球菌的鉴别方法

1. 乳酸菌杆菌和球菌如何鉴定

革兰氏染色后镜检，可判断一些长杆菌与球菌。
但很有些乳酸杆菌较短，容易误认为是乳酸球菌。根据我经验，短杆菌虽然像圆，但球菌其实更小更圆。还有，某些2联、4联球菌，若看得不仔细，也容易判断成杆菌。
可用法国梅里埃公司的API 50试剂盒做一个糖发酵的生理生化鉴定，可判断一部分，准确率还算不错了。
另，还是需要结合其他的生理生化特征来鉴定，然后查细菌手册。
若能做个序列分析，那就最好了。
实际上嘛，若不想纠缠与属、种、亚种的区分问题，只想区分乳酸杆菌与乳酸球菌的话，就是个经验活，你镜检多了，自然就能更容易判断些。

2. 细菌鉴定办法有哪些, 常见细菌的鉴定办法就可以~

一 淀粉水解试验
（一）实验原理
细菌对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用,必须靠产生的胞外酶,如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶将大分子物质分解.胞外酶能分泌扩散到细胞外,将物质分解成小单位如糖、氨基酸、甘油与脂肪酸.这些小单位的物质能被细菌吸收和利用.水解过程可通过底物的变化来证明,如细菌水解淀粉的区域,用碘测定不再产生蓝色；水解明胶可观察到明胶被液化；脂肪水解后产生脂肪酸改变培养基的pH,其中的中性红指示剂使培养基从淡红色变为深红色.
（二）实验方法
将淀粉培养基溶化后,冷至45℃左右,以无菌操作制成平板.
取18-24h的纯培养物点于平板上,每皿可点种3-5个菌株,适温培养2-4d,形成菌落后,在平板上滴加卢戈氏碘液,以铺满菌落周围为度,平板成蓝色.如果菌落周围有无色透明圈出现,说明淀粉已经被水解,实验为阳性,否则为阴性.透明圈的大小一般说明水解淀粉的能力.
（三）实验试剂的配制
肉汤蛋白胨琼脂成分：蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2.
淀粉培养基制法：在肉汤蛋白胨琼脂中添加0.2％的可溶性淀粉,校正pH值至7.6,分装三角瓶,121℃ 20min灭菌备用.
卢戈氏(Lugol)碘液：碘片1g,碘化钾2g,蒸馏水300ml,先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,混匀,定容.
二 糖发酵试验
(一)实验原理
单糖发酵是将葡萄糖,乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内,使其最终浓度为0.75-1％.并加入一定量酚红指示剂及小倒管,制成单糖发酵管,接种细菌经37℃培养18-24小时,若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄,若能分解甲酸有CO2和H2等气体形成,小倒管内则聚集有气泡；不分解,则指示剂不变色.
(二)实验材料
1．菌种：大肠杆菌,伤寒杆菌18-24小时琼脂斜面培养物.
2．培养基：葡萄糖发酵管,乳糖发酵管等.
(三)实验方法
1．将伤寒杆菌,大肠杆菌按照液体接种方法分别接种于葡萄糖及乳糖发酵管内.
2．置37℃孵箱培养18-24小时.
3．观察结果：由于一些细菌能分解某种糖类产酸,所以培养基中pH下降到7.0以下,在酚红指示剂的显示下,培养基颜色由红变黄.产酸者以“+”表示,如果同时产生气体,则培养基中小倒管内有气泡出现,此乃产酸又产气,以“♁”表示,不分解,则指示剂不变色,用“-”表示.
(四)实验结果
伤寒杆菌 大肠杆菌
葡萄糖 + ♁
乳 糖 - ♁
(五)实验试剂的配制
1.单糖发酵管的制备： 成分：蛋白胨水培养基 100ml ,0.2%酚红 1ml ,所需糖（葡萄糖或乳糖）0.75-1g
制法：
（1）将上述成分溶化,混匀分装于内含有倒置小玻璃管的小试管中,每管约2ml,加塞.
（2）小倒管排气,灭菌（8-10磅,20-30分钟）,贮存备用.
用途：供单糖发酵试验用.
2.0.2%酚红配制法
酚红（phenol red）0.2g ,0.lmol/LNaOH 8ml ,蒸馏水 92ml
将酚红入研钵徐徐加入0.lmol/LNaOH研磨,再补足蒸馏水即成.若需长时间保存,可高压灭菌后贮存备用.
三 甲基红（M.R）试验
(一)实验原理
某些细菌如大肠杆菌等分解葡萄糖产生丙酮酸,继而分解为甲酸、乙酸、乳酸等,使培养基pH值降至4.5以下,加入甲基红指示剂呈红色,此为阳性反应；若产酸量少或产生的酸进一步转化为醇、醛、气体和水等,则培养基的酸碱度仍在pH 6.2以上,加入甲基红指示剂呈现黄色,为阴性反应.
(二)实验材料
1. 菌种：大肠杆菌,产气杆菌18-24h琼脂斜面培养物.
2. 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基.
3. 试剂：甲基红试剂.
(三)实验方法
1. 分别将大肠杆菌,产气杆菌接种于两支葡萄糖蛋白胨水培养基中.
2. 置37℃培养2-3天取出,分别滴加甲基红试剂2-3滴,混匀,观察结果.
(四)实验结果
大肠杆菌：+,产气杆菌：-.
(五)实验试剂的配制
1．甲基红试剂的配制
甲基红 0.04g, 95%酒精 60ml , 蒸馏水 40ml .
先使甲基红溶解于酒精中,再加入蒸馏水,混合,摇匀即成.
2.葡萄糖蛋白胨水培养物
成分：蛋白胨5g 葡萄糖5g
制法：
（1）将上述成分溶解于蒸馏水中.
（2）调节pH至7.6,用滤纸过滤除渣.
（3）分装中试管,每管约3-4ml,灭菌后备用.
用途：供甲基红及V-P试验用.
四 产吲哚（indole）试验
(一)实验原理
某些细菌如大肠杆菌,变形杆菌等具有色氨酸酶,能分解蛋白胨水培养基中的色氨酸,产生靛基质（无色吲哚）,再与欧立希试剂（对二甲基氨基苯甲醛）反应,形成红色化合物—玫瑰吲哚,即为阳性反应.
(二)实验材料
1. 菌种：大肠杆菌,伤寒杆菌18-24小时琼脂斜面培养物.
2. 培养基：蛋白胨水培养基.
3. 试剂,欧立希（Ehrlich）试剂（对二甲基氨基苯甲醛）
(三)实验方法
1. 分别将大肠杆菌,伤寒杆菌接种于两支蛋白胨水培养基中.
2. 置37℃培养2-3天后,每管沿管壁各加欧立希试剂0.5-1ml于培养液面上,待1-2分钟后观察结果：在交界面出现玫瑰红色环即为吲哚试验阳性,无红色环即为阴性.
(四)实验结果
大肠杆菌：+ ；伤寒杆菌：- .
(五)实验试剂的配制
1.蛋白胨水培养基的制备
成分：蛋白胨10g 氯化钠5g 蒸馏水1000ml
制法：
（1）先用少量蒸馏水将蛋白胨和氯化钠相混合溶解,再加足蒸馏水量.
（2）调节pH至7.6、用滤纸过滤.
（3）分装中试管,每管约3-4ml,加塞灭菌后备用.
2. 欧立希（Ehrlich）试剂的配制
对位二甲基氨基苯甲醛 4g
95%酒精 380ml
浓硫酸或浓盐酸80ml
三种成分混合即成,瓶口要严密,以免挥发.
五 硝酸盐还原试验
(一)硝酸盐还原试验原理：
硝酸盐还原反应包括两个过程：一是在合成过程中,硝酸盐还原为亚硝酸盐和氨,再由氨转化为氨基酸和细胞内其他含氮化合物；二是在分解代谢过程中,硝酸盐或亚硝酸盐代替氧作为呼吸酶系统中的终末受氢体.能使硝酸盐还原的细菌从硝酸盐中获得氧而形成亚硝酸盐和其他还原性产物.但硝酸盐还原的过程因细菌不同而异,有的细菌仅使硝酸盐还原为亚硝酸盐,如大肠埃希菌；有的细菌则可使其还原为亚硝酸盐和离子态的铵；有的细菌能使硝酸盐或亚硝酸盐还原为氮,如假单胞菌等.硝酸盐还原试验系测定还原过程中所产生的亚硝酸盐.
(二)培养基：
硝酸盐培养基.
(三)试剂：
甲液（对氨基苯磺酸0.8g+5mol/L醋酸100ml）；乙液（α-奈胺0.5g + 5mol/L醋酸100ml）.
(四)方法：
被检菌接种于硝酸盐培养基中,于35℃培养1～4d.将甲、乙液等量混合后（约0.1ml）加入培养基内,立即观察结果.
(五)结果：
出现红色为阳性.若加入试剂后无颜色反应,可能是：①硝酸盐没有被还原,试验阴性；②硝酸盐被还原为氨和氮等其他产物而导致假阴性结果,这时应在试管内加入少许锌粉,如出现红色则表明试验确实为阴性.若仍不产生红色,表示试验为假阴性.
若要检查是否有氮气产生,可在培养基管内加一小倒管,如有气泡产生,表示有氮气生成.
(六)应用：
本试验在细菌鉴定中广泛应用.肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐；铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌等假单胞菌可产生氮气；有些厌氧菌如韦荣球菌等试验也为阳性.
(七)实验试剂的配制
硝酸盐液体培养基
蛋白胨5.0g,KNO3 0.2g, 蒸馏水1000 mL,pH7.4,每管分装4-5mL,121℃灭菌15-20min.
六 产氨实验（尿素分解实验）
(一)实验原理
某些细菌如变形杆菌,具有尿素分解酶,能分解尿素而产生氨,氨溶于水变成氢氧化铵,使培养基变碱而呈红色即为阳性.
(二) 实验材料
1. 菌种：变形杆菌,伤寒杆菌18-24小时琼脂斜面培养物.
2. 培养基：尿素培养基.
(三) 实验方法
1. 分别以斜面接种法将变形杆菌,伤寒杆菌接种于两支尿素斜面培养基上.
2. 置37℃培养18-24小时.
3. 取出观察结果,培养基变为红色,即尿素分解试验阳性,若不变色,即为尿素分解试验阴性.
(四) 实验结果
变形杆菌：+ ；伤寒杆菌：- .
(五) 实验试剂的配制
1.尿素培养基的制备
成分： 蛋白胨1g 、氯化钠5g、葡萄糖1g、蒸馏水900ml、琼脂15-20g 、0.1%酚红 12ml 、20%尿素水溶液（无菌）100ml .
制法：（1）除尿素、琼脂和酚红外,其余成分溶于水中,加热溶化,矫正pH至6.8-6.9.
（2）加入琼脂和酚红,115℃磅灭菌10min.
（3）冷却至60℃后加入无菌尿素溶液,摇匀.
（4）分装中试管（无菌）,每管3-4ml,置成斜面备用.
说明：（1）尿素不耐热,也不能久存,只能用滤器除菌.
2.无菌尿素溶液制备：称取尿素20g,混合于100ml蒸馏水中,充分摇匀,用G6滤菌器过滤除菌,以达到无菌的目的.
七 柠檬酸盐利用试验
(一)实验原理
本试验用于检测细菌利用柠檬酸的能力.细菌利用柠檬酸盐的能力不同,如各种肠细菌可利用柠檬酸为碳源,而大肠埃希氏菌则不利用柠檬酸盐.因此,能否利用柠檬酸盐是一项鉴别性特征.培养基中含有柠檬酸钠时,如将柠檬酸分解为CO2,则培养基中由于有游离钠离子呈碱性,使培养基中酚红指示剂（pH6.8-8.4,黄→红）由淡粉红色变为玫瑰红色以识别之.
(二)材料
柠檬酸钠 2g、K2HPO4 1g、NH3H2PO4 1g、NaCl 5g、MgSO4 0.2g、琼脂 1.5 2g、1%溴麝香草酚蓝(酒精溶液)或0.04%苯酚红 10ml、水 1000ml
将上述各成分加热溶解后,调PH6.8,然后加入酚红指示剂,摇匀,用脱脂棉过滤.制成后为黄绿色,分装试管.121℃灭菌20min后制成斜面.
(三) 实验内容
1.将试验菌在斜面上划线接种,适温培养3-5天.
2.若该菌能利用柠檬酸盐,则可在此斜面上生长并将培养基由原来的淡粉红色变为玫瑰红色,此为阳性；颜色不变者为阴性.
八 油脂水解试验
(一)原理
某些细菌能够分泌脂肪酶（胞外酶）,能将培养基中的脂肪水解为甘油和脂肪酸.所产生的脂肪酸,可通过预先加入油脂培养基中的中性红加以指示[指示范围pH6.8（红）～pH8.0（黄）].当细菌分解脂肪产生脂肪酸时,培养基中出现红色斑点.
(二)实验内容
1.将装有油脂培养基的锥形瓶置于沸水浴中融化,取出并充分振荡（使油脂均匀分布）,再倾入培养皿中,待凝固后制成平板.
2.翻转平板使底皿背面向上,用记号笔在其背面玻璃上划成两半.一半用于接种金黄色葡萄球菌作为阳性对照菌,另一半用于接种实验菌大肠杆菌或产气肠杆菌.接种时用接种环取少量菌在平板两边各划线接种.
3.将接种完的平板倒置于37℃恒温箱中,培养24h.
4.观察结果时,注意观察平板上长菌的地方,如出现红色斑点,即说明脂肪已被水解,此为阳性反应.
（三）培养基配制
油脂培养基：蛋白胨10g,牛肉膏5g,氯化钠5g,香油或花生油10g,中性红（1.6%水溶液）约0.1ml,琼脂15-20g,蒸馏水1000mL,pH7.2,121℃灭菌20min.
九 接触酶试验
(一)实验原理
本试验用于检测细菌是否具有接触酶活性.接触酶又称为过氧化氢酶,是一种以正铁血红素作为辅基的酶,能将过氧化氢分解为水和氧.一般好氧细菌与兼性厌氧细菌（除某些链球菌、乳酸杆菌等外）都能产生接触酶,而厌氧细菌不产生接触酶,这是用以区别好氧和厌氧菌的方法之一.
(二)材料
牛肉膏、蛋白胨琼脂培养基,3%过氧化氢.
牛肉膏、蛋白胨琼脂培养基：牛肉膏 0.3g、蛋白胨 1g、氯化钠 0.5g、琼脂 2g、自来水 100mL、pH 7.0～7.2 、灭菌.
(三)实验内容
1.接种试验菌,适温下培养18-24小时.
2.将3%的过氧化氢滴于斜面菌苔上（或涂有菌苔的载玻片上）,静置1-3分钟后,如有气泡产生即为阳性.不产生气泡者为阴性.
(四) 应用
革兰阳性球菌中,葡萄球菌和微球菌均产生过氧化氢酶,而链球菌属为阴性,故此试验常用于革兰阳性球菌的初步分群.
十 革兰氏染色
(一)实验原理
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法.通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色.
(二)实验方法
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是：
1.涂片固定.
2.草酸铵结晶紫染1分钟.
3.自来水冲洗.
4.加碘液覆盖涂面染约1分钟.
5.水洗,用吸水纸吸去水分.
6.加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分.
7.蕃红梁色液（稀）染2分钟后,自来水冲洗.干燥,镜检.
[染色的结果]：革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色.
(三)应用
其重要的临床意义在于：1.鉴别细菌 2.选择药物 3.与致病性有关：：革兰氏阳性菌能产生外毒素,革兰氏阴性菌能产生内毒素,两者的致病作用不同.

3. 葡萄球菌的检查有哪些方式

（1）血浆凝固酶试验：血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的，与其致病力有关的一种侵袭性酶，其作用是使血浆中的纤维蛋白在菌体表面沉积和凝固以阻碍吞噬细胞的吞噬。血浆凝固酶分为结合型和游离型。前者结合在细菌的细胞壁上，能直接作用于血浆中的纤维蛋白原，使之转化为纤维蛋白，环绕菌体而形成凝块。而游离型血浆凝固酶则在产生后被分泌到菌体外，不能直接作用于纤维蛋白原，但可以激活血浆凝血酶原，使之转化成凝血酶，后者再作用于纤维蛋白原使其转化为纤维蛋白扰漏。具体的测量方法也因此分为玻片法和试管法两种。
玻片法将待试菌落乳化于玻片上的盐水中，经10~20S证实无自凝后，用接种环取人或兔血浆一环，与乳化菌液混合，出现凝集者为阳性，另设生理盐水为阴性对照。
试管法吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀，置37℃培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。

（2）耐热核酸酶试验：将24小时肉汤滑仔培养物沸水缓让烂浴处理15min，用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板，35℃培养24小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。

（3）甘露醇发酵实验金黄色葡萄球菌可发酵甘露醇。

（4）Staphaurex 胶乳凝集实验是鉴定金黄色葡萄球菌的一种快速、简便的商品化直接凝集试验。其基本原理是在纸片上滴加包被有纤维蛋白原和IgG抗体的聚苯乙烯胶乳，然后用接种环挑取待鉴定菌株的新鲜培养物加入混匀，若出现凝集块现象即为阳性。

5. 生化鉴定如上述，注意与其他凝固酶阳性的葡萄球菌的鉴别要点：PYR（吡咯烷酮-β-萘基酰胺试验阴性；VP试验阳性；鸟氨酸脱羧酶试验阴性。

6. 免疫学方法用酶联免疫吸附试验和对流免疫电泳方法可检测金葡菌的磷壁酸抗体。

7. 分子生物学方法包括PFGE脉冲场凝胶电泳以及酶切图谱分析等。

4. 金黄色葡萄球菌鉴定方法

形态染色、菌落特征。根据查询金黄色葡萄球菌鉴定方法得知弊仿，金黄色葡萄球菌鉴定方法主要有：形态染色、菌落特征、鉴定试验等鉴定。金黄色葡萄球菌是一种常见的病做卜链原体，可引起皮肤软组织感染纯孙。

5. 如何鉴别致病性葡萄球菌与非致病性葡萄球菌

致病性与非致病性，从染色上很难区分，只能通过血浆凝固实验才能区分，致病性的能够凝固血浆。

致病性金葡菌首先要凝固酶阳性，其次可以尝试利用血平板做皮团实验，一般有致病性的金葡菌为完全溶血，也称为β溶血。

葡萄球菌分为致病性葡萄球菌与非致病的表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌。很多细菌具有碱基序列，即DNA序列。

金黄色葡萄球菌的核酸酶具有耐热性，经100℃水浴15min不被破坏。把 色素、溶血、血浆凝固酶、耐热核酸酶、甘露醇厌氧产酸等作为鉴别三种菌的依据，其中血浆凝固酶、耐热核酸酶是最重要的鉴定指标。

(5)球菌的鉴别方法扩展阅读：

葡萄球菌是最常见的化脓性球菌，是医院交叉感染的重要来源，菌体直径约0.8μm，小球形，但在液体培养基的幼期培养中，常常分散，细菌细胞单独存在。

凝固酶有两种：

一种是分泌至菌体外的，称为游离凝固酶为蛋白质。作用类似凝血酶原物质，可被人或兔血浆中的协同因子激活变成凝血酶样物质后，使液态的纤维蛋白原变成固态的纤维蛋白，从而使血浆凝固。

另一种凝固酶结合于菌体表面并不释放，称为结合凝固酶或凝聚因子，在该菌株的表面起纤维蛋白原的特异受体作用，细菌混悬于人或兔血浆中时，纤维蛋白原与菌体受体交联而困液使细菌凝聚。游汪握物离凝固酶采用试管法检测，结合凝固酶则以玻片法测试。

6. 如何鉴别肺炎球菌和甲型链球菌

甲型链球菌不分解菊糖，不被胆汁溶解，optochin试验耐药，而肺炎球菌分解菊糖，被胆汁溶解，对optochin试验敏感。

一、肺炎链球菌：

在血琼脂平板上可形成灰色扁平、中心凹陷，直径为0.5~1mm的菌落，周围有草绿色溶血圈。

胆汁溶解试闭余验阳性、Optochin敏感试验阳性，多数菌株分解菊糖。

二、甲型溶血性链球菌：

菌落呈灰色针尖状，菌落周围有2~4mm透明溶血环。

触酶试验阴性，分解葡萄糖产酸不产气，对Optochin耐药，不被胆汁溶解，不分解菊糖。

(6)球菌的鉴别方法扩展阅读：

葡萄球菌和链球菌的鉴别用触酶（过氧化氢酶）试验即可，前者阳性，后者阴性。

甲链和肺链生物鉴别试验有optochin敏感试验、胆汁空唯溶菌试验和菊糖分解实验，后者全是阳性。

在化脓性球菌中，肺炎链球菌的致病力仅次于金黄色葡萄球菌。不同的是，到目前为止，肺炎链球菌极少对青霉素类抗生素产生耐药性。肺炎球菌主要的致病物质是肺炎球菌溶血素及荚膜。荚膜具有抗原性，是肺炎链球菌分型的依据。此菌可引起大叶性肺炎、脑膜炎、支气管炎等疾病。

7. 鉴别葡萄球菌有无致病性的标志

血浆凝固酶。
鉴别致病性葡萄球菌与颤信非致病性葡萄球菌的方法包括血浆凝固酶试验、甘露醇发酵试验、血琼脂平板培养陪握等。
致病性葡萄球菌与非致病性葡萄球菌的方法包括血浆凝固酶试验、甘露醇发酵试验、血琼脂平板培养等。如果血浆凝固酶试验阳性、甘露醇发酵试验有气泡产生、血琼脂平板芦洞庆发现菌落周围可见完全透明溶血圈，则表示属于致病性葡萄球菌。

8. 细菌要怎样识别

单个细胞是无色透明的，为了便于鉴别，需要给它们染上颜色。1884年丹麦科学家革兰姆创造了一种复染法，就是先用结晶紫液加碘液染色，再用酒精脱色，然后用稀复红液染色。

经过这样的处理，可以把细菌分成两大类，凡能染成紫色的，叫革兰氏阳性菌；凡被染成红色的，叫革兰氏阴性菌。这两类细菌在生活习性和细胞组成上有很大差别，医生常依据革兰氏染色法，选用药物，诊治疾病。为纪念革兰姆，复染法又称革兰氏染色法。

细菌家族的成员，如果固定在一个地方生长繁殖，就形成了用肉眼能看见的小群体，叫菌落。菌落带有各种绚丽的色彩，如绿脓杆菌的菌落是绿色的，葡萄球菌的菌落是金黄色的。

细菌菌落的形状、大小、厚薄和颜色等特点，是鉴别各种菌种的依据之一。弗莱明就是通过观察到金黄色的葡萄球菌落减少或消失，从而发现“吃”掉葡萄球菌的青霉素，划时代地揭开了抗生素的秘密。

9. 球菌（医学微生物学）

同学们应重点掌握：1．葡萄球菌属 2．链球菌属 3．肺炎链球菌 4．脑膜炎奈瑟菌 5．淋病奈瑟菌
病原性球菌主要引起化脓性炎症，又称为化脓性球菌。主要包括葡萄球菌属、链球菌属和奈瑟球菌属。
1．葡萄球菌属
（1）形态、染色和分类
为革兰染色阳性球菌，无鞭毛，无芽胞，不形成荚膜。根据色素及生化反应等不同，葡萄球菌可分为金黄色葡萄球菌(金葡菌)、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌三种。金葡菌为血浆凝固酶阳性菌，表皮、腐生葡萄球菌为血浆凝固酶阴性菌，其中金葡菌多为致病菌。
（2）致病物质的种类
①血浆凝固酶：以能否产生此酶作为鉴定菌株致病性的指标。型洞雀
②葡萄球菌溶血素：能破坏多种细胞，故又称为溶细胞毒素。
③杀白细胞素：可损伤中性粒细胞和巨噬细胞。
④肠毒素：直接或间接刺激呕吐中枢，引起以呕吐为主的食物中毒。
⑤表皮溶解毒素：裂解表皮组织的棘状颗粒层，使表皮与真皮脱离。
⑥毒性休克综合征毒素(TSST-1)：可抑制内毒素脱毒，使毛细血管通透卜早性增加，引起低血压性休克。
⑦葡萄球菌表面蛋白A(SPA)：可与IgG抗体的Fc段非特异性结合，竞争性抑制吞噬细胞对细菌的吞噬作用。
（3）所致疾病
①化脓性炎症：伤口化脓性感染、中耳炎、肺炎、脓胸、脑膜炎、心内膜炎等。
②毒素性疾病：食物中毒、烫伤样皮肤综合征、中毒性休克综合征。
③葡萄球菌性肠炎(假膜性肠炎)：由于长期使用广谱抗生素引起的一种菌群失调症。
（4）致病性葡萄球菌的鉴别要点：初步诊断应符合以下特征：
①镜检符合葡萄球菌的形态学特征；②菌落色素为金黄色，并有透明溶血环；
③甘露醇发酵阳性；④血浆凝固酶阳性；⑤耐热核酸酶检测阳性。在专业实验室进行肠毒素的鉴定。
2．链球菌属
（1）形态、染色和分类
革兰染色阳性，无芽胞，无鞭毛，幼龄菌可有透明质酸形成的荚膜。根据溶血现象不同可分为甲型溶血性链球菌(称α溶血)，乙型溶血性链球菌(称β溶血)和丙型溶血性链球菌(菌落周围无溶血环)三大类。根据多糖抗原的不同，将乙型溶血性链球菌分为20个群(A~H，K~V)。对人类致病的90%属于A群。
（2）致病物质的种类
①脂磷壁酸(LTA)。②M蛋白，具有抗吞噬作用。③侵袭性酶，包括透明质酸酶、链激酶(SK)、DNA酶(链道酶，SD)均可促进细菌在组织间扩散。
④链球菌溶血素，包括对氧敏感的链球菌溶血素O(SLO)和对氧稳定的链球菌溶血素S(SLS)。
⑤致热外毒素，又称红疹毒素，是人类猩红热的主要毒性物质。
（3）所致疾病
①A群链球菌所致疾病有化脓性感染(淋巴管炎、扁桃体化脓、中耳炎等)，变态反应性疾病(风湿热、急性肾小球肾炎)及中毒性疾病(猩红热)。②甲型溶血性链球菌可引起感染性心内膜炎。
（4）链球菌溶血素和临床检验的关系
链球菌溶血素O(SLO)抗原性强，风湿热尤其是活动期病例血清SLO抗体升高更显着，≥l：400。临床上常应用测定SLO抗体含量作为风湿热活动性的辅助诊断。
3．肺炎链球菌
（1）形态和染色：革兰染色阳性，无鞭毛，无芽胞，有些毒株形成荚膜，在血琼脂平皿上形成α-溶血环。此菌可发酵菊糖，故胆汁溶菌试验及菊糖发酵试验可鉴别甲型溶血性链球菌及肺炎链球菌。
（2）主要致病物质与所致疾病
主要致病物质有：①肺炎球菌溶血素；②荚膜(主要致病因素，具有抗吞噬作用)；③紫癜形成因子，使试验动物产生紫斑及皮肤出血。所致疾病为大叶性肺炎。
4．脑膜炎奈瑟菌
（1）生物学性状：革兰染色阴性，无鞭毛，无颤握芽胞，大多有荚膜和菌毛。营养要求较高，常用巧克力培养基培养，初次分离培养需提供5%~10%二氧化碳气体。抵抗力弱。
（2）主要致病物质和所致疾病
致病物质有菌毛(吸附易感细胞)，荚膜(具有抗吞噬作用)，内毒素(引起发热反应及低血压休克)。所致疾病为流行性脑脊髓膜炎，简称流脑。
5．淋病奈瑟菌
（1）形态染色：革兰染色呈阴性，咖啡豆状成双排列，无鞭毛，无芽胞，大多有荚膜和菌毛。
（2）致病物质及所致疾病
①菌毛；②淋病奈瑟菌可产生大量IgA1蛋白酶，破坏粘膜表面的特异IgA1，从而使淋病奈瑟菌大量增殖。淋病奈瑟菌是人类惟一宿主，经性接触传播，引起泌尿生殖系统感染。
（3）防治原则：取缔娼妓，加强性病知识宣传教育。治疗首选青霉素，对新生儿用1%硝酸银滴眼，以预防淋病性脓漏眼。
例题：肺炎链球菌的主要致病因素是：
A C反应蛋白 B 自溶酶 C 荚膜 D 外毒素 E 内毒素
答案：C
注：肺炎链球菌荚膜是其主要的致病因素，它具有抗吞噬功能。