‘壹’ RH(D)血型测定生理盐水法原理是什么
Rh血型系统,主要有五种抗血清,即抗C、抗C、抗D、抗E、抗e。用5种抗Rh分型血清,来检查红细胞抗原,可能有18种表现型。在临床输血中,一般只做D抗原的鉴定,凡被检红细胞和抗D血清凝集者为Rho阳性,不凝集者为Rho阴性。其他Rh抗原鉴定和D抗原一样只是加相应的抗血清即可。其鉴定方法,由抗血清的性质而定。如盐水抗体用盐水法,IgG抗体用酶、抗人球蛋白、聚凝胺等方法。
‘贰’ ABO血型鉴定,RH血型鉴定抗凝血用什么管子
鉴别方法(1)盐水凝集法:①玻片法:操作简单,适用于大量样品检查,但反应时间长;被检查的最低血清抗体滴度,不容易引起红细胞凝集,因此不适合反向定型。 ②管法:由于离心作用可加速凝集,反应时间短,并且,通过离心力的手段可以使红细胞与密切联系,并促进凝集,适合应急的健康检查。 (2)微凝胶柱方法:用在微柱的凝胶介质的相应抗原红细胞抗体的免疫凝集反应的方法。血型抗体是单克隆抗体,添加试剂,样品可直接或通过观测与血液具有特殊离心机后肉眼分析。该操作标准化,定量移液管,以确保结果的准确性。
的Rh的Rh血型系统一般是指D抗原的检测,根据患者以D抗原的红细胞进入Rh阳性和Rh阴性是否。
蛋白水解酶(包括菠萝蛋白酶,木瓜蛋白酶,无花果酶,胰蛋白酶等),菠萝酶介质法为例:
⑴取菠萝蛋白酶1G,加入100ml磷酸盐缓冲液pH5.5的彻底动摇在37混合℃水浴30
血型 min,取上清液离心即1%菠萝酶溶液后。放置4℃冰箱储存。
⑵被检控制的红血细胞和红血细胞,用生理盐水冲洗一次(红细胞溶血除外),配成5%的红细胞悬液。
⑶取一小管15,三排管的用C,C,D,E,E顺序标记。
⑷排1号各加抗C血清,前两个加抗c血清,前三加抗D血清,前四加抗E血清,前五次加抗-E血清和1滴。
⑸每个管的第一行,加入一滴红血细胞悬液各加的前两行的红血细胞的阳性对照,阴性对照加前三行的红血细胞进行测试。
⑹各管加1%,每行菠萝酶液1滴。
盐水介质法⑴管法①取小试管3,注意抗-D,另一个是标记阳性对照,最后一个显着的负控制; ②在室温下反应盐水抗D血清各1个以上试管中加入一滴; ③抗D试管中加入1滴5%至红血细胞被扣押(生理盐水血清)
血型匹配的悬挂,阳性对照和阴性对照,分别加入正合适的管红血细胞和红血细胞上的负下降; ④轻轻混匀,于3000r/min离心15秒; ⑤取出轻轻摆动观察有无凝集。
⑺混合,置于37℃保温1h观察舱,无结块,应找出原因。
‘叁’ 血型测试
血型测试 怎么测试自己的血型 核心提示:血型是以A、B、O等三种遗传因子的组合而决定的,大多根据父母的血型即可判断出以后出生的小宝宝可能出现的血型。血型的遗传规律即:A+A→A、O;A+B→A、B、O、AB;A+O →A、O;A+AB→A、B、AB;B+B→B、O;B+O→B、O; B+AB→B、A、A供;O+O→O;O+AB →A、B;A
怎么测试自己的血型? 方法几种:
1、免费的方式,你可以直接曲献血的地方,对方会告诉你的血型是多少的,并且可以免费检查你的血是否健康,一举两得。
2、去医院直接查血,你也可以针对查血型。价格很便宜的。
以上方法是最正确的,并且是最安全的。
其余的并没有什么正规的方法。
医生做血型检测时怎么辨别? 常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有:①正向定型:用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定:凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性。
一般我们体检时查血型用的是第一种正向定型,即一般把分别血液滴在抗A血清(我记得是通常标记为蓝色)和抗B血清(标记为黄色),看看那个凝集了。抗A的凝集了(即血液滴上后红细胞马上聚集沉淀继而保持蓝色)而抗B的没凝(即呈现血液的红色)就是A型,反之一红一黄就是B型,两个都凝了(一蓝一黄)是AB型,两个都没凝(红色)是O型。这是ABO血型检测。
恭至于rh血型检测,同理用盐水介质凝集法。
血型检查需要多久 医院级别不同收费不同,二级医院ABO血型和RH血型收费18元,不包括挂号费
1,首先去挂号,2去任何科室开一张化验ABO血型的申请单,3去收款处交钱不会超过10元钱,4然后去检验科采血,一般是耳垂或者手指,几分钟就会出结果,但是什么时候取化验单就需要问检验科的的医生了
怎么测血型? 方法几种:
1、免费的方式,你可以直接曲献血的地方,对方会告诉你的血型是多少的,并且可以免费检查你的血是否健康,一举两得。
2、去医院直接查血,你也可以针对查血型。价格很便宜的。
以上方法是最正确的,并且是最安全的。
其余的并没有什么正规的方法
如何测自已的血型 好多人对于自己的血型都是一无所知的,我们怎么知道身体上的血型是属于哪种血型的呢?有什么根据呢?现在下面为大家解决这个问题。 通常所说的血型就是红细胞的血型,是根据红细胞表面的抗原特异性确定的。已知人类的红细胞有15个主要血型系统,其中主要的是ABO血型系统,其次Rh血型系统。 临床上最重要的是将人类血型分为A、B、AB、O四种(称为ABO血型系统)。在人类的血液里含有凝集原(又称抗原)A、B和凝集素(又称抗体)A、B。 凝集原附着在红细胞表面。凝集素存在于血浆(或血清)中。同名的凝集原和凝集相遇(如凝集原A和凝集素B)会发生红细胞凝集现象(溶血反应)。所以在人体的血液中,所含的凝集原和凝集素的类型不同,可分为A、B、AB、O四种血型. 血型是遗传决定的,亲代与子代的血型关系取决于遗传因素,如双亲都是O型,子代也是O型,亲代是O型和AB型,则子代为A型或B型。子代与母亲血型不合可引起新生儿溶血病。 我们除了根据医学上的分析判断人是什么血型之外,还可以通过心理学这方面判断血型,一个人的性格是跟他本人的血型有关的,不同血型的人,都有着不一样的性格,所以很多心理学家都可以单凭一个人的性格特点来对这个人估计她是属于什么血型的。现在我们就通过一个人的性格判断自己是什么血型吧。 A型 A型血是比较稀少的一种血型,在销售团队中,男性的比重要远远小于女性的比重。男性如果是A型血的人员,普遍性格内向,这类人员具有相对内敛的做事风格,有些人性格比较古怪,有时候比较固执,甚至有些人不善与人交流。这种血型的人员多数并不适合做销售工作,他们更适合做一些研发或者是按部就班的工作。这种血型如果放在女性身上,她们会体现出完全不同的性格特征,她们普遍表现为做事执着、有韧性。但是,她们往往外在表现与内在思想方面,体现完全迥异的人格特点,甚至有时候自相矛盾。不管怎样这种类型的女性,具有较强的自我意识,对于销售职业来说这是一个非常重要的品质。 B型 B型血是亚洲血型中最为普遍的一种血型,大约会占到总数的60%,是一种绝对大众型的血型。这种血型的男士,他们普遍比较外向,善于言辞,充满表现欲,善于处理比较棘手的问题,面对困难充满斗志,但是,这种类型的人员缺乏持久精神,而且缺乏必要的严谨精神,感性成分要大于理性成分。从整体上看,这种类型的男士比较适合做销售工作,而且他们多是疯狗型销售的代表。这种血型的女士。她们可能是女性当中比较优秀的血型之一,这类人群她们普遍善于表达,性格外向,而且具有较强的行动力,喜欢尝试冒险的行动,期间很多人并不缺乏缜密性,多数情况下她们都能体现一定的领导才能。她们可能是销售的中坚力量。 AB型 AB型血是最为稀缺的一种类型,作为男性来说,这类血型的人员比较内向,性情比较另类,但是他们却非常善于思考,很有智慧,我们一般将这类血型的人称为才子,他们更适合做一些细致的研究工作,对于销售来说他们可能并不太喜欢。因此多数团队中这类血型的男性相对很少。如果这个血型是女性,那么,她将体现出非常复杂的性格特征,要么非常开朗,要么比较内向,而且往往具有双重人格,如果适合做销售的话,将是非常优秀的销售人员,而且这种类型的女性很容易造就沉默型销售。 O型 这类血型的男性办事谨慎、执着,独立性很强,而且具有一定的领导才能,属于理性思考比较强的那种,性格沉稳,而且有一定的爆发力,但是,这种血型的人,往往容易好高骛远,过分的自我,容易产生对立情绪。总的来看,O型血的男性也是非常适合做销售的一种类型,而且他们表现出沉默型、农夫型销售的多项特点。这种血型如果是女性,又体现出极强的不......>>
想做血型测试,哪里可以呢? 血型测试是很普通的检验项目,各大医院都可以的,在华乐街的话,你可以到协和。
怎么简单测试血型或者给一些准确的测试题 O型人的特征──额部圆,发际圆。眼、鼻亦呈圆形。唇薄,面部显得生动、有活力的样子。 A型人的特征──下巴细长而尖且上翘。眉、眼与鼻梁靠近。外眼角长。眉毛根有两条纵形皱纹。眉稀薄。鼻孔纵细。发际不齐。显得有瘦削感。 B型人的特征──三角形眉,颧胄突出。鼻翅向左右张起。眉、眼象离开鼻梁一般。鼻梁高耸。下巴瘦下后缩,给人粗肥的感觉。 AB型人的特征──面部的器官,或者是生得端正整齐,或者是生得零散不匀称。眼珠大而黑。鼻梁隆起。整个看起来有静感。 (2)从对方的性格特征观察血型 A型:倔强,较理智谨慎,责任心强,事业上获得成功的机会较多。缺点是情绪易波动。 B型:乐观热情,脾气随和,待人亲切坦率,爽快开朗,能容忍别人的缺点,常能结交知心好友。缺点是专心致志不够,易产生畏难情绪。 O型:较自信。坚定。冷静,富于实干精神,工作勤恳,学习上进,勇于攀登。 缺点是较固执,不够虚心。 AB型:因为是A、B的复合型,所以如AB偏B者,则具有B型的优点,甚至能成就惊人;如AB偏A者,不但缺乏A型的优点,而且显得孤僻、呆板。 (3)从对方的个性(内向或外向)观察血型 A型和AB型的人,大都属于内向,而O型和B型的人则大部分是外向型的。 A型。B型以及AB型,对感情的表达方式比较类似,O型和B型的人,在行动上较相似。 一般而言,内向的人不容易将感情表达出来,喜怒哀乐不形于外,习惯压抑快乐或悲伤的情绪,喜欢做白日梦。而外向的人,喜欢社交性的生活,不喜欢一个人苦思,宁愿向他人求助,并以获得他人的注意为志。 内向型的人,是属于思考型(孤独型)的,喜好寒色系(绿色。蓝色)的颜色。而外向型的人,属于外交型,喜欢暖色系(红色,橙色)的颜色。 (4)从对方给人的第一印象观察血型 A型 温文有礼、态度认真、爱干净、谨慎。 O型 不爱慕虚荣、待人亲切、爽朗明快、有魄力。 B型 活泼有朝气、品味极佳,给人心直口快的感觉。 AB型 让人觉得善良神经易紧张,心思细密、知性。 (5)从第一次见面相互打招呼并开始交谈的特征来观察血型 A型 善于听人说话,对人态度消极,谈话时,总像怕伤到对方似的。 O型 喜欢说实施,有强烈的自我主张,我行我素。 B型 能巧妙地抓住对方的心理动向,善于发表言论。 AB型 谨言慎行,严肃认真,坚持自我主张。 (6)从对方交谈和行为中判断对方血型 A型 一件事尚未解决时,绝不会动手做另一件事,总在深思熟虑后,才会采取行动,不活跃。 O型 能做全盘的考虑和为大局着想,行动积极。 B型 说做就做,并能考虑到细节问题,以及横向的沟通。 AB型 心思细密,凡事追求合理性,但缺乏着眼于大局的眼光。 (7)从对方的穿着搭配中判断他的血型 A型 对流行服装很敏感,喜欢打扮,但不流于奢华,爱干净,色彩的感觉也很敏锐。 O型 不喜欢华艳的色彩,喜欢干净的装扮和套装,以及强调个性的设计。 B型 对服装的感觉相当敏锐,并有特殊的偏好,而且对服装的要求十分严格。 AB型 喜欢奇形怪状的服装,和极端的个性不谋而合。 (8)从对方对生活的态度(强者或弱者)来判断血型 人类向来有扩展自我的倾向,特别是在遇到和自己血型相同的人的时候,但是在经过一番接触后,又会产生对方的血型似乎和自己的血型不同的感觉,这是因为人类常有征服对方的潜在意识所致。所以我们仍可将人类划分成两大类,容易受人支配以及容易支配他人这两种。由于不愿受人支配的天性所致,自然而然地,愿视对方为一位强者。 所以在未知对方的血型之前,可以先判断对方是属于强者血型还是弱者血型,从这点出......>>
自己在家最简单的测试血型的方法? 买市售抗-A、抗-B血清
找两个已知血型的人一个A型一个B型的
‘肆’ 什么是RH抗体试验
大约2/3的Rh阴性的人野昌旁输入Rh阳性的血液,或约7%的Rh阴性的妇女孕育Rh阳性胎儿后,其血清中颂橡可产生抗Rh抗体。当再次输入Rh阳性血液时迅枣,就可发生输血反应,因此要做RH抗体试验来确定输血有无危险。
‘伍’ 抗体检测怎么检测(核酸、抗原、抗体检测)
自 2020 年新冠疫情爆发以来,“核酸检测”作为一项检测是否感染的重要指标,开始反复出现在我们的生活中。2022 年 3 月 10 日,国务院应对新型冠状病毒肺炎疫情联防联控机制综合组发布通知,决定推进“抗原筛查、核酸诊断”的检测模式,在核酸检测基础上增加抗原检测作为补充。
抗原检测是什么?和其他的检测手段有什么不同?这篇文章,我们以新型冠状病毒为例,讲讲常见的快速筛查手段,聊聊相关的原理以及适用范围。
想要对一种疾病或是一种物质进行筛查,我们首先要弄清楚的就是“从何下手”的问题,其次是“如何检测”,让微观世界的变化反映到我们眼前,帮助我们作出判断。
我们面对的是病毒。根据大家耳熟能详的中学生物课知识,病毒是一类由遗传物质和蛋白质外壳组成的类生命体 。如果想对病毒的感染情况进行探测,就需要从它的组分下手。接下来的内容,希望大家带着自己中学的生物知识阅读。
以目前正在困扰我们的 SARS-CoV-2 为例。它属于冠状病毒科下,冠状病毒亚科的乙型冠状病毒属,是已知的第七种能够感染人类的冠状病毒。所有的冠状病毒都是具有 包膜 的 正义单链 RNA 病毒 ,也就是说,它们的遗传物质是一条单独的 RNA 链,并且这条 RNA 链可以直接作为 mRNA(信使 RNA)参与翻译,指导蛋白质的合成。
编号为NPRC 2020.00002的毒种,图片由国家病原微生物资源库(中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所)提供。
我们现在的目的是检测标本中是否存在这种病毒,无论是检测它本身,还是检测病毒带来的产物,能够下手的方向也就是两种:蛋白质外壳(包膜)、遗传物质。
顺着这个逻辑,那最显而易见的方法就是检查它“能不能看到”,但病毒本体小得很,SARS-CoV-2 的直径在 80-120 nm,要想每个标本都拿电镜过一遍是不现实的,人力物力和财力都撑不住。那么更经济实惠的方法,就是通过某些措施,让 病毒的组分 ,或是因为病毒而出现的 某些特殊物质 积攒到一定数量级后发光、变色,出现 宏观表现 。
那么我们的问题就转化成了,选择一种可以观察到宏观尺度变化的方法,和病毒的组分、病毒引发的某种物质产生关联。我们能选择的物质也摆在台面上:病毒的遗传物质,在这里是它的 RNA;病毒的包膜,也就是蛋白质外壳;以及,如果你还记得一些基础的生物知识,人体的免疫系统会在感染病毒之后产生抗体以抵抗入侵,它也是不错的选材。
我们目前采用的几种检测方式,也就从这些物质(以及它们的相关物质)脱胎而来,分别为针对遗传物质的核酸检测,针对包膜的抗原检测,以及针对抗体的血清抗体检测。
作为病毒的遗传物质,核酸序列载写了能够鉴定病毒为某一特定种的基因特征,因此核酸阳性,也就意味着病毒在体内存在过。
我们目前进行的“核酸检测”其实分为两个部分。平常我们进行的“捅鼻子”“捅嗓子”取样和后续的定性是第一部分。在取得标本之后,因为病毒量太少,样本会在实验室中进行一定次数的扩增,并根据荧光反应结果来判定阳性阴性。
第二部分,确定为阳性的样本,还需要通过基因测序,确定样本病毒的分型,以便溯源。这一步已经不属于日常筛查的范畴,但在流行病学调查上具有重大意义,如果有兴趣了解,可以参看 Wikipedia 简要了解。
我们平常参与的作为 筛查 工具的核酸检测,指的就是采集到定性的第一部分。
在感染了 SARS-CoV-2 之后,咽拭子、痰、下呼吸道分泌物、血液等标本中均可发现病毒核酸。不同部分标本核酸检测的阳性率有一定差异,随着病程进展,各个部位的检出率也会发生变化。
我们习惯称呼的“鼻拭子”与“咽拭子”,其实都是采集咽腔后壁的分泌物与组织,前者采集鼻咽,后者采集口咽。也有采用其他标准的,比如唾液等亦可作为检测标本,本质上也是不同地区规定有差异
鼻(咽)拭子与(口)咽拭子已经是综合了阳性率与便利程度的考量。粪便和尿液等其实也可以作为标本采集的对象。而且根据一项对 31 例患者的研究,肛拭子的准确率要高于鼻咽与口咽采样,尤其病程后期,肛拭子确诊病例的鼻拭子阳性率不到 30%。 4 但显然,由于操作的限制,它无法作为早期筛查的首选手段。
接下来的工作,就是从获取的那一点点标本中提取核酸。由于样本中病毒的数量级很小,不足以拿来分析,还需要将其扩增并标记。需要用到的同样是高中学过的知识:聚合酶链式反应(PCR)——这一步看起来麻烦,但由于它的原理和工序已经研究成熟,实际操作中只需要加好试剂送机器,整个核酸检测的过程里最麻烦的还是让待测者安安分分弄来标本(笑)。
各地疾控机构或检测中心会采购合适的核酸 提取试剂盒 与核酸 检测试剂盒 。提取试剂盒负责将 RNA 从混杂的样本(细胞碎屑、分泌物、灰尘等杂质)中提取出来,常见的有磁珠法、离心柱法和释放剂法,不同提取方法可能对后期检测的准确度略有影响 。之后,提纯出的 RNA 就会移交给检测试剂盒(也有一些试剂盒将两者合一),进行之后的工序。
检测试剂盒带着样本在机器中进行的过程,就是这个检测中最主要的反应:RT-qPCR(实时定量逆转录聚合酶链反应)。
接下来需要你捡起高中生物的知识。一般的 PCR 反应有以下几步:
加热:让双链 DNA 解旋变形,成为两条单链; 退火:让混合的单链 DNA 与根据需要复制的片段而设计好的引物结合; 延伸:调整温度,让 DNA 聚合酶顺着引物开始工作,复制出新链,形成新的双链。在对病毒的探测中,我们要做的工作也无非上面几步,只是需要多出两样东西:
在第一次反应之前,使用 逆转录酶 (依赖 RNA 的 DNA 聚合酶),合成病毒单链 RNA 的互补链,组合成 cDNA ; 在退火与延伸的阶段,除了引物和所需的酶外,还需要 TaqMan 探针 。你可以把 TaqMan 探针这样理解:它的主体部分是一段寡核苷酸链,被设计成能和一小部分需要复制的基因片段配对成双链的样子;它一端接了一个荧光分子,另一端接了一个开关(淬灭基团),两者和探针相连时,荧光就会被淬灭基团压制,探测不到。退火时,这个探针会和引物一起结合在要复制的单链片段上。在延伸的过程中,DNA 聚合酶会把挡在面前的障碍物切碎,其中就包括这段探针,淬灭基团和荧光分子就这样分离,荧光就表现出来。
随着循环数的增多,扩增的 DNA 片段和荧光也越来越多。对比每个循环的荧光亮度和前若干次循环的基准亮度,我们就能得出目前的 DNA 片段量,也可以直接用循环数和荧光亮度做定性的判断。
那么具体复制哪一部分呢?既然要探测病毒,那我们就选取最有代表性的核酸片段。现行的标准中,ORF 基因与 N 基因是常用的检测位点。
检测试剂盒负责的就是将提取出的 RNA(样本)投入后,根据试剂盒上的程序说明,设定对应的 PCR 温度与时长,由机器控制完成扩增过程,在固定的环节收集荧光信号,记录对应的循环数(Ct 值)。判断阴性阳性 / 是否还具有传染力的标准,就是看荧光信号达到阈值时,目前循环数是多少。根据目前现行的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第九版)》,解除隔离管理的标准为 Ct 值 ≥ 35 。和此前通行的 ≥40 标准相比,出院与解除隔离的时间会大大缩短 。
经 RT-PCR 的核酸检测到现在都是确诊的金标准,因为它在方法学的角度看来,(理论上)可以做到 100% 准确。但核酸检测耗时长、对环境与操作人员要求高,在环境条件达不到标准、物资与仪器不齐全等情况下,大批量的核酸检测会带来巨大人力与财力消耗。
在本次疫情中,我们采用的免疫测定包括了快速抗原检测与抗体检测,它以 抗原-抗体反应 为基本原理,旨在通过抗原与抗体快速的中和效应,以较少的时间成本探测样本中是否存在待测物。两者都属于免疫层析法的范畴。
以盒装方式出现、可以自行操作的抗原检测就很适合作为物资不足、自我测定等情况下的补充。
核酸检测检查的是病毒的(标志性)遗传物质,是病毒的“内里”。那么(快速)抗原检测检查的就是病毒的“外在”,直接检查完整的病毒颗粒。目前通过审批的抗原检测试剂盒包括三种类型:胶体金法、乳胶法、荧光免疫层析法。三者内在原理一致。但其中荧光免疫层析法试剂盒仍然需要专用的检测仪或紫外线手电,不适合家庭自测;胶体金法和乳胶法则都是将检查结果转化成肉眼可见的条带,差别在于用于标记上色的物质不同。
当然,抗原检测自然有它的劣势在,它的 假阴性率 (是阳性但显示阴性)要更高,可能导致漏检错检。但放在一杯茶就能出结果的时间优势面前,准确性上的差距在某些特定情况下可以暂时让步。
图源:How the SARS-CoV-2 EUA Antigen Tests Work | ASM.org
和核酸检测相比,抗原检测增加了“鼻拭子”这一采样途径,降低了个人自测的难度。拭子上的样本在缓冲液中洗脱,取液体滴加在加样孔后,液体会因为毛细作用,带着潜在的抗原,经过一片预载了抗体的区域(结合垫,conjugate pad)。
这片区域上的抗体,是抗目标抗原(SARS-CoV-2)的单克隆抗体,每一个抗体分子都和特别的标记结合,它们与样本中的抗原发生反应,形成抗原-抗体复合物,并随着毛细作用向下一条带流去。
紧接着经过的是检测线(T 线,test line),在检测线上附着的同样是抗目标抗原的单克隆抗体,你可以理解成这里的东西和结合垫上的一样,只是没带标记。此时,如果受测者已经感染了 SARS-CoV-2,他留在样本中的抗原形成的抗原-抗体复合物,会在此处与固定在线上的抗体再次结合。在这里,这些带着标记的复合物不断沉积,最终会显示出一条或深或浅的条带。条带的颜色来源,就是之前结合垫上的抗体分子附着的标记,在胶体金法中是胶体状态的金颗粒,在乳胶法中是上色的乳胶滴,在荧光法中是荧光分子。所以你在使用这类试纸时,会发现刚刚加样结束,液体刚开始扩散的时候,扩散的最前端会有一点点很淡的颜色不断推移,这就是还没有固定沉积的标记的颜色。
接下来,液体继续扩散,经过质控线(C 线,control line),在质控线上附着的是另一种抗体——‘抗“抗目标抗原的单克隆 抗体 ” 的 单克隆 抗体 ’,简称“ 二抗 ”。这种新的抗体是让上一种抗体在另一种动物的免疫系统中反应得来的,比如结合垫的抗体来自兔,那这里的抗体就来自羊,是羊抗兔的单克隆抗体。也就是说, 二抗的抗原是 之前在 结合垫上的抗体 。这条线就是为了检测液体有没有正常扩散、结合垫上的抗体有没有失效等等而存在的。此时,液体中剩余的大量来自结合垫的抗体就会作为抗原,与质控线上的二抗发生抗原抗体反应,形成复合物,显出一条明显的条带。
由于结合垫上的抗体非常充裕,这条质控线条带会出现得非常快、非常显色,而检测线由于抗原(病毒)数量不一定,显色速度会有差别,但一般在 15 分钟内就足够判断结果。所以不要看 C 线很明显,T 线隐隐约约就觉得“没事了”, T 线不管深浅,只要有,就是阳性 。
具体操作方面,可以参考医政医管局发布的 教学视频。目前国家也在逐步推广抗原自测试剂盒,在一定程度上可以减轻未来医疗与街道的压力。
除了前两种检测手段外,还有一种使用不太多,但同样重要的检测方法,就是同属免疫测定方法的“血清抗体检测”。
抗体检测采用的试剂盒与抗原检测非常接近,但标本的限制更大——由于检测的对象变成了抗体,标本就必须是明确有抗体存在的血液(或血浆、血清)。而且人体在初次感染病毒后,并不会第一时间内产生抗体。抗体能够明确达到被检测的数量级,一般是在初次感染(或接种疫苗)的一到两周之后。这些条件限制了抗体检测不能作为确诊性质的检查。目前,血清抗体检测仅作为一定情况下检查疫苗是否生效,或查验受测者近期是否感染过新冠病毒的方法。
在人体中有五种抗体,分别是 IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM。IgA 主要负责黏膜免疫。IgD 与免疫反应激活有关。IgE 抵御寄生虫,同时也参与过敏反应。剩下的 IgG 与 IgM 就是对抗病原体的过程中,免疫系统派出的主力军。
SARS-CoV-2 作为病原体,人体经刺激主要分泌的就是 IgG 与 IgM 两种。现有的抗体检测试剂盒,主要也是针对人体对 SARS-CoV-2 的 N 蛋白(核衣壳蛋白)或 S 蛋白(刺突蛋白)产生的 IgG 与 IgM。
抗体试剂盒的检测装置外观和抗原检测别无二致。二者的差别就是上文中提到的结合垫、检测线、质控线上附着的物质。
这次,加样孔中滴入的样本可能有对 SARS-CoV-2 的抗体。因此,结合垫上就应当是带了标记物的抗原——当然不可能放活病毒上来。一般这里使用的都是设计检测的抗原蛋白,比如前文提到的 N 蛋白或 S 蛋白,或是重组病毒,无论是哪种,它都必须包含受体结合域(RBD)作为抗体结合的靶点。在检测线上,附着的就是抗 IgM 或抗 IgG 抗体,以捕获结合了抗原的抗体蛋白。最后,质控线上附着抗原的特异性抗体,捕获剩余的游离抗原。
总的说来,三种检测方式针对的是不同的需求,互有优势,互相补充。核酸检测作为金标准,直接查验病毒的 RNA,负责看被检者带不带病毒;抗原检测作为快速检测方法,查的是病毒的蛋白质,但准确度不如核酸检测,对传染力强的感染者更有效;抗体检测查的是疫苗有没有生效、人近期有没有感染过病毒。
近期,新冠疫情在各地卷土重来。Omicron 变种与此前流行的 Delta 变种相比,虽然病死率与重症率明显下降,但潜伏期更短,病毒复制速度更快,传染力明显增强。希望大家在这样的环境中保持健康。
‘陆’ 查免疫性抗RH抗体到那里查谢谢。
病情分析:你好!Rh阴性的人受Rh阳性红细胞(带有Rh抗原)刺激后产生抗体,从其血清中提取嫌贺抗D免疫球蛋白即可制成芹尺派。用困猜于预防新生儿溶血症。
意见建议:检查免疫性抗RH抗体在各大县级以上医院都能查,一般是在检查血型时同时检查。
‘柒’ 临床上常用的血清学检查方法有哪几种
主要有沉淀试验、凝集试验、补体结合试验、中和试验及与标记抗体有关的试验。
(1)凝集试验
包括玻板凝集法、全血平板凝集法、试管凝集法和琼脂扩散法。
①全血平板凝集反应
此法常用于传染性鼻炎、鸡白痢、鸡伤寒、鸡慢性呼吸道病等禽病的检疫和监测。
②琼脂扩散反应
当适当比例的抗原抗体在含有电解质的琼脂网状基质中自由扩散相遇时,形成肉眼可见的白色沉淀线。此法常用于鸡传染性法氏囊病、鸡马立克氏病、禽流感、禽脑脊髓炎、禽腺病毒感染等病的诊断,还常用于抗体监测和血清学流行病学调查。
(2)血凝与血凝抑制试验
试验原理:某些病毒能够与人或动物的红细胞发生凝集,称为血凝反应(HA)。这种凝集反应可被加入的特异性血清所抑制,称为红细胞凝集抑制试验,即血凝抑制反应(HI)。
此方法常用于鸡新城疫、禽流感、鸡产蛋下降综合征等病毒的诊断和血清学监测。
‘捌’ Rh血型鉴定的方法操作
(包括菠萝酶、木瓜酶、无花果酶、胰蛋白酶等) 以菠萝酶介质法为例:
⑴取菠萝酶1g,加pH5.5磷酸盐缓冲液100ml,充分振摇混匀,置37℃水浴箱30min,离心沉淀后取上清液即1%菠萝酶液。放置4℃冰箱贮存。
⑵待检者红细胞及对照红细胞用生理盐水洗涤1次(有溶血的红细胞除外),配成5%红细胞悬液。
⑶取小试管15支,分3排,每排试管按C、c、D、E、e顺序标记。
⑷每排第1管加抗C血清,第2管加抗c血清,第3管加抗D血清,第4管加抗E血清,第5管加抗e血清各1滴。
⑸第1排各管加待检者红细胞悬液各1滴,第2排加阳性对照红细胞,第3排加阴性对照红细胞。
⑹每排各管加1%菠萝酶液1滴。
⑺混匀,置入37℃水浴箱中1h观察结果,若无凝集,应查找原因。
结果判读:?
⑴倾斜试管肉眼观察,先看阳性对照管应凝集,阴性对照管不凝集,再看待检者的试管有凝集者为阳性,无凝集者为阴性。如肉眼观察有疑问者再做镜检。
⑵分别记录,阳性或阴性。
⑶抗RhD阴性者,应作间接抗人球蛋白试验,以免遗漏Du型。附注:凡检查出体内有Rh抗体者,应发给Rh血型卡。需要时,一方面动员捐出血液,另—方面须提高警惕,以免接受不相合的血液而发生意外。 ⑴试管法①取小试管3支,1支注明抗D,另1支注明阳性对照,最后1支注明阴性对照;②将室温盐水反应活性的抗D血清各1滴加入上述试管内;③抗D试管中加入1滴5%待检者红细胞(盐水、血清)悬液,阳性对照及阴性对照试管中分别加入相应的阳性红细胞及阴性红细胞悬液1滴;④轻轻混匀,于3000r/min离心15s;⑤取出轻轻摆动观察有无凝集。
结果判读:抗D试管中出现凝集,而阴性对照试管不凝集,阳性对照试管凝集,待检者为阳性;抗D管和阴性对照管均不凝集,阳性对照试管凝集,待检者为阴性。
⑵平板法①取洁净平板1块,用记号笔划出反应小格,在左侧注明抗D,中间段注明阴性对照,右侧注明阳性对照;②将室温盐水反应的抗D血清各1滴加入上述小格内;③抗D小格内加入待检者5%红细胞悬液1滴,阳性对照小格内加入阳性对照红细胞悬液1滴,阴性对照小格加入阴性对照红细胞悬液1滴;④用干净玻棒搅拌红细胞悬液和试剂血清充分混合;⑤连续轻轻倾斜转动平板,一般在2min内观察结果,或按试剂说明书规定的时间观察结果。
结果判读:同试管法。
‘玖’ rh血型鉴定的原理
1.AB0血型鉴定原理
常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有:①正向定型:用已盯碧旅知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定:凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性。ABO血型定型原则见表1-5-2。
2.鉴定方法
(1)生理盐水凝集法:①玻片法:操作简单,适于大量标本检查,但反应时间长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型。②试管法:由于离心作用可加速凝集反应,故反应时间短,而且,借助于离心力可以使红细胞接触紧密,促进凝集作用,适于急诊检查。
红细胞亚型抗原性弱,如抗A抗B标准血清效价低时,易造成漏检或误定。如加用O型(抗A、B)血清和反向定型,可避免此凯凳类错误。
玻片法凝集结果判断:红细胞呈均匀分布,无凝集颗粒,镜下红细胞分散。在低倍镜下凝集程度强弱判断标准:①呈一片或几片凝块,仅有少数单个游离红细胞为(++++)。②呈数个大颗粒状凝块,有少数单个游离红细胞为(+++)。③数个小凝集颗粒和一部分微细凝集颗粒,游离红细胞约占1/2为(++)。④肉眼可见无数细沙状小凝集颗粒。于镜下观察,每凝集团中有5~8个以上红细胞凝集为(+)。⑤可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多的游离红细胞(±)。⑥可见极少数红细胞凝集,而大多数红细胞仍呈分散分布为混合凝集外观。⑦镜下未见细胞凝集,红细胞均匀分布为(-)。
(2)凝胶微柱法:是红细胞抗原与相应抗体在凝胶微柱介质中发生凝集反应的免疫学方法。血型抗体为单克隆抗体,加入试剂、标本,用专用离心机离心后可直接用肉眼观察结果或用血型仪分析。此法操作标准化,定量加样,确保结果准确性。
3.抗A、抗B和抗AB标准血清标准
准血清均采自健康人,并应符合下述条件:①特异性:只能与相应的红细胞抗原发生凝集,无非特异性凝集。②效价:我国标准抗A和抗B血清效价均在1:128以上。③亲和力:我国标准要求抗A对A1、慧迟A2及A2B发生反应开始出现凝集的时间分别是15s、30s和45s;抗B对B型红细胞开始出现凝集的时间为15s。凝集强度为3min时,凝块不小于1mm2。④冷凝集素效价:在1:4以下。⑤无菌。⑥灭活补体。
‘拾’ 鉴定Rh血型要用什么方法特别要注意什么
鉴定信哗弊方法因抗血清的性质而定,如盐水抗体用滑族盐水法,IgG抗体用聚凝胺法、抗球蛋白法或酶法等。
如一般芦陆检查为RhD阴性,应进一步确证,以排除诸如Du、DⅥ等弱D或不完全D抗原。因它们比正常D阳性红细胞抗原弱,接受正常D抗原红细胞仍有产生抗D的可能;故对受血者而言,作为RhD阴性对待最为安全。