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获取目地基因的简单方法

发布时间:2023-03-12 02:31:30

❶ 获得目的基因有几种主要方法

获得目的基因常用的方法有PCR法、化学合成法、cDNA法及建立基因文库的方法来筛选

直接获取
1.从基因文库中获取 这个没什么就是现成的基因储存在受体菌上你用的时候提取出来就好了(基因组文库法 就是原教材中的用限制性内切酶直接获取。利用λ噬菌体载体构建基因组文库的一般操作程序如下:① 选用特定限制性内切酶, DNA进行部分酶解,得到DNA限制性片段② 选用适当的限制性内切酶酶解λ噬菌体载体DNA。③ 经适当处理,将基因组DNA限制性片段与λ噬菌体载体进行体外重组。④ 利用体外包装系统将重组体包装成完整的颗粒。⑤ 以重组噬菌体颗粒侵染大肠杆菌,形成大量噬菌斑,从而形成含有整个DNA的重组DNA群体,即文库。)经典解释
2.cDNA文库法(即原教材中提到的逆转录法)。cDNA文库,是指汇集以某生物成熟mRNA为模板逆转录而成的cDNA序列的重组DNA群体。虽然可用基因组文库法来获取真核生物的目的基因,但是由于高等真核生物基因组DNA文库比其cDNA文库大得多,相关工作量同样大得多。更为重要的是,在真核生物基因组中合有大量的间隔序列或内含子,但在大肠杆菌等原核生物中没有类似序列的存在,所以大肠杆菌不能从真核生物基因的初级转录本中去除间隔序列,即不能表达真核生物DNA。而在真核生物成熟mRNA中已不存在间隔序列(已在拼接过程中被去除),所以可以以真核生物成熟mRNA为模板,逆转录而成的cDNA可被大肠杆菌表达。因此,在基因工程中,cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法
3.直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。这种方法有如用猎枪发射的散弹打鸟,无论哪一颗弹粒击中目标,都能把鸟打下来。鸟枪法的具体做法是:用限制酶(即限制性内切酶)将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别转入不同的受体细胞,让供体细胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分别在受体细胞中大量复制(在遗传学中叫做扩增),从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法吧带有目的基因的DNA片段分离出来。如许多抗虫,抗病毒的基因都可以用上述方法获得。

用“鸟枪法”获取目的基因的优点是操作简便,缺点是工作量大,具有一定的盲目性。

人工合成
1.(主要是序列已知的基因)。主要是通过DNA自动合成仪,通过固相亚磷酸酰胺法合成,具体过程可以网上查询,反正是可以按照已知序列将核苷酸一个一个连接上去成为核苷酸序列,一般适于分子较小而不易获得的基因。对于大的基因一般是先用化学合成法合成引物,再利用引物获得目的基因。
2.聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研 究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑

❷ 目的基因的获取方法

1、当目的基因的序列已知时:用化学方法合成目的基因,或用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因。
将含有某种生物的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存。各个受体菌分别含有这种生物不同的基因,称为基因文库。当需要某一片段时,根据目的基因的有关信息来获取目的基因。如根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA,以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。
2、当目的基因序列未知时:建立一个包括目的基因在内的基因文库,从基因文库中提取目的基因。
3、用PCR技术扩增技术提取。已知目的基因引物的序列,将整个DNA放入合成仪。只有引物中间的目的基因被大量扩增,即被提取出来。

❸ 目的基因的获取

选修三的1.2基因工程基本操作中的目的基因获取主要介绍了两种方法。

一、从基因文库中获取目的基因。

形象的说,就是相当于“从图书馆中找到你要的那本图书”。基因文库是前人已经构建好的受体菌群体,整个群体已经包括所有该物种的基因,你只需要通过目的基因的位置或转录产物mRNA、蛋白质等的特异性的表现,与基因文库中的基因产物一致性找出文库中的目的基因。

二、通过PCR扩增获取目的基因。

关键是设计目的基因上游的引物,通过DNA复制,从引物开始延伸出引物后的DNA序列,从而得到你要的目的基因。

3,我最近学的还有
化学法
是知道了核苷酸序列
用人工合成的方法得到

❹ 目前获取目的基因的主要途径有哪些

一是从供体细胞的DNA中直接分离基因。,最常用的方法是“鸟枪法”又叫“散弹射击法"。另一种是人工合成基因。这种方法有两条途径。

二是以目的基因转录的信使RNA为模板。反转录成互补的单链DNA。再在酶的作用下合成双链DNA。即目的基因。另一条途径是蛋白质的氨基酸序列。推测出信使RNA序列。再推测出结构基因的核苷酸序列,然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成。

(4)获取目地基因的简单方法扩展阅读:

基因计算

DNA分子类似“计算机磁盘”,拥有信息的保存、复制、改写等功能。将人体细胞核中的23对染色体中的DNA分子连接起来拉直,其长度大约为0.7米,但若把它折叠起来,又可以缩小为直径只有几微米的小球。因此,DNA分子被视为超高密度、大容量的分子存储器。

基因芯片经过改进,利用不同生物状态表达不同的数字后还可用于制造生物计算机。基于基因芯片和基因算法,未来的生物信息学领域,将有望出现能与当今的计算机业硬件巨头——英特尔公司、软件巨头——微软公司相匹敌的生物信息企业。

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