‘壹’ 金黄色葡萄球菌有哪些检查方式
(1)血浆凝固酶试验:血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的,与其致病力有关的一种侵袭性酶,其作用是使血浆中的纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞的吞噬。血浆凝固酶分为结合型和游离型。前者结合在细菌的细胞壁上,能直接作用于血浆中的纤维蛋白原,使之转化为纤维蛋白,环绕菌体而形成凝块。而游离型血浆凝固酶则在产生后被分泌到菌体外,不能直接作用于纤维蛋白原,但可以激活血浆凝血酶原,使之转化成凝血酶,后者再作用于纤维蛋白原使其转化为纤维蛋白。具体的测量方法也因此分为玻片法和试管法两种。
玻片法将待试菌落乳化于玻片上的盐水中,经10~20S证实无自凝后,用接种环取人或兔血浆一环,与乳化菌液混合,出现凝集者为阳性,另设生理盐水为阴性对照。
试管法吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀,置37℃培养,每隔半小时观察一次,连续观察6小时,出现缓让烂凝固,即将小试管倾斜或倒置时,内容物不流动,判为阳性。
(2)耐热核酸酶试验:将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min,用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板,35℃培养24小时,在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。
(3)甘露醇发酵实验金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇。
(4)Staphaurex 胶乳凝集实滑仔验是鉴定金黄色葡萄球菌的一种快速、简便的商品化直接凝集试扰漏验。其基本原理是在纸片上滴加包被有纤维蛋白原和IgG抗体的聚苯乙烯胶乳,然后用接种环挑取待鉴定菌株的新鲜培养物加入混匀,若出现凝集块现象即为阳性。
5. 生化鉴定如上述,注意与其他凝固酶阳性的葡萄球菌的鉴别要点:PYR(吡咯烷酮-β-萘基酰胺试验阴性;VP试验阳性;鸟氨酸脱羧酶试验阴性。
6. 免疫学方法用酶联免疫吸附试验和对流免疫电泳方法可检测金葡菌的磷壁酸抗体。
7. 分子生物学方法包括PFGE脉冲场凝胶电泳以及酶切图谱分析等。
‘贰’ 金黄色葡萄球菌鉴定方法
形态染色、菌落特征。根据查询金黄色葡萄球菌鉴定方法得知弊仿,金黄色葡萄球菌鉴定方法主要有:形态染色、菌落特征、鉴定试验等鉴定。金黄色葡萄球菌是一种常见的病做卜链原体,可引起皮肤软组织感染纯孙。
‘叁’ 目前检测金葡萄球菌的快速检测方法有哪些
有测试试纸的。
金黄色葡萄球菌测试片
金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)是人类最常见的致病菌之一,其侵袭力很强,能产生多种致病物质如:肠毒素、凝固酶等;可引起化脓性炎含肢症、霉素性疾病及葡萄球菌性肠炎。在自然界中普遍存在,食品受其污染的机会很多,人误食了含有霉素的食品,就会发生食物中毒,已成为世界性的公共卫生问题。我国每年金葡菌引起的食物中毒事件屡有报道,在细菌性食物中毒事件中仅次于沙门氏菌和副溶血弧菌引起的食物中毒,对人的健康是一种潜在危险,检查食品中金黄色葡萄球菌及数量具有实际意义。
传统菌检测法全程需4-7天,才能得出明确的诊断结果,且操作繁琐,效率底,很难适应现代化需要。本产品采用法国先进可靠的选择性显色培养基作为主要原料,通过在选择性培养基中加入专一性的酶显色剂,运用微生物测试片专有技术,做成一次性快速检验产品,一步培养15-24小时就可确定出病原菌的存在,大大地简化了检验程序。
该法对提高食品卫生监督检测系统对食物中毒病原菌的快速检测,增强政府和行政卫生部门对食源性疾病的监测能力、预警能力和对突发事件的反应能力,在应对细菌性食物中毒突发公共卫生事件中具有重要的意义。
使用方法:
1.A、食品样品处理:按无菌操作取25g(ml)样品,加入225ml灭菌生理盐水中,固体样品研磨或置均质器中制成卖档混悬液,静置片刻。
B、人体的样品处理:取从业人员体检肛拭或粘有病人粪便的棉签放入5ml7.5%NaCL肉汤中,37℃培养6小时,配制增菌液。
2、 样品接种:将测试片水平放在台面上,揭开上盖膜,用灭菌吸管吸取0.5ml 样品上清夜或增菌液,均匀加到中间的滤纸片上,然后轻轻将上盖膜放下,静置5分钟。
.
3、 培养:将加了样品的测试片每6-8片叠放在一起,放入原来的自封袋中,平放在37℃培养箱内培养15-24小时。
4、 结果观察:对测试纸片进行观察,呈紫红色的菌谈配世落为金黄色葡萄球菌;呈蓝色的菌落为其他大肠菌落。
‘肆’ 怎样分离鉴定金黄色葡萄球菌,沙门氏菌,志贺氏菌
金葡耐盐,先用306增菌,然后划线BP平板,典型菌落为黑色中心、混浊带和透明环,挑取典型菌落进行凝血实验。
沙门想要前增菌,选择性增菌TTB、SC,然后分离坚定BS、XLD,BS典型菌落为黑色、有金属光泽、是培养基变黑,XLD典型菌落为黑色菌落。挑取典型菌落进行生化鉴定,TSI为上红下黄、有或无硫化氢,赖氨酸阳性,氰化钾阴性,尿素酶阴性,色氨酸阴性。
志贺氏菌:志贺增菌肉汤增菌,XLD和MAC分离坚定,挑取粉红色菌落,生化鉴定。