ldh检测方法

㈠ LDH是用来检测什么是啊

LDH是乳酸脱氢酶 LDH属糖酵解酶，广泛存在于各种组织中，以心肌、骨骼肌、肾脏、肝脏中含量最丰富档伏，LDH测定常用于诊断心肌梗行者携塞，肝病和某些恶性肿瘤。

增高见于：心肌梗塞，心肌梗塞后9～20h开始上升，36～60h达到高峰，持续6～10天恢复正常(比AST、CK持续时间长)，因此可作为急性心肌梗塞后期的辅助诊断指标；肝脏疾病，如急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝癌、肝硬化、阻塞性黄疸等；血液病，如白血病、贫血、恶性淋巴瘤等；骨骼肌损伤、进行性肌萎缩、肺梗塞等；嫌握恶性肿瘤转移所致胸、腹水中乳酸脱氢酶活力往往升高。

㈡ 血乳酸的医学检查

（1）全血乳酸测定（分光光度法）：在NAD存在下，LDH催化乳酸脱氢，氧化成丙酮酸。加入硫酸肼使丙酮酸不断被转换消除，并促进反应完成。反应完成后生成的NADH与乳酸为等摩尔，在340nm波长下测定NADH的量，计算乳酸的含量。
（2）血浆及血清乳酸测定（比色法）：以氧化型辅酶Ⅰ（NAD）作氢受体，LDH催化L-乳酸脱氢，生成丙酮酸，NAD转变成还原型辅酶Ⅰ（NADH）。酚嗪二甲酯硫酸盐（PMS）将NADH的氢传递给氯化硝基四氮唑蓝（NBT），使其还原。在530nm波长的吸光度与乳酸含量呈线性关系。 （1）全血乳酸测定（分光光度法）：
①50g/L偏磷酸（MPA）：称取5.0g MPA，溶于蒸馏水中，并稀释到100ml，新鲜配制。
②30g/L偏磷酸：称取3.0g MPA，溶于蒸馏水中，并稀释到销耐100ml，新鲜配制。
③Tris-硫酸肼缓冲液，pH9.6（Tris 79mmol/L；硫酸肼400mmol/L）；取1mol/L氢氧化钠350ml，加入Tris 4.79g，硫酸肼26g，EDTA-Na2 0.93g，以1mol/L氢氧化钠调至pH 9.6，用蒸馏水稀释到500ml，4℃保存可稳定8天。
④27mmol/L NAD溶液：根据需要量称取NAD溶于蒸馏水中，4℃可稳定48h。
⑤LDH溶液：取LDH原液，用生理盐水稀释成1500U/ml（如用SigmaⅢ型LDH，该制品从牛心提制，每毫升含10mg蛋白，每毫克蛋白具有LDH活性400～600U，用盐水稀释成3mg/ml蛋白即可）。
⑥1mmol/L（9.08mg/dl）乳酸标准液：精确称取L-乳酸锂9.6mg（或DL-乳酸锂19.2mg），以少量蒸馏水溶解，加入25μl浓硫酸，用蒸馏水稀释到100ml，4℃保存可长期稳定。
（2）血浆及血清乳酸测定（比色法）：
①0.1mol/L Tris-HCl缓冲液（pH 9.0）：取Tris 12.12g，溶于约800ml蒸馏水中，加入TritonX-100 40ml，混匀，以1mol/L盐酸调节至pH9.0，蒸馏水稀释至1L。
②无乳酸蛋白液：取Sephadex G25，用蒸馏水充分溶胀后装柱。层析柱内径16mm，装柱高360mm。有蒸馏水反复流洗后，取20ml肝功能试验正常的混合血清上柱，用蒸馏水洗脱。待洗脱物开始出现混浊时收集，共收集20ml，加入少许氯化钠（约0.1g）及叠氮钠20mg，置冰箱保存。按本法测定乳酸（即无乳酸蛋白液代替标本进行测定），测定管与对照管吸光度之差应小于0.015。可按100ml上述缓冲液加无乳酸蛋白液5ml，混合后置冰箱保存。
③乳酸脱氢酶溶液：用全血法。
④5mmol/L乳酸标准液：溶解DL-乳酸锂96mg或L-乳酸锂48mg于蒸馏水中并稀裤谈释至100ml，4℃保存。LDH只催化L（+）-乳酸。
⑤呈色剂：溶解NBT82mg于20ml蒸馏水中，可稍加热助溶，不溶物需离心去除。再加入NAD200mg，最后中入PMS 5mg，混合后置棕色瓶中，4℃保存，至少可用6个月。 （1）全血乳酸测定（分光光度法亏纯春）①应在空腹及休息状态下抽血。不用止血带，不可用力握拳。如用止血带，应在穿刺后除去止血带2min后再抽血。最好用肝素化的注射器抽血，抽取后立即注入预先称量的含冰冷蛋白沉淀剂的试管中。如用血浆测定，每毫升血用10mg氟化钠及2mg草酸钾抗凝，立即冷却标本，并在15min内离心。
抽血前试管编号，称重（Wt）并记录。加入6ml MPA（50g/L），再称重（Wm）后放入冰浴中，每份标本最好作双管分析。抽血后，立即注入上述试管中，每管2ml。颠倒混合3次，不可产生气泡。待试管温度与室温平衡后，再称重（Wb）。静置至少15min后，离心沉淀（400r/min，15min）。上清液必须澄清。计算稀释因数D：
D=Wb－Wt/Wb－Wm
②偏磷酸在水溶液易中形成多聚体（HPO3），水化成正磷酸（HPO3+H2O→H3PO4）。正磷酸不沉淀蛋白质，偏磷酸溶液沉淀蛋白的能力在4℃时仅能维持大约1周。
③本法线性范围达5.6mmol/L（50mg/dl）。
④本法不用过氯酸作蛋白沉淀剂。
⑤一般乳酸锂未标明L-或DL-者，均为DL-型，L-型乳酸锂价格昂贵。
（2）血浆及血清乳酸测定（比色法）混匀后，用分光光度计在530nm波长，10mm光径比色杯，以蒸馏水调零读取各管吸光度。
①本法条件下，NBT还原生成物在反应液中十分稳定，无混浊和沉淀，吸光度久置不变。
②肝素抗凝血浆、血库ACD保养液抗凝血浆、脑脊液、尿液、胃液等均可用本法测定。
③加入蛋白质对反应及生成物溶液的稳定是必要的。同时加入蛋白质及表面活性剂，可提高灵敏度及稳定性。Brij-35和TritonX-100有同样效果。人血清白蛋白中含乳酸浓度较高，不适用。因人血清白蛋白的显色强度平均较牛血清白蛋白高1.06倍，如用牛血清白蛋白，且仅加于标准管中时，标准管吸光度须乘此数。
④无乳酸蛋白液可与缓冲液预先混合后再加入1ml，代替表2中分别加入。
⑤本法线性范围达8.0mmol/L（73mg/dl）。
⑥吸光度随孵育时间延长而增加，必须准确10min。加入0.1mol/L盐酸后吸光度不变。
⑦抗凝剂用肝素-氟化钠较好（1mg肝素，6mg氟化钠可抗凝5ml血）。血液抽出后，血标本管置冰浴中送检，尽快分离血浆，放冰室保存待测。草酸钾对LDH有一定抑制作用，抽血较少而草酸钾相对多时尤为明显。 （1）全血乳酸测定（分光光度法）：全血乳酸0.5～1.7mmol/L（5～15mg/dl）。尿液乳酸为5.5～22mmol/24h。
（2）血浆及血清乳酸测定（比色法）：小于2.4mmol/L（22.0mg/dl，呈正偏态分布，95%百分位数上限）。 组织严重缺氧可导致三羧酸循环中丙酮酸需氧氧化的障碍，丙酮酸还原成乳酸的酵解作用增强，血中乳酸与丙酮酸比值增高及乳酸增加，甚至高达25mmol/L。这种极值的出现标志着细胞氧化过程的恶化，并与显着的呼吸增强、虚弱、疲劳、恍惚及最后昏迷相联系。即使酸中毒及低氧血症已得到处理，此种高乳酸血症常为不可逆的。见于休克的不可逆期、无酮中毒的糖尿病昏迷和各种疾病的终末期。
在休克、心失代偿、血液病和肺功能不全时，常见的低氧血症同时有高乳酸血症，在低氧血症及原发条件处理后常是可逆的。在肝脏灌流量降低的病例，乳酸由肝的移除显着降低，会出现乳酸酸中毒。

㈢ ldh检测为什么要测细胞内活性

国外检败裤孝测体外细胞毒性比较常用的方法有MTT比色法，XTT比色法，利用线粒体内部酶的活性，将特定的四唑盐类进行转化，然后通过酶标仪进行检测
LDH法，通过检测细胞培察稿养上纯型清中LDH的酶活性，来检测细胞毒性
其他还有细胞增殖度法，检测碱性磷酸酶活性等。

㈣ LDH在医学名词里是什么意思

LDH在医学名词里是乳酸脱氢酶。

乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）几乎存在于所有组织中，以心、骨骼肌和稿迹肾脏最丰富，其次为肝、脾、胰腺、脑、肺脏等。

采用电泳法可将人组织中的乳酸脱氢酶同工酶分离出5种同工酶区带，根据其电泳迁移率的快慢，依次为LDH-2、LDH-1、LDH-3、LDH-4、LDH-5。乳酸脱氢酶同工酶分布存在明显的特异性，可用于心肌疾病的诊断。

(4)ldh检测方法扩展阅读：

乳酸脱氢酶的测定方法：

1、乳酸脱氢酶的测定

乳酸脱带敬渗氢酶催化乳酸氧化为丙酮酸为可逆反应，正反两个方向的反应均能测蠢脊定。但逆反应测得的乳酸脱氢酶活性比正反应高得多，所以采用不同的测定方法得出的结果也会不同。

2、乳酸脱氢酶同工酶测定

乳酸脱氢酶同工酶的测定方法有电泳法、离子交换柱层析法、免疫法、抑制法和酶切法。

㈤ 尿素的测定方法

尿素的测定方法有色谱法、分光光度法、电化学法和仪器分析法。

1、色谱法：色谱法是目前尿素测定的常用方法。将尿素水解后释放出来的NH3，经过适当的前处理后，用气相色谱仪进行测定。

2、分光光度法：该方法通过利用尿素和溴酸反应获得反应产物的吸收值来测量尿素的含量。

3、电化学法：利用尿素的水解即可以产生氨气的性质，将含尿素的拍岩样品进行加温水解，所得的NH3通过导电池中传导到电极，利用所测量的电流或电势来计算样品中尿素的含量。

4、仪器分析法：目前有一些仪器，如自动生化世贺宽仪，能够通过测定乳酸脱氢酶（LDH）催化尿素水解，生成氨气并计算尿素的含量。

测量尿素的注意事项

需要注意的是，不同测定方法具有自身的优点和适用范围，应根据具体情况来选择合适的测定方法。另外，在进行尿素的测定时，需要根据尿液或者血液样品进行前处理，避免干扰物质对测定结果的影响。

㈥ 浆膜腔积液检验的LDH测定

1.LDH（乳酸脱氢酶）检测主要用于渗出液和漏出液的鉴别。当浆膜腔积液中LDH与血清LDH之比值≥0.6时，多为渗出液；反之则为漏出液。
2.当胸水或腹水中LDH与血清LDH比值>1时，对胸、腹膜恶性肿瘤或转移癌的诊断有一定意义。