求助检测黄曲霉素的方法

① 花生油里的黄曲霉素如何检验

GB/T 18979-2003 食品中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法

② 现在黄曲霉怎么怎么检测

在紫外线下，黄曲霉毒素b1,b2发蓝色荧光，黄曲霉毒素g1,g2发绿色荧光.黄曲霉毒素的相对分子量为312-346.难溶于水，易溶于油，甲醇，丙酮和氯仿等有机溶剂，但不溶于石油醚，己烷和乙醚中.一般在中性溶液中较稳定，但在强酸性溶液中稍有分解，在ph9-10的强碱溶液中分解迅速.其纯品为无色结晶，耐高温，黄曲霉毒素b1的分解温度为268℃紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性.

液相色谱法
液相色谱（liquid chromatography,lc)与薄层层析在许多方面具有相似性，二者互相补充.通常用tlc进行前期的条件设定，选择适宜的分离条件后，再用lc进行黄曲霉毒素的定量测定.
免疫化学分析方法
利用具有高度专一性的单克隆抗体或多克隆抗体设计的黄曲霉毒素的免疫分析方法，也是最常用的黄曲霉毒素检测方法.这类方法通常包括放射免疫分析方法（radioimmunoassay,ria),酶联免疫法（enzyme-linked of immunosorbent assay,elisa)和免疫层析法（immunoaflinity column assay,ica).它们均可以对黄曲霉毒素进行定量测定.
(1) 免疫亲和柱-荧光分光光度法和免疫亲和术-hplc法
免疫亲和柱法和酶联免疫吸附法虽然都可达到速简便效果，但酶联免疫吸附法仅能检测单一毒素（如黄曲霉毒素b1)含量，而且易出现假阳性结果，难以控制.免疫亲和柱法（包括荧光光度法和hplc法）却能达到既定量准确又快速简便的要求.
免疫亲和柱的使用可以避免传统tlc和hplc的缺点，同时免疫亲和柱与tlc和hplc法结合可以大大提高工作效率，提高灵敏度和准确度.
黄曲霉毒素免疫亲和柱-荧光光度计法是以单克隆免疫亲和柱为分离手段，用荧光计，紫外灯作为检测工具的快速分析方法.它克服了tlc和hplc法在操作过程中使用剧毒的真菌毒素作为标定标准物和在样品预处理过程中使用多种有毒，异味的有机溶剂，毒害操作人员和污染环境的缺点.同时黄曲霉毒素免疫亲和柱-荧光光度计法分析速度快，一个样品只需10-15min,比传统方法快几个小时甚至几天时间；仪器设备轻便容易携带，自动化程度高，操作简单，直接读出测试结果，可以在小型实验或现场使用.可以进行黄曲霉毒素总量 (b1b2g1g2) 的测定，检测限可达到1ug/kg,达到黄曲霉毒素标准限量值以下测定范围为1-300ug/kg.
黄曲霉毒素免疫亲和柱-高效液相色谱法比传统的hplc法更加安全，可靠，灵敏度和准确度高.它采用单克隆抗体免疫技术，可以特效性地将黄曲霉毒素或其他真菌毒素分离出来，分离效率和回收率高.
分析原理试样中的黄曲霉毒素用一定比例的甲醇/水提取液经过过滤，稀释后，用免疫亲和柱净化，以甲醇将亲和柱上的黄曲霉毒素淋洗下来，在淋洗液中加入溴溶液衍生，以提高测定灵敏度，然后用荧光分光光度计进行定量.也可以将甲醇-黄曲霉毒素淋洗液的一部分注入hplc中，对黄曲霉毒素b1,b2,g1,b2分别进行定量分析.免疫亲和柱是用大剂量的黄曲霉毒素单克隆抗体固化在水不溶性的载体上，然后装柱而成.该方法的测定范围0-300ug/kg.
(2) 酶联免疫吸附法：
1996年，nakane 建立了辣根过氧化物酶标记抗体的测定技术.由于该方法简便，敏感，特异，可作为多种抗原或抗体的测定，20世纪70年代后期，该方法引入真菌毒素的检测中，下面介绍的是竞争性酶联免疫吸附间接法检测黄曲霉毒素b1.
原理：将已知抗原吸附在固态载体表面，洗除末吸附抗原，加入一定量抗体与待测样品（含有抗原）提取液的混合液，竞争培养后，在固相载体表面形成抗原抗体复合物.洗除多余抗体成分，然后加入酶标记的抗球蛋白的第二抗体结合物，与吸附在固体表面的抗原抗体结合物相结合，再加入酶底物.在酶的催化作用下，底物发生降解反应，产生有色物质，通过酶标检测仪测出酶底物的降解量，从而推知被测样品中的抗原量.
(3) 微柱筛选法 可以用来半定量测定各种食品中黄曲霉毒素b1,b2,g1,g2的总量.
原理 样品提取液中的黄曲霉毒素被微柱管风硅镁型吸附层吸附后，在波长365nm紫外光灯下显示蓝紫色荧光环，其荧光强度与黄曲霉毒素在一定的光密度范围内成正比例关系.若硅镁型吸附剂层未出现蓝紫色荧光，则样品为阴性（方法灵敏度为5-10ug/kg).由于在微柱上不能分离黄曲霉毒素b1,b2,g1,g2,所以测得结果为总的黄曲霉毒素含量.
(4) 一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法
一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法是利用单克隆抗体而设计的固相免疫分析法.由此产生的一步式黄曲霉毒素快速检测试纸可在5—10分钟完成对样品中黄曲霉毒素的定性测定.借助黄曲霉毒素标准样品，这种方法能估算黄曲霉毒素的含量，非常适用于现场测试和进行大量样品的初选.

③ 黄曲霉毒素B1的检测方法

GB2761-2014《食品安全国家标准 食品中真菌霉素的限量》中对于黄曲霉毒素B1的限量以及检测方法做了修改，婴幼儿配方食品及婴幼儿辅助食品按照GB5009.24规定的方法测试，其他食品按照GB/T18979规定的方法测定。 TLC法是测定黄曲霉毒素的经典方法，是中国测定食品及饲料中AFT黄曲霉素B1(AFB1)的标准方法之一（GB/T5009.23-2006）。其原理是针对不同的样品，用适宜的提取溶剂将AFB1从样品中提取出来，经溶剂萃取纯化，再在薄层板上层析展开，分离，利用AFB1的荧光特性，根据荧光斑点的大小和强弱，比较测定黄曲霉毒素含量。
TLC有单项展开法和双向展开法，TLC法由于设备简单，易于普及，所以国内外仍在使用，但由于该法样品前处理繁琐，且提取和净化效果不够理想，提取液中杂质较多因而在展开时影响斑点的荧光强度，而双向展开虽避免了杂质干扰，增加了灵敏度，但增加了操作步骤和时间。 酶联免疫法检测AFB1的理论基础是抗原抗体反应，其采用单克隆或多克隆抗体技术，具有特异性强、分析时间短等优点。其原理是抗原（或抗体）吸附于载体上的免疫吸附剂和用酶标抗体（或抗原）与标本中的待测物（抗原或抗体）起特异的免疫学反应，最后用测定酶活力的方法来增加测定的敏感度。大体分为2类：一是用双抗体夹心法检测样本中的AFTB1， 二是用竞争法检测样本中的AFTB1,。为了使用方便，目前国内外已研制了酶标记免疫吸附测定试剂盒及配套仪器,方法也被列入国家标准(GB/T5009.22 1996第二法)。
但由于ELISA法中酶的活性易受反应条件影响，因此ELISA法测定结果稳定性较差，分析结果的准确性不高，容易出现假阳性结果。 一般来说，组织中黄曲霉毒素含量很低，而液相色谱串联质谱法具有比高效色谱法更高的灵敏度和准确性，如今这种方法还极少使用在测定组织霉菌毒素含量中。该方法检测限可达0.02~0.025 ppb。 84%甲醇水溶液提取样品中,正己烷脱脂,HLB固相萃取柱净化。采用电喷雾电离,正离子扫描,选择多反应检测模式（MRM）监测,外标法定量，该法灵敏,结果可靠。

④ 中药材黄曲霉素是用以下哪种方法检验的

2015版《中国药典》中国家食品药品监督管理局对陈皮、僵蚕、桃仁、胖大海、酸枣仁、薏苡仁、柏子仁、莲子、麦芽、使君子、槟榔、肉豆蔻、决明子、远志、大枣、地龙、水蛭、全蝎、蜈蚣等19种药材及其饮片品种项下增加“黄曲霉毒素”检查项目。药典限量为黄曲霉毒素B1不得过5 μg/kg，黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2总量不得过10 μg/kg 。同时第四部2351规定黄曲霉毒素测定采用高效液相色谱法，另外药典增补描述该法增加柱后光化学衍生法检测。Pribolab KRC光化学柱后衍生器，双波长254nm/352nm衍生光源，FEP衍生反应池线圈<10米，光源寿命超3000小时，不需要任何衍生试剂。配合PriboFast黄曲霉毒素免疫亲和柱。

⑤ 有什么方法可以检验花生油中有没有黄曲霉素

炸花生油是去除黄曲霉素方法：
1.家庭中最简单快捷的方法是煮花生时加点食用碱，用高压电饭煲可彻底破坏黄曲霉毒素，特别是熬八宝粥，加点食用碱不仅可彻底破坏各种豆类和花生中的黄曲霉毒素，同时保护杂粮中的维生素族，使玉米中的营养能被人吸收。
2.消除毒素的主要方法是加碱破坏毒素。结晶的黄曲霉素b1，耐强酸和紫外线照射，加热到268-269℃时开始分解破坏。
3.黄曲霉素是一种强致癌物，是由一系列霉菌代谢产生的，容易导致肝癌，还会降低免疫能力。黄曲霉素可怕的地方还在于它耐高温、不易清除。黄曲霉菌落一般生长在花生皮（种皮）上，放置很长时间后，黄曲霉素会积累到一定程度对人体有很大危害（致癌）。花生油是花生的子叶（两片白色花生仁）压榨而成，需要脱去种皮，所以好的花生油一般含有的黄曲霉素量极低，劣质花生油就不能保证。因此专家提醒，消费者尽量不要食用粗制花生油，要选择正规厂家生产的花生油。

⑥ 土榨花生油怎么样检测黄曲霉素

土榨花生油检测黄曲霉素的方法如下：
在炒菜时放一颗剥皮的蒜头（蒜子），蒜子对于黄曲霉素最敏感。
如果蒜子变红色，就是用地沟油，含有大量黄曲霉素。食油良好的话，蒜子是白色的。

⑦ 你们黄曲霉毒素B1是怎么检测的用什么方法学检测的

通用方法

薄膜层析法和液相色谱法是目前国内绝大多数检测机构都在使用的方法。由于其检测周期长，程序复杂所需试剂繁多等缺点已远远不能满足现代检测要求.随着现代科学技术的不断发展，特别是免疫学生物化学，分子生物学的不断发展人们已创建了不少快速，简便特异，敏感低耗且适用的黄曲霉毒素检测方法.而且以金标试纸为代表的这些方法已经被先进国家所广泛使用，引进和消化这些先进的方法是我们检测领域的当务之急.免疫亲和柱法优点很多但由于检测费用过高，而无法普及.而一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法似乎更适用于中国值得推广。薄层层析（Thin-Layer Chromatography,TLC）是在黄曲霉毒素研究方面应用最广的分离技术.自1990年它被列为AOAC （Association of Official Agricultural Chemists）标准方法，该方法同时具有定性和定量分析黄曲霉毒素的功能.2、液相色谱法液相色谱（Liquid Chromatography,LC）与薄层层析在许多方面具有相似性二者互相补充.通常用TLC进行前期的条件设定，选择适宜的分离条件后再用LC进行黄曲霉毒素的定量测定。3、免疫化学分析方法利用具有高度专一性的单克隆抗体或多克隆抗体设计的黄曲霉毒素的免疫分析方法也是最常用的黄曲霉毒素检测方法.这类方法通常包括放射免疫分析方法（Radioimmunoassay,RIA），酶联免疫法（Enzyme-linked of Immunosorbent Assay,ELISA）和免疫层析法（Immunoaflinity Column Assay,ICA）.它们均可以对黄曲霉毒素进行定量测定。