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检测蛋白质电泳条带方法

发布时间:2023-03-11 14:18:25

1. 常用的蛋白质电泳方法有哪些

聚丙烯酰胺凝胶电泳:这是一种活性电泳,可以分析混合样品,并且可用特异检测手段检测目标物条带。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳:最常用的变性电泳,可以用来测定蛋白质分子量。比层析法测定要好。

2. 什么叫电泳技术分离或分析蛋白质常用的电泳方法有哪些

电泳悬浮于样品溶液(有机的或无机的,生命或无生命的)带电粒子,朝向相反的电荷移动的现象的电极的电场的影响下的频带本身。
分离方法:(一)醋酸纤维素薄膜电泳
(二)凝胶电泳
(三)IEF
(d)其他电泳
这些单独的步骤具体是指的 http://www.zhyico.com/ news_jsview.asp? ID = 2501
我希望对你有所帮助

3. 怎么看蛋白质电泳分析结果图,以及它的原理是什么

双向电泳就是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合。
1.先进行等电聚焦电泳(按照蛋白等电点pI分离):在胶中加入双性电解质溶液,加上电场后建立稳定PH梯度,蛋白质溶液加入后建立电场,蛋白以不同PI分离开来。
2.然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小):将上一步的胶加上横向电场,同一PI中聚集的蛋白,由于分子量不同而分开。
经染色(一般是银染)得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。

二维电泳使用于蛋白组学研究,对大批量蛋白筛选鉴定中存在很大优势,通过不同胶做对比,把不同处的胶割出来单独鉴定。
通过对尿蛋白电泳的蛋白条带的特征进行分析可以判断尿液中蛋白的分子大小,可以区分出低分子蛋白尿、中分子蛋白尿、高分子蛋白尿和混合型蛋白尿,为临床肾脏病的诊断提供帮助。如高分子蛋白尿,分子量范围在5万到100万,蛋白条带包括白蛋白及其以上蛋白条带,以白蛋白为主。低分子蛋白尿,分子量范围在1万到7万,蛋白条带在白蛋白和以下蛋白,以小分子蛋白质条带为主。

4. 电泳图蛋白质的怎么看

电泳图蛋白质这样看。




1、直接将带条带的凝胶放在凝胶呈像系统中进行定量分析。

2、将所需要的条带剪切下来,用X体积蒸馏水溶解,通过紫外分光光度计在280纳米条件下,测定吸光度值。根据仪器目前标准曲线计算蛋白质浓度,与蒸馏水体积相乘,得到蛋白质质量。

3、如果样品中含有荧光成分,可以进行荧光分析。


电泳图谱(electrophoregram)是通过电泳将一个混合物样品(如血清)在支持介质上分成区带。但须将电泳条经过染色,使区带显示出来而得电泳图谱。还可以进一步在光密度计上进行扫描而获得记录图谱。

带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象,称为电泳。利用带电粒子在电场中移动速度不同,对混合物各组份进行分离、纯化和测定的技术称为电泳技术。

可分离的样品即可以是大分子的蛋白质、多糖、核酸,也可以是小分子的氨基酸,核苷等。

电泳方式差别很大.但基本原理是一致的,即:待分离样品中各种分子在同一pH下带电性质和带电量以及分子本身大小、形状等性质的差异,使带电分子在电场中产生不同的迁移速度,从而实现对样品分离、鉴定或提纯。

5. 测量蛋白质等电点的方法有哪些谢谢

交错分配法。

对一种特定的蛋白质,在不同盐系统中,pH和其分配系数之间的关系应不同,而在等电点时,得到的均为不带电时分子的分配系数。

对不同的盐系统,其等电点时的分配系数应相等,两条pH和分配系数关系的曲线必交于一点,该点所对应的pH值即为该特定蛋白质的等电点。根据这一原则测定蛋白质等电点的方法,称为交错分配法。

特性

蛋白质在溶液中有两性电离现象。假设某一溶液中含有一种蛋白质。当pI=pH时该蛋白质极性基团解离的正负离子数相等,净电荷为0,此时的该溶液的是pH值是该蛋白质的pI值。某一蛋白质的pI大小是特定的,与该蛋白质结构有关,而与环境pH无关。

在某一pH溶液中当pH>pI时该蛋白质带负电荷,反之pH<pI时该蛋白质带正电荷,pH=pI时该蛋白质不带电荷。人体内pH=7.4;而体内大部分蛋白质的 pI<6; 所以人体内大部分蛋白质带负电荷。

以上内容参考:网络-蛋白质等电点

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