atp含量检测的方法

⑴ 手持ATP荧光检测仪的ATP方法使用和评价

ATP荧光检测法能在十几秒内实现检测，它大大提升了传统细菌培养法24-48小时的工作效率，ATP方法的实现包括仪器、试剂和如何使用三大要素。 是影响准确性和一致性的关键之一，可按照<<医院消毒卫生标准附录A（规范性附录）采样及检查方法>>等规范要求再参照手持式ATP仪说明书采样、检测、计算得出结果并记录报告。采样：（面积类）将ATP拭子采样棒一支在物体表面或双手指曲面从指跟到指端来回涂擦个两次（一只手涂擦面积约30cm2），并随之转动采样拭子。（体积类桥羡卖）将ATP拭子采样棒一支在待测液体充分浸湿。检测：将拭子放入手持ATP仪，获得被测样本与细菌污染程度相对应的ATP生物荧光值，得出菌落数指标（详见下文操作步骤及定标评价）。另外天隆牌ATP仪自带的专用软件能自动将ATP荧光值储存、处理和传输。
以上取样、检测全过程在1分钟之内快速完成，比起24-48小时的传统细菌培养优势巨大。细菌数量与细菌内所含ATP量有明确的相关性，通过检测ATP含量可间接得出细菌数量，即ATP荧光检测仪检测结果显示的发光值——相对照度单位RLU读数与常规细菌培养法结果菌落数CFU具有很高的相关敏逗性，两者没有统计上的显着差异，因此这也是ATP荧光法细菌检测的理论基础。举例来说，某食品加工厂上班前使用ATP检测仪对生产工人进行手卫生检测，检测值<80RLU合格参考值时，判定洗手消毒合格；检测值≥80RLU合格参考值时判定洗手消毒不合格，需要重新洗手直至满足规定的合格参考值才能上岗工作，合格参考值（如80）的确定需科学合理，不同应用场合不建议规定统一的参考值，须根据不同品牌ATP荧光仪、ATP试剂、被测对象洁净度不同要求等具体情况和对一定量的检测数据进派岩行统计学分析来确定。

⑵ promga atp 检测试剂盒三种型号怎么选择

三种型号的检测方法都为一步法生物发光检测，灵敏度（384孔板）均为10个活细胞，反应时间都在10分钟。不同之处是各盒子的试剂组成不同，对巧瞎实验应用及操作上也不一样。可根据实际需要来选择。以下为各试剂盒检测原理及包含规格。

1、CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay，基于活细胞ATP含量检测的快速细胞活力检测法。在国内外被广泛应用和公认的高灵敏度发光检测法，细胞活力检测的金标准。

厚百（holdbio）以上回答为你选择以上试剂盒时源山提供参考。祝实验顺利！

⑶ 怎么使用atp生物荧光检测仪，有人懂吗

ATP生物荧光检测仪操作使用方法，供大家参考：
1、开机预热，30秒后即进入工作状态；
2、将一体化试剂采样棉签棒从超净管中拔出准备采样；
3、对被测物进行采样；
4、采样完后放进超净管中旋紧密封；
5、按压一体化试剂棒顶部使密封腔内试剂自动流入超净管中与棉签棒上标本发生ATP反应；
6、按压仪器顶部橙黄色按钮使试剂舱盖自动弹开；
7、将正在发生反应的一体化试剂插入仪器试剂舱接受检测；
8、经过十几秒检测时间仪器完成标本检测，自动显示、存储、传输ATP检测结果。

⑷ 细菌总数的检验方法是什么

细菌总数是水质参数之一，指单位体积水中的细菌总量。其检验方法是:在玻璃平皿内,接种一毫升水样或稀释水样于加热液化的营养琼脂培养基中，冷却凝固后在37°C培养24小时，培养基上的菌落数或乘以水样的稀释倍数即为细菌总数。有的国家把培养温度定为35°C或其他温度，也有把培养时间定为48小时的。

⑸ 什么是ATP检测

ATP是生物的直接能量供体，生命活动所需的能量最终都以ATP的形式来提供。每种生物体内的ATP含量一般都在某一范围内。荧光素是一种在氧气存在的情况下，能氧化发出荧光的分子。ATP拭子配有裂解液和反应液两种溶液，样品首先与裂解液接触，裂解液中将使样品中的菌体裂解，释放出体内的ATP。再与反应液混合，反应液中的荧光素酶催化荧光素与氧气的反应，利用ATP释放的能量发出荧光，发光强度与ATP的量成正比。仪器可读出荧光强度，输出为RLU值，反应出ATP的量，进而可推算出样品中菌体含量范围。拭子方面你可以看看赛思锐的，听说最近开发二代产品比国外的好

⑹ 有没有办法可以测定细胞内ATP含量

有没有办法可以测定细胞内ATP含量
ATP检测试剂盒(ATP Assay Kit)可以用于检测普通溶液、细胞或组织内的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。细胞和组织样品一步裂解即可完成样品制备，检测灵敏度高达1nmol/L，化学发光可以持续稳定达30分钟，并且获得的样品还可以同时进行Western检测。
ATP，作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP水平的改变，会影响细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下，ATP水平会下降，而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。
样品制备非常简单。本试剂盒提供了可以用于细胞和组织裂解的ATP检测裂解液，简单裂解后即可用于ATP检测。无需进行高氯酸或三氯乙酸(TCA)抽提，或样品裂解后的煮沸等繁琐操作。

⑺ 现场快速检测仪atp荧光检测仪可以测定水质的什么

1、atp荧光检测仪（水质微生物检测仪器）仪器可快速检测各种水质中微生物、细菌含量。设备为全新升级产品，大屏幕触摸显示屏，代替传统按键。操作采用生物化学反应方法检测ATP含量，ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷（ATP）。ATP拭子含有可以裂解细胞膜的试剂，能将细胞内ATP释放出来，与试剂中含有的特异性酶发生反应，产生光，再用荧光照度计检测发光值，微生物的数量与发光值成正比，由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP，所以ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少，用于判断卫生状况。
2、仪器特点：
实用性 —— 可根据环境检测需求设定上下限值，做到数据快速评估预警，表面洁净度快速筛查。
灵敏度高 —— 10-15～10-18 mol
速度快 —— 常规培养法18-24h以上，而ATP只需要十几秒钟 .
可行性 —— 微生物数量与微生物体内所含ATP有明确的相关性。 通过检测ATP含量，可间接得出反应中微生物数量
可操作性 —— 传统培养方法需要在实验室由经过培训的技术人员进行操作；而ATP快速洁净度检测操作非常简便，只需简单的培训即可由一般工作人员进行现场操作。
体验更好 —— 试子套管采用插拔式灵活设计，可定期清洗长期使用，延长仪器寿命。

⑻ atp提取为什么沸水浴

（1）荧光素酶 发光强岩码度与ATP的含量成正比 （2）温度 （磷酸）缓冲液 化学能→光能粗祥哪 （宴早3）e 荧光素浓度、ATP浓度 （4）大致相同且相对稳定

⑼ 求助，如何检测细胞的ATP

您好3M微生物快速检测片包括：细菌总数测试片，乳酸菌测试片，大肠菌群测试片，大肠杆菌(同时检测大肠菌群)测试片，金黄色葡萄球菌测试片，霉菌酵母菌测试片，肠杆菌科测试片，环境李斯特测试片，快速大肠菌群测试片，高灵敏度大肠菌群测试片，沙门和李斯特试剂盒，3M快速涂抹棒，电子移液枪，ATP荧光检测仪。3M微生物快速检测片是一种检测微生物的快速检测方法，操作简单，结果准确，只需要三步即可完成，接种，培养，判读。不需要很熟练的化验技巧。Petrifilm能减少测试时间。对于大肠菌群测试时间能从48小时以上减少到24小时，对于大肠菌群，测试时间能从120小时减少到24小时，而金黄色葡萄球菌的测试时间能从96小时以上减少到24小时。操作简单，无须验证实验，结果准确。因此，使用Petrifilm，你将能得到更好的现金流，减少库存和储存的费用，更好的财务控制以及赢得更有利的市场时间。

⑽ 微生物是怎样获得所需ATP的

我这里有一篇文献是关于ATP荧光技术检测细菌生长的
《荧光快检：生物传感器的应用不是梦——访沈阳中科靓马生物工程有限公司技术总监金振华教授》
ATP荧光法是根据萤火虫发光原理开发的快速检测技术。萤火虫会发光是由于它能合成将化学物质的化学能转变为光能的生物催化剂，萤火虫荧光素酶（简称虫光素酶，luciferase）、虫荧光素（D-luciferin）以及ATP(三磷酸腺苷，所有细胞生物都能产生的能源物质)。在有氧条件下，虫荧光素酶催化虫荧光素生成氧化荧光素并发出荧光。如果具备上述条件，即使在萤火虫体外的系统也可以发出荧光。早在20世纪50年代末，美国太空总署就已经利用萤火虫荧光素酶建立了快速超微量ATP检测技术，60年代末曾对地球土壤样本的ATP进行了检测，蚂春并分别在日后探测月球、火星是否存在生命中得到应用。基于虫光素酶的ATP检测商业应用则始于80年代后期。最初，是通过养殖萤火虫幼虫获得虫光素酶，随着基因工程技术的发展和应用，科学家从萤火虫细胞中取出编码萤火虫酶的基因，并将其引入细菌细胞。这样，通过生物发酵在短短的十几个小时内就可以得到大量的虫光素酶。
2003年沈阳中科靓马引入由中科院发育所金振华教授发明的“含荧光素酶基因的新型菌株及虫光素酶的生产”专利项目，经过几年的产业化探索，终于在2005年后开始批量生产拥有自主知识产权的虫光素酶、虫荧光素制剂，并于2007年完成相关检测产品的配套，实现了食品样品的细菌总数快速检测。基于虫光素酶的ATP荧光检测原理虫光素酶只有在ATP存在时才会催化虫荧光素发生反应，并产生荧光。因此，如果在虫光素酶、虫荧光素过量的情况下，萤光强弱将只取决于反应系统中ATP的数量。以样品中细菌检测为例，细胞数越多，ATP数量也越多，发出的荧光就越强。也就是说，在特定条件下，荧光值与ATP的数量是呈线性相关的；而且，荧光值很容易通过光度计准确计量。所以，在排除样品中非细菌ATP干扰的情况下，只要得到相对荧光值和细菌细胞数的关系曲线，然后根据纯ATP的相对荧光值与细胞数的标准曲线，就能快速确定样品中细菌的细胞数。
ATP快检系统的组成部件及其作用目前，依据萤火虫发光原理并用于生物量、酶和代谢产物检测的应用系统已经有很多种。尽管各类检测系统的应用目的、操作方法、样品来源各不相同，但在组成上都闷扰耐包括以下几个部分。
1．试剂系统试剂系统包括促使荧光反应发生所需的所有反应试剂和ATP有效提取试剂。具体包括体细胞裂解试剂组、细菌细胞裂解试剂组和荧光反应试剂组。体细胞裂解试剂组可以专一有效地裂解样品中的非细菌细胞（体细胞）并释放ATP出ATP，然后通过过滤比色杯底部的滤膜将其排除。细菌细胞裂解试剂组主要作用是，有效地裂解细菌细胞并释放出ATP以便检测。同时，为了避免ATP降解而影响检测结果的李衡真实性，细菌细胞裂解试剂应能使ATP降解的酶迅速失活。荧光反应试剂组则包括能与样品中细菌ATP相互作用并发出荧光的虫萤光素和虫光素酶。
2．取样器及样品预处理装置该部分包括可以定量取得不同物理状态待检样品的取样器，用于加压排出体细胞ATP的加压器、供反应用的带膜比色杯，杯架以及用于样品浓缩的专用浓缩器等。
3．微量光度计微量光度计，即微量荧光检测仪器。按具体需要，光度计除了用于计量、显示荧光值的屏幕外，还具备与个人电脑或自动打印机联用的外接口，以便记录、储存有关数据资料以供产品质量或卫生监控趋势分析。
ATP快速检测技术的优势一般来说，要实现快速检测有赖于待检样品在反应过程能够产生易于检测的声、光、磁等信号。ATP荧光快速检测就是由于产生了容易检测的荧光而实现的。在卫生监测方面，它具有常规检测无法比拟的优势。实践和文献资料都表明，用快检系统检测到的荧光值，即总ATP值（指来自细菌和事物残渣两部分的ATP）作为卫生监测指标，无论是“时效性”或实际效果都大大优于通过目测或细菌平皿计数的效果。因此，有观点认为，可以用ATP的总量作为判断卫生状况是否良好的一个标准。
1．快速、准确常规平皿计数法检测细菌总数，是让细菌在LB培养基上培养成肉眼可见的细菌菌落。由于样品稀释不均等原因，一个菌落往往由两个或多个细菌细胞构成，而且LB培养基只适合需氧或半需氧细菌的生长。因此，只能得到此类细菌的数量。采用ATP荧光快检法可检测到所有细菌、真菌和藻类，且1-5分钟即可得到实时检测结果，操作简单，时间短。平皿计数法则需要1-5天，所得结果难以反映实际卫生状况。
2．样品量少由于虫光素酶对ATP的反应非常灵敏，通过发光反应能够检测低于0.1皮克分子（10-12mol）ATP，因此，可用于低细菌含量样品的检测。例如经过0.45um膜过滤除菌后的啤酒细菌含量很低，不是常规方法所能检测出的，而通过ATP荧光法的浓缩处理可以检出。ATP快速检测技术的应用“ATP荧光法细菌总数快速检测系统”在全程监测中的应用自20世纪90年代至今，根据萤火虫发光原理研发成功并投放市场的产品已有多种，如中科靓马开发的“ATP荧光法细菌总数快速检测系统”可用于食品、饮料、乳品加工生产的全程监测：在生产加工前，可用于生产设施清洁、消毒效果的检测，原辅料细菌总数的检测；在加工生产过程中，可用于生产设备关键控制点（例如供水、通风阀门）的卫生学监测，影响乳品发酵饮料、酒类特殊微生物总数的检测；在加工生产后，可用于成品污染细菌总数的检测。另外也可用于环保、水政、海关检疫等执法部门对各种样品中微生物（细菌总数）的快速检测。ATP快检在HACCP中的应用通过对食品生产线或周边卫生环境的研究发现，如果用平皿计数法得到的生产线上某点的细菌总数很少或无菌，而通过ATP荧光检测法得到的ATP值很高，那么该检测点在之后容易大量滋生微生物。经过分析后认为，通过ATP荧光检测得到的ATP总值来自残渣和微生物两部分。并且多数情况下，来自微生物的比例较小。因此，可以通过ATP荧光检测的ATP值判断检测点是否会被重新污染，而不必通过依据细菌细胞ATP值折算的细菌菌落总数来判断，但是关键是要确定不同生产线不同检测点的ATP临界值。据此，发达国家已经将ATP荧光法检测用于HACCP中，对食品原料及经过清洁、消毒后的食品原料接触表面是否达到卫生标准做出评估；然后对容易引起微生物污染的关键部位实施重点监控。例如，通过ATP快速检测，可以判断已经达到卫生标准的部位或表面，在常规消毒后到新一轮生产的间歇时间，是否存在污染的可能性；进而制订出既符合本单位情况，又符合卫生要求的ATP数值范围。掌上ATP快速检测仪的应用目前，掌上ATP快速检测仪已经应用于生活的方方面面，在食品方面的应用主要是对饭店、列车上的餐具进行卫生状况的检测。我国铁道部决定，在2008年奥运会之前，将在列车上采用沈阳中科靓马生物工程有限公司掌上快速检测仪代替之前采用间接检测氯离子的方法对餐具进行卫生检测。此外，基于虫光素酶的ATP快速检测还可应用于其它更多领域和目的的检测，如用于自来水检测、桶装水无菌状况的检测、部队野战饮食中炭疽杆菌的检测及环境监测、临床检测等。