A. 1.写出基因工程第四个步骤中,要从分子水平上检测的内容及采用的检测方法
从分子水平上检测有DNA分子杂交技术,分子杂交技术和抗原-抗体杂交技术。
1.DNA分子杂交技术检测的是转基因生物的DNA是否插入了目的基因。将转基因生物的基因组DNA提取出来,在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作标记,以此作为探针,使探针与基因组DNA杂交,如果显出杂交带,就表明目的基因已插入染色体DNA中。
2.分子杂交技术检测目的基因是否转入出了mRNA。从转基因生物中提取出mRNA,用标记的目的基因作为探针,与mRNA杂交,如果显出杂交带,则表明目的基因转入出了mRNA。
3.抗原-抗体杂交检测目的基因是否翻译成蛋白质。从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原-抗体杂交,若有杂交带出现,表明目的基因已形成蛋白质产物。
B. 转基因的具体步骤,从目的基因的获得到最后的鉴定,谢谢
1:目的基因的获取。有三种方法(1)从基因文库中获取(2)利用PCR技术扩增目的基因(3)人工合成
2:基因表达载体的构建。这个载体一般是质粒。
3:将目的基因导入受体细胞。这个导入植物细胞一般用农杆菌转化法,也可用基因枪法或花粉管通道法。
导入动物细胞一般用显微注射法。
导入微生物细胞一般用感受态细胞吸收DNA分子的方法。
4:目的基因的检测与鉴定。这个分为4步:(1)用DNA分子杂交技术检测目的基因是否进入受体细胞(2)用分子杂交技术检测目的基因是否转录出RNA(3)用抗原抗体杂交技术检测目的基因是否翻译出蛋白质(4)进行生物个体水平的鉴定(这步不是一定的,也可不进行)。进行生物个体水平的鉴定举个例子就是比如让虫子去啃食导入抗虫基因的植株,看是否抗虫。
C. 基因检测方法
一般有三种基因检测方法:生化检测、染色体分析和DNA分析。
1.生化检测
生化检测是通过化学手段,检测血液、尿液、羊水或羊膜细胞样本,检查相关蛋白质或物质是否存在,确定是否存在基因缺陷。用于诊断某种基因缺陷,这种缺陷是因某种维持身体正常功能的蛋白质不均衡导致的,通常是检测测试蛋白质含量。还可用于诊断苯丙酮尿症等。
2.染色体分析
染色体分析直接检测染色体数目及结构的异常,而不是检查某条染色体上某个基因的突变或异常。通常用来诊断胎儿的异常。
常见的染色体异常是多一条染色体,检测用的细胞来自血液样本,若是胎儿,则通过羊膜穿刺或绒毛膜绒毛取样获得细胞。将之染色,让染色体凸显出来,然后用高倍显微镜观察是否有异常。
3.DNA分析
DNA分析主要用于识刖单个基因异常引发的遗传性疾病,如亨廷顿病等。DNA分析的细胞来自血液或胎儿细胞。
D. 检测目的基因是不是只有酶切鉴定、PCR后电泳、测序这三种方法
还有其他的方法,比如分子杂交,根据你检测的是DNA还是RNA可选用southern或Northern杂交。
还有转基因,瞬时表达,荧光定量PCR等等。
主要是看你检测基因的目的及所要达到的要求是什么。如果是看构建的载体是否成功,可用酶切,或PCR方法;如果要检测突变体,则用PCR+测序;如果想检测目的基因表达量则用荧光定量PCR;如果想看载体是否导入目标生物体及其表达情况,则可用转基因或瞬时表达或分子杂交。
希望对你有帮助!!
E. 基因检测方法有哪些
基因是遗传的基本单元,携带有遗传信息的DNA或RNA序列,通过复制,把遗传信息传递给下一代,指导蛋白质的合成来表达自己所携带的遗传信息,从而控制生物个体的性状表达。基因检测是通过血液、其他体液、或细胞对DNA进行检测的技术,是取被检测者外周静脉血或其他组织细胞,扩增其基因信息后,通过特定设备对被检测者细胞中的DNA分子信息作检测,分析它所含有的基因类型和基因缺陷及其表达功能是否正常的一种方法,从而使人们能了解自己的基因信息,明确病因或预知身体患某种疾病的风险。
基因检测可以诊断疾病,也可以用于疾病风险的预测。疾病诊断是用基因检测技术检测引起遗传性疾病的突变基因。应用最广泛的基因检测是新生儿遗传性疾病的检测、遗传疾病的诊断和某些常见病的辅助诊断。
一般有三种基因检测方法:生化检测、染色体分析和DNA分析。
1.生化检测
生化检测是通过化学手段,检测血液、尿液、羊水或羊膜细胞样本,检查相关蛋白质或物质是否存在,确定是否存在基因缺陷。用于诊断某种基因缺陷,这种缺陷是因某种维持身体正常功能的蛋白质不均衡导致的,通常是检测测试蛋白质含量。还可用于诊断苯丙酮尿症等。
2.染色体分析
染色体分析直接检测染色体数目及结构的异常,而不是检查某条染色体上某个基因的突变或异常。通常用来诊断胎儿的异常。
常见的染色体异常是多一条染色体,检测用的细胞来自血液样本,若是胎儿,则通过羊膜穿刺或绒毛膜绒毛取样获得细胞。将之染色,让染色体凸显出来,然后用高倍显微镜观察是否有异常。
3.DNA分析
DNA分析主要用于识别单个基因异常引发的遗传性疾病,如亨廷顿病等。DNA分析的细胞来自血液或胎儿细胞。
基因检测可以分为以下五类:
1.基因筛检
主要是针对特定团体或全体人群进行检测。大多数通过产前或新生儿的基因检测以达到筛检的目的。
2.生殖性基因检测
在进行体外人工授精阶段可运用,筛检出胚胎是否带有基因变异,避免胎儿患有遗传性疾病。
3.诊断性检测
多数用来协助临床用药指导。
4.基因携带检测
基因携带者如果与某些特殊基因相结合,可能会导致下一代患基因疾病,通过基因携带者的检测可筛检出此种可能,作为基因携带者婚前检查、生育时的参考。
5.症状出现前的检测
检测目的是了解健康良好者是否带有某种突变基因,而此基因与特定疾病的发生有密切的联系。
临床意义
1.用于疾病的诊断
如对结核杆菌感染的诊断,以前主要依靠痰、粪便或血液培养,整个检验流程需要在两周以上,采用基因诊断的方法,不仅敏感性大大提高,而且在短时间内就能得到结果。
2.了解自身是否有家族性疾病的致病基因,预测患病风险
资料证实10%~15%的癌症与遗传有关,糖尿病、心脑血管疾病等多种疾病都与遗传因素有关。如具有癌症或多基因遗传病(如老年痴呆、高血压、糖尿病等)的人可找出致病的遗传基因,就能够有针对性地调整生活方式,预防或者延缓疾病的发生。
3.正确选择药物,避免滥用药物和药物不良反应
由于个体遗传基因上的差异,不同的人对外来物质产生的反应也会有所不同,因此部分患者使用正常剂量的药物时,可能会出现药物过敏、红肿发疹的现象。根据基因检测的结果,可制定特定的治疗方案,从而科学地指导使用药物,避免药物毒副反应。
F. 高二生物中的目的基因的检测与鉴定
目的基因的检测与鉴定分分子水平检测和个体水平鉴定。
个体水平鉴定简单说就是把导入了目的基因的生物体培养出来,看生物个体中是否能表达出你所需要的性状。
分子水平检测就相当麻烦了,它有三个步骤。
首先,要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。方法是采用DNA分子杂交技术,即将转基因生物的基因组DNA提取出来,同时,在外面(像基因文库中)取一段新的含有目的基因的DNA片段,用放射性同位素等作标记,以此来作为探针,将探针与基因组DNA杂交,来检测。(实际上就是DNA复制的情况,DNA复制时,一条双链的DNA分子解旋成了两条单链的DNA,而探针也是一条双链的DNA片段解旋成了两条单链的DNA片段,因为探针上也有目的基因,基因组的DNA上也有目的基因,在重新形成新的2条DNA,也就是复制时,碱基互补配对,则含目的基因的探针上的单链能与同样含目的基因的基因组DNA单链配对,形成一条新的DNA双链分子,一旦形成新的DNA分子后,放射性标记能在新的DNA分子中含目的基因处发出荧光,从而表明目的基因已导入。)
其次,就是大大你说的检测目的基因是否转录出了mRNA,方法和上面一样,但不同之处是,从转基因生物中提取出的是mRNA,同样,同时,在外面(像基因文库中)取一段新的含有目的基因的DNA片段,用放射性同位素等作标记,以此来作为探针,将探针与mRNA杂交,来检测。(这里实际上和DNA的转录翻译有点像,毕竟mRNA是单链的,实际上是探针DNA解旋成两条单链的DNA片段,就像转录一样,这时的mRNA会与单链的DNA碱基互补配对,显现出标记的同位素荧光,表明mRNA上有目的基因。)所以说,mRNA与目的基因杂交,是和DNA杂交,不是mRNA与目的基因的转录出的mRNA杂交。
最后要检验的就是看目的基因能否翻译成蛋白质,就不多说了。
不知道讲的清不清楚,语文表达有限,希望你能理解啊。
G. 检测dna上的目的基因是否表达常用的检测方法是
A 对目的基因的检测和表达检测的方法混淆,不能准确应用。目的基因的检测常采用DNA分子杂交技术,即将含有目的基因的DNA片段用放射性同位素作标记,以此作为探针,使探针与基因组DNA杂交,若出现杂交带,则表明目的基因已插入到染色体中。DNA—RNA分子杂交与抗原——抗体杂交法是目的基因的表达检测。目的基因是否转录出了相应的信使RNA分子,用DNA—RNA分子杂交法检测。细胞内是否合成了由目的基因控制的蛋白质,使用抗原——抗体杂交法检测。要准确区分目的基因的检测和表达检测使用的方法。显微注射技术是目的基因导入受体细胞的方法。