‘壹’ 怎么检测蔬菜和水果的激素农药残留
农药残留的检测技术,常见的有化学速测法、免疫分析法、酶抑制法和活体检测法等。
化学速测法,主要根据氧化还原反应,水解产物与检测液作用变色,用于有机磷农药的快速检测,但是灵敏度低,使用局限性,且易受还原性物质干扰。
免疫分析法,主要有放射免疫分析和酶免疫分析,最常用的是酶联免疫分析(ELISA),基于抗原和抗体的特异性识别和结合反应,对于小分子量农药需要制备人工抗原,才能进行免疫分析。
酶抑制法,是研究最成熟、应用最广泛的快速农残检测技术,主要根据有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酶的特异性抑制反应。
活体检测法,主要利用活体生物对农药残留的敏感反应,例如给家蝇喂食样品,观察死亡率来判定农残量。该方法操作简单,但定性粗糙、准确度低,对农药的适用范围窄。
‘贰’ 蔬菜水果中有机磷农药的残留如何检测
便携式农药残留速测仪及卡片的检测原理和使用方法便携式农药残留速测仪是根据国家标准方法GB/T5009.199 — 2003 )速测卡法(纸片法)而专门设计的仪器.主要用于果,蔬,茶,粮食,水及土壤中有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测,特别适用于农产品质量检测站的快速检测,果蔬生产基地和专业户采摘前田间地头检测,农贸批发销售市场现场检测,酒楼,食堂,家庭果蔬茶加工前安全检测. 检测原理: 仪器的检测原理是利用速测卡中的胆碱酯酶(卡②)可催化靛酚乙酸酯(卡①)水解为乙酸和靛酚,由于有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的活性有强烈的抑制作用,因此,根据显色的不同,即可判断样品中含有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留情况.①② 使用方法:(1)开机 按住面板上的"开 / 关"键约2秒钟,仪器开机(开机后再次按次键可关机):按[模式]键切换至"温度",当温达到40℃时,仪器发出一声提示音,预热完成,可以开始测试.(2)装片 将速测卡撕去上盖膜对折后再展开,插入压纸条下的各通道加热板上(注意卡①一端在上方,卡②一端在下方),检查速测卡放置位置是否正确,速测卡中间的虚线应与压条对齐,不要歪斜.(3)取样 选择有代表性的蔬菜或瓜果皮 ,擦去表面泥土,剪成一平方厘米左右碎片,取5克放入带盖瓶中,加入10毫升纯净水或缓冲溶液震荡50次(有条件拥护可配备超声波清洗器搅拌),静置2分钟以上,每批最好做9个检样,同时做一个纯净水或缓冲液的空白对照,每剪完一个样品,尖刀要洗净后方可处.理另一个样品,以免交驻污染.用移液抢取80微升样品液加到白色药片上. 如果检测是在采样现场或条件简陋的情况下进行,可直接在待检蔬菜叶尖部位滴2-3滴洗脱液,用另一片菜叶尖部在滴液处轻轻摩擦,使蔬菜表面的残留农药充分溶入洗液中.然后滴一滴在(卡②)上.(4)测试 按〈启动〉键,反应开始倒计时10分钟("反应"指示符亮)当听到仪器发出急促的蜂鸣提示音时关闭上盖,显色开始倒计时3分钟("显色"指示符亮):待仪器出缓和的蜂鸣提示音时,打开仪器上盖,进行结果判定.结果判定与空白对照卡比较,若(卡②)不变色或略有淡黄色均为阳性结果,不变黄为强阳性结果,说明农药残留量较高,显黄色色为弱阳性结果,说明农药残留量机对较低.(卡②)变为橘黄色或与空白对照卡相同,为阴性结果.附加说明本方法是生物化学反应,应尽可能避免一些物理和化学因素对酶活性的影响.反应最适酸碱度为PH7.5左右,检样偏酸或偏碱时应改用磷酸缓冲液浸提处理. 反应中,药片表面应保持湿润,最好将每一批样品处理好后统一加样,以免是过长蒸发干. 葱,蒜,萝卜,芹菜,茭白,蘑菇及番茄汁液中含有对酶活性有影响的植物次生物质,容易产生假阳性.处理这类样品时,不宣剪切过碎,浸提时间不宜过长,以免液汁过多释放影响检测检测结果.必要时可采用整株(体)蔬菜浸提的方法进行测定.农药速测卡在常温条件下有效期为壹年,贮存时要求放在阴凉,干燥和避光处,有条件者放于4℃冰箱中最佳.农药速测卡开封后最好在三天内用完,如一次用不完可存放在干燥器中.农药速测卡果蔬农药残留快速检测卡是用对农药高度敏感的胆碱酯酶和显色剂做成的酶试纸,可以快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯这两大类用量较大,毒性较高的杀虫剂的残留情况,选用的酶对甲胺磷敏感,抗干扰性强,操作简便,不需要配制试剂,不需要专业的技术培训,可以不需要任何仪器设备单独使用,也可配套农药残留快速检测仪使用,提高检测效率.产品容易贮存,携带方便,是现场检测的最佳方法.
‘叁’ 如何测定蔬菜中残留农药
一般常用两种方法:
酶抑制法和色谱法
酶抑制法:
原理:有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性,造成神经传导介质乙酰胆碱的积累,影响正常传导,使昆虫中毒致死,根据这一昆虫毒理学原理,用在对农药残留的检测中。加入反应试剂后,用分光光度计测定吸光值随时间的变化值,计算出抑制率,判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药的残毒情况。 乙酰胆碱酯酶+有机磷或氨基甲酸酯类农药——→酶活性被抑制
乙酰胆碱酯酶+样本提取液——→
1. 活性被抑制——→样本中含有有机磷或氨基甲酸酯类农药
2.活性正常 ——→样本中不含有有机磷或氨基甲酸酯类农药
如以乙酰硫代胆碱(AsCh)为底物,在乙酰胆碱酯酶(AchE)的作用下乙酰硫代胆碱(AsCh)水解成硫代胆碱和乙酸,硫代胆碱和二硫双对硝基本甲酸(DTNB)产生显色反应,使反应液呈黄色,在分光光度计410nm处有最大吸收峰,用分光光度计可测得酶活性被抑制程度(用抑制率表示)。
速测卡用的也是这个原理,但是这个方法只能只能知道或许含有有机磷和氨基甲酸酯类农药。而且不能定性定量的检测,只是一个表征。
色谱法:
前处理过程,取3KG的样品,用食品加工机打碎,然后称取25克,加入乙腈提取液均浆,过滤,加入食盐,震荡,静置分层,然后去上层有机相10毫升,到氮吹仪上吹至近干,用丙酮转移,定容到5毫升,混匀,过膜,装入1.5毫升的样品瓶中,上气相色谱仪(FPD),外标法,能检测有机磷,讲吹近干的提取液,用正己烷烷、正己烷和丙酮的混合液转移,过弗洛里矽柱到15毫升,再氮吹至5毫升以下,用正己烷定容到5毫升,转移到样品瓶,上气象色谱仪(ECD)能检测有机氯农药。
其他种类的农药,吡啶类、除草剂等就要上液相色谱仪,或者是质谱仪!
‘肆’ 有机磷农药(OrganophosphatePestcides)的测定
气相色谱法
方法提要
敌敌畏、马拉硫磷、甲基对硫磷等有机磷农药可溶于丙酮、二氯甲烷等有机溶剂,经丙酮、二氯甲烷混合溶剂-加速溶剂提取、净化后,毛细管柱分离-气相色谱-火焰光度检测器检测。
方法适用于土壤中敌敌畏、乐果、甲胺磷、速灭磷、内吸磷、甲基对硫磷、久效磷、二嗪磷、杀螟硫磷、马拉硫磷、倍硫磷、对硫磷等多组分残留量的测定。当取样量为10g时,检出限为0.50~1.20μg/kg。
仪器与装置
气相色谱仪带氮磷检测或火焰光度计。
快速溶剂萃取系统ASE-300型,配22mL和33mL萃取池,美国Dionex公司。
旋转蒸发浓缩器。
微量注射器5μL,10μL等。
DB-1弹性石英毛细管柱型号30m×0.25mmi.d;0.25μm膜厚。
试剂与材料
中性氧化铝100~200目,层析用。500℃烘4h,存放于干燥器备用。
硅藻土。
碳粉分析纯。
二氯甲烷、丙酮农残级。
农药标准溶液敌敌畏、马拉硫磷、甲基对硫磷、乐果、甲拌磷、速灭磷、二嗪磷、异稻瘟净、杀螟硫磷、溴硫磷、水胺硫磷、稻丰散、杀扑磷等,100μg/mL,-18℃保存备用。
替代物标准磷酸三苯酯,100μg/mL。
载气、燃烧气及助燃气分别为氮气,氢气和空气。氮气纯度为99.9%,经去氧管过滤,氧的含量小于5×10-6。
样品的采集与保存
按有关规定采集土壤样品,充分混匀后装入250mL样品瓶中,另取5g测定含水量。土壤样品保存在-18℃冷冻箱中,保存期不超过7d。
分析步骤
1)试样前处理。准确称取10.00g土壤样品、4.0g硅藻土、0.5g中性氧化铝、0.2g活性炭,加入6μL10.0μg/mL磷酸三苯酯溶液,混匀后装入22mL萃取池中。萃取条件:提取溶剂为丙酮-二氯甲烷(1+1)混合溶剂,提取温度60℃,压力10.3MPa,预热5min,静态提取10min,淋洗体积为60%池体积,氮气吹扫时间90s,循环提取2次,收集全部提取液。氮气吹扫浓缩至1.0mL,正己烷换相定容1.0mL,GC-FPD分析。
2)校准曲线。用正己烷逐级稀释有机磷农药标准储备液到1μg/mL溶液,再配制成0.00ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL、100ng/mL、150ng/mL等浓度水平的混和标准系列,各标准点加入10.0μg/mL磷酸三苯酯6μL。通过浓度与对应响应值峰面积建立校准曲线。
确证标准。配制30.0ng/mL的标准溶液,作为确证标准。气相色谱分析样品时,至少每10个试样或试样分析结束时,应用确证标准验证仪器及校准曲线的稳定性。当确证标准与初始标准的偏差超过20%时,应重新配制校准曲线,偏差区间内所分析的试样需要重新测定。
3)气相色谱条件。色谱柱,DB-1弹性石英毛细管柱(30m×0.25mmi.d;0.25μm);气化室温度220℃;检测器温度250℃;柱前压12×6895Pa;氢气流速75mL/min;空气流速100mL/min;尾吹气,氮气,流速为15mL/min;不分流进样,进样量1μL。升温程序,120℃保持5min,以10℃/min升至180℃,保持5min,再以30℃/min升至250℃保持5min。
4)定性及定量分析。
a.定性分析。采用与标准目标物保留时间相比较的方式对试样待测目标物进行定性,当试样与标准同时分析时,试样中待测目标物保留时间与标准目标物保留时间偏差不大于±0.06min,试样待测目标物初步被定性为标准目标物。对试样待测目标物含量达到方法检出限3倍以上的组分,需要进行气相色谱-质谱确证或性质不同的色谱柱进行确认。
b.定量分析。定量方法一般为外标法,也可以采用内标法。参见85.2.2.1定量分析部分。
5)方法性能指标。标准系列0.00ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL、150ng/mL建立的回归方程的线性相关系数在0.995~0.999之间。
将质量分别为20.00ng的有机磷混合标准加入到空白土样中,按试样前处理分析方法操作,经浓缩定容后按选定的仪器工作条件分析。根据浓度与仪器的响应(峰高)计算检出限,在0.50~1.20μg/kg之间。试样加标回收率60.7%~108%。替代物磷酸三苯酯标准回收率控制限在60%~130%。
‘伍’ 请问 有机磷农药的检测有哪些方法,哪些又是最新的方法
在检测技术方面,方法有很多,主要有酶抑制法、酶联免疫法、光度法、色谱法及质谱法等。目前国际上已普遍采用多残留检测技术。这些方面的建立得益于气质联用(GC-MS)、液质联用(LC-MS)技术的应用以及常规使用的气相色谱仪(GC)、液相色谱仪(LC)技术上新的突破,并提高农药定性定量、多农残检测、快速检测等方面发挥着巨大的作用,色谱法以成为目前检测的主流仪器。
2.1 酶抑制法
酶抑制法是利用杀虫剂可以抑制乙酰胆碱酯酶或是羧酸酯酶的活性的原理而建立的,即乙酰胆碱酯酶或羧酸酯酶与样品反应,若酶的活性受到抑制,则表示该类杀虫剂的存在。因为酶的活性与杀虫剂的含量有关,测定酶活性的抑制率,即可得杀虫剂的残留量。应用抑制原理快速测定法只能判断是否有过高的有机磷和氨基甲酸酯农药,而不能判断超标的具体农药品种和残留量,因此只能作为快速测定方法。
2.2 酶联免疫测试法
酶联免疫检测法是利用化学药物在动物体中有促进其产生免疫抗体的原理,将某种农药与大分子化合物的复合体注入实验动物体内,使其对该种农药产生抗体,然后将抗体的抽取物与蔬菜样品农药残留抽取物进行离体试验,以比色的方式确认农药的残留量。这种结果精确、灵敏度高、特异性强,可采用试剂盒检测。但是,在实际应用中,农药种类繁多,制备抗体的难度较大,具有一定的盲目性。
2.3 气相色谱及其联用技术
气相色谱是一种简易、快速、高效和灵敏的现代分离分析技术,是农药残留测定不可或缺的手段,由于农药的种类很多,不同类型的农药,结构差异很大,而每一种检测器仅能对一类或几类原子和官能团进行响应,因而不同类型的农药常常需要采用不同类型的检测器,加上农药的残留一般都比较低,所以检测器的选择十分关键,如分析有机氯和拟除虫菊酯类农药采用电子捕获检测器(ECD)、分析有机磷农药采用火焰光度检测器(FPD)、分析含氮农药和氨基甲酸酯类农药采用氮磷检测器(NPD)。高灵敏的检测器可以检出1×10-10~1×10-12g的组分,适合农药微量和痕量分析。
气相色谱—质谱联用技术发挥气相色谱的高分离能力,又可发挥质谱法的高高鉴别能力,适用于多组分混合物中未知组分的定性鉴定,简化了多农残检测的分析步骤,而采用SIM模式仅对待测组分的定性离子进行采集,减少了杂质峰的干扰,提高了灵敏度。
2.4 液相色谱及其联用技术
相对于GC,液相色谱的适用性更广,可分析高沸点、热不稳定、非挥发性化合物。液相色谱质谱联用(LC-MS)对分析技术和仪器的要求高,具有检测灵敏度高、选择性好、定性定量同时进行、结果可靠等优点。但液相色谱与质谱之间的接口技术比较复杂,因此LC-MS在检测农药残留方面落后于GC-MS。由于目前LC-MS接口技术还没有真正地实现标准化,加之LC-MS对操作者的水平和仪器要求比较高,因此它在农残检测方面没有GC-MS普及。但LC-MS的飞速发展已成为发达国家在各种基质中微量极性农药检测手段。在多农残残留分析中,LC-MS技术使用最多的是四极质量分析器。由于质谱仪通用性,LC-MS在多种类多成分的农药残留检测中越来越广泛,如我国标准GB/T 20776-2006建立的粮谷中372种农药残留的LC-MS方法和国外环境样品中多农残分析。
3.CTI华测检测农药残留测试服务
CTI华测检测作为食品检测领域权威第三方检测机构,在诸多农残检测技术具有国际先进检测技术,同时获得中国合格评定国家认可委员会(CNAS)和国家计量(CMA)资质认可。华测检测可提供各国标准的农药残留检测服务,助您的产品通往日本、欧美顺利通关。根据企业的不同需求,华测检测农药残留测试服务如下:水胺硫磷、氧化乐果、克百威等约500种农药残留扫描,多农残检测324项(应对日本“肯定列表制度”),应对日本通过检测项目248项,日本厚生省57项有机磷农药列表测试服务,中国与欧盟常见农药185项,l 34项高毒农药一齐分析
‘陆’ 农产品中有机磷农药残留量的测定方法有哪些
根据有机磷农药的化学和毒理学性质,检测有机磷农药的分析方法有五大类:波谱法、色普法、酶抑制法、酶联免疫法以及活体生物测定法。
波谱法。该方法是根据有机磷农药中某些官能团或水解、还原产物与特殊的显色剂在特定条件下发生氧化、磺酸化、酯化、络合等化学反应,产生特定波长的颜色反应来进行定性或定量(限量) 测定。
高效液相色谱法是在液相色谱柱层析的基础上,引入气相色谱理论并加以改进而发展起来的色谱分析方法。高效液相色谱法在农药残留分析的应用越来越广泛,是因为高效液相色谱法能适合分析沸点高而不太容易汽化、热不稳定和强极性农药及其代谢产物;且可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱等联用,易实现分析自动化;同时一些新型检测器的问世在一定程度上提高了高效液相色谱法的检测灵敏度。与气相色谱法相比,不仅分离效能好,灵敏度高,检测速度快,而且应用面广。
酶抑制法。有机磷农药对哺乳动物中毒作用的基础,通常与它们抑制中枢和周围神经系统的胆碱酯酶的能力有关。酶抑制法是利用有机磷农药的毒理特性建立的一种快速检验方法。由于有机磷农药能抑制乙酰胆碱酯酶的活性,使该酶分解乙酰胆碱的速度减慢停止,再利用纸片或电极(即纸片法和膜电极法) 作为载体将乙酰胆碱酯酶吸附在上面,如果酶的活性没有被抑制,生成了基质水解产物,使用呈色剂或发色的基质而显色。反之,如果被测样品中含有农药残留,则酶的活性被抑制,基质就不被水解,遇显色剂不显色。这样,通过纸片的颜色变化或电极的读数指示变化上可以测定有机磷农药与标准有机磷农药比较则可定量。
酶联免疫法是六十年代发展起来的一种新的检测方法,该方法起初主要用于病毒、细菌、蛋白等较大结构或分子的检测,应用范围主要集中于医学方面。七十年代后期,随着科技的发展,酶联免疫检测方法开始向检测生物毒素、农药残留、抗生素残留等小分子物质方向延伸。
‘柒’ 水果蔬菜中的有机农药残留量的测定方法
4.
实验步骤:
4.1
样品的处理
取A、B、C三种蔬菜样品,各1g左右,放入三个洁净的烧杯中。
加入5mL提取液,震荡混匀10min
取待测液2.5mL,加入酶液0.1mL,显色剂0.1mL,混匀静止10min
在比色管中加入2.5mL样品提取液,待用
4.2
对照溶液测试
取提取液2.5mL,加入酶液0.1mL,显色剂0.1mL,混匀静止10min
立即加入0.1mL底物摇匀,此时检液开始显色反应,立即放入仪器比色皿中,按照仪器操作规范,点击对照按钮,在3号通道进行测定,3min后记录抑制率。
4.3
样品溶液测试
立即加入0.1mL底物摇匀,此时检液开始显色反应,立即放入仪器比色皿中,按照仪器操作规范,点击对照按钮,在3号通道进行测定,3min后记录抑制率。
四.注意事项
1.
所有使用液使用前都要摇匀,用一瓶取一瓶,防止其他物质污染,以免溶液中毒失效。
2.
反应瓶及反应容器应该用去污粉洗涤后再用自来水及蒸馏水洗涤,不能用酸性溶液洗涤,最好也不使用洗洁精。
3.
取样时需要注意典型性和代表性,去除不可食用部位。
4.
取用反应液及酶液的器具需要专用并做好标记,所有溶液做到只进不出。
五.实验结果
我们组的实验结果失败,用的第2小组的数据:
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率大于50%时,表示样品中有高剂量有机磷或氨基甲酸甲酯类农药存在可判定样品为阳性结果。
实验测定的结果为:
样品
质量m/g
抑制率%
阳性(抑制率<50%)
A
1.094
6.39
阴性
B
1.114
63.17
阳性
C
1.037
15.47
阴性
从测定的结果来看,B号样品的有机磷农药表现为阳性,A、C号样品的有机磷农药表现为阴性,初步可以判定B号样品中农药残留不合格。但要确定其使用农药种类和数量必须通过其他手段进一步定性和定量。
从抑制率来看,B>C>A,从而可以初步判断,样品中有机磷的含量依次为B>C>A。有机磷农药在蔬菜上的残留与吸收能力依次为:根菜类>叶菜类>果菜类,本次实验选用的蔬菜是卷心菜与生菜,都是属于叶菜类的蔬菜,比较容易积累和吸收有机磷农药
‘捌’ 有机磷和氨基甲酸酯类农药农残标准
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准1. 范围本标准要求了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检验方法。本标准适适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速筛选测定。测试方法 酶抑制率法2. 原理在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功效有抑制作用,其抑制率和农药浓度呈正相关。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物和显色剂反应,产生黄色物质,用分光光度计在410nm处测定吸光度随时间改变值,计算出抑制率,经过抑制率能够判定出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在。3.试剂3.1 pH8.0缓冲溶液:分别取43.5g无水磷酸氢二钾和2.2g磷酸二氢钾,用510mL蒸馏水溶解。3.2 显色剂:分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和15.6mg碳酸氢钠,用20mL缓冲溶液溶解,4°C冰箱中保留。3.3 底物:取25.0mg硫代乙酰胆碱,加3.1mL蒸馏水溶解,摇匀后置4℃冰箱中保留备用。保留期不超出十天。3.4 乙酰胆碱酯酶:依据酶活性情况,用缓冲溶液溶解,3 min吸光度改变D A0值应控制在0. 3以上。摇匀后置4℃冰箱中保留备用,保留期不超十天。3.5 可选择由以上试剂制备试剂盒。乙酰胆碱酯酶ΔA0值应控制在0.3以上。4 仪器4.1 分光光度计或对应测定仪。4.2常量天平。4.3 恒温水浴或恒温箱5 分析步骤5.1 样品处理:选择有代表性蔬菜样品,冲洗掉表面泥土,剪成1cm左右见方碎片,取样品1g,放入烧杯或提取瓶中,加入5mL缓冲溶液,静制十五分钟,之间需振荡几次,待用。5.2 对照溶液测试: 先于试管中加入2.5mL缓冲溶液,依次加入0.lmL酶液、0.1mL显色剂、0.lmL底物摇匀,此时检液开始显色反应,应立即放入仪器比色池中,统计反应3 min吸光度改变值ΔA0。5.3 样品溶液测试:先于试管中加入2.5mL样品提取液,其它操作和对照溶液测试相同,但在加底物之前必需放置15分钟,统计反应3min吸光度改变值ΔAt。
6 结果表述计算6.1 结果计算检测结果按公式计算:抑制率(%)=[ (ΔA0-ΔAt)/ ΔA0]×100式中:ΔA0 -对照溶液反应3min吸光度改变值;ΔAt -样品溶液反应3min吸光度改变值;6.2 结果判定结果以酶被抑制程度(抑制率)表示。当蔬菜样品提取液对酶抑制率≥50%时,表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在,样品为阳性结果。阳性结果样品需要反复检验2次以上。对阳性结果样品,可用其它方法深入确定具体农药品种和含量。7 附则7.1酶抑制率法技术指标7.1.1 灵敏度指标:酶抑制率法对部分农药检出限见表2酶抑制率法对部分农药检出限表2 酶抑制率法对部分农药检出限
农药名称 检出限mg/kg 农药名称 检出限mg/kg
敌敌畏 0.1 氧化乐果 0.8
对硫磷 1.0 甲基异柳磷 5.0
辛硫磷 0.3 灭多威 0.1
甲胺磷 2.0 丁硫克百威 0.05
马拉硫磷 4.0 敌百虫 0.2
乐果 3.0 呋南丹 0.05
7.1.2 符合率:在检出抑制率≥50%30份以上样品中,经气相色谱法验证,阳性结果符合率应该在80%以上。8说明8.1葱、蒜、萝卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有影响次生物质,轻易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整棵蔬菜萃取或采取表面测定法。对部分含叶绿素较高蔬菜,也可采取整株蔬菜萃取方法,降低色素干扰。8.2 当温度条件低于37度,酶反应速度随之放慢,加入酶液和显色剂后放置反应时间应对应延长,延长时间确实定,应以胆碱酯酶空白对照测试3min吸光度改变差值在0.3以上,即可往下操作。注意样品放置时间应和空白对照溶液放置时间一致才有可比性。胆碱酯酶空白对照测试3min吸光度改变差值在0.3以下原因:一是酶活性不够,二是温度太低。
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蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检验方法统一标准
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法标准
1. 范围
本标准要求了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检验方法。
本标准适适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速筛选测定。
测试方法 酶抑制率法
2. 原理
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在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功效有抑制作用,其抑制率和农药浓度呈正相关。正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物和显色剂反应,产生黄色物质,用分光光度计在410nm处测定吸光度随时间改变值,计算出抑制率,经过抑制率能够判定出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在。
3.试剂
3.1 pH8.0缓冲溶液:分别取43.5g无水磷酸氢二钾和2.2g磷酸二氢钾,用510mL蒸馏水溶解。