医院病原体检测方法

① 感染性疾病病原检查方法有哪些

感染（infection）是病原体（pathogen）和人体在一定条件下相互作用的病理过程，感染的病原体包括各种细菌、病毒、寄生虫、真菌、支原体、衣原体、螺旋体等。病原体的来源可分为外源性和内源性感染两种类型。外源性感染是由于外界的病原体侵入人体，如志贺菌、结核分枝杆菌、人免疫缺陷病毒（HIV）等引起的感染。内源性感染是人体内经常寄生的微生物，如大肠埃希菌、肠球菌、某些真菌等在一定条件下引起的感染。感染后是否引起感染性疾病（infection diseases）与病原体的数量、毒力和人体的抵抗力有关，并决定感染的发生、发展和结局。病原体感染后机体可以出现不感染、隐性感染（covert infection）、显性感染（overt infection）、持续性感染（persistent infection）或病原体携带状态（carrier state）几种类型。感染性疾病是由于感染的病原体毒力强、数量多，超过了机体的抵御能力，定植在机体一定部位增殖、扩散或蔓延、释放毒素，引起机体免疫病理反应，导致组织、器官等损伤，生理功能紊乱，并出现一系列的临床症状和体征。感染性疾病的检查主要包括病原体的检查、感染的血清学试验等，并由此确定感染性疾病的发生和性质；通过病原体的药物敏感试验、耐药株监测和医院感染的监测报告，为临床感染性疾病的最佳治疗药物选择，采取最有效的预防措施，防止感染的传播或流行提供及时、有效的实验数据。
随着现代社会与临床医学的发展，目前感染性疾病的流行病学特点发生了明显变化，主要体现在以下几个方面：①由强毒性病原体引起感染的疾病，如鼠疫、白喉、伤寒、天花、小儿麻痹逐渐减少或绝迹，而条件致病的病原体引起的感染、医院感染逐渐增多。②由新的病原体、原有的病原体变异引起的新感染性疾病，如艾滋病（AIDS）、疯牛病、O157出血性肠炎、严重急性呼吸综合征（severe acute respiratory syndrome, SARS）等陆续出现。③以前的感染性疾病，如淋病、梅毒、结核病等又重新流行。④多重耐药株，如耐万古霉素的肠球菌（VRE）、耐苯唑西林的葡萄球菌（MRS）、耐异烟肼的结核杆菌等，导致抗感染治疗无效或低效。因此，临床感染性疾病的检查应密切结合上述新的变化趋势进行。
细菌感染所致的感染性疾病占首位；病毒性感染在人群中的发生率最高，但不一定致病；真菌感染的发病率近年来显着上升；寄生虫，如隐孢子虫、卡氏肺孢子虫、滴虫等感染开始受到普遍关注。病原体的检查是临床确诊感染性疾病的主要手段，根据需要鉴定到一定水平即可。例如，作为临床病原学诊断，细菌感染只需鉴定到种，必要时才进一步鉴定；若进行流行病学调查，细菌鉴定应达到血清型或基因型。临床病原体检查必须通过采集标本，经过各种试验后才能明确诊断。标本采集质量的好坏直接影响诊断结果，早期采集、无菌采集、适当与适量采集是确保查明病原体的前提。临床病原体检查的方法有多种，包括涂片检查、分离培养、血清学鉴定和分子生物学诊断（molecular biological diagnosis）等，可根据临床需要和标本类型进行选择。临床标本分离培养的阳性结果最具确诊意义，但阴性结果并不能完全除外病原体感染的可能。病原体抗原成分检测可早期、快速诊断感染性疾病，阳性结果表明感染病原体的存在。分子生物学诊断为病原体感染的早期、快速、敏感、特异诊断成为可能，但应排除假阳性或假阴性结果。

② 病原微生物基因检测和其他检测有什么不同

病原微生物检测方法包括：

传统金标准：特殊染色镜检，培养药敏试验等确定病原菌和耐药基因

免疫学方法：酶联免疫技术通过已知的抗体或抗原来检测病原体的抗原或抗体

PCR检测：用已知引物引导未知片段中微量待测基因片段扩增

基因芯片：通过微加工将百万计的基因探针与核酸杂交检测技术

核酸杂交：探针和核酸按碱基互补配对原则缔成异质双链检测

宏基因组：从样品中提取总核酸，构建宏基因组文库测序分析检测

病原微生物宏基因检测法相比于其它方法：其利用宏基因组检测样本总核酸鉴定微生物的种类，检测范围更广，一次性可分析10635种微生物，包括RNA病毒，速度快48小时能完成交付，检测样本灵活，

重点：

1、可检出新发病原，解决想不到，

2、可检也罕见病原，解决没想到，

3、可检出低频率突变，解决做不到，

达瑞基因

③ 2021天津医疗卫生检验学：梅毒检测方法

梅毒是由苍白(梅毒)螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病。主要通过性途径传播，临床上可表现为 一期梅毒 、 二期梅毒 、 三期梅毒 、 潜伏梅毒 和先天梅毒(胎传梅毒)等。梅毒在考试中的常考难点为梅毒的检测方法，目前，在医学上梅毒常用的检测方法主要分为两类，一类是病原学检测;另一类是血清学检测。

一、病原学检测法：以直接观察病原体为目的的检测，目前在临床上应用的较少，能够开展的医院也不多。病原学检测包括：①暗视野显微镜检查。②镀银染色检查。

二、血清学检测则又包括两大类：

(一)以非梅毒螺旋体抗原的血清试验：

①VDRL(性病研究实验室试验)。

②USR(不加热血清反应素试验)。

③RPR(加速血浆反应素环状卡片试验)。

④TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)。

目前RPR和TRUST是我国主要采取的两种非梅毒螺旋体抗原血清检测方法。

(二)以梅毒螺旋体抗原的血清试验：

①FTA-ABS(密螺旋体荧光抗体吸收)

②TPPA/TPHA(梅毒密螺旋体凝集试验)

③TP-ELISA(酶联免疫吸附试验)

④CIA(发光法)

⑤GICA(胶体金免疫层析法)

⑥WB(蛋白印迹试验)

⑦PCR聚合酶链反应

⑧梅毒螺旋体IgM抗体检测

通过检查血液中的抗体来判断是否感染的检测，是目前在临床上广泛被采用的检验梅毒的手段。

(三)目前临床上检测梅毒较常用的检测方法有及其优缺点：

1.化学发光法ELISA：其敏感度及特异性较高，在操作中可以同一时间进行多份抗体检验，该方法较简单，常用来进行大批量的筛查。

缺点：结果阳性不能区分既往感染和现症感染。

2.TRUSTRPR：该方法操作简便、迅速，适用于大量标本检测。用于临床初筛试验、梅毒的病程和疗效观察。

缺点：TRUST在硬下疳出现后4周才能检出，对一期梅毒检出率较低，适合诊断二期梅毒。还易出现生物学假阳性反应;肉眼观察结果，判断主观。

3.TPPA：敏感性和特异性均较高，能够作为非梅毒螺旋体抗原血清学试验初筛阳性标本的确证试验。

缺点：手工操作，步骤繁琐，对操作人员要求较高。结果依赖肉眼判断且不宜保存，不适用于大批量筛查实验。

以上通过将梅毒检测方法分为两个方向，总结了在临床检测中的常用方法，考生可根据具体问题具体分析。

④ mNGS检测呼吸道病原体

文献信息：

文献：Metagenomic Sequencing Detects Respiratory Pathogens in Hematopoietic Cellular Transplant Patients
中文：宏基因组测序检测造血细胞移植患者的呼吸道病原体
杂志：American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. IF:13.204
时间：2017年7月
单位：加利福尼亚大学

摘要：

下呼吸道感染是造血细胞移植(HCT)接受者住院和死亡的主要原因。尽管如此，由于传统诊断法在预防性抗菌剂的设置中产量降低，抗体滴度降低，以及来自罕见机会微生物的感染，病因往往无法确定。mNGS可能提供更强的诊断，通过进行无需培养临床样本的微生物组成的综合检测。通过捕捉微生物和人类RNA, mNGS还允许同时通过转录组分析宿主免疫反应, 可以提供快速(< 48 h)和可行的微生物学的数据精确传染病诊断。

1 样本、常规临检：

由于HCT受者明显需要加强LRTI诊断，我们根据密歇根大学HUM00043287协议，先后纳入了22名因急性呼吸系统疾病住院的成人HCT受者，他们在2012年1月25日至2013年5月20日期间接受了支气管镜检查和BAL检查。对所有患者进行标准护理 BAL微生物学检测 ，包括 细菌、分枝杆菌、真菌和巨细胞病毒的半定量培养;曲霉半乳甘露聚糖检测;jirovecii肺孢子虫银染色;流感A/B、呼吸道合胞病毒和人偏肺病毒;和人疱疹病毒-6聚合酶链反应 ，具体方法见在线补充(4)。对血液和鼻咽部样本的补充诊断由治疗医师自行决定，具体见表1和在线补充(4)。

2 建库、测序、分析：

用250 μl BAL构建RNA和DNA测序文库，并根据已建立的方法进行双端Illumina测序。病原体检测利用定制的生物信息学管道来区分临床样本中的病原体和背景微生物污染物（参考2，3）。使用由每百万读序列(rpM)排列的核苷酸reads乘以每个属相对于无模板对照的nt和nr Z-scores之和所组成的排序分数[score = rpMnt×(Znt + Znr)]。

参考2： Actionable diagnosis of neuroleptospirosis by next-generation sequencing. N Engl J Med 2014
参考3： Illuminating uveitis: metagenomic deep sequencing identifies common and rare pathogens. Genome Med 2016
方法：sequence-based ultra-rapid pathogen identification (SURPI)

3 评估标准

微生物鉴定被归类为病原体确认，如果：1)临床试验和mNGS发现了微生物, 2) 存在致病性在肺部的文献证据, 和3) 得分至少两倍比其他相同类型的微生物(病毒、细菌或真菌)中确定病人。如果mNGS单独识别了微生物，且符合标准2和3，则认为微生物是新的潜在病原体;所有其他微生物都被认为是不太可能或不确定的病原体。结果分别由病毒PCR或细菌16S rRNA基因测序独立证实，如(参考4)所述。

4 结论：

总而言之，我们利用元基因组测序的持续改进来扩大LRTI诊断急性呼吸系统疾病HCT受者的能力。我们证明，与目前的微生物诊断相比，mNGS具有更大的检测微生物的能力，并且能够将病原体检测与宿主反应和气道微生物组同步分析相结合。

参考：
临床上那些潜藏的病原体，可以用宏基因组测序“揪出”吗？

⑤ 支原体衣原体怎么检查

问题一：怎样检查支原体和衣原体 10分 原体和衣原体检查都是提取尿道分泌物，然后进行化验。最好停用抗生素10天后去医院检查，避免出现“假愈”现象。如果前列腺已经感染需要与尿道炎同时治疗，尿道前端刺痒应该是尿道炎症状。停药后做一下药敏试验，试验与支原体、衣原体检查同时进行，到时候别忘了提醒医生。药敏试验的目的是根据身体对药物敏感性合理用药，既防止钱财郸必要浪费，又能有效治疗。
祝你早日恢复健康

问题二：在妇科检查中，什么叫衣原体，支原体检查 衣原体、支原体是引起人体感染的一种非常小的微生物，它的特征主要有几点，一个是它感染人体初期的症状不是很明显，经常我们发现的时候，它已经时间比较长了，已经感染了其他的组织或器官了。所以初期症状不明显。第二个特点，衣原体、衣原体造成的危害是比较大的，尤其是对生殖系统。第三，衣原体支原体的治疗相对来说是比较困难的。
1、支原体一般对泌尿生殖系统的感染有三种，解脲支原体，人型支原体，还有生殖道支原体，还有感染呼吸系统，引起肺炎，我们叫肺炎支原体，一般来说支原体有四型。
支原体是一类大小和结构复杂程度介于病毒和细菌之间，能在人工培养基中生长、增殖的最小原核微生物。大小约为 0.3～0.4μm，难以在显微镜下看清楚。由于支原体缺乏细胞壁，故在形态上呈多形性。迄今，已知的支原体有150多种，广泛分布在自然界中。寄居于人类的支原体有16种，其中寄居在人泌尿生殖道中的常见支原体包括解脲支原体、人型支原体、生殖支原体、灵长类支原体、嗜 *** 支原体、穿通支原体等6种。由于口和生殖器接触，有时寄居于泌尿生殖道的支原体（如解脲支原体、人型支原体、生殖支原体、穿通支原体）偶尔可在口咽部分离出来。相反，有些寄居在口咽部的支原体（如发酵支原体、唾液支原体、肺炎支原体）也可出现在泌尿生殖道中。解脲支原体、人型支原体和生殖支原体等三种支原体是目前在正悄喊医学领域最受重视的支原体。
支原体不耐干燥，对热抵抗力差，煮沸或高温、紫外线均能轻易将支原体杀灭。同时，支原体易被脂溶剂、清洁剂、常用消毒剂，如酒精、酚、甲醛、来苏尔等灭活。
2、衣原体常说的是说只有沙眼衣原体，可以感染我们的眼睛，也可以感染我们的泌尿生殖系统，衣原体在临床上是比较大的一个话题。
衣原体是自然界中传播很广泛的病原体。多呈球状、堆状，有细胞壁，以一般寄生在动物细胞内。从前它们被划归病毒，后来发现自成一类。是一种比病毒大、比细菌小的原核微生物，呈球形，直径只有O.3-0.5微米，它无运动能力，衣原体广泛寄生于人类，哺乳动物及鸟类，仅少数有致病性。
衣原体为革兰氏阴性病原体，是一种专性细胞内微生物，没有合成高能化合物ATP、GTP的能力，必须由宿主细胞提供，因而成为能量寄生举野物。衣原体是一类能通过细胞滤器，有独特发育周期、严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。
主要是通过性接触传播，进入生殖道后，喜欢进入粘膜细胞内生长繁殖，在女性引起子宫内膜炎、输卵管炎、盆腔炎、尿道炎等。在男性可引起尿道炎、附睾炎、直运数肠炎等炎症。女性感染沙眼衣原体，会引起不孕、异位妊娠(宫外孕)、流产、死胎、胎膜早破、早产等。

问题三：衣原体检查方法有哪些 衣原体是引起非淋菌性尿道炎(宫颈炎)的主要病原微生物的一种。衣原体分为三种，即沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体。引起性病是沙眼衣原体。沙眼衣原体具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA，具有合成蛋白质、核酸和脂类的能力，但不能产生三磷酸腺苷，因而完全依靠宿主细胞提供必需的能量，所以沙眼衣原体是一类在真核细胞内寄生的微生物，即在细胞内寄生是其特点。沙眼衣原体引起的疾病，除非淋菌性尿道炎外，还有沙眼、包涵体性结膜炎、性病淋巴肉芽肿、衣原体性宫颈炎、输卵管炎、副睾炎、直肠炎、新生儿肺炎等。临床对沙眼衣原体的检查方法包括：1、涂片直接镜检：主要用于眼部标本，诊断沙眼，姬姆萨染色后在上皮细胞内查找包涵体。2、抗原检测：①直接免疫荧光抗体检测法。②酶联免疫吸附试验。这两种方法均有快速、简单、敏感性高的优点，广泛应用于新近感染的临床诊断。缺点是死菌也可被检测到，易出现假阳性。3、细胞培养：此法操作复杂，操作条件要求高，但是检测衣原体的“金标准”。4、血清学试验：主要用于流行病学调查，对诊断急性输卵管炎、附睾炎、肛周炎和婴儿衣原体肺炎有价值。5、分子生物学技术：包括核酸探针检测法、核酸扩散技术(PCR)、连接酶链反应等，敏感性均高。正常参考值： 正常人 阴性(谭立明)

问题四：男性支原体衣原体怎么检查 您好！
最准确的应该尿道取样，衣原体化验一般50分钟出结果，支原体做细菌培养，3天出结果，检查出致病菌后在针对性用药，并且日常需要注意卫生，检查的前三天避免同房，最好夫妻同治。
感谢您关注问病网，祝您健康！

问题五：女性支原体衣原体的检查方法 1 快速抗原检测：多采用单克隆抗体直接免疫荧光法检测标本中的衣原体还可应用2I―IsA法加入抗衣原体抗体酶标抗体18G及底物进行比色定量检测这两种方法简便敏感.2 血常规：周围血白细胞计数一般正常嗜酸性粒细胞增多.3 PcR技术 普通PcR技术检测肺炎衣原体特异性DNA具有快速简便特异的优点敏感性高于细胞分离技术但在检测咽拭于标本中效果不够理想用套式PcR(nPcR)检测可显着提高其敏感性.4 x线检查：衣原体肺炎胸片无特异性多为单侧下叶浸润表现为节段性肺炎严重者呈广泛双侧肺炎沙眼衣原体肺炎胸片显示双侧广泛间质和肺泡浸润过度充气征比较常见偶见大叶实变.5 血清学检查 采用补体结合试验着恢复期血清抗体效价比急性期血清效价增高 4倍或4倍以上即有诊断意义但无早期诊断意义微量免疫荧光法(MrF)适用于沙眼衣原体.6 直接涂片镜检：取咽分泌物痰呼吸道教膜或其他部位标本做涂片进行GZmesa染色原体染成红色始体染成深蓝色沙眼衣原体包涵体因含有糖原801染色染成褐色.7 衣原体分离 肺炎衣原体培养最好用Hela细胞或Hep一2细胞一般取气管或鼻咽吸取物作为临床标本及时接种目前衣原体鉴定多采用Hela细胞或Hep一2细胞培养后通过特异性单克隆荧光抗体法(MFA)该技术敏感性高特异性强如能早期采集标本可在48h内获得阳性结果。

⑥ 传染病监测的技术方法都有哪些

一、病原学检查
1、病原体的直接检出：许多传染病可通过显微镜或肉眼检出病原体而明确诊断，如从血液或骨髓涂片中检出疟原虫、利什曼原虫、微丝蚴、回归热螺旋体等；从大便涂片中检出各种寄生虫卵及阿米巴原虫等；从脑脊液离心沉淀的墨汁涂片中检出新型隐球菌等；肉眼观察粪便中的绦虫节片和从粪便孵出的血吸虫毛蚴等。
2、病原体分离：细菌、螺旋体和真菌可用人工培养基分离培养，如伤寒杆菌、志贺杆菌、霍乱弧菌、钩端螺旋体和新型隐球菌等。立克次体需经动物接种或细胞培养才能分离出来，如斑疹伤寒、恙虫病等。病毒分离一般需细胞培养，如登革热、脊髓灰质炎等。用以分离病原体的检材可采用血液、尿、便、脑脊液、痰、脊髓和皮疹吸出液。
3、特异性抗原检测：可较快地提供病原体存在的证据，其诊断意义较抗体检测更为可靠。常用方法有凝集试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、酶免疫测定（EIA）、荧光抗体技术（FAT）、放射免疫测定（RIA ）、流式细胞检测（FCM）等，必要时可作核酸定量检测、基因芯片技术检查。
4、特异性核酸检测：可用分子生物学检测方法，如放射性核素或生物素标记的探针作DNA印迹法或RNA印迹法，或用聚合酶链反应（PCR）或反转录PCR（RT-PCR）检测病原体的核酸。必要时还可作原位聚合酶链反应（PCR）。
二、特异性抗体检测
在传染病的早期，特异性抗体在血清中往往尚未出现或滴度很低，而在恢复期或后期抗体滴度有显着升高，故在急性期及恢复期双份血清检测其抗体由阴性转为阳性或滴度升高4倍以上有重要诊断意义。特异性IGM抗体的检出有助于现存或近期感染的诊断。蛋白印迹法（WB）（又称免疫印迹法）的特异性和灵敏度都很高。常用于艾滋病的确定性诊断。

⑦ 病原微生物中细菌常见检测方法有哪些

1、快速测试片技术法

快速测试片是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定食品中微生物的方法。

细菌总数检测纸片的研制始于 20 世纪 80 年代，其主要优点是简便、实用、经济、操作性强。近年来以滤纸和美国某公司的 Petrifilm 为载体的测试片已开始被广泛应用。

2、生物电化学方法

生物电化学方法是指通过电极测定微生物产生或消耗的电荷，从而提供分析信号的方法。微生物在滋生代谢过程中，培养基的电化学性质如电流、电位、电阻和电导等会发生变化，所以可以通过检测分析这些电化学参量的变化来实现对微生物的快速测定。

常见的有：阻抗分析法、电位分析法、电流分析法等。生物电化学方法具有测量快速、直观、操作简单、测量设备成本低和信号的可控性等特点。

3、微菌落技术

微菌落是指细菌生长繁殖早期在固相载体上所形成的只能借助于显微镜观察的微小菌落。微菌落技术具有快速、经济、实用的特点，其研究始于 20 世纪50年代，定量测定技术从 20 世纪 70 年代开始，国外已有报道将该法应用于水、食品中细菌总数的快速检测。

4、气相色谱法

气相色谱应用到微生物的检测中，主要是依据不同微生物的化学组成或其产生的代谢产物各异，利用上述色谱检测可直接分析各种体液中的细菌代谢产物、细胞中的脂肪酸、蛋白质、氨基酸、多肽、多糖等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

5、高效液相色谱法

利用高效液相色谱检测可分析各种体液中的细菌代谢产物、病原微生物等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

⑧ 鉴定未知病原体的技术有哪些

鉴定未知病原体的技术雀明枣可以用快速测试片技术法，具体介绍如下：

快速测试片是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定食品中微生物的方法。

细菌总数检测纸片的研制始于20世纪80年代，其主要优点是简便、实用、经济、操作性强。近年来槐闭以滤纸和美国某公司的Petrifilm为载体的测试片已开始被广泛应用。

每个人一生中可能受到150种以上的病原体感顷拆染，在人体免疫功能正常的条件下并不引起疾病，有些甚至对人体有益，如肠道菌群（大肠杆菌等）可以合成多种维生素。