维生素d3检测方法

㈠ vd3是什么

VD3是维生素D类，是类固醇衍生物，目前认为它也是一种类类固醇激素。

维生素D是一种脂溶性维生素，陪辩有五种化合物，对健康关系较密切的是维生素D2和维生素D3。它们有以下三点特性：它存在于部分天然食物中；人体皮下储存有从胆固醇生成的7-脱氢胆固醇，受紫外线的照射后，可转变为维生素D3。

(1)维生素d3检测方法扩展阅读：

维生素D（vitamin D ）为固醇类衍生物，具芦嫌缺抗佝偻病作用，又称抗佝偻病维生素。目前认为维生素D也是一种类固醇激素，维者亏生素D家族成员中最重要的成员是VD2（麦角钙化醇）和VD3（胆钙化醇)。维生素D均为不同的维生素D原经紫外照射后的衍生物。植物不含维生素D，但维生素D原在动、植物体内都存在。

维生素d（Vd）是环戊烷多氢菲类化合物，可由维生素d原（provitamind）经紫外线270~300nm激活形成。动物皮下7-脱氢胆固醇，酵母细胞中的麦角固醇都是维生素d原，经紫外线激活分别转化为维生素d3及维生素d2量少，但人工照射者多为此型。

维生素d的最大吸收峰为265nm，比较稳定，溶解于有机溶媒中，光与酸促进异构作用，应储存在氮气、无光与无酸的冷环境中，油溶液加抗氧化剂后稳定，水溶液由于有溶解的氧不稳定。双键系统还原也可损失其生物效用。

㈡ 想要补充维生素D3,想请问医院可以做这方面测试吗

你好,想要补充维生素D3可以去药店拿药吃的,不是处方药。
医院也可以测试你是否缺碧宴乏维生宏改素D3的,但是要去三甲医院检测。维生素D3滴剂悔绝银一般每粒含400单位D3.以上是对想要补充维生素D3,想请问医院可以做这方面测试吗这个问题的建议,希望对您有帮助,祝您健康!

㈢ 检查微量元素都查些什么，包括维生素d3吗

病情分析：
您好，微量元素检查不包括维生素，检宏咐皮查维生素D3需要血清蔽差25-羟维生素D3测定
指导意见：
微量元素检查项目主要是锌、钙简则、镁、铁、铜、钾、钠、血清磷、汞、硒等。

㈣ 维生素d检查之前吃饭喝水吗

维生素d检查之前可以吃饭喝水，对检查结果没影响，但是不能用食用维生素D3的维生素片等，检查时要求应放松心情，配合医生做好检查。
维生素D(vitamin D)是类固醇的衍生物，分为迅此竖维生素D2和维生素D3。检测维生素D主要通过以下方法测定：
1、血清25-羟维生素D3测定：25-羟维生素D3是维生素D3的主要代谢产物，测定其具有早期诊断的价值。
2、血亩大液生化检查：其改变比X线影像显示的骨扒御骼改变早。

㈤ 奶粉中含多少d3怎么看

40微克。维生素纯升歼D2只存在于植物体内，维生素D3则是动物体内才有，所以补充剂中一般添加的是维生素D3。维生素D2和D3都可以通过阳光中紫外线的做冲照射合成。根据《中国居民膳食营养素参考摄入量（2013年版）》的数据，0~0.5岁、0.5~1岁、1~3岁这3个年龄段的宝宝每日都应该摄入10微克，也就是400IU的维生素D。

不过，维生素D也并非越多越好，3岁以下的宝宝每日最多不可摄入超过20微克或者800IU的维生素D，否则有可能会引笑慧起中毒。

㈥ 血里维生素d3正常含量 43.2ng

指导意见：
建立HPLC法测定血中25-羟基维生素D3的含量,以评价维生素D的营养状况。方法:血清经无水乙醇沉淀蛋白后,以10%二氯甲烷-正已烷提取,进行HPLC法分析

㈦ 你的维生素D够了吗医生没告诉你的各种细节，本篇都有了

维生素D（VD）对人体的钙吸收起着关键作用。VD缺乏的时候，吃下去的钙只能被吸收10%，再怎么补钙也可能无济于事。对现代城市伏案工作学习的人群来说，怎样才能知道日照是否已经生成了足量的VD？补钙要补VD，该通过哪些形式补？有什么需要注意的？本文介绍了人体所需维生素D的来源、作用、如何补充以及血检结果的解读，希望帮到各位新手父母和需要补钙、正在补钙的你。

撰文|史隽

20世纪初期，研究营养缺乏症的医生们发现了13种维生素。由于人体自身不能合成维生素，所以，从那时起，科学家们就将晌磨运维生素定义为 必须从饮食中获取的有机化学物质 ，它们在人身体的新陈代谢中起着至关重要的作用，但仅需少量即可发挥作用。

维生素D(VD)是这13种维生素之一，是一种脂溶性维生素(总共有4种脂溶性维生素：维生素A、D、E、K)。虽然VD确实对 健康 至关重要，而且只需要少量即可，但是严格地从定义上讲，它不应该算是维生素，因为人体是可以自身合成VD的。相反，大多数天然的食物，除了鱼和蛋黄等以外，都不含VD。此外，从食物中获取的VD，人体也必须先对其进行转化加工，才能发挥作用。

和其他常见维生素不同，VD不是一种化学物质，而是许多化学结构类似的化学物质的总称。常见的VD主要包括两种类型：维生素D2(ergocalciferol)和维生素D3(cholecalciferol)。

图1：维生素D2和维生素D3的化学结构

维生素D2主要来自真菌(例如在阳光下生长的蘑菇)和一些植物源食物。阳光中的紫外线B(UVB)会促进蘑菇中的麦角固醇(ergosterol)形成维生素D2 [1] 。人工合成维生素D2的过程也比较简单，将植物甾醇暴露于紫外线中就可以生成维生素D2。由于维生素D2的生产成本较低，所以经常被添加在食品里。

维生素D3仅存在于动物源食物中，如多脂鱼（fattyfish，指各部肌肉混合后脂肪含量高于5.0%的鱼类）、鱼油、肝脏、蛋黄等。人体内天然的维生素D3是由皮肤中普遍存在的7-脱氢胆固醇作为前体合成产生的。阳光是合成反应的关键：阳光中的紫外线B将7-脱氢胆固醇转化为维生素D3的催化剂 [2] 。 没有阳光中的紫外线B，体内就没有维生素D3的生成 。人工合成维生素D3的方法于人和动物皮肤中天然产生的方法相似：从胆固醇游慧产生7-脱氢胆固醇，然后紫外线辐射将7-脱氢胆固醇转化为D3形式。

图2：紫外线催化维生素D2和D3的化学合成

无论是从食物里摄取的，还是人体自身合成的，维生素D2和D3都要经过人体的进一步代谢才能起作用。

肝脏会将维生素D2代谢为25-羟基维生素D2，将维生素D3代谢为25-羟基维生素D3。这两种化合物统称为25-羟基维生素D，也叫骨化二醇(calcifediol)。

25-羟基维生素D是VD的主要循环形式，其血液水平反映了体内VD的储存量。因此，医生通常通过测量血液里的25-羟基维生素D水平来估算您体内VD的量是否足够 [3] 。

尽管25-羟基维生素D被用作检测指标，但它还需要在肾脏里加上最后的一对氧和氢分子，成为最后的有活性的形式：1,25-二羟基维生素D，也被称做骨化三醇(Calcitriol)。

图3：人体内VD的代谢丨作者作图

VD最主要的作用是增加肠道对钙的吸收，从宴梁而调节骨骼生长、保持骨骼 健康 。当人体内有足够的VD时，人体对饮食摄入的钙能吸收30-40%；如果VD缺乏，就只能吸收10-15％。儿童缺乏VD会导致佝偻病(rickets)；成年人缺乏VD会引起骨软化症(osteomalacia)和骨质疏松症(osteoporosis)。

随着年龄的增长，很多人(多数是女性，但也有男性)会有患骨质疏松症的风险。骨质疏松症的特征是骨骼易碎，如果摔倒可能会骨折。

VD对维持骨骼 健康 有重要的作用，这几乎是众所周知的。但这个作用也是最有争议的——尽管医生们都同意缺乏VD会增加患骨质疏松症和骨折的风险，但他们对服用VD保健品的益处和最佳剂量意见有分歧。

血液中的钙对神经、肌肉和心脏的功能至关重要，其水平是不能下降的。此时，如果体内钙总量不足，为了应对血液对钙的需求，身体会分泌甲状旁腺激素，从骨骼中调动钙补充血液里的钙，维持血钙水平，以使心脏和神经能够正常工作。但这样一来，骨骼就被牺牲了，随着其中的钙浓度下降，骨骼就会变得脆弱且容易骨折。

没有足够的VD，肠道就无法有效从食物中吸收钙。大多数研究显示，缺乏VD会增加骨质疏松症的风险以及骨折的可能性。那么，补充多少VD保健品能降低骨折风险？有些研究只包括女性，另一些包括男性和女性；有些只包括体弱、年长或住院的人，另一些则包括 健康 的人；有些研究只补充VD，其他则同时使用VD和不同剂量的钙；有的研究每天服用400IU的VD，其他的则每天多达800IU……研究设计五花八门，因此这个问题还没确定的答案。

VD很重要，但不意味着如果您体内VD水平正常，也需要额外补充。2018年8月发表的一项荟萃分析得出结论：增加普通人群的VD水平不能降低 健康 人群骨折的风险 [4] 。一项对81个研究的荟萃分析发现，补充VD并不能预防骨折或跌倒或改善骨骼矿物质密度 [5] 。对于一些确认体内VD不足的人，额外补充会有 健康 益处。

有越来越多的证据表明，VD在许多其他方面对人体也很重要。人体的许多组织，例如前列腺、肠道、心脏、血管、肌肉和内分泌腺等，都会表达VD的受体(能与VD结合的蛋白质)。一些正在进行中的研究表明，当VD与这些受体结合时，可能产生有益的作用：肌肉需要它才能收缩，神经需要它在大脑和身体各部位之间传递信息，免疫系统需要它来抵抗入侵的细菌和病毒 [6] 。

对任何疾病的任何一组患者进行采样，他们体内的VD含量几乎都会低于 健康 个体。很多人据此推测，VD含量低会导致这种疾病——但其实并没有证据证明。生病时，人的外出活动少，食欲不振，这些都会降低体内VD的水平。因此， 我们无法断定VD的水平低是导致疾病的原因，还是生病造成的后果。

一些相关性研究表明，VD可能可以预防结肠癌 [7] ，甚至可能预防前列腺癌和乳腺癌 [8] 。但是，血液中较高的VD水平也与胰腺癌的高发病率有关 [9] 。这些研究不能确切地证明缺乏VD会导致疾病，也没有证明服用VD保健品可以降低患这些疾病的风险。目前，要断定低VD状态是否会增加患癌症的风险，以及高水平VD是否会保护或者增加某些人的风险，还为时过早。

简单来说，是否需要补充VD的原则是： 不缺 不用补，缺了才需要补充到正常水平。

如何获得VD？

简单的答案：阳光、食物或保健品。

VD也被称作“阳光维生素”，因为它的合成需要紫外线/阳光做催化剂。影响体内VD水平的最大的因素是光照。

如果您大部分时间都在室内活动，常年防晒或居住在日照缺乏的地区，就很有可能缺乏足够的光照促进自身合成所需的VD。

小知识点

在室内透过窗户暴露在阳光下，皮肤不会产生VD。这是因为，玻璃虽然对可见光是透明的，但几乎能够吸收所有的紫外线B。紫外线B是可能导致晒伤的射线，因此，透过玻璃不会被晒伤。

但是，紫外线A(UVA)比紫外线B更接近可见光谱，约75％的紫外线A能够透过普通玻璃。紫外线A会导致皮肤损伤和基因突变。后者可能导致皮肤癌。因此玻璃不能防护阳光引起的皮肤损伤。

有个研究发现，印度南部的蒂鲁伯蒂人（北纬13.40°东经77.2°），每周晒两次半小时的正午太阳，所产生的VD的量就足够人体所需 [10] 。阳光催化的自身皮肤内合成的VD也不会过量：如果身体所需的量够了，自身合成就会减少。

但是，在距赤道较远的国家/地区，因为日照不够强，可能需要更多时间才能达到相同的结果。然而，也需要注意不要长时间在没有防晒霜的条件下接受日照。这点对肤色较浅的人尤其重要，因为过多紫外线引起的晒伤是引起皮肤癌的主要危险因素 [11] 。

知识点：防晒霜的使用

晒太阳和涂防晒霜是一个需要权衡利弊的选择。

阳光包含两种形式的射线：紫外线A(UVA)和紫外线B(UVB)。UVB是皮肤合成VD所需的能量。

UVA的波长更长，穿透皮肤较深，与皮肤老化有关(例如皱纹的产生)。UVB的波长较短，穿透皮肤较浅，与皮肤灼伤有关(例如皮肤晒红)。尽管UVA和UVB射线对皮肤的影响方式不同，它们都会破坏皮肤细胞的DNA，引起基因突变，从而可能导致皮肤癌以及过早衰老。这些射线还会损伤眼睛，导致白内障和眼睑癌等。

适当的光照对身体有好处，过量的紫外线辐射对身体有害。

为了保护自己，应该尽量避免夏季的日照，尤其是上午10点至下午2点之间。夏季大艳阳天出门的时候，要么尽可能戴大帽檐的帽子，穿深色的长袖衬衫和长裤；要么就应该涂抹防晒霜。

防晒霜的SPF至少应该要有15；皮肤白的人应该选择SPF30以上的。但是，有一点要注意，SPF仅适用于UVB，挑选防晒霜的时候应该选一种也可以防止UVA的“广谱”防晒霜。最重要的是，应该尽早涂防晒霜，并且经常补涂。

需要的光照时间还受很多其他因素的影响，例如季节、一天中的不同时间、所处地区的纬度/海拔、空气污染程度、皮肤色素沉着、防晒霜的使用、玻璃和塑料对紫外的穿透能力及其老化程度等等，都会影响人们所需的光照时间。（详见：紫外线的危害：知己知彼，方能立于不“黑”之地丨展卷）。举个例子，生活在北纬37°以北或南纬37°以南的人们，除了在夏季短短的几个月内，一年中其它季节都无法从太阳获得足够的UVB来产生人体所需的所有VD。另外，皮肤色素沉着可以导致皮肤中VD的产量减少90％以上，因此肤色深的人群很容易缺乏VD。

VD也可以从饮食中摄入。VD含量高的食物来源包括多脂鱼(例如三文鱼)、鱼油、蛋黄、黄油和肝脏。

然而，VD含量高的食物资源不多，单纯从饮食中获取足够的量不太容易。一个蛋黄只含有大约20IU(InternationalUnits,国际单位)的VD。必须吃大约10克的鲑鱼、200克的大比目鱼、850克的鳕鱼或将近两个230克的金枪鱼罐头才能得到400IU的VD。

除此以外，一些加工食品，例如酸奶和橙汁等，会额外添加VD(D2或者D3)。

如果检测发现体内VD的水平确实比较低，而又无法通过生活方式的改变来改善，那么还可以服用VD保健品来补充。

市面上的VD保健品既有维生素D2，也有维生素D3，它们的区别是很大的。

虽然维生素D2和D3被统称为VD，但是它们对提高人体内VD水平的能力不完全相同。在摄入量相等的情况下，维生素D3比维生素D2更能有效地升高血液中骨化二醇的水平中 [12,13] 。

一项针对32位老年女性的研究发现，同等单剂量(300,000IU)的维生素D3提升骨化二醇水平的功效几乎是维生素D2的两倍 [14] 。

还有研究发现，粉末形式的维生素D2对温度和湿度的波动更敏感 [15] ，因此已发现不同品牌的维生素D2的含量与瓶子上标注的含量可能有很大的差别。但是，这个研究看的只是粉末形式的维生素D2，目前还不清楚溶解在油里面的维生素D2是否也会不稳定。

所以，如果需要额外补充VD，应该考虑选择维生素D3。由于VD是脂溶性的，VD的保健品最好与含有脂肪的食物一起服用。

1997年以前，美国建议所有成年人每天VD的摄入量是200IU。随着越来越多的美国人被发现缺乏VD，现在建议51至70岁的人每天摄入量增加到400IU，70岁以上的人增加到600IU。这是因为随着年龄的增长（尤其是绝经后的女性），人们合成VD和吸收钙的效率降低。现在有许多权威机构建议每天摄入800-1000IUVD。

母乳喂养的婴儿尤其需要注意补充VD ，因为母乳里面含有的VD的量比较低。婴儿出生后每天需要400IU的VD，直到他们喝添加了VD的配方奶或牛奶。

2010年11月，美国医学会的专家委员会设定了新的VD“饮食参考摄入量”。

这个摄入量基于一个假设条件：这个人完全没有通过日照自身合成VD，并且摄入了足够的钙 。美国医学会建议从饮食或保健品中获取的VD见表格1(注意，上限摄入量是美国医学会的专家们认为最高安全量；1mcg=1µg=1微克):

表1：美国医学会推荐的VD参考摄入量丨作者作图

那么VD是不是越多越好呢？

绝对不是，任何好东西都有过量的风险。

过多的VD会引起异常高的血钙水平，导致恶心、便秘、食欲不振、精神错乱、心律不齐甚至肾结石。

像其他脂溶性维生素一样，VD存储在人体的脂肪中。每日摄入量总会有波动，当某些天摄入过量的时候，多余的量可以被存储起来；当某几天摄入量不足时，身体就可以动用自己的储备。但这也意味着，持续摄入过量的VD，身体的存储可能会积累到毒性水平。在这些极端情况下，过量的VD会升高血液中的钙水平，从而引起嗜血、便秘甚至死亡。但是这种极端情况在超大量摄入的情况下才会发生。目前每天剂量≤2,000IU被认为是安全的。

另外一种情况是，身材瘦小的人(例如婴儿和儿童)体内的脂肪量较少，那么VD的存储空间也较少。如果服用了大剂量的VD，过量的就会进入血液，导致钙吸收过多，以致中毒。目前尚不清楚超过VD摄入量的上限多久后会有危险。

VD的毒性几乎总是由保健品的过量使用而造成的。过度的阳光照射不会造成VD过量，因为人体自身合成会有精密的调控，量足够了就不再继续了。

国内很多VD是以鱼肝油的形式补充的，主要成分是维生素A(VA)+VD。补充VA对VA缺乏的孩子有帮助。但是，大多数 健康 ，营养丰富的孩子不需要额外补充，还很容易摄入过量。例如，在美国，一项对全国3,000多个儿童进行的随机抽样调查发现，服用复合维生素的2岁以内的儿童，有97%摄入的VA过量。即使在不服用保健品的幼儿中，也有15％的人摄入了过多的VA [16] 。

图4：常见的“鱼肝油”

VA过量会有很严重的后果：虚弱，头痛，恶心，皮肤干燥和其他症状。长期服用过量的维生素A会引起关节疼痛和骨骼脱钙，导致骨质疏松 [17] 。

因此，如果不是VA缺乏，要补充VD应该选择单一成分的保健品，而不是选择这种复合形式的。

怎么知道自己到底缺不缺VD呢？上面讲到可以通过检测血液里的25-羟基VD来衡量看体内VD的水平。

测试本身不是问题，问题在于如何解释结果。很多专家认为，还缺乏高质量研究的数据来系统地确认到底哪个临界值显示VD缺乏。

1)尽管标准不尽相同，但大多数专家都认为，血液里的25-羟基VD的水平低于12ng/mL(毫微克/毫升)或是30nmol/L反映了VD明显不足。（1nmol/L=0.4ng/mL）
2)美国医学会认为如果在12-20ng/mL(30-50nmol/L)之间，有些人可能有VD缺乏的倾向。没有证据表明血液里的浓度高于30ng/mL(75nmol/L)会有更多的益处，而浓度高于50ng/mL(125nmol/L)可能反而会引起不好的问题。
3)美国国立卫生研究院认为血液里25-羟基VD的水平持续超过200ng/mL(500nmol/L)就会有“潜在毒性”。

表2：各路专家对VD含量危害性的看法丨作者作图

根据这个指标，有些人缺乏VD，几乎没有人的VD量过高。一般而言，年轻人的血液中25-羟基VD的水平高于老年人，男性的水平高于女性。
可能缺乏VD的人群包括：

1)母乳喂养的婴儿。

2)老年人，因为他们的皮肤在阳光照射下不能像年轻时一样有效地产生VD，而且肾脏也不能很好地将VD转化为活性形式。

3)肤色较黑的人，因为他们的皮肤从阳光中产生VD的能力较低。

4)患有克罗恩氏病或乳糜泻等疾病的患者无法正常代谢脂肪，而VD需要通过脂肪被吸收。

5)肥胖的人，因为他们的体内脂肪会与VD结合，阻止其进入血液循环。

类固醇药物如泼尼松(prednisone)会干扰VD的代谢。如果定期服用类固醇药物，需要与医生讨论VD。

减肥药orlistat(商标名称包括Xenical和Alli)可能会影响VD的吸收。降胆固醇药cholestyramine（商标名称包括Questran、LoCholest和Prevalite）也是如此。服用这些药物的人应与医生讨论VD的摄入量。

治癫痫药物苯巴比妥(Phenobarbital)和地兰汀（Dilantin，phenytoin）会影响VD的代谢并影响钙的吸收。结核药也是如此。

另一方面，降胆固醇的他汀类药物和噻嗪类利尿剂会增加VD的水平。

以前，只要晒成“ 健康 ”的棕褐色，身体就会自然生产人体所需的所有VD。然而，现代人常在室内办公，为防皮肤癌使用防晒霜，这个传统经验已经不再对所有人适用了。如今保证摄入足量VD的方案是：吃鱼、鸡蛋，喝添加了VD的牛奶和果汁，服用适当剂量的VD保健品。

关于到底什么人需要补充VD和应该补充多少的辩论仍在继续，但波士顿哈佛医学院附属的BrighamandWomen’sHospital的研究人员正在进行一项期待已久的随机试验（名为VIital），他们使用了25,000名成年人作为试验对象，旨在研究补充VD和欧米茄-3脂肪酸对癌症、中风和心脏病的影响。结果可能会在今年年底公布。

参考文献

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3.M.F.Holick,VitaminDStatus:Measurement,Interpretation,andClinicalApplication.AnnalsofEpidemiology19,73-78(2009).

4.K.Trajanoskaetal.,:.BMJ362,k3225(2018).

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15.L.A.Houghton,R.Vieth,Thecaseagainstergocalciferol(vitaminD2)asavitaminsupplement.,694-697(2006).

16.R.Briefel,C.Hanson,M.K.Fox,T.Novak,P.Ziegler,:gUSInfantsandToddlers?,52.e51-52.e15(2006).

17.M.Rutkowski,K.Grzegorczyk,.,105-121(2012).

㈧ 液相色谱怎么判断维生素d3的保留时间

保留时间的概念是从样品进入仪器中，到出峰的时间。若你的样品只有维生素D3，那么就很好判断了，仪器会直接出来数据，像保留时间，峰高，峰面积之类的。若你的样品还含有其他物质，你就需要查文献，这种常见物质的出峰时间文献上都有，你再对照你的结果就可以知道了。

㈨ 饲料中维生素D3测定为什么要乘以1.25

1.25是回流皂化时生成维生素D3原的校正因子
其他：标准维生素D3结晶纯品与试样同样皂化处理滑穗后，所得标准橘肢溶液注入高效液相色谱分析柱以维信伍卜生素D3峰面积计算时可不乘1.25

㈩ 食品中维生素d 测定

简要描述： 高效液相色谱法 1. 原理 样品中脂溶性维生素在皂化过程中与脂肪分离，以石油醚萃取后，用正相色谱柱提取富集，用反相色谱柱，紫外检测器定量测定。 2. 适用范围 ...高效液相色谱法
1. 原理
样品中脂溶性维生素在皂化过程中与脂肪分离，以石油醚萃取后，用正相色谱柱提取富集，用反相色谱柱，紫外检测器定量测定。
2. 适用范围
本方法来源于GB/T 5413.9-1997。适用于婴幼儿配方食品和乳粉维生素A、维生素D、维生素E的测定；也适用于食品或强经食品及饲料中的维生素D含量的测定。
3. 主要仪器
1) 高压液相色谱仪，具有可变波长的紫外检测器，数据处理系统或记录仪。
2) 旋转蒸发器。
3) 平底烧瓶：250mL。
4) 分液漏斗：500mL。
4. 试剂
所有试剂，如未注明规格，均指分析纯，所实验用水均指蒸馏水。
1) 异丙醇：色谱纯。
2) 2％焦性没食子酸乙醇溶液：取2g焦性没食子酸溶液于100mL无水乙醇中。
3) 75％氢氧化钾溶液：取75g氢氧化钾溶于100mL水中。
4) 石油醚：沸程30～60℃。
5) 甲醇：色谱纯。
6) 正己烷：色谱纯。
7) 环己烷:色谱醇。
8) 维生素D标准溶液
A. 维生素D2标准贮备液：含维生素D2100mg/ml的甲醇溶液。称取10mg的维生素D2，用甲醇定容于100mL容量瓶中。
B. 维生素D3的标准贮备液：含维生素D3100mg/ml的甲醇溶液。称取10mg的维生素D3，用甲醇定容于100mL容量瓶中。
5. 操作步骤
5.1样品处理：准确称取10g样品，于250mL平底烧瓶中，加30mL蒸馏水。
5.2测定液的制备：
1) 于上述样品溶液中加入100mL的20％没食子酸乙醇溶液，充分混匀后加50mL75％氢氧化钾溶液，在蒸汽浴上边续回流30min后，立刻冷却到室温。
2) 将皂化液转入一500mL分液漏斗中，用100mL水分几次冲平底烧瓶。洗涤液并入分液漏斗中。
3) 于上述分液漏斗中，加入100mL石油醚，盖好瓶塞，倒置分液漏斗并剧烈振摇1 min.在振摇过程中，注意释放瓶内压力。静置分层，将水相放入另一500mL分液漏斗中，重复上棕萃取过程2次，合并醚液到第一个分液漏斗中。用蒸馏水洗该醚液至中性，通过无水硫酸钠过滤干燥，在40℃和氮气流下，于旋转蒸发器上蒸至近于（绝不允许蒸干）后，用石油醚转移至10mL容量瓶中，定容。
4) 从上述容量瓶中取7mL放入一试管中，用氮气将石油醚吹干，于试管中加1mL正己烷。
5.3测定：
1) 测定液的制备：
A) 仪器条件：
色谱柱：30cm×40cm，硅胶柱。
流动相：正己烷与环己烷按体积比1：1混合，并按体积分数0.8％加入异丙醇。
流速：1mL/min。
波长：265nm。
柱温：20℃。
灵敏度：0.005AU/MV。
注射体积：200mL。
B) 注射50mL维生素D标样和200mL样品溶液，根据维生素D标样保留时间收集维生素D于试管中，将试管用氮气吹干，准确加入0.2mL甲醇溶解。
2) 测定步骤：
A) 仪器条件：
色谱柱：4.6mm×25cm，C18或具同等性能的色谱柱。
流动相：甲醇。
流速：1mL/min。
波长：265nm。
柱温：20℃。
灵敏度：0.005AU/MV。
注射体积：50mL。
B) 注射50mL维生素D标准溶液，注射50mL样品溶液，得到标样和样品溶液中维生素D峰面积或峰高。
6. 计算
ρs×10∕7×40×100
X =
m
As
ρs= ---×ρsd
Asd
式中： X--样品维生素D的量，mg/100g；
m--称样量，含量，IU∕100g；
ρs --进样液中维生素D有浓度，mg/mL；
A s --进样液中维生素D有峰高（或峰面积）；
A s d --标样液中维生素D有峰高（或峰面积）；
ρsd --标样中维生素D的浓度；
计算结果精确至小数点后一位。
7. 注意事项
1) 允许误差及最小检出量：同一样品的2次测定值之差不得超过2次测定平均值的10％；最小检出量为0.1国标单位。
2) 试剂焦性没食子酸容易变性，应购习近期生产的试剂。
3) 如果皂化不完全，可适当增加氢氧化钾的加入量。