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哪种方法可用于基因突变定量检测

发布时间:2023-03-30 12:02:44

1. 以下哪些方法可以直接用于基因点突变的检测 a,dna测序 b,pcr-rflp技术 c,dna

以下哪种检友袭测技术不属此洞于DNA水平的基因诊断( )
A.PCR B.Northern blotting C.Southern blotting
D.好扒兄RFLP分析 E.ASO
答案B

2. 基因突变的检测方法有哪些

基因突变的检测方法可以用放射性标记的基因探针进行检测

3. 基因突变的检查方法有哪些

基因突变检测方法: PCR-SSCP法是在非这性聚丙烯酰胺凝胶上,短的单链DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同构象,一个碱基的改变将影响其构象而导致其在凝胶上的移动速度改变。其基本原理为单链DNA在中性条件下会形成二级结构

4. 基因突变检测方法

基因突变检测方法:
PCR-SSCP法是在非这性聚丙烯酰胺凝胶上,短的单链DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同构象,一个碱基的改变将影响其构象而导致其在凝胶上的移动速度改变。其基本原理为单链DNA在中性条件下会形成二级结构,这种二级结构依赖于其碱基组成,即使一个碱基的不同,也会形成不同的二级结构而出刺同的迁移率。由于该法简单快速,因而被广泛用于未知基因突变的检测。
异源双链分析法(HA)
HA法直接在变性凝胶上分离杂交的突变型一野生型DNA双链。由于突变和野生型DNA形成的异源杂合双链DNA在其错配处会形成一突起,在非变性凝胶中电泳时,会产生与相应的同源双DNA不同的迁移率。该法与SSCP相似,所不同的是SSCP分离的是单链DNA,HA法分离的是双链DNA,也只适合于小片段的分析。
突变体富集PCR法(mutant-enriched
PCR)本法的基本原理是利用ras基因家族某个密码子部位存在已知的限制性内切酶位点,如K-ras基因第12密码子的BstNI位点,第13密古巴子有BgⅠⅡ位点。用链续二次的巢式PCR来扩增包括K-ras第12、13密码子的DNA片段,在两次扩增反应之间用相应的内切酶消化扩增的DNA片段,野生型因被酶切而不能进入第二次PCR扩增,而突变型则能完整进入第二次PCR扩增并得到产物的富集。

5. 基因检测最方便最快捷最准确的方式有哪些

需要按照实际需求去选择,没有哪个最好的说法,合适的就是最好的常用基因诊断技术:一、Southern印迹法(Southern blot)基本原理是:硝酸纤维膜或尼龙滤膜对单链DNA的吸附能力很强,当电泳后凝胶经过DNA变性处理,覆以上述滤膜,再于其上方压上多层干燥的吸水纸,借助它对深盐溶液的上吸作用,凝胶上的单链DNA将转移到滤膜上。转移是原位的,即DNA片段的位置保持不变。转移结束后,经过80℃烘烤的DNA,将原位地固定于膜上。当含有特定基因片段已原位转移到膜上后,即可与同位素标记了的探针进行杂交,并将杂交的信号显示出来。杂交通常在塑料袋中进行,袋内放置上述杂交滤膜,加入含有变性后探针的杂交溶液后,在一定温度下让单链探针DNA与固定于膜上的单链基因DNA分子按碱基到互补原理充分结合。结合是特异的,例如只有β珠蛋白基因DNA才能结合上β珠蛋白的探针。杂交后,洗去膜上的未组合的探针,将Ⅹ线胶片覆于膜上,在暗盒中日光进行放射自显影。结合了同位素标记探针的DNA片段所在部位将显示黑色的杂交带,基因的缺失或突变则可能导致带的缺失或位置改变。二、聚合酶链反应近年来,基因分析和基因工程技术有了革命性的突破,这主要归功于聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)的发展和应用。应用PCR技术可以使特定的基因或DNA片段在短短的2-3小时内体外扩增数十万至百万倍。扩增的片段可以直接通过电泳观察,也可用于进一步的分析。这样,少量的单拷贝基因不需通过同位素提高其敏感性来观察,而通过扩增至百万倍后直接观察到,而且原先需要一、二周才能作出的诊断可以缩短至数小时。三、扩增片段长度多态性小卫星DNA和微卫星DNA的长度多态性可以通过PCR扩增后电泳来检出,并用于致病基因的连锁分析,这种诊断方法称为扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,Amp-FLP)连锁分析法。PCR扩增后,产物即等位片段之间的差别有时只有几个核苷酸,故需用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离鉴定。此法多用于突变性质不明的连锁分析. 四、等位基因的特异寡核苷酸探针诊断法当基因的突变部位和性质已完全明了时,可以合成等基因特异的寡核苷酸探针(allele-specific oligonucleotide,ASO)用同位素或非同位素标记进行诊断。探针通常为长20bp左右的核苷酸。用于探测点突变时一般需要合成两种探针,与正常基因序列完全一致,能与之稳定地杂交,但不能与突变基因序列杂交;另一种与突变基因序列一致,能与突变基因序列稳定杂交,但不能与正常基因序列稳定杂交,这样,就可以把只有一个碱基发生了突变的基因区别开来. PCR可结合ASO,即PCR-ASO技术,即先将含有突变点的基因有关片段进行体外扩增,然后再与ASO探针作点杂交,这样大大简化了方法,节约了时间,而且只要极少量的基因组DNA就可进行。五、单链构象多态性诊断法单链构象多态性(signle strand conformation polymorphism,SSCP)是指单链DNA由于碱基序列的不同可引起构象差异,这种差异将造成相同或相近长度的单链DNA电泳迁移率不同,从而可用于DNA中单个碱基的替代、微小的缺失或手稿的检测。用SSCP法检查基因突变时,通常在疑有突变的DNA片段附近设计一对引物进行PCR扩增,然后将扩增物用甲酰胺等变性,并在聚丙烯酰胺凝胶中电泳,突变所引起的DNA构象差异将表现为电泳带位置的差异,从而可据之作出诊断。

6. 在医学遗传学中常用什么方法检测基因突变

SNP检测,
楼上答的挺多一看就是网上摘的,但有点错误,我更正和补充一下。 主观填空题 1.干系 2.基因组DNA 3.遗传物质 4.染色体(或DNA)复制一次 5.交叉遗传 6.细胞癌基因 7.点突变 8.完全显性遗传 9.罗伯逊易位 10.重排 四、名词解释 聚合酶链式反应(PC...
11多重PCR 12正确 13正确 14正确 15正确 16正确 17错误 18正确 19正确 20错误
1.减数分裂是指生殖细胞成熟过程中(DNA复制一次 )后,细胞连续分裂二次。 2.发生于近端着丝粒染色体间的易位称为(着丝粒融合 )。 3.在一个肿瘤细胞群体中,占主导地位的克隆就构成其(干系 ) 4.结构异常是指由于染色体断裂、重接后,形成结构改变...
医学遗传学英文名称:medical genetics定义:应用遗传学的理论与方法研究遗传因素在疾病的发生、流行、诊断、预防、治疗和遗传咨询等中的作用机制及其规律的遗传学分支学科。 遗传学在医学中的应用,包括,生理、病理和药理的遗传学分析。遗传学...
遗传学是研究生物的遗传和变异,即研究亲子间的异同的生物学分支学科。 遗传学的研究范围包括遗传物质的本质、遗传物质的传递和遗传信息的实现三个方面。遗传物质的本质包括它的化学本质、它所包含的遗传信息、它的结构、组织和变化等;遗传物质...

7. 哪些技术可以检测DNA的单碱基的突变

DNA 序列最微小的变异也可能会造成深远的影响。这些小的改变可能是疾病的根源或是一些传染病耐受某些抗生素的原因。现代基因组学研究曾证实,成功治疗一种疾病以及让其迅速蔓延至整个身体,两者之间有可能就仅是一个突变的差异。
现在,来自华盛顿大学和莱斯大学的研究人员开发出了一种新方法,可以检测 DNA 的特定片段,并精确找到单个突变,这有可能帮助医生诊断及治疗诸如癌症和结核病等疾病。相关研究论文刊登在了近期出版的《岁斗自然-化学》(Nature Chemistry)杂志上薯高。
研究人员改进了从前的方法,新方案无需任何复杂的反应或是添加酶,它只需要利用 DNA 。这一方法能够有力地检测温度变化及其他的环境改变,这意味着它非常适用于资源缺乏环境下的诊断应用。
DNA 是一类核酸生物分子,它赋予了所有生物独特的遗传特征。在 DNA 双螺旋链中,一连串的碱基对编码着我们的遗传信息。随着基因组学研究的进展,人们清楚地了解到,仅一个碱基对的改变(突变、插入或删除)都足以引发严重的生物学后果。可以此来解释部分疾病发作,或是一些疾病对于常规抗生素治疗不产生反应的原因。
例如,众所周知耐药结核病是严重威胁人类健康和生存的危险因素之一。它对抗生素耐药通常是由于某一特异基因上的少数突变所导致。Seelig说乎手磨,如果一名结核患者对治疗不产生反应,很有可能存在有突变。
现在,研究人员已具备了检测这种突变的能力。
研究人员设计出了一些探针,它们可以辨认出靶 DNA 片段上的单碱基对突变。借助这些探针,研究人员能够更详细地寻找长达 200 个碱基对的序列中的变异,而当前的方法只能检测 20 个碱基对 DNA 片段中的突变。
这项研究表明,研究人员可以更好地提高特异性。无论最好的特异性水平是什么,他们最佳能够获得这一数值的平方。
针对一段怀疑带有突变的 DNA 序列,研究人员设计出一些测试探针。为此,他们生成了与问题双螺旋链互补的 DNA 序列。随后,他们将探针和 DNA 序列放置到有盐水的试管中混合,在那里如果碱基对完整它们会自然地彼此相互匹配。不同于以往的技术,探针分子检测的是靶 DNA 双螺旋链的突变,而非单链的突变,从而提高了特异性。
如果探针与靶 DNA 序列之间能够完美的匹配,探针就会发射荧光。如果不发荧光,则表明两者不匹配,靶 DNA 链中存在有突变。
研究人员已将该技术申请专利,并推动其商业化。他们希望能够把它转化为纸质诊断测试,使其能够应用于世界上部分缺少医疗资源的地区。

有用的话,给个好评吧O(∩_∩)O~

8. 检测基因突变的方法有哪些

有传统的杂交法、DNA分子探针法和DNA碱基测序法。

9. 毒理遗传学的以基因突变为指标的检测法

在搜汪许多检测方法中以艾姆斯测验最有效。它用鼠伤世腊仔寒沙门局卖氏菌的组氨酸缺陷型(不能在没有组氨酸的培养基上生长的突变型)菌株为测试对象,如果菌株用某待测化学物质处理后能在没有组氨酸的培养基上形成菌落,就说明发生了回复突变(图1)。 根据菌落出现的数目就可以估算出该物质诱变能力的强弱。应用哺乳动物肝脏微粒体酶系(S9)作为活化系统,使待测物质先行活化,用这一模拟活体内代谢状况的措施进一步提高了检测的准确性。

10. 基因检测方法

一般有三种基因检测方法:生化检测、染色体分析和DNA分析。

1.生化检测

生化检测是通过化学手段,检测血液、尿液、羊水或羊膜细胞样本,检查相关蛋白质或物质是否存在,确定是否存在基因缺陷。用于诊断某种基因缺陷,这种缺陷是因某种维持身体正常功能的蛋白质不均衡导致的,通常是检测测试蛋白质含量。还可用于诊断苯丙酮尿症等。

2.染色体分析

染色体分析直接检测染色体数目及结构的异常,而不是检查某条染色体上某个基因的突变或异常。通常用来诊断胎儿的异常。

常见的染色体异常是多一条染色体,检测用的细胞来自血液样本,若是胎儿,则通过羊膜穿刺或绒毛膜绒毛取样获得细胞。将之染色,让染色体凸显出来,然后用高倍显微镜观察是否有异常。

3.DNA分析

DNA分析主要用于识刖单个基因异常引发的遗传性疾病,如亨廷顿病等。DNA分析的细胞来自血液或胎儿细胞。

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