目的基因检测与鉴定四步方法

❶ 目的基因的检测与鉴定过程是什么

目的基因的检测是看看目的基因进入受体细胞没，所以先利用基因探针检查受体细胞中是否含有目的基因；其次需要考虑，受体细胞中有了目的基因后是否能顺利转录，因此还是基因探针来检查信使RNA；含有信使RNA后还得考虑是否能翻译形成蛋白质，利用抗原-抗体杂交来检测蛋白质。最后，考试中经常考察最后的一步，有了蛋白质后是否就有了满意的性状，即个体生物学水平上的检测，例如，我国的抗虫棉经过了多次基因改造后才得到我们满意的性状。

❷ 关于目的基因的检测与鉴定（高二生物）

如果目的基因没有插入到染色体上的话，即使检测到蛋白质或mRNA也不一定代表这是基因的产物，并且该性质不一定能稳定遗传。
有可能生物体内本身能少量表达这种蛋白质，那即使检测到mRNA或目的蛋白，也不代表基因重组成功了。
如果不检测mRNA，而直接测目的基因和蛋白质，则不能确定蛋白质是由细胞本身基因所表达的还是外源的蛋白质。
如果不检测蛋白质，即使目的基因在染色体上，并且能转录出mRNA，也不能保证此mRNA能正确翻译。
上面的埋晌3步是必不可茄腊少的，缺少任何一步的实验都是不严谨的颤液滑，没有科学意义的。如楼上所说的，做科学是要有严谨的思维，每一部都是环环相扣的。

❸ 基因的表达和鉴定

大学的课本上用的是基因的表达和检测
两个都可以,只不过侧重点不同

❹ 如何对目的基因进行检测与鉴定

可以从三方面对目的基因进行鉴定：
1直接测定：按照目的基因组成制作DNA分子探针进行配对；
2 mRNA测定：根据目的基因组得出其哪销转录的mRNA组成,利用探针检测；
3蛋白测定：可旦让应用PCR相应技术测定目的基因翻译的相关蛋白,也可采用免疫化学法李迟游导入蛋白抗体检测蛋白.

❺ 基因工程的主要步骤

什么是基因工程？它包括哪些主要步骤
基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。第一步，获取目的基因。第二步，目的基因与运载体结合。第三步，将目的基因导入受体细胞。第四步，目的基因的检测与鉴定。
基因工程操作过程的主要步骤有哪些
一，目的基因的获取。二，基因表达载体的构建。三，导入受体细胞。四，目的基因的检测与鉴定。

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基因工程的操作过程的主要步骤包括哪些
提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达。

基因工程的操作步骤
工具（1）酶：限制性核酸内切酶、DNA连接酶、（2）载体：质粒载体、噬菌体载体、Ti质粒、人工染色体1.提取目的基因获取目的基因是实施基因工程的第一步。如植物的抗病（抗病毒 抗细菌）基因，种子的贮藏蛋白的基因，以及人的胰岛素基因干扰素基因等，都是目的基因。要从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因，是十分不易的。科学家们经过不懈地探索，想出了许多办法，其中主要有两条途径：一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因；另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。鸟枪法的具体做法是：用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞提供的DNA（即外源DNA）的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制（在遗传学中叫做扩增，如使用PCR技术），从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来。如许多抗虫抗病毒的基因都可以用上述方法获得。用鸟枪法获得目的基因的优点是操作简便，缺点是工作量大，具有一定的盲目性。又由于真核细胞的基因含有不表达的DNA片段，一般使用人工合成的方法。人工合成基因的方法主要有两条。一条途径是以目的基因转录成的信使RNA为模版，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需要的基因。另一条途径是根据已知的蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对的原则，推测出它的基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。如人的血红蛋白基因胰岛素基因等就可以通过人工合成基因的方法获得。2.目的基因与运载体结合基因表达载体的构建（即目的基因世旦与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也搜禅扰是基因工程的核心。将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为运载体，首先要用一定的限制酶切割质粒，使质粒出现一个缺口，露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因，使其产生相同的黏性末端（部分限制性内切酶可切割出平末端，拥有相同效果）。将切下的目的基因的片段插入质粒的切口处，首先碱基互补配对结合，两个黏性末端吻合在一起，碱基之间形成氢键，再加入适量DNA连接酶，催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键，从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来，形成一个重组DNA分子。如人的胰岛素基因就是通过这种方法与大肠杆菌中的质粒DNA分子结合，形成重组DNA分子（也叫重组质粒）的。3.将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞是实施袭卖基因工程的第三步。目的基因的片段与运载体在生物体外连接形成重组DNA分子后，下一步是将重组DNA分子引入受体细胞中进行扩增。基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌，枯草杆菌，土壤农杆菌，酵母菌和动植物细胞等。用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞，主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。例如，如果运载体是质粒，受体细胞是细菌，一般是将细菌用氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。目的基因导入受体细胞后，就可以随着受体细胞的繁殖而复制，由于细菌的繁殖速度非常快，在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。4.目的基因的检测和表达目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。以上步骤完成后，在全部的受体细胞中，真正能够摄入重组DNA分子的受体细胞是很少的。因此，必须通过一定的手段对受体细胞中是否导入了目的基因进行检测。检测的方法有很多种，例如，大肠杆菌......
基因工程技术包括哪些基本步骤
目的基因的提取、基因表达载体的构建、把目的基因导入受体细胞、目的基因的鉴定与检测

❻ 基因工程的四个步骤

基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
由于基因工程按照人们的意愿，进行严格的设计，所以在育种过程中能够定向改变生物的性状．
故答案为：目的基因的获取  基因表达载体的构建   将目的基因导入受体细胞    目的基因的检测与鉴定     定向

❼ 高二生物中的目的基因的检测与鉴定

目的基因的检测与鉴定分分子水平检测和个体水平鉴定。
个体水平鉴定简单说就是把导入了目的基因的生物体培养出来，看生物个体中是否能表达出你所需要的性状。
分子水平检测就相当麻烦了，它有三个步骤。
首先，要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。方法是采用DNA分子杂交技术，即将转基因生物的基因组DNA提取出来，同时，在外面（像基因文库中）取一段新的含有目的基因的DNA片段，用放射性同位素等作标记，以此来作为探针，将探针与基因组DNA杂交，来检测。（实际上就是DNA复制的情况，DNA复制时，一条双链的DNA分子解旋成了两条单链的DNA，而探针也是一条双链的DNA片段解旋成了两条单链的DNA片段，因为探针上也有目的基因，基因组的DNA上也有目的基因，在重新形成新的2条DNA，也就是复制时，碱基互补配对，则含目的基因的探针上的单链能与同样含目的基因的基因组DNA单链配对，形成一条新的DNA双链分子，一旦形成新的DNA分子后，放射性标记能在新的DNA分子中含目的基因处发出荧光，从而表明目的基因已导入。）
其次，就是大大你说的检测目的基因是否转录出了mRNA，方法和上面一样，但不同之处是，从转基因生物中提取出的是mRNA，同样，同时，在外面（像基因文库中）取一段新的含有目的基因的DNA片段，用放射性同位素等作标记，以此来作为探针，将探针与mRNA杂交，来检测。（这里实际上和DNA的转录翻译有点像，毕竟mRNA是单链的，实际上是探针DNA解旋成两条单链的DNA片段，就像转录一样，这时的mRNA会与单链的DNA碱基互补配对，显现出标记的同位素荧光，表明mRNA上有目的基因。）所以说，mRNA与目的基因杂交，是和DNA杂交，不是mRNA与目的基因的转录出的mRNA杂交。
最后要检验的就是看目的基因能否翻译成蛋白质，就不多说了。
不知道讲的清不清楚，语文表达有限，希望你能理解啊。

❽ 重组DNA技术包括哪四个步骤

重组DNA技术主要包括四个步骤：提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。

1、提取目的基因

获取目的基因主要有两条途径：一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因；另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。

2、目的基因与运载体结合

目的基因与运载体结合的过程实际上是不同来源的DNA重新组合的过程，是基因工程的核心。

3、将目的基因导入受体细胞

用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞，主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。目的基因导入受体细胞后，就可以随着受体细胞的繁殖而复制，由于细菌的繁殖速度非常快，在很短的时间内就能够获得大绝举量的目的基因。

4、目的基因的检测和表达

目的基明历因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程。

(8)目的基因检测与鉴定四步方法扩展阅读

重组DNA技术是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体激宏搜外操作程序，也称为分子克隆技术。因此，供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。

重组DNA技术使用的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶。常用的载体有质粒载体、噬菌体载体、Ti质粒、人工染色体。

❾ 目的基因的检测与鉴定

目的基因的检测枝消此是检测标记基因,而其鉴定是观测目的基猛迅因所表达出来的性状。
所谓检测,就是看目的基因是否已经成功导入受体细胞桥培,要看的是标记基因。导入细胞后,基因并不一定会遗传给后代并表达出来,所以要再鉴定目的基因的性状。注意!一定是先检测,后鉴定。因为受体细胞表达的不一定是整合到细胞核内的,即不一定是能传给下一代的,所以要先检测筛选掉没有标记基因的(剩下的都可以稳定遗传)再检测,选出能够表达的。
罗嗦了半天,不知楼主明白了没有。。。