dna质量检测方法

‘壹’ dna测试怎么做

第一、dna检测的方法
1、传统的亲子鉴定是进行血型测试。一般孩子6个月以上才可以做，并需要大量的血液样本。这种方法过程烦琐、取样痛苦且错误率高。传统的血型判断在一定程度上有其作用态睁蚂，但亲子鉴定并不能按照血型来鉴定。
2、DNA亲子鉴定测试。DNA亲子鉴定是通过人体任何组织取样(例如口腔上皮细胞取样)，也可以在孩子早芹未出世前进行。该方法是目前亲子测试中最准确的一种--准确率可达99.99999%，具有精巧、简便、快速、经济、实用的特点。父子关系相对机会(RCP)，按照国内外亲子鉴定的惯例，当RCP值大于99.73%时，则可以认为假设父与孩子具有亲生关系。
3、SNP检测。当前DNA亲子鉴定利用人类基因组中的重复碱基序列(STR作为第二代分子标记)和PCR技术进行个体识别，帆埋但STR具有很大的局限性，SNP是第三代分子标记技术是将来的发展方向，美国911尸体辨认即利用了此技术。

‘贰’ DNA质量检测相关方法，及效果

DNA质量检测的方法有：基因组DNA片段大小的确定，基因组DNA浓度的测定，基因组DNA纯度的测定三方面。
检测的效果分析如下：
当OD260/OD280<
1.8，表示蛋白质含量较高；
当OD260/OD280>
2.0，表示RNA含量较高；
当OD260/OD280=1.8～2.0，表示DNA较纯。

‘叁’ dna检测复杂吗，有没有简单点的方法

基因突变检测方法：
（1） PCR-SSCP法是在非这性聚丙烯酰胺凝胶上，短的单链DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同构象，一个碱基的改变将影响其构象而导致其在凝胶上的移动速度改变。其基本原理为单链DNA在中性条件下会形成二级结构，这种二级结构依赖于其碱基组成，即使一个碱基的不同，也会形成不同的二级结构而出刺同的迁移率。由于该法简单快速，因而被广泛用于未知基因突变的检测。
（2）异源双链分析法（HA） HA法直接在变性凝胶上分离杂交的突变型一野生型DNA双链。由于突变和野生型DNA形成的异源杂合双链DNA在其错配处会形成一突起，在非变性凝胶中电泳时，会产生与相应的同源双DNA不同的迁移率。该法与SSCP相似，所不同的是SSCP分离的是单链DNA，HA法分离的是双链DNA，也只适合于小片段的分析。
（3）突变体富集PCR法（mutant-enriched PCR）本法的基本原理是利用ras基因家族某个密码子部位存在已知的限制性内切酶位点，如K-ras基因第12密码子的BstNI位点，第13密古巴子有BgⅠⅡ位点。用链续二次的巢式PCR来扩增包括K-ras第12、13密码子的DNA片段，在两次扩增反应之间用相应的内切酶消化扩增的DNA片段，野生型因被酶切而不能进入第二次PCR扩增，而突变型则能完整进入第二次PCR扩增并得到产物的富集。

‘肆’ DNA制品可用哪几种方法测定其含量,试从原理,准确性方面加以比较

测定DNA浓度的方法有两种,即利用分光光度计法测定DNA的紫外光吸收值;另一种方法是测定样品中溴化乙锭发射的荧光的强度来计算核酸的含量.
紫外光吸收法:因为组成核酸的碱基(G,A,T,C)在260nm处具有强吸收峰,所以通过测定260nm的吸收峰即可对DNA进行定量.但有时也会因为所处溶液的pH值不同而导致吸光系数的不同.因此,一般在中性pH值左右的环境中进行测定.这种方法常用于测定比较纯的样品.
溴化乙锭荧光强度法:当DNA含量很低以及样品中杂质含量高时,会影响紫外光吸收值的测定,这时,可以采用测定嵌入DNA中溴化乙锭分子受紫外光激发而发射出的荧光强度,因为这种荧光的强度与DNA总质量数成正比.

‘伍’ DNA含量的测定方法

那要看你用什么方法测定DNA和RNA：
（1）紫外吸收法也就是测量OD（260）和OD（280）的吸收值，这样的方法其它的杂质对测量结果影响大一点，因为其它杂质在这两个吸收波长也有吸收。
（2）荧光法，用PicoGreen荧光染料，测定DNA，RNA浓度比较灵敏，并且适合测量低浓度和微量DNA和RNA，并且受其它杂质的影响不大，缺点要有专门的荧光检测仪器，试剂比较昂贵。
纯化DNA可以买试剂盒，主要有膜吸附法，磁珠分离法，都很方便。

‘陆’ 鉴定dna的方法

第一步，DNA的提取就是把样本的细胞核中所含的DNA提取出来，然后进行一定的纯化；第二步，就是PCR扩增，简单的说，这一步，就是把我们需要的片段，通过酶促反应在PCR仪上进行大量复制，放大到通过某些专用仪器可以看到的程度；第三步，就是后PCR反应，这一步主要就是上ABI测序仪检测准备阶段，将双链的DNA打开，加一些检测用的内标，主要是用来标记检测的片段长度；第四步，就是毛细管测序仪检测。由于DNA是带有电荷的，通过毛细管电泳的方法就可以检测处理一些数据；第五步，就是分析数据，出具报告；最后，出鉴定结论和报告。

‘柒’ 植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量

第一种方法是测量260/280的比例，判断是否有蛋白质的污染。在260nm和280nm处测定DNA溶液的光吸收，A260与A280之比应在1.75-1.80之间。低于此值表明制备物中残留蛋白质成分较高或含有酚，高于此值表明有RNA的残留。

第二种方法是凝胶电泳分析，看有无断裂降解。

影响DNA提取质量的因素：

如果实验开始植物样品不经液氮处理，则提取液中的CTAB浓度需要提高到4%。

在大多数情况下，使用0.1%巯基乙醇，并不能完全抑制叶片中的氧化作用。但这种氧化作用不会影响限制性内切酶的活性。如果使用的巯基乙醇浓度高于0.1%，则会大大降低DNA提取的得率。

(7)dna质量检测方法扩展阅读：

DNA的提取方法：

一、酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯萃取，高速离心后取上清，所得DNA大小为100-150kb

二、甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。

三、玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。

四、异丙醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在异丙醇中可溶状态）

五、表面活性剂快速制备法：用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。

六、加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。

七、碱变性快速制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和，离心后取上清，含少量DNA。

‘捌’ 如何使用简单的实验方法检测DNA纯度

实验原理

DNA/RNA在260nm处有最大的吸收峰，蛋白质在280nm处有最大的吸收峰，盐和小分子则集中在230nm处。因此，可以用260nm波长进行分光测定DNA浓度，OD值为1相当于大约50μg/ml双链DNA。如用25px光径，用 H2O稀释DNA/RNA样品n倍并以H2O为空白对照，根据此时读出的OD260值即可计算出样品稀释前的浓度：

DNA（ug/ml）=50×OD260读数×稀释倍数。

RNA（ug/ml）=40×OD260读数×稀释倍数。
DNA/RNA纯品的OD260/OD280为1.8或2.0，故根据OD260/OD280的值可以估计DNA的纯度。若比值较高说明含有RNA，比值较低说明有残余蛋白质存在。OD230/OD260的比值应在0.4-0.5之间，若比值较高说明有残余的盐存在.本实验室机器显示是OD260\OD230，则比值应在2-2.5之间，偏小则说明有残余盐剩余。

实验步骤
1. 将制备的DNA悬浮溶解于TE缓冲液中[pH8.O, 1Ommo1/L的Tris缓冲液,内含〈1mmol/L EDTA〉]或悬浮溶解在灭菌水中(依据DNA含量加水)。
2. 用可扫描的紫外分光光度计测定制备的DNA/RNA的紫外吸收曲线，测定OD260和OD280，并计算比值：OD260/OD280，纯DNA的此比值约为1.8～2.0。纯RNA的此比值约为大于2.0。
3. 根据：每毫升1微克的纯DNA的OD260值= 0.020，计算所得DNA的纯度；
每毫升1微克的纯RNA的OD260值= 0.025，计算所得RNA的纯度；

并讨论纯度较低的原因和解决办法。
260、320、230、280nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的，只看OD260/OD280（Ratio，R）。

DNA: OD260/OD280比值应接近1.80，若R值大于1.8。说明存在RNA，可重新用RNaseA处理,酚:氯仿:异戊醇(23:24:1)抽提。若R值小于1.8，则说明有蛋白质等杂质存在，需再用蛋白酶K、SDS及盼、氯仿、异戊醇重新对DNA进行纯化（也可加入1/8体积的3M NaAc(pH5.2)与冷乙醇一同促使DNA沉淀析出。

RNA: OD260/OD280比值在1.8-2.0时，认为RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的，不过要注意，当你用Tris作为缓冲液检测吸光度时，R值可能会大于2（一般应该是<2.2的）。当R<1.8时，溶液中蛋白或者时其他有机物的污染比较明显，你可以根据自己的需要决定这份RNA的命运。当R>2.2时，说明RNA已经水解成单核酸了。

注意事项：
1. 有用品均需要高温高压，以灭活残余的DNA酶/RNA酶。

2. 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制，RNA均用DEPC处理的水。

3. 用大口滴管或吸头操作，以尽量减少打断DNA的可能性。