血清输液检测方法

1. 临床上常用的血清学检查方法有哪几种

主要有沉淀试验、凝集试验、补体结合试验、中和试验及与标记抗体有关的试验。

（1）凝集试验

包括玻板凝集法、全血平板凝集法、试管凝集法和琼脂扩散法。

①全血平板凝集反应

此法常用于传染性鼻炎、鸡白痢、鸡伤寒、鸡慢性呼吸道病等禽病的检疫和监测。

②琼脂扩散反应

当适当比例的抗原抗体在含有电解质的琼脂网状基质中自由扩散相遇时，形成肉眼可见的白色沉淀线。此法常用于鸡传染性法氏囊病、鸡马立克氏病、禽流感、禽脑脊髓炎、禽腺病毒感染等病的诊断，还常用于抗体监测和血清学流行病学调查。

（2）血凝与血凝抑制试验

试验原理：某些病毒能够与人或动物的红细胞发生凝集，称为血凝反应（HA）。这种凝集反应可被加入的特异性血清所抑制，称为红细胞凝集抑制试验，即血凝抑制反应（HI）。

此方法常用于鸡新城疫、禽流感、鸡产蛋下降综合征等病毒的诊断和血清学监测。

2. 用血清检测是指把人的血输进血清还是血清输进人体

将血液抽出之后自然放返老置一段时间，随着血液凝固，会逐渐析出淡黄色的液体，而这个液体就渣世或是血清，使用血清检测，就是说使用上述析出的黄色液体进行检测，当然如果因为其他情况造成血清受到影响，比如红细胞被破坏，饮食后有大量乳糜微粒等情况，就会影响血清的检测结果。
使用血清检测的项目主要有免疫学检验和临如伍床生化检验的项目。

3. 采集血清检验标本时应

采集血清检验标本时应注意的事项御销：

4. 猪病常用的血清学诊断方法有哪些

抗原和相应的抗体在动物体内或体外都能发生特异性结合反应，这种反应称为抗原抗体反应，习惯上把体内的抗原抗体反应称为免疫反应，体外的抗原抗体反应称为血清学反应，因为抗体主要存在于血清中。

血清学反应可以用已知的抗体检查未知的抗原，也可用已知抗原测定未知的抗体。人们根据抗体能与相应抗原发生反应并出现可见的抗原—抗体复合物的原理，设计了许多血清学诊断方法，不仅可以检测动物体内乃至体外的病原微生物，或其抗原性成分，而且还可以测定动物机体对病原微生物的侵袭或对其抗原成分的免疫反应。在抗原—抗体复合物成不可见状态时，可以通过琼脂扩散、凝集实验以及酶标记等指示系统，使其变为可见或可测状态。

目前已知的血清学诊断方法很多，现仅介绍几种在目前条件下规模化猪场通过学习都能做到的诊断方法：

（1）凝集试验猪病诊断过程中常用的操作方法有以下几种：

①全血平板凝集试验实践中主要用于细菌性疾病的抗体检测和抗原（经分离培养后）的鉴定。现举例用已知猪丹毒抗原（丹毒杆菌的纯培养液）测定被检猪血清中的抗体。其操作步骤如下：

a.材料猪丹毒凝集抗原，玻片，9号针头，酒精棉球，酒精灯，铂耳（取血环）等。b.操作用铂耳取已知抗原1滴，置于玻片上。用酒精棉球擦拭针头，铂耳在酒精灯上灼烧消毒。用针头刺破被检猪的耳静脉，以铂耳取血与玻片上的抗原等量混合，在2～3分钟内观察结果。c.结果判定出现颗粒状的凝集，为阳性反应。否则为阴性。

②试管凝集试验是一种定量法，用于测定被检血清或其他体液中有否某种抗体及其效价，可做临床的辅助诊断，或用于流行病学监测。在猪场中，本法常用于猪布氏杆菌病的诊断。

A.材料布氏杆菌病试管凝集抗原（1∶20倍稀释），布氏杆菌病阳性血清、阴性血清（1∶25倍稀释），稀释液（0.5 %石炭酸生理盐水），灭菌小试管，1毫升吸管，试管架，待检血清等。B.操作取试管7支置于试管架上，设阳性和阴性血清及抗原对照各1支，测定管4支，以后每增加1个样品，只需增加4支测定管。

按表10示意稀释血清，加抗原，完成后每支试管内应含1毫升液体。

5. 常用的血清蛋白质含量测定方法有哪些

四种血清总蛋白质的测定的方法：

1.基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚试剂比色法 由于各种蛋白质分子中上述两种氨基酸的组成比例不同，特别是白蛋白含色氨酸为0.2%，而γ-球蛋白中含量达2%-3%，导致较大的差异。Lowry的改良法在酚试剂中加入Cu2+，集中原法和双缩脲反应两者的作用，使呈色灵敏度提高。其中75%的呈色依赖于Cu2+.反应产物最佳吸收峰在650-750nm，方法灵敏度为双缩脲方法的100倍左右。有利于检测较微量的蛋白质。但试剂反应仍易受多种化合物的干扰。

2.紫外测定法 采用280nm和215/225紫外吸收值，计算蛋白质含量280nm 是由于蛋白质分子中存在芳香族氨基酸所致。方法的特异性和准确性受蛋白分子中该种氨基酸的含量比例影响甚大。尿酸和肝红素在280nm附近有干扰。紫外区200-225nm是肽健的强吸收峰。在此区域其吸收值为280nm的10-30倍，将血清稀释1000-2000倍可以消除干扰物质的影响。

3.采用沉淀反应进行散射比浊法 用磺柳酸、三氯醋酸等配方，此方法甚为简便，不需特殊仪器，技术关键在于：①选择最佳试剂浓度及温度；②混匀技术；③选用的标准；④待测标本中的蛋白浓度。

4.染料结合法 蛋白质可与某些染料特异结合，如氨基黑（amino black）与考马亮蓝（comassive brilliant blue ）。这一性质除了可以用于电泳后的蛋白质区带染色，亦可用于总蛋白质的定量。缺点是多种蛋白质与染料的结合力不一致。考马亮蓝在与蛋白质结合后的吸收峰从465nm移向595nm，这一性质可用分光光度法来定量检测。

6. 临床化学检验血液标本的采集和处理知识

临床化学检验血液标本的采集和处理知识

临床检验的目的是为临床提供准确可靠的实验诊断依据。为了保证实验数据的可靠性，在检验医学中必须坚持全面质量控制(totalqualitycontrol,TQC。即指对影响临床检验结果可靠性的各方面因素及各个环节进虚槐罩行质量控制)和全过程质量控制(即指对实验工作的全过程进行质量控制和质量管理)。下面是我为大家带来的临床化学检验血液标本的采集和处理知识，欢迎阅读。

一、临床化学检验血液标本的定义

临床化学检验血液标本是指为完成某项或多项临床化学检验项目而采集的一定量的血液，包括抗凝及非抗凝血。

二、血液标本的采取

(一)采取部位

1.静脉采血：应用最多的采血方式。常用的静脉为肘前静脉、腕背静脉，小儿和新生儿有时用颈静脉和前囟静脉。

2.动脉采血：主要用于血气分析时。常用的动脉为股动脉、肱动脉、桡动脉和脐动脉。

3.毛细血管采血：适用于仅需微量血液的试验或婴幼儿。常用部位为耳垂、指端，小儿有时为大趾和足跟。采血针刺入皮肤深度应为2mm(<2.5mm),采血局部应无炎症、水肿等。

(二)标本类型

临床化学检验血液标本分为血清、血浆和全血3种。血清和血浆为临床常用，除前者不含纤维蛋白原外，其余多数化学成分无差异;全血只有在红细胞内成分与血浆成分相似时才用;血气分析、血红蛋白电泳等时用全血，一般临床化学分析多不用全血。

三、全血处理为血清或血浆

血液标本采取后应尽可能早地自然地使血清(浆)从与血细胞接触的明汪全血中分离出来。一般应于采血后2h内分离出血清或血浆。全血处理为血清或血浆分为离心前、离心中和离心后三个阶段，对各不同阶段均有具体要求。

(一)离心前阶段

即指标本采集到离心处理前的一段时间。

1.血清：标本离心前一般应令其自行凝集，不可用木棍等剥离凝血块。通常于室温(22~25oC)放置30~60min血标本可自发完全凝集;冷藏标本凝集缓慢;加促凝剂时凝集加快(标本采集后应轻轻颠倒混合5~10次，以确保促凝剂作用)。

2.血浆：需用血浆标本时，必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，而且采血后必须立即轻轻颠倒采血管混合5~10次(以确保抗凝剂发挥作用)，5~10min后即可分离出血浆。

3.冷藏标本：标本冷藏可抑制细胞代谢，稳定某些温度依赖性成分?但全血标本一般不能冷藏;血钾测定标本冷藏不得超过2h。血液中儿茶酚胺、pH/血气、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲状腺激素等检测时需用制冷的标本。

标本需要冷藏(2~8oC)时，标本采取后应立即将标本置于冰屑或冰水混合物(不可用大冰块)，并且必须保证标本与制冷物充分接触，保证制冷物达到标本的高度。

4.代谢抑制剂和防腐剂：某些添加剂加入血液标本中能抑制细胞代谢，可以防止血液标本贮存时分析物浓度的变化。血液葡萄糖测定时，如在差闹血液中加入氟化钠，在血细胞未分离的情况下，葡萄糖在22~25oC时可稳定24h，2~8oC时可以稳定48h;但在新生儿和儿童标本，由于红细胞压积高，用氟化钠难以控制细胞的糖酵解作用;甲醛-草酸钾抗凝保存剂不适合血糖测定;氟化钠-麝香草酚混合剂因能抑制酶活性，不适用于酶学测定。

5.标本采集现场：(1)标本采集后应尽快送往实验室，尤其当收集区温度超过22oC时此点更为重要;(2)血液标本采集后血管必须加塞、管口向上、垂直放置，以减少管中内容物振动，促进凝血完全，防止标本蒸发、污染和外溅等;(3)已收集的血液标本应温和地处理，要防止标本管振荡所造成的溶血;溶血可影响测定结果。有严重影响(使结果升高)的项目有：乳酸脱氢酶、血清门冬氨酸氨基转移酶、血清钾和血红蛋白;引起值得注意的影响的项目有：血清铁(↑)、血清丙氨酸氨基转移酶(↑)和血清甲状腺素(↓);轻度受影响(增加)的有：总蛋白、白蛋白、血清磷、血清镁、血清钙和酸性磷酸酶;(4)应避免对光线敏感的'分析物暴露在人造光或太阳光(紫外线)照射下。如VA、VB6、β-胡萝卜素、卟啉、胆红素等测定时，标本管应该用铝箔或类似物质包裹保护起来。

6.标本运送：全血标本应尽快从采血现场运送至实验室，如果运送距离较远，特别是因分析物稳定性有影响，必要时可于采血现场分离出血清或血浆后，再送往实验室;标本运送过程中要注意标本的包装、温度要求、处理方法等，要确保分析成分的稳定性;标本管在运送过程中要保持管口封闭、向上垂直放置。

7.实验室接受标本及离心标本准备：(1)要有标本收取记录(应认真核对检验中清单，对有关情况要认真记录，标本接收及处理应签字登记);(2)对接受的标本要予以分类准备离心;(3)实验室接受标本后应仍保持标本管于密闭封口、管口向上，垂直位放置。管塞移去后血中CO2丢失，会造成pH增加，离子钙和酸性磷酸酶减少，尤其pH变化会影响某些检测结果的准确性;(4)标本凝集时间要充分;加抗凝剂的血液标本可以立即离心;加促凝剂的标本可于采血后5~15min尽早离心;抗凝的全血标本(锌、锂、原卟啉等测定时)可以不离心;(5)冷藏(2~8oC)标本应保持这个温度直到准备离心。推荐用温度控制离心机;(6)离心标本前不主张用小木棒或类似器材去剥离附着于试管壁和管塞上的凝块，人为剥离会诱导溶血。如果必须露出试管壁或取下管塞时，一定要十分注意，动作一定要轻柔。

(二)离心阶段

即指标本处于离心机里的一段时间。

1.离心时间和相对离心力(RCF)：临床化学分析血液标本离心时，RCF(1000~1200)×g，离心时间为5~10min。

2.温度控制离心：离心时产热不利于分析物稳定，临床化学分析血液标本离心时必须采用温度控制离心机。一些温度依赖性分析物(如促肾上腺皮质激素、环腺苷酸、儿茶酚胺等)应在4oC分离;无特殊温度要求的分析物，离心温度应设定在20oC~22oC;温度低于15oC可以人为地使血钾测定值增高;冷藏运送的标本必须在要求的温度下离心。

3.关于再离心：标本离心最好一次完成，若需再次离心，应距上次离心相隔时间很短;对于含有分离物质的血标本绝不可以再离心。

(三)离心后阶段

指标本离心后和用于检测的血清或血浆被取出一定量之前的一段时间。

1.血清或血浆与接触的血细胞和凝块的分离应在采血后尽快(2h内)完成。

2.分离的血清或血浆的贮存：实验室的室温和血清或血浆的贮存温度、时间，是分析物稳定性和测定结果准确性的重要参数。(1)于22oC~25oC血清或血浆的保存不超过8h;(2)实验于8h内不能完成时，血清或血浆应置2oC~8oC保存;(3)48h内不能完成的实验项目，或分离的血清或血浆需贮存48h以上时，应于-20oC保存;(4)标本不可反复冻融(只能冻融一次)，且不可贮存于无霜冰箱(可造成样品温度变化);(5)离心后分离凝胶(凝胶屏障)上面的血清可保存2~5天，但必须保证凝胶的完整性;但应用非凝胶分离物质时，离心后必须立即将血清或血浆移出。(6)血清或血浆必须保存于密闭的试管中。

四、血清或血浆分离物质

是指将血清或血浆从全血中分离出来的物质，包括凝胶物质与非凝胶物质。

(一)凝胶物质

为一类具有特定粘度和特殊比重(介于血清或血浆与凝块之间的比重)的惰性凝胶物质，用(1000~1100)×gRCF离心10min，能在血清或血浆与凝块之间形成不可穿透的凝胶屏障，从而将血清或血浆与其接触的血细胞、凝块分开。

(二)非凝胶物质

是由惰性物质(玻璃、塑料、纤维、毛毡等)构成的小珠、盘、滤器、纤维塞等组成。具有介于血清或血浆与凝块之间的比重，将其轻轻加入血管中，用(1000~1100)×gRCF离心10min时，可透过血液移动至血清或血浆与血细胞、凝块之间，形成一个界面，使血清或血浆被分离出来。

(三)完整的凝胶管系统

该系统是由一个真空采血管(硅化塑料管)、内含惰性凝胶物质、促凝剂或抗凝剂组成。使用时要注意该产品必须具有相应性能证书和有效期，并且必须在其有效期内正确使用。

随着检验方法日益完善，高精档次的自动化仪器的大量应用，以及检验的科学管理和检验工作人员技术水平不断提高，明显降低检测过程中的影响因素和干扰，而分析检测前的各类影响或干扰因素相对增多。现代检验医学对检测标本的留取与收集提出较高的要求，而广大就诊患者也必需了解留取标本的基本知识，遵照嘱托，配合检验人员，以使检验结果更准确准确可靠。

门诊检验常见的标本一般包括血液(指血，静脉血)、尿、粪便、脑脊液、胸水、腹水、前列腺液、精液、阴道分泌物等，这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

标本采集注意事项

一、血液标本

尽量避免生理因素的影响，有些生理因素，如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化，有些甚至还有昼夜变化。采集血液标本的条件应尽量一致为宜，如无法避免，应说明在标本上注明该因素。

1.外周血

一般选取左手无名指内侧采血，该部位应无冻疮，炎症，水肿，破损。如该部位不符合要求，以其他手指部位代替。对烧伤病人，可选择皮肤完整处采血。由于部分血液常规检测(如白细胞计数、分类等)受生理因素影响波动过大，比较时宜便条件尽量一致。出、凝血功能的检测项目(如血小板计数，出血时间或凝血时间等)的检测，不宜服用抗凝、促凝药物，以免影响测定结果。

2.静脉血

除涉及各种止血和血栓检测等项目需采用抗凝静脉血血浆外，目前绝大多数检测项目的分析检测可直接采用静脉血的血清。在血清检测项目中，有些(如血糖，血脂等)受饮食及昼夜因素影响较大，一般以清晨空腹血标本为宜，有些在血中衰变较快(血清酶活性测定如ACP活性等)，0～4℃贮存活性减弱也不一，这些项目的检测必须及时而快速，有些(如肌酸激酶等)受运动等因素影响较大。抽血时避免溶血的发生也十分重要，尤其涉及血钾，LDH等的测定。切忌在输液的同侧静脉抽血做各项检验。

二、尿液标本

同血标本一样，尿液标本受饮食、运动、药物量等因素的影响也较大，特别是饮食的影响，故一般来说晨尿优于随机尿。晨尿是指清晨起床后的第一次尿标本，较浓缩和酸化，有形成分(如血细胞，上皮细胞，管形)相对集中便于观察。随机尿即随意一次尿，留取方便，但受饮食、运动、药物影响较甚，易于出现假阳性和假阴性结果，如饮食性蛋白尿，饮食性糖尿，维生素C干扰潜血结果等。餐后尿(午餐后2小时收集的患者尿液)适用于尿糖，尿蛋白和尿胆原的检查，此时的尿标本可增加试验敏感性，检出较轻微的病变。12小时尿细胞计数，即Addis(前晚8时排空膀胱后留取至次日8时的所有尿液)，因时间较长，细菌易繁殖，须加入防腐剂甲醛。

24小时尿(第一天晨8时排空膀胱后留取至次日晨8时的所有尿液)中化学物质的定量，包括蛋白，糖，Ca2十等，检测不同的物质，选择不同的防腐剂防腐。清洁中段尿多用于尿细菌培养，要求无菌，冲洗外明后留取标本。所有尿标本的收集都应足量，最少12m1，最好50ml，定时尿须全部收集，对女性患者应避免阴道分泌物、经血污染尿标本。

三、粪便标本

粪便标本的检测对判断消化系统疾病有重要参考价值。采集时要求用干净的件签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便，对外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材。找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集24小时粪便。查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即检查，从有脓血和稀软处取材，保温送检。

查日本血吸虫虫卵时应取粘液、脓血部分，孵化毛蚴时至少留取30g粪便，且需尽快处理。检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子于晚12时或清晨排便前自肛门周围皱处处拭取并立即镜检。隐血试验(化学法)，试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂，维生素C等整理搜集。所有粪便标本采集后1小时内应检查完毕，以防止有形成分受消化酶及pH的破坏。

四、脑脊液标本

脑脊液标本采集后立即送检，放置过久将影响检验结果：如细胞变性，破坏，导致计数和分类不被：有些化学物质如葡萄糖等将分解含量减少：细菌发生自溶影响细菌的检出率。脑脊液抽取后一般分装三个无菌管，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第三管作一般性状及显微镜检查，三管顺序不宜颠倒。因标本采集较难，全部送检和检测过程应注意安全。

五、胸腹水标本

与脑脊液标本一样，采集后的标本注意安全，及时送检。一般也分装三管，一管作常规细胞学检查，一管生化检查，一管细菌培养，顺序以与脑脊液相同为宜。

六、前列腺液标本

前列腺液标本由前列腺按摩后采集，液量少时直接滴在载玻片上及时送检，须注意防止标本蒸干，量多时收集在洁净干燥的试管中。若按摩不出前列腺液，可检查按摩后的尿液沉渣。

七、阴道分秘物标本

阴道标本采集前24小时应禁止房事、盆浴、明道检查、明道灌洗及局部上药等.取材所用器械需要清洁。一般用盐水浸湿棉拭子自阴道或阴道弯后部、宫颈管口取材，制生理盐水涂片后观察分泌物标本，经期的女性患者不宜检查阴道分泌物标本。

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7. 病毒感染的血清学诊断方法

常用的血清学方法有中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验等传统的方法，以及应用免疫学标记技术发展的酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫试验（RIA）及免疫荧光试验（IF）等特异、灵敏的微量血清学方法。
1.中和试验（NT）是指病毒在活体内或细胞培养中，被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验。它既可用来检查患病后或人工免疫后机体血清中抗体的增长情况，也可用来鉴定病毒或研究其抗原结构。中和抗体特异性高、持续时间较长，因此流行病学调查也常用此指征。
2.血凝抑制试验许多病毒能凝集鸡、豚鼠、人等的红细胞，称为血凝现象。这种现象能被相应抗体所抑制，称血凝抑制试验。其原理是相应抗体与病毒结合后，阻抑了病毒表面的血凝素与红细胞的结合。
3.酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫试验（RIA）及免疫荧光试验（IF）参见第八节细菌感染的血清学诊断方法的介绍。
4.蛋白印迹试验（Westernblot，WB）用于检测HIV抗体，是HIV感染的确认试验。应用WB也可检测病毒抗原，但一般不常用。
5.检测病毒核酸的分子生物学试验检测患者血清等标本或病毒培养物中病毒基因或核酸片段的技术有多种：①病毒核酸扩增试验即聚合酶链反应（PCR）；②核酸杂交技术，包括点杂交、原位杂交、DNA-DNA印迹杂交（Southernblot）及RNA-DNA印迹杂交（Northernblot）等；③基因芯片技术（genechip）；④病毒基因测序等。目前，分子生物学技术日益广泛地应用于对病毒及其感染的检测和研究中。

8. 血液检验标本采集方法有哪些

血液检验标本采集方法有哪些

血液检验标本分为全血、血浆、血清等。全血标本主要用于临床血液学检查,例如血细胞计数和分类、形态学检查等;血浆标本适合内分泌激素、血栓和止血检测血清标本多适合于临床化学和免疫学的检测。按照血标本采集部位的不同，分为静脉血、动脉血和毛细血管血三种。绝大多数检查采用静脉血,少数检查如血气分析、乳酸和丙酮酸测定等需要采集动脉血，毛细血管血主要用于各种微量法检查或大规模普查。下面是我为大家带来的血液检验标本采集方法有哪些的知识，欢迎阅读。

一、静脉血采集方法、注意事项和采集样品所用材料的安全处置

1、止血带或压脉器：采集静脉血时，止血带压迫静脉时间不宜过长,以不超过 40 秒为宜，

否则容易引起淤血、静脉扩张，并且影响某些指标的检查结果,如乳酸升高、pH 值降低、K + 、Ca 2+ 、肌酸激酶升高等。

2、采血时间与部位：大多数化验检查要求清晨、空腹、采集静脉血应尽可能避免在输液同时取血,输液不仅使血液稀释，而且对实验室检查结果发生严重干扰，特别是血糖和电解质。

3、避免溶血、杂质污染：采血器具必须无菌、干燥、洁净.避免特别用力抽吸和推注、避

免化学污染和细菌污染引起的溶血。因为红细胞的某些成分与血清(浆)不同，样本溶血可使

红细胞某些成分释放,影响实验室检查结果。

4、血样的采集：血样要求在每一天的同一时间采集，理想的时间是早晨 7：00 到 8：00，尤其是监测为目的时，更要保证标本采集时间的统一。最后一次食物和液体摄入应在前

一天下午 6：00 到 7：00 (急诊检验例外)。血样采集应在不服药期间，如在早晨服前。血样采集时，患者应仰卧位，采血点应在同一静脉区，通常为手臂静脉。

5、标本采集后须立即送检，放置过久影响检验结果。当取血不顺利时,切忌在同一处反复

穿刺，易导致标本溶血或有小凝块，影响检测结果。

6、采集血培养标本时应先注射厌氧瓶，尽量减少接触空气时间。

7、微量元素测定采集标本的'注射器和容器不能含游离金属。

8、采集样品所用材料的安全处置：使用后的采血针、注射器针头等锐器物应当直接放入不能刺穿的利器盒内或毁型器内进行安全处置，禁止对使用后的一次性针头复帽，禁止用手直接接触使用过的针头、刀片等锐器物;注射器针筒、棉签等其他医疗废物放入黄色医疗废物袋中，医疗废物和生活垃圾分类收集存放。消毒毁形后的医疗废物必须交给指定的医疗废物处理厂，不得擅自废弃。

二、临床化学/ 免疫检验标本

临床化学/免疫检验多用非抗凝血标本,最好使用真空负压采血管。

标本采集主要注意事项有：

1、化学项目大多数需要空腹采静脉血，多个单项化学检测项目组合检验时一般可采管血;

2、采血量视检查项目多少不同而异，通常为 4.0～5 .0ml;

3、多个组合检测项目同时采血时应按下列顺序采血：

血培养 ——无添加剂管凝血管 ——有添加剂管

有添加剂管的顺序为：橼酸盐管 ——肝素管 ——EDTA 管——草酸盐/氟化钠管

4、不论是抗凝血还是非抗凝血，为了缩短血清或血浆与血细胞的接触时间，血液标本收集后，须尽可能早地将血清或血浆从全血中分离出来，避免由此而影响检验结果的准确性。从血液标本采集开始，必须在2h 内将全血处理为血清或血浆。

1)血清(非抗凝血)：采血后标本于 22～25℃(室温)15～30min 后可自行(自发)完全凝固，禁用木棍和玻棒等剥离凝块;冷藏标本凝集较慢，加促凝剂者凝集加快。

2)血浆(抗凝血)：应采用抗凝管采血,采血后立即颠倒混合 5～10 次，采血后数分钟内可

离心分离血浆。

3)冷藏标本：用于稳定血液中温度依赖性成分(抑制细胞代谢)的检测项目，标本于 2～8℃冷藏(标本采集后立即置于冰箱中，冷藏必须充分);标本需冷藏的测定项目有：儿茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH/血气、NH3、乳酸、丙酮酸等。全血标本一般不冷藏，血钾测定标本冷藏不得>2h。全血标本切忌冷冻。

4)代谢抑制剂和防腐剂的应用：用于抑制细胞代谢。血标本中加入氟化钠后，血细胞未

分离情况下血标本中 Glu，22～25℃稳定 24h.2～8℃稳定 48h;氟化钠不适用于新生儿及儿童的 Glu 测定(因儿童 PCV 高，细胞糖酵解难以控制);氟化钠一麝香草酚混合剂不适合酶学检测(因氟化钠一麝香草酚混合剂抑制酶活性));甲醛草酸钾抗凝保存剂不适用于血糖测定。

三、红细胞沉降率(血沉，ESR )检测标本

静脉采集枸橼酸钠(109mmol/L，即 32.06g/L)抗凝血(枸橼酸钠抗凝管采血)，黑帽管。

采血注意事项：

1、单独采 1 管血，准备采血至 2 ml 刻度线(抗凝剂：全血=1：4);

2、采血后立即上下颠倒混合 5~10 次;

3、采血后应尽快送检(必须 2h 内检测)。

四、血常规(全血细胞分析)检验标本

一般用 EDTA 1.5～2.2mg/ml 抗凝(EDTA 抗凝采血管-紫帽管)。

采血注意事项：

1、采血后立即上下颠倒混匀，5～10 次.不可用力震荡;

2、应按抗凝管刻度采血至 2ml，可不用空腹;

3、采血后应尽快送检(需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定，因为超过 2

小时 WBC 形态会发生改变);

4、血型与血常规可采 1 管血。

五、75 克葡萄糖耐量试验(OGTT )/ 胰岛素释放试验/C-肽释放试验

1、病人准备：试验前 3 日，每日进食碳水化合物量不低于 250-300 克，且维持正

常活动，影响试验的药物(如：咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等)应在 3 日前停用，

试验前病人应 10～16 小时不进食。

2、标本采集：临床上常用方法是清晨抽空腹血后，口服 75 克葡萄糖，再于给糖后

0.5、1、2、3 小时各采血 2ml /1 次(共 5 次)。

3、标本保存：采血后 1 小时内分离血清并及时冷藏送检或采用血糖专用抗凝管采

血，于 2～8℃保存。

4、注意事项：胰岛素测定受溶血影响较大，采血时应避免溶血。

六、高血压系列检验标本

1、高血压三项(肾素、血管紧张素 I、II)

1)病人准备：β-阻断剂、血管扩张剂、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平，一般要在停药后 2 周测定肾素活性(PRA)，利血平等代谢慢的药物应在停药 3 周测定。不宜停药的病人改服胍乙啶等影响 PRA 较小的降压药。钠摄入量影响机体 PRA 水平，故病人测定 PRA 前 3 天应适当减少食盐摄入量，最好同时测定取血前 24 小时尿钠含量，以供分析PRA 结果时参考;

2)标本采集：静脉取血 4～5ml，拔除针头后缓慢注入到专用抗凝管中,盖好管塞后上

下颠倒5次,混匀后2500转/分,离心5～10分钟,分离血浆,将血浆装入专用血浆管后低温送检。如不能立即送检,需尽快冰冻保存(-15℃)。溶血标本不能检测;

3)标本类型、标本量：专用抗凝管采血，分离血浆，取 2ml 送检;

4)标本保存：低温冰箱保存(-15℃以下)，可保存 2 个月;

5)注意事项：申请单上应注明抽血时的体位(卧位：病人在早上 6-8 时起床前，取静脉血;立位：病人起床后活动3 小时，取静脉血。)和饮食情况(普食饮食、低钠饮食);标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保存不当、使用过期抗凝管等均可使结果受到影响。

2、醛固酮

1)病人准备：留样前应停服利尿剂至少 3 周，停服抗高血压药物 1 周;

2)标本采集：血浆醛固酮测定应采用肝素抗凝，采集后立即分离血浆，置-20℃保存

待测;尿液标本则留取 24 小时尿量，用 10～15mL 浓盐酸防腐;

3)申请单上注明：抽血时的体位(卧位、立位)和饮食情况(普食饮食、低钠饮食);

尿液标本要准确记录 24 小时尿量。

七、皮质醇标本采集及注意事项

正常人皮质醇的分泌存在昼夜节律，一般为早上 8 点或下午 4 点采血，送检时请务必在申请单上注明采血时间。

八、流式细胞术检测项目的标本采集及注意事项

1 、淋巴细胞亚群系列

标本要求：EDTA 或肝素抗凝全血 2ml(推荐 EDTA 抗凝)

注意事项：该系列项目在不同年龄段的细胞数参考值不尽相同，所以送检时请务必在

申请单上注明病人年龄。

2 、白血病免疫分型

标本要求：肝素抗凝骨髓或全血2ml

注意事项：请使用白血病免疫分型专用申请单

3、人类白细胞抗原 B27 检测(HLA-B27)/ 阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)检

测标本要求：EDTA 或肝素抗凝全血 2ml备注：保证新鲜标本，流式细胞术检测项目需要 24 小时内送检;

九、微量元素检测标本采集要求

1、所有采血人员要经过严格培训并熟悉采血过程，知晓操作技术对微量元素(尤其

是铅和锌)检测质量的影响。

2、采血人员应戴乳胶或聚乙烯手套，若手套涂粉，需用静脉采血皮肤清洁法处理手套

后进行操作。

3、血铅检测采血时按顺序用 0.2%硝酸、纯水、碘酒、酒精清洁采血区皮肤，防止环境

对血铅检测的污染。

4、橡皮塞对锌有污染，故普通采血管不可使用，请使用本中心提供的专用管。

5、采集方法：采集静脉血 0.5-1.0mL，采集后马上轻轻颠倒混匀，粘上条形码，装入

自封袋送检。

6、如不能及时送检，应放置 2-8℃冰箱保存。

7、标本凝固或含凝块，不能检测。

十、遗传学检测标本采集要求

1、标本采集：外周血标本可使用中心配送的肝素抗凝管(遗传专用)和采血针进行采集，采集后立即将试管轻轻颠倒混匀，以免凝血;脐带血标本、骨髓标本可以在穿刺成功后，打开中心配送的肝素抗凝管盖，将脐带血或骨髓注入采集管中，立即将试管轻轻颠倒混匀，以免凝血，请注意无菌操作，不要污染管盖。请避免使用注射器采集标本后直接注入采集管的方式进行标本采集，以免引起溶血;请勿使用 EDTA 等抗凝管采集标本。

2、标本量：外周血、脐带血、骨髓各 4ml;

3、标本送检：合格标本须于采血后当天送至遗传实验室，故请于标本采集后及时通知艾

迪康工作人员接收标本;标本有溶血、凝血现象，也视为不合格标本。骨髓标本应尽快送

至实验室。

4、标本保存：标本采集后置于 18～25℃保存，不可冷冻，不可放置于高温环境中。

5、申请单填写：请完整填写申请单，尤其是标本采集时间、性别、病史、临床诊断等。

十一、基因检测标本采集要求

1、所有用于基因诊断的标本必须用无菌试管或容器留取，严禁使用肝素抗凝管，采集标

本时注意无菌操作。

2、为避免污染，送检基因诊断标本项目需单人单项目单管。

3、采集方法：

1)血液标本

抽取病人静脉血，置无菌试管中室温自然凝固或 2000 转/分离心，取分离出的 EDTA 抗凝血浆/血清送检;

2)女性分泌物标本

(1) 分泌物标本采样应在非月经期进行;采样前 3 天内不使用阴道内药物，不冲洗阴道;24 小时内不应有性行为;

(2)采集时先用棉签将宫颈口或尿道口过多的分泌物轻轻擦去，更换棉拭子，将棉拭子伸入宫颈，通过上皮交界处，旋转 3～5 周，以保证取得较多的柱状上皮标本，对于怀疑HPV 感染的患者，尽量采集病变部位标本，可提高 HPV 的检出率。将取样后的棉拭子放入配套的软管中，旋紧管盖;

(3)男性分泌物标本先清洁尿道口，将棉拭子伸入男性尿道 1cm，旋转 3～5 次获得标本，将取样后的棉拭子放入配套的软管中，旋紧管盖;

(4)疱疹液或疣体标本：对于生殖器或肛周有疣状体增生，怀疑为尖锐湿疣者，宜直接采集疣体组织置于标本管中送检。备注：疣体标本时，需要在申请单上的标本类型栏处写上“疣体”。

4 、标本保存：检测靶核酸为 DNA 的标本，可在 2～8℃下保存 3 天;检测靶核酸为 RNA

的标本，应保存在-20℃下。

十二、骨髓检查的要求和注意事项

1、涂片要求：二张血片，六张骨髓片，怀疑白血病则需八张骨髓片。骨髓血片注明“B”，骨髓片注明“M”，以示区别。

2、申请单注意事项：

1)病例摘要:应填写全面，尤其是肝、脾、淋巴结、出血状况等与血液病相关的症状以及药物的应用等均应填写清楚;

2)化验结果：血常规结果一定不能缺，如果可能，MCV、MCH、MCHC及分类也一并填上;

3)采取骨髓部位也应填上，如果采取骨髓时不顺，应重抽，以免耽误病人;

4)写上主治医生联系方式，如科室电话、手机号码等(以便与临床密切联系)。

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9. 测定血清总蛋白的参考方法是

、总蛋白检测方法:凯氏定氮法

将血清与强酸一起加热消化,使血清中的含氮化合物转化为铵盐,再加碱使铵盐成为氨进经蒸馏分离出来,最后用酸滴定测定氮量,按每克氨相当于6.25g蛋白质计算蛋白质的浓度。

2、总蛋白检测方法:双缩脲法

蛋白质中的肽键(-CONH-)在碱性条件下与Cu2+络合成紫红色复合物,产生的颜色强度在一定范围内与蛋白质含量成正比。

3、总蛋白检测方法:酚试剂法

蛋白质分子中的酪氨酸残基和色氨酸残基能够和酚试剂中的磷钨酸-磷钼酸反应生成蓝色化合物。Lowry改良法在酚试剂中加入Cu2+,提高了呈色的灵敏度,其中75%呈色靠铜离子产生。Lowry改良法的灵敏度为双缩脲法的100倍左右。

总蛋白检测方法

4、总蛋白检测方法:UV法

这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。从而显得结果很不稳定。蛋白质直接定量方法,适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。

5、总蛋白检测方法:BCA法

原理 BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂混合一起即成为苹果绿,即BCA工作试剂。在碱性条件下,BCA与蛋白质结合时,蛋白质将Cu2+还原为Cu+,工作试剂由原来的苹果绿色变为紫色复合物。562nm下其光吸收强度与蛋白质浓度成正比。

BCA蛋白浓度测定试剂盒,Abbkine的蛋白质定量试剂盒(BCA法)提供一个简单,快捷,兼容去污剂的方法,准确定量总蛋白。