1. 如何判断革兰氏染色法结果是否正确
革兰氏染色法 最常用的细菌鉴别染色法之一。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法,即将标本固定后,先用龙胆紫染色,雀坦粗加碘液媒染后用酒精脱色,再用稀释复红复染。染色后除可以看到细菌形态外,还可将细菌分为两大类,即不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌(G+)。被酒精脱色复染成红色者为革兰顷镇氏阴性菌(G-)。革兰氏染色原理尚不肯定,可能与细菌所带核糖核酸、细菌壁结构通透性、等电点等因素有关。致病菌如金黄色葡萄球菌、绿色溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、碳疽杆菌等属革兰氏染色阳性菌。百日咳杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆信晌菌、霍乱弧菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌等均属革兰氏阴性。所以根据细菌的革兰氏染色性质,可以缩小鉴定范围,有利于进一步分离鉴定,以对疾病做出诊断。又由于各种抗生素的抗菌谱不同,革兰氏染色尚可做为选用抗生素的参考。
参考资料: http://www.foodmate.net/topic/term/14217.html
2. 什么是革兰氏染色法染色过程应注意什么
一、定义
革兰氏染色法是由1884年由丹麦医师gram创立的一种复染色法,用以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,对其进行分类鉴定。
二、染色原理
1、g﹢菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性屏障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔隙缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。
2、gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,番红染液复染后呈红色。
三、染色目的
在细胞发放之前,利用标准的革兰氏染色法对即将发放的细胞悬液进行检测,判断细胞悬液中是否含有革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。
四、染色方法步骤
1
、涂片:取灭过菌的载玻片于实验台上,用移液枪吸取10ul待检样品滴在载玻片的中央,用烧红冷却后的接种环将液滴涂布成一均匀的薄层,涂布面不宜过大。
2、
干燥:将标本面向上,手持载玻片一端的两侧,小心地在酒精灯上高处微微加热,使水分蒸发,但切勿紧靠火焰或加热时间过长,以防标本烤枯而变形。
3、固定:固定常常利用高温,手持载玻片的一端,标本向上,在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次,共约2-3秒种,并不时以载玻片背面加热触及皮肤,不觉过烫为宜(不超过
60℃),放置待冷后,进行染色。
4、
初染:在涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫1-2滴,使染色液覆盖涂片,染色约1min。
5
、水洗:斜置载玻片,在自来水龙头下用小股水流冲洗,直至洗下的水呈无色为止。
6
、媒染:用100-1000ul移液枪吸取约300ul碘液滴在涂片薄膜上,使染色液覆盖涂片,染色约1min。
7
、水洗:斜置载玻片,在自来水龙头下用小股水流冲洗,直至洗下的水呈无色为止。
8
、脱色:斜置载玻片,滴加95%乙醇脱色,至流出的乙醇不现紫色为止,大约需时20-30s,随即水洗。
9
、复染:在涂片薄膜上滴加沙黄染液1-2滴,使染色液覆盖涂片,染色约1min。
10
、水洗:斜置载玻片,在自来水龙头下用小股水流冲洗,直至洗下的水呈无色为止。
11
、干燥、观察:用吸水纸吸掉水滴,待标本片干后置显微镜下,用低倍镜观察,发现目的物后滴一滴浸油在玻片上,用油镜观察细菌的形态及颜色,紫色的是革兰氏阳性菌,红色的是革兰氏阴性菌。
五、注意事项
1、革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响,难以严格规定。
2、染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后,应吸去玻片上的残水,以免染色液被稀释而影响染色效果。
3、选用幼龄的细菌。g+菌培养12h-16h,e.coli培养24h。若菌龄太老,由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。
3. 染色体检查货车核型分析是确诊哪类遗传病的主要方法
染色体检查货车核型分析是确诊哪类遗传病的主要方法是染色体病。遗传病是指由遗传因素决定的疾病,是指由于遗传物质发生改变导致的疾病,而不是顾名思义的指遗传病都是一定有家族遗传的病。现代遗传学将人类遗传病分为5类:染色体病、单基因病、喊闭晌多基因病、体细胞遗传病、线粒体遗传病。染色体病是遗传病的一种。正常人共有23对染色体,一条来源自父亲,一条来源自母亲,其中性染色体是决定人类性别的,女性是X染色体,男性Y染色体,所以人类共24种类型染色体。当这些染色体结构或数郑锋目发生异常时,就会引起染色体病。在染色病中,最态键常见的就是唐氏综合征,又名21三体,先天愚型。所以孕期一般要常规行唐氏筛查,高风险的孕妇需要进一步行产前诊断。
4. 免疫组化是什么
第一、免疫组化,主要是用于病理诊断预后判断和治疗效果的预测,能够提高病理诊断水平,对临床有指导意义。例如恶性黑色素兆世瘤HMB45为阳性表达,可以帮助明确诊断。除此之外,还有用于疾病的病理诊断和分型、探讨其发病机制,例如胃肠道间质瘤其C-kit基因突变碧猜谨可以用悔基靶向药物治疗,效果较好。
5. 免疫组织化学染色法的检查过程
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法,称荧光抗体法。用已知的荧光抗原标记物示袜敏踪或检查相应抗体的方法,称荧光抗原法。免疫荧光组织化学分直接法、间接法和补体法。一、直接法(1) 检查抗原方法这是最简便、快速的方法,用已知特异性抗体与荧光素结合,制成特异性荧光抗体,直接用于细胞或组织抗原的检查。此法特异性强,常用于肾穿刺,皮肤活检和病原体检查,其缺点是一种荧光抗体只纯弊能检查一种抗原,敏感性较差。(2)检查抗体方法将抗原标记上荧光素,用此荧光抗原与细胞或组织内相应抗体反应,而将抗体在原位检测出来。二、间接法(1)检查抗体(夹心法)方法此法是先用特异性抗原与细胞或组织内抗体反应,再用此抗原的特异性荧光抗体与结合在细胞内抗体上的抗原相结合,抗原夹在细胞抗体与荧光抗体之间,故称夹心法。(2)检查抗体方法用已知抗原细胞或组织切片,加上待检血清,如果血清含有切片中某种抗原的抗体,抗体结合在抗原上,再用间接荧光抗体(抗种属特异性IgG荧光抗体)与结合在抗原上的抗体反应,在荧光显微镜下可见抗原抗体反应部位呈现明亮的特异性荧光。此法是检验血清中自身抗体和多种病原体抗体的重要手段。(3)检查抗原法此法是直接法的重要改进,先用特异性抗体与细胞标本反应,随后用缓冲盐水洗去未与抗原结合的抗体,再用间接荧光抗体与结合在抗原上的抗体结合,形成抗原-抗体-荧光抗体的复合物。同直接法相比荧光亮度可增强3或4倍。此法除灵敏性高外,它只需要制备一种种属间接荧光抗体,可以适用于同一种属产生的多种第一抗体的标记显示,这是现在最广泛应用的技术。三、补体法(1)直接检查组织内免疫复合物方法用抗补体C3荧光抗体直接作用组织切片,与其中结合在抗原抗体复合物上的补体反应,而形成抗原-抗体-补体—抗补体荧光抗体复合物,在荧光显微镜下呈现阳性荧光的部位就是免疫复合物上补体存在处,此法常用于肾穿刺组织活检诊断等。(2)间接检查组织内抗原方法常将新鲜补体与第做好族一抗体混合同时加在抗原标本切片上,经37℃孵育后,如发生抗原抗体反应,补体就结合在此复合物上,再用抗补体荧光抗体与结合的补体反应,形成抗原-抗体-补体—荧光抗体的复合物,此法优点是只需一种荧光抗体可适用于各种不同种属来源的第一抗体的检查。[1]四、双重免疫荧光组织化学标记方法在同一组织标本上需要同时检查两种抗原时要进行双重荧光染色,一般均采用直接法,将两种荧光抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,加在标本上孵育后,按直接法洗去未结合的荧光抗体,抗A抗体用异硫氰酸荧光素标记,发黄绿色荧光;抗B抗体用TMRITC或RB200标记,发红色荧光,可以明确显示两种抗原的定位。
6. 常用的鉴别染色法属于
1 细胞生物学
2 因为常用的鉴别染色法,如吉姆萨染色法、透明质酸酶染色法等,都是用于细胞棚搭轿学和组织学的研究中,用于鉴别和区分不同种类的细胞或组织。
3 此外,鉴别染色法还常用于医学诊断中,比如常见的链肆血液常规染色法,可以通过染色的方式看出血液中的不同细胞类型和数量,帮助医生进行疾病诊断和枝斗治疗。
7. 染色体怎么检查
染色体的检查包括传统的细胞核型分析、荧光原位杂交即FISH、现代分子生物学技术、定量荧光聚合酶链式反应、多重连接探针扩增技术MLPA、二代测序、比较基因组杂交aCGH等方法。建议你到西宁现代妇产医院咨询,医疗设备专业水平都很高
8. 疑似猪肺疫病料涂片镜检常用染色方法
瑞氏染色。疑似猪肺疫病料涂片镜检常用染色方法,病料组织或体液涂片用瑞氏染色、美蓝染色或姬姆萨染色镜检,见菌体多呈卵圆形,两端着色较深,像两个并列的球菌。如只在肺脏内见有极少数的巴氏杆菌,而其余脏器没有见到,并且肺雹碧纳脏又无源没明显病变时,是带菌猪而不能诊断为猪肺疫慧巧。