细菌感染的检测方法

① 简述细菌性疾病微生物学检查的主要程序及方法

能够在得病生物体内提取出病原微生物。病原微生物能够引发其他目美丽病。目美丽病后症状与感染源生物症状相同。在目标体内仍能够提取出相同病原微生物。

标本的采集非常重要。细菌感染通常是通过培养的方法检测的，而病毒通常是通过抗原或者核酸来检测的。细菌培养和鉴定，以及药敏试验，是合理使用抗菌药物的前提，好的标本决定一切，这是检验领域的一句俗话。

不恰当的标本、不恰当的采集时间、不规范的采集方法，可能造成假阴性，假阳性，杂菌污染等，延误诊断，危及生命。对于严重感染，需要确定病原菌的，标本应该选择细菌可能定植的部位，如深部痰液，胸水，血液等，标本提取的时间应该在抗菌药物使用前，最好在发生寒战的时候。

(1)细菌感染的检测方法扩展阅读：

菌落总数是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）样品生长出来的细菌菌落数量。国内外普遍采用此需氧平板计数法（APC）。国外用于食品、化妆品中微生物计数的螺旋平板计数法（SPC）也需（48±3）h。

这2种方法均为传统的培养方法，操作繁琐，费时费力。近年来，国内外技术人员研究开发了快速测试片技术、生物电化学技术、微菌落技术、发射测量法、微热量技术、ATP生物发光技术、色谱法等快速检测方法，缩短了检测时间，简化了检测程序。

② 简述临床常用的细菌检验技术

细菌的培养和分离技术微生物分离鉴定流程第一节 细菌的形态学检查工具：显微镜显微镜检查的目的：1.镜检可以了解标本中有无细菌及大致的菌量2.根据细菌形态、排列和染色性有助于对标本中的病原菌进行初步诊断，对临床早期诊断和治疗疾病有一定的参考意义方法：包括不染色标本检查法和染色标本检查法常用的显微镜（1）普通光学显微镜（light microscope）光源：自然光或灯光，波长0.4μm最大分辨率：0.2μm（2）暗视野显微镜（darkfield microscope）（3）相差显微镜（phase contrast microscope）（4）荧光显微镜（fluorescence microscope）（5）电子显微镜（electron microscope）返回普通光学显微镜一、不染色标本直接镜检目的：主要用于检查生活状态下细菌的动力及运动状况。常用的方法：悬滴法和压滴法 悬滴法检查细菌的动力不染色标本镜下结果观察：动力（+），动力（-）观察时注意：用普通光学显微镜高倍镜观察，调小显微镜的光栅。有动力：可看到细菌自一处移至另一处，有明显的方向性位移。无动力：细菌呈现布朗运动，只在原地颤动而无位置的改变。 意义：有些病原菌通过不染色标本的动力检查可作出初步鉴定： 如疑似霍乱患者“米泔水样”便中发现穿梭样运动细菌，可辅助诊断。 螺旋体辅助诊断二、染色标本的显微镜检查（一）常用染料（色基+助色基）1．碱性染料：碱性复红、结晶紫、美蓝等， 电离后带正电荷，常用于细菌染色（原因何在？）。2．酸性染料：有伊红、刚果红等，电离后带负电荷。3．复合染料（中性染料）：复合染料有瑞氏染料（伊红美蓝）、姬姆萨染料（伊红天青）等 。

③ 检查幽门螺杆菌的方法

幽门螺杆菌的检测方法有:
1、呼吸试验，即碳13或碳14呼吸试验。早上空腹，吞服尿素酶胶囊，15分钟后进行呼吸试验，结果相对准确；
2、胃镜检查，取胃镜下粘膜组织进行快速尿素酶试验；
3、验血，验血幽门螺杆菌抗体，结果呈阳性表明有近期或持续感染。
本人曾有胃不适，做了碳13呼吸试验，结果是幽门螺旋杆菌。服药一周后，痊愈。服药期间，家里用餐单独使用餐具。
据说这种细菌感染可引发慢性胃炎，并导致胃溃疡和胃萎缩，严重者可发展为胃癌。所以不要大意，及早就医治疗为好。

④ 细菌感染的病原学诊断方法有哪些（临床微生物学与检验范畴）

微生物感染的病原学实验室诊断方法大致包括：①光学显微镜对标本或组织中的病原体的形态学检改毁查；②病原体的分离培养和鉴定；③用免疫学技术对病原体抗原或相应抗体的检测；④用分子生物学方庆友法对病原体核差备特异性基因的检测。

⑤ 细菌学有哪些检验方法

直接涂片检查：取混匀新鲜尿涂片，健康人的尿涂片无细菌。若每个油镜视野下可见1条或以上的细菌，提示为菌尿。并可行革兰氏染色，初步确定尿路感染细菌是阳性球菌或阴性杆菌。细菌培养：目前多采用定量接种环法，培养24h，计数菌落。阴性杆菌分裂快，菌落数>l〇5cfo/ml，提示菌尿，菌落数104〜105cfo/ml为可疑。阳性球菌分裂慢，菌落数>103cfU/ml为菌尿。结核菌检查：尿结核菌检查是确定有无泌尿系结核的重要方法，尿沉渣涂片抗酸染色较简单，阳性率为50%〜70%;清晨第1次尿送检则阳性率高。尿结核菌培养阳性率可达90%，但结核菌生长缓慢。使用改良罗氏培养基，一般需4〜8周始能报告结果。近年常用聚合酶链反应（PCR)方法，使含微量结核菌DNA扩增，40条结核菌即可有阳性结果，此法特异性强，2d可有结果，但时有假阳性或假阴性的情况。菌尿的辅助检查亚硝酸盐试验：革兰阴性杆菌如大肠、副大肠杆菌能将尿中的硝酸盐还原为亚硝酸盐，而球菌和结核菌无还原硝酸盐的能力，因此亚硝酸盐试验阳性，提示革兰阴性杆菌的感染。氯化三苯四氮唑试验（TTC试验）；大部分革兰阴性活杆菌能将无色TTC还原为红色的三苯甲替，而球菌及变形杆菌则呈阴性。故可用以初步判定是哪一类细菌感染。尿抗体包裹细菌（ACB):肾盂肾炎为肾实质感染，在细菌抗原作用下，机体可产生相应抗体，抗体将致病菌包裹，在荧光镜下观察用荧光素标记的抗人体蛋白抗体处理的尿细菌，若表面有荧光抗体包裹则大多属肾盂肾炎，膀胱炎为黏膜浅表感染，故细菌表面无荧光抗体包裹。用ACB法有助于上、下尿路感染的定位诊断。但在前列腺炎患者，其ACB试验亦呈阳性，应注意鉴别。其他：另外还有过氧化物酶试验、葡萄糖氧化酶试验、鲎试验及尿氧压测定均可帮助诊断尿路感染，但目前临床上应用较少。

⑥ 常见的尿细菌学检查方法是什么

尿细菌学检查对诊断尿路感染具有重要价值。主要有以下两种方法。

（1）尿涂片找细菌。尿路细菌感染时尿中含有大量细菌，尿液涂片镜检易找到细菌。每高倍视野细菌数少于10个或未找到，提示中段尿培养阴性或菌落数低于103/ml。如果细菌数为15～30个/高倍视野，中段尿培养菌落数常大于105/ml。据中山医科大学叶任高教授经验，其可靠率为90%以上。并认为，即使已开始使用抗生素的病例，尿培养阴性，尿沉渣革兰染色找细菌仍有可能找到，这样就可弥补在应用抗生素的情况下尿细菌培养阴性的缺点。另外，应用革兰染色涂片找细菌可以初步确定尿路感染是阳性球菌或阴性杆菌，作为使用抗菌药物的参考。

（2）尿液细菌培养。正常人尿内有一定数量的细菌，尿道口周围亦有大量细菌。正常人尿道口及阴道存在以下细菌：表皮葡萄球菌、链球菌、枯草杆菌、假白喉棒状杆菌、变形杆菌、大肠杆菌、乳酸杆菌、卡他布兰汉氏菌及耻垢分枝杆菌等。外阴冲洗不净，细菌常混入尿中，但细菌数小于103/ml。尿细菌培养的目的主要是运用中段尿培养菌落计数的方法以鉴别是否为尿路感染。

若尿菌落数大于105/ml为感染，准确率约80%；细菌数小于103/ml或有多种细菌生长，为污染所致，无临床意义。但值得注意的是球菌，特别是粪球菌及肠球菌繁殖缓慢，其尿菌落数若为103～104/ml之间，即有诊断价值；细菌数在103～105/ml者不能排除感染，考虑是否因应用抗生素、清洗消毒剂混入、尿过频、细菌生长缓慢等因素所致，必要时复查。

不论中段尿，还是导尿，都不可避免前尿道细菌的污染。因此，做细菌培养而不加含菌量计数，结果很不可靠。但在常规消毒下做膀胱穿刺取尿作定性却很可靠，只要培养出细菌，不论细菌数多少，均认为是感染，不会出现假阳性。尿细菌定量培养结果很可靠，但遇到下列情况时需做膀胱穿刺尿培养：没有条件做尿含菌量计数的单位，在诊断上有困难时；高度怀疑有尿路感染而尿含菌量却低；反复尿定量细菌培养结果均可疑者；要进一步确定是否有混合感染存在；可疑的厌氧菌所致者。以上情况均考虑做膀胱穿刺尿培养。

方法如下：鼓励患者饮水，使膀胱充盈至耻骨联合以上，扪及膀胱后即可穿刺。先剃毛、消毒，用9号10cm长的针头连接注射器，在耻骨联合上方正中线穿入皮肤，然后猛力穿入膀胱，将尿液收集于无菌试管送检。拔针后用无菌纱布覆盖。本法是避免污染的最好方法。

缺点是患者有一定的痛苦。

急性泌尿系感染多为单种细菌，大肠杆菌占60%～80%，余为金黄色葡萄球菌、变形杆菌、粪肠球菌；慢性感染常混合其他细菌；绿脓杆菌多在手术或插管后引起感染。