Ⅰ 国标 氨基酸的检测方法
国家标准检测食品中的氨基酸是采用先将食品中蛋白质经盐酸水解成为游离氛基酸,经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后,与印三酮溶液产生颜色反应,再通过分光光度计比色浏定氨基酸含量。
Ⅱ 牛肉是否含有蛋白质的实验是什么
牛肉是否含有蛋白质的实验是凯氏定氮法测定
牛肉含有丰富的蛋白质,氨基酸。牛肉中的肌氨酸含量比任何其它食品都高,它对增长肌肉、增QL量特别有效,袜氏能提高机体抗病能力,对生长发育及手术后、病后调养的人在补充失血和修复组织等方面特别适宜。
实验工具
1、仪器,K1160全自动凯氏定氮仪,SH420F石墨消解仪,分析天平。
2、试剂,硫酸(分析纯),催化剂片(分析纯无水硫酸钾3g和分析纯无水硫酸铜0.2g),20g/L硼酸溶液,溴甲酚绿-甲基红混合指示剂,40%氢氧化钠。
实验方法
1、取样,将牛肉样品粉碎,精确称取1.0g左右(精确值0.1mg),用称量纸包好放入消化管内,然后分别加棚好李入3g硫酸钾与0.2g硫酸铜,沿消化管壁加硫酸10mL。
2、消解利用石墨消解炉进行消解,将消化管链迟放在石墨炉上,盖上排气罩,连接废气吸收系统,消化过程采用曲线升温模式,设定消解参数。
3、测试,将消化管放置于凯氏定氮仪上,定氮仪参数。
Ⅲ 检验氨基酸用什么方法
1.茚三酮反应,氨基酸与其发生反应缩合成蓝色物质。除开脯氨酸和羟脯氨酸,他们与其反应生成黄色衍生物。
2.桑格反应,氨基酸与其反应会生成黄色的2,4-二硝基氨基酸,可以用于鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸。
3.艾德曼反应(DNFB反应),即氨基酸与苯异硫氰酸反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸。
Ⅳ 食品中氨基酸的测定,有简单方法吗
氨基酸(amino acids):含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称。生物功能大分子蛋白质的基本组成单位,是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物,氨基一般连在α-碳上。
氨基酸的结构通式:构成蛋白质的氨基酸都是一类含有羧基并在与羧基相连的碳原子下连有氨基的唤轿卖有机化合物,目前自然界中尚未发现蛋白质中有氨基和羧基不连在同一个碳原子上的氨基酸。
其理化特性大致有:
1)都是无色结晶。熔点约在230°C以上,大多没有确切的熔点,熔融时分解并放出CO2;都能溶于强酸和强碱溶液中,除胱氨酸、酪氨酸、二碘甲状腺素外,均溶于水;除脯氨酸和羟脯氨酸外,均难溶于乙醇和乙醚。
2)有碱性[二元氨基一元羧酸,例如赖氨酸(lysine)];酸性[一元氨基二元羧酸,例如谷氨酸(Glutamic acid)];中性[一元氨基一元羧酸,例如丙氨酸(Alanine)]三种类型。大多数氨基酸都呈显不同程度的酸性或碱性,呈显中性的较少。所以既能与酸结合成盐,也能与碱结合成盐。
3)由于有不对称的碳原子,呈旋光性。同时由于空间的排列位置不同,又有两种构型:D型和L型,组成蛋白质的氨基酸,都属L型。 由于以前氨基酸来源于蛋白质水解(现在大多为人工合成),而蛋白质水解所得的氨基酸均为α-氨基酸,所以在生化研究方面氨基酸通常指α-氨基酸。至于β、γ、δ……ω等的氨基酸在生化研究中用途较小,大都用于有机合成、石油化工、医疗等方面。氨基酸及其 衍生物品种很多,大多性质稳定,要避光、干燥贮存。
1、茚三酮反应 (ninhydrin reaction)
ninhydrin reaction
在加热条件下,氨基酸或肽与茚三酮反应生成紫色(与脯氨酸反应生成红色)化合物的反应。
茚三酮反应,即:所有氨基酸及具有游离α-氨基的肽与茚三酮反应都产生蓝紫色物质,只有脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生黄色物质。
此反应十分灵敏,根据和逗反应所生成的蓝紫色的深浅,在570nm波长下进行比色就可测定样品中氨基酸的含量,也可以在分离氨基酸时作为显色剂对氨基酸进行定性或定量分析。在法医学上,使用茚三酮反应可采集嫌疑犯在犯罪现场留下来的指纹。因为手汗中含有多种氨基酸,遇茚三酮后起显色反应。
2、坂口反应 (Sakaguchi reaction)
坂口反应;Sakaguchi reaction
本法广帆巧泛用于精氨酸的分析与测定。精氨酸与α-萘酚在碱性次溴酸钠(或次溴酸钾)中发生反应,得到如左式的红色产物:当用茚三酮方法发现可能有精氨酸时,可用此法检测确证。单取代的胍基衍生物如章鱼肉碱、胍基乙酸等对此反应敏感,显示正反应。该反应可用于精氨酸的定性和定量测定。
3、米隆反应
HgNO3+HNO3+热 红色 (检验酚基 酪氨酸有此反应)
4、Folin-Ciocalteau反应
磷钨酸-磷钳酸 蓝色 (检验酚基 酪氨酸有此反应)
5、黄蛋白反应
浓硝酸煮沸 黄色 (检验苯环 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反应)
6、Hopkin-Cole反应(乙醛酸反应)
乙醛酸+浓硫酸 乙醛与浓硫酸接触面处产生紫红色环 (检验吲哚基 色氨酸有此反应)
7、Ehrlich反应
P-二甲氨基苯甲醛+浓盐酸 蓝色 (检验吲哚基 色氨酸有此反应)
8、硝普盐试验
Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 红色 (检验巯基 半胱氨酸有此反应)
9、Sulliwan反应
1,2萘醌、4磺酸钠+Na2SO3 红色 (检验巯基 半胱氨酸有此反应)
10、Folin反应
1,2萘醌、4磺酸钠在碱性溶液 深红色 (检验α-氨基酸)
据我了解 武汉武达生物科技用头发提取氨基酸技术生产的胱氨酸、亮氨酸、酪氨酸等系列产品,是世界公认的绿色生化制品,因此,可以说全球80%以上的氨基酸市场是属于我们的,这就给我们提供了一个极好的发展空间。
Ⅳ 检验氨基酸用什么方法
你若是问蛋白质,我可以直接告诉你又双缩脲试剂(中学阶段),但氨基酸的检验比蛋白质麻烦多了。 一、氨基酸的分离和检测氨基酸的分离和检测手段,以往用化学分析法、层析法、比色法、气相色谱法、氨基酸自动分析仪。随着高效液相色谱及填料的发展,HPLC在氨基酸检测方面显示了其特有的优越性。但大多数氨基酸无紫外吸收和荧光发射特性,为提高分析检测灵敏度和分离选择特性,通常将氨基酸衍生,衍生方式有柱前衍生法与柱后衍生法。HPLC与各种衍生相结合的氨基酸分析技术,构成了具有广泛适用性的现代氨基酸分析技术。 二、鉴定是哪种氨基酸,不同的氨基酸要用不同的方法。1、茚三酮反应 (ninhydrin reaction) 茚三酮(弱酸环境加热) 紫色(脯氨酸、羟脯氨酸为黄色) (检验α-氨基) 2、坂口反应 (Sakaguchi reaction) 丙氨酸 α-萘酚+碱性次溴酸钠 红色 (检验胍基 精氨酸有此反应) 3、米隆反应(又称米伦氏反应) HgNO3+HNO3+热 红色 (检验酚基 酪氨酸有此反应,未加热则为白色) 4、Folin-Ciocalteau反应(酚试剂反应) 磷钨酸-磷钳酸 蓝色 (检验酚基 酪氨酸有此反应) 5、黄蛋白反应 浓硝酸煮沸 黄色 (检验苯环 酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸有此反应) 6、Hopkin-Cole反应(乙醛酸反应) 加入乙醛酸混合后徐徐加入浓硫酸 乙醛与浓硫酸接触面处产生紫红色环 (检验吲哚基 色氨酸有此反应) 7、Ehrlich反应 P-二甲氨基苯甲醛+浓盐酸 蓝色 (检验吲哚基 色氨酸有此反应) 8、硝普盐试验 Na2(NO)Fe(CN)2*2H2O+稀氨水 红色 (检验巯基 半胱氨酸有此反应)
Ⅵ 氨基酸的检测方法有哪些
1. 分光光度法氨基酸检测:主要是利用氨基酸与衍生剂发生化学反应,产生蓝紫色化合物,该化合物在某一波长处有最大吸收峰,根据吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生剂为茚三酮。
2. 毛细管电泳法氨基酸检测:根据分离原理的不同,可分为毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电电泳、毛细管等速电泳以及胶束电动力学毛细管电泳。其中,毛细管区带电泳和胶束电动力学毛细管电泳可用于氨基酸检测。
3. 近红外光谱法氨基酸检测:利用有机化合物的含氢基团在特定波长区域跃迁,产生光谱的变化,结合统计学方法间接地实现氨基酸的定量检测。
4. 气相色谱法氨基酸检测:将氨基酸衍生化处理变为容易气化的物质,根据气态样品中各组分在流动相和固定相中的分配系数的不同,实现对氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色谱法氨基酸检测:是最常用的一种氨基酸检测方法。由于大多数氨基酸本身没有紫外吸收和荧光反应,因此需要对样品进行衍生化处理将其转化为有紫外吸收和发射荧光的物质,衍生可分为柱前衍生和柱后衍生。
Ⅶ 测定氨基酸含量的方法有几种
1)称干重法.可用离心法或过滤法测定.优点:可适用于一切微生物,缺点:无法区别死菌和活菌.
2)比浊法.原理:由于微生物在液体培养时,原生质的增加导致混浊度的增加,可用分光光度计测定.优点:比较准确.
3)测含氮量,大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致,根据含氮量再乘以6.25即可测得其粗蛋白的含量.
4)血球计数板法.优点:简便、快速、直观.缺点:结果包括死菌和活菌.
5)液体稀释法.对未知菌样作连续的10倍系列稀释,经培养后,记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查MPN表,再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量.优点:可计算活菌数,较准确.缺点:比较繁琐.
6)平板菌落计数法.取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基,经培养后计算原菌液的含菌数.优点,可以获得活菌的信息.缺点:操作繁琐,需要培养一定时间才能获得,测定结果受多种因素的影响.
Ⅷ 简述氨基酸的检测方法。
氨基酸的分别测定可利用基于离子交换树脂层析分离法的氨基酸自动分析仪,非专用的高效液相色谱仪也可测定。速度快、分辨率和灵敏度高的薄层层析可做氨基酸定性检测。化学法测定多数只能针对某一种或数种氨基酸。磷酸铜试剂与尿液中氨基酸和肽类生成蓝色络合物,可测定总尿液氨基酸;色氨酸可用荧光分光光度法测定;尿中羟脯氨酸可用比色法测定;苯丙氨酸可采用苯丙氨酸氧化酶或苯丙氨酸脱氢酶法;谷氨酰胺测定可采用谷氨酰胺酶偶联谷氨酸脱氢酶;支链氨基酸包括亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸均被亮氨酸脱氢酶催化而测定。