❶ 鉴别纤维素分解菌采用什么染色法
1、刚果红能给纤维素染色，第一种方法是在菌落长出来以后加的刚果红，产纤维素酶的菌落周围的纤维素被水解了，因此染色较浅或没有被染色，从而分辨出产纤维素酶并改前的菌落；而第二种方法是在培养基中直接加入刚果红，因为培养绝清基中有淀粉物质歼基的存在，产淀粉酶的菌落在水解淀粉的同时可能会使刚果红的染色变浅，出现水解圈，即假阳性现象。
2、是在培养基中加入刚果红。
❷ 纤维素酶活的活性检测方法及使用说明是什么
这些是在索莱宝官网上借鉴的：（仅供参考）
纤维素酶活的活性检测方法
1. 纤维素CMC酶
1.0标题
用3.5一二硝基水杨酸法测定纤维素CMC酶活性单位。 2.0范围
生产分析和质量控制部门适用。 3.0原理
纤维素CMC酶（EC3.2.1.4）水解羧基纤维素分子中β－1.4葡萄糖苷键,释放出的还原糖(以葡萄糖计)与3.5二硝基水杨酸(DNS)反应,产生颜色变化,这种颜色变化与释放还原糖(以葡萄糖计)的量成正比关系,即与酶样品中的酶活性成正比。通过在550nm的光吸收值查对标准曲线(以葡萄糖为标准物)可以确定还原糖产生的量,从而确定出酶的活力单位。 4.0试剂
4.1无水醋酸钠(分析纯) 4.2冰醋酸(分析纯) 4.3 3.5－二硝基水杨酸 4.4无水葡萄糖
4.5四水酒石酸钾钠(分析纯) 4.6氢氧化钠(分析纯) 4.7重蒸苯酚(分析纯) 4.8无水亚硫酸钠(分析纯) 4.9叠氮化钠(分析纯) 4.10羧甲基纤维素钠 5.0仪器
5.1水浴锅(恒温)50±1℃ 5.2电热干燥箱80±1℃ 5.3 722型分光光度机计 5.4分析天平感量0.1㎎ 5.5一级玻璃制品 5.6电冰箱 6．0试剂的准备
6．1乙酸－乙酸钠缓冲溶液（PH=4.8）
溶液A：量取冰醋酸6ml，定容至1000ml，制成0.1M醋酸钠溶液。 溶液B：称取8.2g醋酸钠，溶解后容至1000ml，制成0.1M醋酸钠溶液。 以A：B=4：6的比例混合，低温冷藏备用。 6.2 DNS试剂:
溶液A:称分析纯NaOH 104g溶于1300ml水中,加入30g分析纯3.5一二硝基水杨酸。 溶液B:称分析纯酒石酸钾钠910g，溶于2500ml热水中，再称取25g重蒸苯酚和25g无水亚硫酸钠加入酒石酸钾钠溶液。
将A、B溶液混合，定容至5000ml，贮存于棕色瓶中，暗处放置一星期后可使用。 6.3 CMC溶液：用羧甲基纤维素钠（CMC）以PH4.8醋酸缓冲液配成1%的溶液。 7．0标准曲线制作：
7.1无水葡萄糖80℃烘干至恒重。
7.2准确称取1.000g溶于1000ml水中，加10mg叠氮化钠防腐，4℃冷藏备用。 7.3标准葡萄糖曲线制作
纤维素酶的作用原理
1、纤维素酶在提高纤维素、半纤维素分解的同时,可促进植物细胞壁的溶解使更多的植物细胞内溶物溶解出来并能将不易消化的大分子多糖、蛋白质和脂类降解成小分子物质有利于动物胃肠道的消化吸收熊谱成1996.
2、纤维素酶制剂可激活内源酶的分泌,补充内源酶的不足,并对内源酶进行调整,保证动物正常的消化吸收功能,起到防病,促生长的作用（张国立,1996）.
3、消除抗营养因子,促进生物健康生长.半纤维素和果胶部分溶于水后会产生粘性溶液,增加消化物的粘度,对内源酶造成障碍,而添加纤维素酶可降低粘度,增加内源酶的扩散,提高酶与养分接触面积,促进饲料的良好消化.
4、纤维素酶制剂本身是一种由蛋白酶、淀粉酶、果胶酶和纤维素酶等组成的多酶复合物,在这种多酶复合体系中一种酶的产物可以成为另一种酶的底物,从而使消化道内的消化作用得以顺利进行.也就是说纤维素酶除直接降解纤维素,促进其分解为易被动物所消化吸收的低分子化合物外,还和其他酶共同作用提高奶牛对饲料营养物质的分解和消化.
5、纤维素酶还具有维持小肠绒毛形态完整,促进营养物质吸收的功能.
❸ 纤维素酶的测定方法
土壤样品应为<2mm，即过10号筛，我们常用20目筛。
❹ 筛选纤维素分解酶的方法
（1）纤维素酶是一种复合酶，包括C 1 酶、C X 酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖．纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，刚果红可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，能够产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌．因此，刚果红染色法能通过颜色反应直接对微生物进行筛选．
（2）为了确定是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验．纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种．
（3）进行菌种保藏时，若采用临时保藏，将菌种接种在斜面培养基上，放人4℃冰箱中可保藏3～6个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的甘油混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年．
故答案为：
（1）复合 葡萄糖
（2）刚果红染色法 液体发酵 固体发酵
（3）将菌种接种在斜面培养基上，放人4℃冰箱中 将菌液与灭菌的甘油混匀，放在-20℃的冰箱中
❺ 纤维素酶活力用什么方法测定
纤维素酶活力的测定 一、目的学习和掌握3,5-二硝基水杨酸（DNS）法测定纤维素酶活力的原理和方法，了解纤维素酶的作用特性。二、原理纤维素酶是一种多组分酶，包括C1 酶、CX 酶和�0�7�0�0-葡萄糖苷酶三种主要组分。其中C1酶的作用是将天然纤维素水解成无定形纤维素，CX 酶的作用是将无定形纤维… 3．C1 酶活力的测定 将5mg/mL 的原酶液稀释10～15 倍后用于测定C1 酶活力，以脱脂棉为底物。取4 支洗净烘干的20mL具塞刻度试管，编号后各加入50mg 脱脂棉，加入1.5mL 0.05MpH5.0 的柠檬酸缓冲液，并向1 号试管中加入1.5mL DNS 溶液以钝化酶活性，作为空白对照，比色时调零用。将4 支试管同时在45℃水浴中预热5～10min，再各加入适当稀释后的酶液0.5mL，45℃水浴中保温24h。取出后立即向2、3、4 号试管中各加入1.5mL DNS溶液以终止酶反应，充分摇匀后沸水浴5min，取出冷却后用蒸馏水定容至20mL，充分混匀。以1 号试管溶液为空白对照调零点，在540nm 波长下测定2、3、4 号试管液的光密度值并记录结果。 根据3 个重复光密度的平均值，在标准曲线上查出对应的葡萄糖含量，按下式计算出C1 酶活力（U/g）。在上述条件下反应24h，由底物生成1�0�7�0�0mol 葡萄糖所需的酶量定义为一个酶活力单位（U）。 式中：24 为酶活力定义中的24h。 4．CX 酶活力的测定 将5mg/mL 的原酶液稀释5 倍后用于测定CX 酶活力，以CMC 为底物。 取4 支洗净烘干的20mL 具塞刻度试管，编号后各加入1.5mL 0.51％CMC 柠檬酸缓冲液，并向1 号试管中加入1.5mL DNS 溶液以钝化酶活性，作为空白对照，比色时调零用。 将4 支试管同时在50℃水浴中预热5～10min，再各加入稀释5 倍后的酶液0.5mL，50℃水浴中保温30min 后取出，立即向2、3、4 号试管中各加入1.5mL DNS 溶液以终止酶反应，充分摇匀后沸水浴5min，取出冷却后用蒸馏水定容至20mL，充分混匀。以1 号试管溶液为空白对照调零点，在540nm 波长下测定2、3、4 号试管液的光密度值并记录结果。 根据3 个重复光密度的平均值，在标准曲线上查出对应的葡萄糖含量，按下式计算出CX 酶活力（U/g）。在上述条件下，每小时由底物生成1�0�7�0�0mol 葡萄糖所需的酶量定义为一个酶活力单位（U）。 5．�0�7�0�0-葡萄糖苷酶活力的测定 取4 支洗净烘干的20mL 具塞刻度试管，编号后各加入1.5mL 0.5％水杨酸苷柠檬酸缓冲液，并向1 号试管中加入1.5mL DNS 溶液以钝化酶活性，作为空白对照，比色时调零用。将4 支试管同时在50℃水浴中预热5～10min，再各加入酶液0.5mL，50℃水浴中保温30min，取出后立即向2、3、4 号试管中各加入1.5mL DNS 溶液以终止酶反应，充分摇匀后沸水浴5min，取出冷却后用蒸馏水定容至20mL，充分混匀。以1 号试管溶液为空白对照调零点，在540nm 波长下测定2、3、4 号试管液的光密度值并记录结果。 根据3 个重复光密度的平均值，在标准曲线上查出对应的葡萄糖含量，按下式计算出�0�7�0�0-葡萄糖苷酶活力（U/g）。在上述条件下，每小时由底物生成1�0�7�0�0mol 葡萄糖所需的酶量定义为一个酶活力单位（U）。五、结果计算 1．葡萄糖（G）标准曲线的制作（表2） 表2 标准曲线测定数据列表
❻ 刚果红鉴别纤维素测定方法，氯化钠冲洗什么浓度
用这方法判断酶活力大小的,实际上刚果红是结合到培养基的多糖底物,但分解纤维素的细菌可以产纤维素酶,能分解这个多糖底物成为寡糖,这样刚果红就不能结合上去了,氯化钠呢就可以使结合不牢的刚果红洗去,这样就留下大大小小的透明圈,大的透明圈当然分解纤维素的能就强。
刚果红染色法的原理
刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物.当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红—橘迅—纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌.
刚果红染色法：
常用的刚果红染色法有两种,一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种是在倒平板时就加入刚果红.
方法一 在长出茵落的培养基上,覆盖质量浓度为1 mg／mI.的CR溶液,10～15 min后,倒去CR溶液,加入物质的量浓度为l mol／I.的NaCI溶液,15 min后倒掉NaCl溶液,此时,产生纤维素酶的茵落周围将会出现透明圈.
方法二 配制质量浓度为10 mg／mI.的CR溶液,灭菌后,按照每200 mI.培养基加入1 mI.的比例加入CR溶液,混匀后倒平板.等培养基上长出茵落后,产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈.
两种刚果红染色法的比空伍较
刚果红在筛选纤维素分解菌上的应用已经有超过20年的历史,课本中给出了两种方法斗伍或.方法一是传统的方法,缺点是操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用.方法二的优点是操作简便,不存在菌落混杂问题,缺点是由于在纤维素粉和琼脂、薯仔汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应.但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊,因为培养基中纤维素占主要地位,因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分.方法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的能力,它们在长时间培养过程中会降解刚果红而形成明显的透明圈,与纤维素分解菌不易区分.
❼ 嗜碱纤维素酶活力的测定方法
CMC法和滤纸法。嗜碱纤维素酶活力的测定方法有两种，一种是适用于CX酶的陵仿CMC法，另闷举一种是适用于C1酶蚂汪碧的滤纸法。纤维素酶一种复合酶，是能够将纤维素降解为葡萄糖的的总称。
❽ 纤维素酶的检测方法
1 酶的活力测试方法现状：�纤维素酶是由霉菌等培养得到的一个自然的多组份混合物，它的生物催化作用可以使纤维素纤维发生水解，有效地控制水解速度和水解率可以得到纤维素纤维织物的不同处理要求，纤维素酶对纤维素纤维的作用分四个程序；渗入，内切，外切，糖化。�渗入决定于酶的分子量大小和纤维的内表面可及度，内切(在任意部位把纤维素苷键切断)主要决定于组份中Cx酶的活力，外切(在纤维素的一端顺序切下一个个双糖)主要决定于C1酶的活力，糖化决定于把多糖转化为单糖的葡萄糖酶Co的活力。多种组分的各自活力和协调构成了单位时间内纤维素纤维的降解糖化量，酶的活力测定对织物酶处理工艺设计有重要意义。� 酶的活力测定，有称作催化活力测定，测定方法有；滤纸崩溃法，总糖比色法，粘度法……等。滤纸崩溃法属于定性检测，总糖比色法重点反映C1与Co的协调作用，粘度法重点反映Cx与C1的协调作用，两者都可以用作定量测定。至今活力测定尚未有统一的方法，表示活力大小的计量单位更是多种多样，丹麦NOVODISK(诺和诺得公司)早期采用总糖比色法（AF187．2／1－GB 82－08－10）一分钟水解产生1μmol葡萄糖称为一个NCU活力单位（NCU＝NOVO Cellulase Unit）。后来又采用粘度法（AF275／1－GB 1989－02－03）用一种活力为880EGU的内切葡聚糖酶，以其作用于CMC的粘度曲线为对比标准，测得的对应值以EGU／克作为一个内切酶活力单位（EGU＝Endo Glucase Unit）。
❾ 纤维素酶的鉴定方法
在纤维素分解菌的鉴定实验中，纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解纤维念缺素后所产生的葡萄糖进行定量戚高档测定高乱．
故选：B．
❿ 纤维素酶活力用什么方法测定
纤 维 素 酶 是 一 种 复 合 酶 。 酶 系 包 括 外 切 B-1.4- 葡 聚 糖 酶 （ ExoB-1.4glucanase,EC3.2.1.9 ） 内 切 B-1.4 葡 聚 糖 酶 （ Endo β -1.4-glucanase,EC1.2.1.4） 和纤维二糖酶。纤维素酶在一定温度和 PH 条件下， 将纤维素酶底物（滤纸或羟甲基纤维素钠）水解，释放出还原糖。在碱性，煮沸 条件下，3.5-二硝基水杨酸（DNS 试剂）与还原糖发生显色反应，其颜色的深浅 与还原糖（与葡萄糖汁）含量成正比。通过在 540nm 测定吸光度，可得到产生还 原糖的量，计算出纤维素酶的 FPA 酶和 CMCA 酶活力，以此代表纤维素酶的酶活 力。