Ⅰ 消毒与灭菌效果的评价方法与标准有没有最新版
第一篇压力蒸汽灭菌效果评价方法与标准
1主题内容与适用范围
本方法规定了压力蒸汽灭菌技术标准及其评价灭菌效果的检测方法。
本方法适用于对压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的评价。
2试剂
本标准所用试剂,凡未说明规格者,均为分析纯(AR),水为蒸馏水。
2.1蛋白胨。
2.2葡萄糖。
2.3溴甲酚紫酒精溶液:取溴甲酚紫2.0g,溶于100mL95%乙醇中。
2.4溴甲酚紫蛋白胨水培养基配制:蛋白胨10.0g,葡萄糖5.0g,溶于1000mL蒸馏水中,调pH值至7.0~7.2,然后再加2%溴甲酚紫酒精溶液0.6mL,摇匀后,按5mL/管,分装包口,置压力蒸汽灭菌器中,于115℃灭菌40min后备用。
3指示菌
嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC 7953或SSI K31)菌片,含菌量为5×105~5×106cfu/片,121℃下,杀灭90%微生物所需时间D121值为1.3~1.9min,杀灭时间(KT值)为≤19min,存活时间(ST值)为≥3.9min。
4化学指示剂
需用卫生部批准的化学指示剂。
5技术要求
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6检测方法
6.1生物学指标(用作压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的依据)。
6.1.1将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片两个分别放入灭菌小纸袋内,置于标准试验包中心部位。
6.1.2灭菌柜室内,上、中层中央和排气口处各放置一个标准试验包(由3件平纹长袖手术衣,4块小手术巾,2块中手术巾,1块大手术巾,30块10cm×10cm、8层纱布敷料包裹成25cm×30cm×30cm大小)。手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒(22cm×13cm×6cm)代替标准试验包,盒内盛满中试管,指示菌片放于中心部位两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封),将盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。
6.1.3经一个灭菌周期后,在无菌条件下,取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片,投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中,56℃培养48h,观察培养基颜色变化。
6.2化学指标
在物品包外用化学指示胶带,可作为物品是否经过灭菌的处理标志。在物品包内中心部位用化学指示剂,可作为物品是否灭菌的参考标志。
7结果判定及评价
7.1同次检测中,标准试验包或通气贮物盒内,每个指示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基全部不变色,判定为灭菌合格。指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基由紫色变为黄色时,判定为灭菌不合格。
7.2化学指示剂的颜色变为与灭菌合格标准色相同时,或熔化时作为灭菌合格的参考标准。
第二篇紫外线表面消毒效果评价方法与标准
8主题内容与适用范围
本方法规定了物体表面消毒用紫外线的波长、强度及评价其消毒效果的物理学指标和生物学检测方法。
本方法适用于紫外线直接照射到的物体表面消毒效果评价。
9指示菌
9.1大肠杆菌(8099或ATCC 25922)。
9.2枯草杆菌黑色变种芽胞(ATCC 9372)。
10物理学指标
10.1在电压220V时,普通30W直管型紫外线灯,在室温为20~25℃的使用情况下,253.7nm紫外线辐射强度(垂直1m处)应≥70μW/cm2。
10.2在电压220V时,高强度紫外线灯,在室温为20~25C的使用情况下,253.7nm紫外线辐射强度(垂直1m处)应≥200μW/cm2。
10.3照射剂量按式(1)计算:
剂量(μW·s/cm2)=强度(μW/cm2)×时间(s)………………………(1)
11检测方法
11.1物理学检测方法
11.1.1灯管的紫外线强度(μW/cm2)用中心波长为253.7nm的紫外线强度测定仪(标定有效期内),在灯管垂直位置1m处测定。
11.1.2在实际应用中消毒表面的照射强度应以灯管与消毒对象的实际距离测定。
11.1.3表面消毒接受的照射剂量,应达杀灭目标微生物所需。对大肠杆菌,照射剂量应达到20000μW·s/cm2,对枯草杆菌黑色变种芽胞应达到100000μW·s/cm2。
11.2生物学检测方法
11.2.1采用载体定量消毒试验。载体制备按本标准附录C进行。
11.2.2开启紫外线灯5min后,将8个染菌玻片平放于灭菌器皿中,水平放于适当距离照射,于4个不同间隔时间各取出2个染菌玻片,分别投入2个盛有5mL洗脱液(1%吐温80,1%蛋白胨生理盐水)试管中,振打80次。
11.2.3经适当稀释后,取0.5mL洗脱液,作平板倾注,每个染菌玻片接种两个,放37℃培养48h作活菌计数。
11.2.4阳性对照,除不作照射处理外,取2个染菌玻片分别投入2个盛有5mL洗脱液中振打80次,余按4.2.3进行。
11.2.5计算杀灭率
12判定标准
12.1对指示菌杀灭率≥99.9%判为消毒合格。
12.2达物理学检测标准时,作为消毒合格的参考标准。
第三篇液体消毒剂消毒效果评价方法与标准
13主题内容与适用范围
本方法具体规定了消毒剂消毒效果生物学检测方法及其评价标准。
本方法适用于消毒剂对各种物体的消毒效果评价。
14理化指标
将消毒剂置20±2℃水浴中,测定在使用浓度下杀灭指示微生物达到消毒或灭菌所需的最短时间(min)。
15指示微生物
15.1细菌
15.1.1细菌繁殖体:金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(8099或ATCC 25922)。
15.1.2细菌芽胞:枯草杆菌黑色变种芽胞(ATCC 9732)。
15.2真菌:白色念珠菌(ATCC 10231)。
15.3乙型肝炎表面抗原:纯化抗原(1.0mg/mL)。
16检测方法
16.1中和试验(见附录 A)。
16.2消毒剂定性消毒试验(见附录 B)。
16.3消毒剂定量消毒试验(见附录 C)。
16.4消毒剂杀菌能量试验(见附录 D)。
16.5乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗原性破坏试验(见附录 E)。
17消毒效果评价标准
17.1对细菌和真菌的杀灭率≥99.9%,对HBsAg,将检测方法灵敏度104倍或5×104倍(载体试验)的HBsAg抗原性破坏,可判为消毒合格。
17.2对枯草杆菌黑色变种芽胞全部杀灭,可判为灭菌合格。
17.3在实际应用中消毒效果评价以有机物保护试验的最低浓度和最短时间为该消毒剂达到实用消毒所需的浓度和时间。
Ⅱ 如何测试紫外线 如何测试紫外线的强度
1、紫外线辐射强度检测: 医院里利用紫外线的辐射强度杀菌消毒是最常见的方法,保证紫外线辐射强度必须使用紫外辐照计来进行监测,因为紫外线灯管由于生产制造、使用方法以及照射时间等诸多方面因素的影响,紫外线灯照射的紫外线辐射很难达到标准的杀菌强度。
2、为了确保紫外线消毒灯达到规定的杀菌效果,使用紫外辐射照度计对紫外线辐射强度进行测量是行之有效的方法。紫外线杀菌的关键因素是紫外线消毒灯辐射253.7nm波长的紫外线强度,因为该波段范围最强,最具杀死破坏细菌病毒。此波段与微生物细胞核中的脱氧核糖核酸的紫外线吸收和光化学敏感性范围重合,使生物体丧失蛋白质的合成和复制繁殖能力。
3、紫外线消毒灯的安装位置和照射距离对杀菌效果至关重要,用于空气消毒的紫外线灯可以采用垂直正向照射、反向照射和侧向照射。吊装即将紫外线灯吊装在天花板距离地面2.0±0.2的高度,进行垂直正向照射;将带有反光罩的紫外线灯采用可升降式吊装进行反向照射或装在移动式灯具车上进行正反向照射;侧装即将紫外线灯装载墙壁上进行侧向照射。不管何种安装方式都必须保持灯管之间距离均匀,使得空间辐射强度分布均匀。
4、紫外线杀菌作用较强,但对物体的穿透能力很弱。它适用于手术室、烧伤病房、传染病房和无菌间的空间消毒及不耐热物品和台面表面消毒。
5、一些使用单位紫外线杀菌灯辐照强度小于70μw/cm2(1m处)。有的甚至使用几年未更换,紫外线强度小于40 μw/cm2 仍在使用。要知道,每种微生物都有其特定的紫外线杀灭剂量阀值。杀菌剂量(K)是照射强度(I)和照射时间(t)的乘积,K=It.从式中可以看出高强度短时间或低强度长时间照射均能获得同样的灭菌效果。
6、然而,若紫外线强度小于40μw/cm2 ,则再延长照射时间也不能起到满意的灭菌效果,这中间存在着微生物的损伤修复问题,故应以提高照射强度为主,而不能仅单纯的依靠延长照射时间。这是利用紫外线消毒的一个误区。
7、紫外线杀菌灯随着使用时间的延长,辐照强度会逐渐衰退,再加上随时间的加长,灯管内的水银存在慢漏现象,也会导致辐照强度降低。经实验测定,石英灯管使用1000~4000小时后,衰退率小于20%,而一些厂家制作的高硼灯管使用200小时后,衰退率大于30%,加上高硼灯管本身的辐照强度就小于70μw/cm2 ,因此使用中应选用石英紫外线杀菌灯管。石英紫外线杀菌灯的特点,主要是辐照强度高,衰退慢。石英灯管的原料是采用天然水晶石,透紫率达80%以上,而高硼玻璃的紫外透过率不足50%,紫外线透过率低,辐照强度也低了。
8、紫外线照度计检测的原理是根据紫外线消毒器特定波长(253.7nm),选择特异性光敏元件制作接受元件,当受光器受到紫外线照射时,把光信号转变为电信号,通过放大传输,在紫外辐照计仪表上以电信号或数字信号显示出来。
Ⅲ 紫外线灯的紫外线强度检测标准
用于消毒的紫外线灯在电压为220V、环境相对湿度为60%、温度为20℃时,辐射的253.7nm紫外线强度不得低于70uW/cm2(普通30W直管紫外线灯在距灯管1米处测定,特殊紫外线灯在使用距离处测定,使用的紫外线测强仪必须经过标定)。
一般是按照紫外线灯的产品技术说明检测,紫外线灯厂家都会提供强度说明:
1、xx mm处中心强度高达xxx uw/cm2,按照这个数据用紫外线照度计测量就行了。
2、会有一个最低强度,有效照射面积最低强度达到xxx uw/cm2,按照这个数据用紫外线照度计测量就行了。
(3)紫外线消毒效果检测方法和标准扩展阅读:
紫外线的消毒原理
利用紫外线照射,使菌体蛋白发生光解、变性,菌体的氨基酸、核酸、酶遭到破坏死亡。同时紫外线通过空气时,使空气中的氧电离产生臭氧,加强了杀菌作用。
紫外线多用于空气及物体表面的消毒,波长2573A。用于空气消毒,有效距离不超过Zm,照射时间30~60min,用于物品消毒,有效距离在25~60cm,照射时间20一30min,从灯亮5一7min开始计时(灯亮需要预热一定时间,才能使空气中的氧电离产生臭氧)。