Ⅰ 风湿病的免疫检验
风湿病的免疫检验
自身免疫病(AID)是指由于过度而持久的自身免疫反应导致组织器官损伤并引起相应器官病变或临床症状的一类疾病。风湿病是一类涉及到关节、软骨、肌肉等结缔组织的慢性疾病。下面是我为大家带来的风湿病的免疫检验的知识，欢迎阅读。
一、抗核抗体测定
(Antinuclear antibody ,ANA) ANA是抗细胞核多种成分的自身抗体，无种属及器官特异性。ANA可分为抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体及其他细胞成分抗体。这些抗体共同组成ANA谱。
抗核抗体(ANA)的检查最常用于筛查全身性风湿病和自身免疫病。ANA的检查可观察到能与细胞核内的核酸和蛋白抗原起反应的自身抗体。细胞内可能存在对多种抗原起反应的抗体。只有某种抗体的效价很高时，IFA才能加以鉴别。
1、homogenous(均质型)
又称弥散型，相应的抗原是双链DNA和组蛋白复合物。常见于SLE，特别是肾脏受累病人。也可见于其它结缔组织病，如：风湿性关节炎，MCTD，干燥综合征，硬皮病，慢性活动性肝炎及原发性胆汁性肝硬变。
2、Peripheral(周边型)
相应的抗原为双链DNA，多见于活动性SLE病人。
3、Speckle(斑点型)
主要是针对ENA的抗体，包括Sm，RNP，SSA，SSB，Scl-70。一般认为低效价的斑点型ANA不是结缔组织病特有的，实际上不代表临床异常。高效价的抗Sm抗体多与SLE有关。高效价的抗RNP自身抗体见于MCTD，但也见于SLE。抗SSA和抗SSB抗体，见于S.S，也可见于SLE。当病人有抗SSA抗体时，通常以皮肤表现和光过敏为主。，也存在于ANA阴性狼疮和新生儿狼疮。Scl-70抗体与硬皮病有关。
4、Nucleoli(核仁型)
其靶抗原是与RNA分子相关的核蛋白。多见于硬皮病。
5、Centromere(着丝点型)
抗着丝点抗体(ACA)，多见于全身性硬皮病的CREST综合征。
常用检测方法为IFA、ELISA、免疫印迹法、RIA、免疫斑点法、胶体金标斑点免疫渗滤法等。其中IFA是应用较广的一种方法。一般采用鼠肝切片或Hep-2细胞为底物抗原片，当加入病人血清时，病人血清中的ANA可与细胞中相应抗原成分结合。再加入荧光标记抗人IgG，在荧光显微镜下可见细胞核内亮绿色荧光。
〖参考值〗 <1:10或阴性
〖临床意义〗
ANA阳性见于多种疾病，常用于风湿病及自身免疫病的诊断。SLE患者阳性率在95%以上，且效价常在1：80以上。在其他风湿病如RA、系统性硬化症、皮肌炎、干燥综合征 (SS)、混合结缔组织病(MCTD)等也可阳性。其他如肝病，病毒感染等也可呈低效价阳性。
〖注意事项〗
在大约1%的正常人的体内可测到低效价的非特异性抗核抗体，80岁以上老人的检出率可高达50%。高效价的ANA一般与活动期SLE密切相关。采用Hep-2细胞检测ANA，可见到不同的染色模型。
此外，口服避孕药的妇女也可检测到ANA。
二、可提取性核抗原(Extractable nuclear antigen ENA)抗体
ENA是细胞内许多小分子的RNA和多肽组成的非组蛋白的酸性核蛋白颗粒。分布在细胞质中的称为小细胞浆核糖核蛋白(scRNPs);分布在细胞核内的称为小细胞核核糖核蛋白(snRNPs)。目前已发现的有20余种，其中常用的抗ENA抗体有如下几种。
(一)抗Sm抗体
Sm是病人Smith的缩写。Sm抗原属于SnRNP，由5个RNA和多肽组成，抗原表位在29KD、28KD和13.5KD多肽上，抗Sm抗体是酸性糖蛋白，是SLE的标记抗体。
(二) 抗nRNP(u1RNP)抗体
u1RNP是u1RNA和蛋白质组成的，抗原表位在73KD、32KD和17.5KD多肽上，是混合结缔组织病(MCTD)的重要血清标志。
(三)抗SSA抗体
SS为干燥综合征的缩写。此抗体又称抗RO抗体。SSA抗原是RNA和蛋白质复合物，抗原表位在52KD多肽上，主要见于原发性干燥综合征患者及SLE。
(四)抗SSB抗体
SSB抗体常伴随SSA抗体同时出现，又称抗La抗体，SSB抗原属于SnRNP，是含有RNA和50KD蛋白质的复合物。抗原表位在45KD、47KD和48KD多肽上。与SSA抗体并存对诊断SS有特异性。
(五)抗Scl-70抗体
Scl-70抗原表位在86KD、70KD的片段上，是DNA拓扑异构酶I的降解产物，抗Scl-70抗体几乎仅见于硬皮病，阳性率30%左右。
(六)抗Jo-1抗体
Jo-1抗体是组氨酰tRNA合成酶，抗原表位在55KD多肽，抗Jo-1抗体是多发性肌炎和皮肌炎的标记抗体，阳性率25-40%。
(七)抗核糖体抗体
核糖体在核仁合成，然后转入胞浆，抗原表位在大亚基上的38KD、16KD和15KD多肽上。抗核糖体抗体阳性主要见于SLE，阳性率20-30%。
检测以上抗体的方法主要有：对流免疫电泳法(CIE)、双相免疫扩散法，免疫印迹试验(IBT)，免疫斑点技术和ELISA法等。一般采用兔胸腺或牛胸腺提取物或细胞提取物作为抗原。近年来，应用分子重组抗原制备的试剂盒已投入市场。
〖参考值〗阴性
〖临床意义〗
1. 抗n RNP抗体：见于35-40%的SLE病人，在MCTD病人中阳性率可达95-100%，也可见于其他风湿性疾病。
2. 抗Sm抗体：主要见于SLE及重叠综合征，急性期病人75%为阳性。一般SLE患者30-40%阳性率。但Sm抗体阳性者90%以上为SLE，故称之为SLE的标记抗体。
3. 抗SSA和抗SSB抗体：见于40-45%的SS病人。抗SSA抗体也可见于25%的SLE病人及其他风湿性疾病;抗SSA抗体与新生儿狼疮和先天性传导阻滞有关。抗SSA抗体也可见于病毒感染等非风湿性疾病。抗SSB抗体对原发性干燥综合征较特异，但阳性率仅27%左右。
4. 抗Scl-70抗体：一般仅见于系统性硬化症病人，阳性率20-60%。
5.抗Jol-1抗体见于30%的多发性肌炎病人及10%的皮肌炎病人。抗Jol-1抗体与多发性肌炎病人间质性肺炎的发生率增加有关。
6.抗rRNP 抗体：主要见于SLE患者，阳性率20%左右，与中枢神经系统病变有关，多在疾病活动期出现。
〖注意事项〗
判断试验结果时要结合临床表现作出评价，也应根据试验方法来作出解释。对流免疫电泳法和双相扩散法敏感性低，但特异性较高;免疫印迹法、斑点免疫法及ELISA方法敏感性提高，但特异性相对减少。
三.抗双链DNA抗体(Antidouble-stranded DNA ， A-dsDNA，)
A-dsDNA 对SLE有高度特异性，是针对细胞核脱氧核糖核酸的自身抗体。临床上常用的检测方法有：①Farr¡®s法：125I-DNA与待检标本中的A-dsDNA形成免疫复合物，加饱和硫酸铵使复合物沉淀，以γ计数器分别测定上清中游离及沉淀物中已结合的125I-DNA含量，可计算出血清中A-dsDNA的结合活性。
②ELISA法：将小牛胸腺DNA包被在微孔板中，加入病人血清，如有A-dsDNA则结合到微孔板上，加入酶标抗人IgG，加入底物显色后经酶标仪比色可知血清中A-dsDNA抗体的量。
③免疫荧光法：采用马疫锥虫或短膜虫作为基质，加入病人血清。血清中的A-dsDNA与膜上的天然DNA结合，加入荧光标记抗人IgG。马疫锥虫和短膜虫的动基体会发出绿色荧光。
④金标斑点法：双链DNA包被于硝酸纤维膜上，加入病人血清，加入金标记抗人IgG，如有A-dsDNA存在，会显示红色斑点。
〖参考值〗依方法不同参考值也有不同。
Farr¡®s法：≤ 0.20 免疫荧光法：<1:10ELISA法：依试剂盒而定，一般<70u
金标法：阴性
〖临床意义〗
A-dsDNA 阳性对 SLE 有较高的特异性。大约60%的活动性 SLE 病人会出现 A-dsDNA。其他风湿性疾病也会出现，但阳性率非常低，如RA、S.S。
〖注意事项〗
假阳性结果非常少见，但阴性亦不能排除SLE的诊断。
四.抗中性粒细胞胞浆抗体( Antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA) 测定
ANCA是针对中性粒细胞胞浆多种成分的 自身抗体，主要有髓过氧化物酶(MPO)和蛋白酶3( Proteinase 3 ，PR3)的抗体 。主要用于诊断Wegener 肉芽肿和系统性血管炎，特别是伴有肾病、呼吸疾病或其他类型血管炎引起多器官损害的患者。检测方法有IFA、ELISA、 IBT等。
〖参考值〗 阴性。
〖临床意义〗
免疫荧光法检查ANCA阳性一般分为两种荧光类型，一种是胞浆型，称为cANCA，一种是核周型，称为pANCA。cANCA产生弥漫性细胞浆染色，是针对PR3的抗体 ，一般见于wegener肉芽肿病(WG)，特别是肾和肺受累的病人。pANCA产生核周染色，是针对MPO的抗体 ，主要见于系统性血管炎病人。
在WG病人中，cANCA阳性率在活动期可达80%，且有较高的抗体效价。在缓解期抗体阳性率低，且效价下降，或完全消失。
〖注意事项〗
ANCA 阳性也可见于 Good-Pastare¡®s 综合征和SLE病人。WG的诊断不能单纯依赖ANCA的结果，还要结合其他临床表现，试验室检查和组织病理学检查才能确定。ANCA效价不能完全反应疾病的活动以及对治疗的反应。pANCA 阳性不是特异性的抗MPO抗体，也可以是抗粒细胞胞浆中其他酶的抗体，如弹性蛋白酶，组织蛋白酶G等。ANCA检测应注意排除其他自身抗体的交叉反应，如ANA。因其可产生假阳性应注意鉴别，并进行ANA检测。
五、抗线粒体抗体(Antimitochondrial antibody,AMA)
AMA是以细胞浆中的线粒体为抗原的一种自身抗体，无器官和种属特异性。一般采用大鼠肾及胃作为抗原基质，采用IFA检测，阳性可见大鼠肾和胃的细胞浆呈现细颗粒状荧光。
采用免疫印迹法可将与线粒体抗原的反应分为从M1到M9九种类型，高效价的M2和M9型自身抗原与原发性胆汁性肝硬变相关。目前已有检测M2的ELISA试剂盒供应。
〖参考值〗 阴性 >1：10 为阳性
〖临床意义〗
AMA是原发性胆汁性肝硬化的标记抗体，阳性率达90%，并且50%患者抗体效价达1：1280或更高。此外，也可见于慢性活动性肝炎、隐匿性肝硬化。肝外阻塞性黄疸患者AMA常阴性，因此可作为鉴别诊断的一个指标。正常人中阳性率<10%，且效价较低。
六.抗平滑肌抗体(Antismooth muscle antibody，ASMA )
ASMA是抗肝细胞膜上一种肌动球蛋白的自身抗体。这种肌动球蛋白与平滑肌有交叉抗原性，因此与平滑肌有反应。一般采用IFA法，以大鼠胃作为抗原基质，阳性可见胃壁平滑肌呈现亮绿色荧光。
〖参考值〗 阴性，>1：10为阳性
〖临床意义〗
主要见于明显活动期的自身免疫性肝炎患者，阳性率在80%以上，效价 在1：80以上。急性病毒性肝炎早期ASMA也可阳性，且早于 HBsAg出现。其他疾病如传染性单核细胞增多症、SS、RA、支原体肺炎、肿瘤和病毒感染者也有不同程度的阳性率。正常人中仅有2%阳性。
七. 抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA)和抗甲状腺微粒体抗体(ATMA)
ATGA 是由甲状腺炎引起的自身抗体 ，抗原是一种糖蛋白。ATGA有器官特异性而无种属特异性。ATMA 的抗原是甲状腺滤泡上皮细胞胞浆内的脂蛋白。常用检测方法有：IFA、IHA、RIA、ELISA等。
〖参考值〗
IHA： 血清效价 ≤1：32， >1：32为阳性，ATGA 和ATMA
ELISA：正常为阴性，P/N < 2.1，>2.1 为阳性, ATGA 和 ATMA
RIA：ATGA <30%;ATMA <15%
l〖临床意义〗
主要见于桥本甲状腺炎、甲亢、甲低患者，也可见于甲状腺瘤、恶性贫血、重症肌无力、Edison 病和肝脏疾病等。SLE及其他自身免疫病也有一定的阳性率。
正常人也可检出这两种抗体 ，并且随着年龄的增长，阳性率增加，特别是40岁以上妇女，可达18%左右。
应该注意到，有的患者ATGA阴性，但ATMA阳性，因此两种抗体同时检测可提高抗甲状腺自身抗体的检出水平。
八. HLA-B27测定
HLA-B27 抗原为人类MHC I类 抗原B位点的表达产物，可分为几种亚型。HLA -B27的检测方法有多种，补体依赖性微量细胞毒法(CDMA);流式细胞仪法;玫瑰花法;ELISA法;等电聚焦法等。近来应用PCR法检测HLA-B27，敏感而特异，并且可进行B27亚型的分析。
l〖参考值〗
非洲-美洲人：3-4%;l 高家索人：6-8%;l 亚洲人：1%。
〖临床意义〗
强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27阳性率为90-95%。大约42%的青年类风湿关节炎(JRA)存在HLA-B27，Reiter¡®s 综合征患者阳性率大约79%。此外，肠病性关节炎、银屑病性关节炎也有一定的阳性率。RA病人阳性率不高。
〖注意事项〗
在评价HLA-B27阳性结果时应结合临床表现综合考虑，不能单纯依靠此结果作出诊断。
其他免疫指标及检测
C反应蛋白(C-Reactive Protein，CRP )
CRP是一种急性时相蛋白，由肝细胞合成，可与肺炎球菌细胞壁C多糖发生沉淀反应，故称CRP。在各种炎症的急性期或组织创伤时，血清CRP浓度急剧升高。CRP不仅可结合多种细菌( bacteria ),真菌(fungi)及原虫(protozoal)体内的多糖物质，而且在钙离子存在下，还可以结合磷脂酰胆碱和核酸。结合后的复合体具有激活补体(complement)的作用。〖参考值〗 <8mg/L
〖临床意义〗
血清CRP 升高多见于：急性、慢性细菌感染;组织损伤坏死;急性心肌梗死;各种炎症;外科手术;肿瘤浸润;急性风湿热和活动性类风湿关节炎，以及其它关节炎性疾病。但病毒性感染一般CRP不升高，因此可作为病毒性感染和细菌性感染的'鉴别指标。
〖注意事项〗
CRP测定方法不同，在判定结果时应予考虑。此外，雌激素、口服避孕药可使CRP增高，皮质激素和抗炎药可使CRP下降。
类风湿因子(Rheumatoid Factor，RF)
RF是一种自身抗体，可与变性的IgG发生反应，与IgG 的Fc段结合。RF可分为IgG、IgM、IgA、IgD和IgE五型。凝集试验检测的主要为IgM型RF。RF主要见于类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis RA)，也可见于其他结缔组织病及其他疾病。检测方法有乳胶凝集试验、致敏羊红细胞凝集法、速率散射比浊法、ELISA法等。
〖参考值〗
乳胶法：阴性或<1：20 速率散射比浊法：<30IU/ml
〖临床意义〗
RF见于90%以上的RA病人，效价常在1：160以上，含量多>80IU/ml。，一般方法所检测的大部分是IgM-RF。
关于RF分型，临床应用尚不广泛。多数作者认为：IgM-RF效价高低可在一定程度上反映RA的活动性，但无明确的密切关系;IgG-RF与RA患者的滑膜炎、血管炎和关节外症状密切相关;IgA-RF见于RA、硬皮病、Felty综合征和系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus， SLE)，也是RA临床活动性的一个指标;IgE-RF 除RA患者外，也见于Felty综合征和青年型RA。高水平 IgM-RF阳性病人预后较差。
从早期RA患者的X线片分析，IgM-RF持续阳性的病人更易发生骨侵蚀。IgA-RF在SS病人中阳性率较高;IgE-RF在恶性关节炎病人中阳性率较高。在RA病人，高效价RF存在并伴有严重的关节功能受限时，常提示预后不良。
〖注意事项〗
正常人也可有4%左右的阳性率。随年龄增加，RF的检出率会增加。RA病人RF也可阴性，不能单纯依靠RF阳性来诊断RA。RF还可见于其它多种疾病，其中最常见的是干燥综合征(S.S)， 发生率在90%以上，且含量一般较高。其它常见的RF阳性的疾病有： SLE、系统性硬化症、高球蛋白血症、结节病、梅毒、麻风、病毒感染、肝硬化等等。有些效价可在1：160以上，含量在80IU/ml以上，在解释结果时应予注意。
冷球蛋白(Cryoglobulin CG，)
冷球蛋白是一种球蛋白，4℃时发生沉淀，30 ℃易聚合，37℃又溶解。CG分为三类：
1.I型(单克隆型)：大多为IgM或IgG 型，无抗补体作用。
2.II型(混合型)：两种或两种以上单克隆Ig混合，以IgM+IgG最常见，也可见IgA+ IgG;IgG+IgM+IgA等。有抗补体作用。
3. III型(多克隆型)： 没有单克隆蛋白。
其检测方法有血球压积管法(定性)和分光光度计法(定量)。
〖参考值〗 定性法：阴性 定量法：<80μg/ml。
〖临床意义〗
SLE 病人血清中可出现混合型CG。在血管炎、肾小球肾炎、淋巴细胞增生性疾病也可阳性。在巨球蛋白血症或多发性骨髓瘤病人伴雷诺氏现象时与I型冷球蛋白血症有关。 II型冷球蛋白血症与自身免疫病例如血管炎、肾小球肾炎、SLE、RA 和 SS 有关。在某些感染如肝炎、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染和弓形虫病也可出现。
小结:
胞浆抗体
Hep-2细胞具有许多胞浆抗原。如有特异性胞浆抗体存在，可出现强阳性胞浆荧光。包括抗线粒体抗体(AMA)、抗核糖体抗体、抗肌动蛋白抗体即抗平滑肌抗体(ASMA)、抗高尔基体抗体、抗丝抗体(如Vimentin)。一般最有意义的是AMA和ASMA，可是荧光染色Hep2细胞却不能鉴定这两种抗体，可应用鼠肾和鼠胃切片作进一步分析。
系统性风湿病活动期的评价
自身抗体检测以诊断全身性疾病比监测该病活动更有意义。但抗dsDNA抗体效价却与活动性有关。应定期检测抗dsDNA抗体的效价及C3、C4的含量。以及测定循环免疫复合物(CIC)的含量。ESR和CRP在炎症反应时常常升高。RA病情加重时，CRP明显增高。SLE活动期，CRP一般正常。
器官特异性自身免疫性疾病
组织抗体
许多自身抗体可采用IFA测定，用鼠肾和胃的切片能测出抗线粒体、平滑肌、肝肾微粒体和胃壁细胞的抗体。甲状腺组织切片可测定抗甲状腺自身抗体。
自身免疫性肝病
在肝脏病变中，ANA阳性率可达40-80%。抗线粒体抗体(AMA)与原发性胆汁性肝硬变有关。特别是高效价的M2和M9线粒体抗原。
约一半的自身免疫性肝炎的病人有较高效价的ASMA。此外，肝肾微粒体抗体(LKMAs)，抗可溶性肝抗原(SLA)抗体，抗肝细胞膜抗体等也可用于自身免疫性肝病诊断和监测。
其他
肾脏疾病常测定的抗体有抗dsDNA抗体，抗肾小球基底膜抗体等，还可测定CIC，以及作肾组织活检进行荧光染色。
韦格纳肉芽肿病是一种发生于上下呼吸道的坏死性血管炎，也累及肾脏，病人常死于肾和肺衰竭。检查抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCAs)是诊断指标之一。也可通过ELISA测定抗髓过氧化物酶抗体，抗蛋白酶3抗体，有助于诊断和鉴别诊断。
胃肠道疾病中，恶性贫血与抗胃壁自身抗体有关，与抗内因子抗体的相关性达75%。抗胰岛细胞抗体(ICAs)，抗谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)与I型糖尿病有一定关系。重症肌无力病人可出现抗骨骼肌抗体。多发性肌炎和皮肌炎可有抗Pm1和抗Jo-1抗体。抗心肌抗体常见于心肌梗死、心脏手术或心肌损伤后。
;Ⅱ 间接免疫荧光抗核抗体检测怎么看
看有荧光增强标记的地方。间接免疫荧光抗核抗体检测技术是直接免疫荧光技术的改进。待检细胞首先用未标记的抗体处理，使之与特异的抗原形成复合物，然后再用抗抗体的荧光标记抗体着色，即可检测出特异抗原在细胞中的存在部位，具有荧光增强效应。
间接免疫荧光法（IIF）这是进行抗核抗体、抗核仁抗体和抗胞浆抗体筛选检测的最有效方法。在些检测系统中，以组织培养细胞和器官的冷冻片切为反应底物。
Ⅲ 抗核抗体（ANA）高应该和什么疾病有关
ANA包含一组自身抗体，无种属和器官特异性，见于多种疾病，缺乏特异性。在自身免疫性疾病中，细胞核常成为自身免疫反应的靶子。ANA主要是指对核内成分所产生的抗体，此外也包括对核内成分相同的物质所产生的抗体。所以，ANA是抗核酸抗体和抗核蛋白抗体的总称。通常是7sIgG，但也可以是19sIgM。中国医学健康网 【正常值】间接免疫荧光试验：阴性.酶免疫染色试验:阴性。PAP染色法:阴性.ANT和抗ds-DNA抗体联合测定：阴性。临床最常用的ANA测定方法是间接免疫荧光抗核抗体（IFANA）检测。临床上以血清稀释度大于1:6以上判定为阳性。 抗核抗体的核型:ANA的核型有一些临床参考价值.某种核型可能伴有某种特定的ANA和风湿病 ，但这种关联是不可靠的，况且当血清中含有多种抗体时，随血清稀释度不同，可能会表现不同核型.核型的价值大部分被测定特异抗体所代替.但熟知核型的斟基本临床意义仍然是风湿科医师的基本功之一。 ANAs的荧光染色分型见附表.其中常见的有以下几种: 1.均质型:核质染色均匀一致，此型与抗组蛋白抗体和抗DNA抗体有关; 2.颗粒型（斑点型）:核质染色呈斑点状，核膜存在，此型多与可溶性核抗原（ENA）抗体有关，多见于混合型结缔组织病. 3.核周（核膜）型:即周边型.荧光包绕在核膜周围，多与抗双链DNA抗体有关，主要见于累及肾脏的SLE患者，且和疾病的活动性明显有关，缓解期以均质型多见. 4.核仁型:仅核仁染色，与4~6sRNA抗体有关，在系统性硬化症中较常见，也可见于口和眼干燥及关节综合征等. 5.着丝点型:处于分裂时相的Hep-2细胞为底物可出现依着丝点散在排列的特殊点状圆形，与斑点型的区别是前者核膜消失. 间接免疫荧光抗核抗体（IFANA）检测的核型与临床意义 镜下核型分裂相核染色相关抗体常见疾病 周边型均染抗ds-DNA抗体或抗脱氧核糖核蛋白（ds-DNA+组蛋白，DNP）高滴度仅见于SLE 均质型均染抗组蛋白抗体、抗DNA抗体引起狼疮细胞形成见于所有的结缔组织疾病(CTD)、SLE、RA及药物性SLE 颗粒型粗颗粒型 细颗粒型抗U1RNP抗体、抗Sm抗体、抗SS-A/Ro抗体、抗SS-B/La抗体、抗nRNP抗体、抗Scl-70抗体、抗PCNA抗体等抗盐水可提取的核抗原(ENA)抗体见于SLE、RA、PSS和SS、MCTD.颗粒型荧光阴性则无需免疫印迹法进行抗ENA抗体的特异性检测 核仁型细颗粒抗RNA聚合酶-1抗体、抗核仁小分子RNA（TH抗原）抗体、抗PM-Scl抗体、抗核糖体抗体、抗U3-RNP抗体硬皮病，也见于DM、RA、SS、SLE等 着丝点型趋向于线性染色抗RNA抗体、抗PM-Scl抗体硬皮病、尤其是硬皮病的CREST综合症80%阳性 核糖体型SLE 核膜型阴性抗Lamins（核层素）抗体，多与dsDNA有关SLE、狼疮肾炎 胞浆型 其他临床意义:（1）SLE:约99%（86%~100%）的活动期SLE病人ANA阳性，其滴度也常>1:80，但它的特异性差.对于未经治疗的疑似患者，多次检查抗核抗体，若结果阴性，应考虑其他疾病的可能.ANA阳性本身不能确诊任何疾病，但ANA阳性且伴有特征性狼疮症状则支持狼疮诊断.ANA阴性几乎可除外SLE的诊断.但应注意有5%的SLE病人ANA可为阴性，这其中大部分为抗SSA抗体、抗SSB抗体阳性，因为测定ANA通常用鼠肝或鼠肾做底物，而这些组织核内含SSA、SSB、Jo-1、rRNP抗原相对较少，所以不易测出其相应抗体.可加做人喉癌上皮细胞为底物的方法进行检测. 有人认为效价滴度可作为反映病情的参考指标.由于抗脱氧核糖核蛋白因子，尤其是抗脱氧核糖核酸因子与病情活动性有关，当病性好转或用大量皮质激素治疗后，其滴度下降甚至完全消失.一般说来抗核抗体滴度的高低大多数与病性的好转，恶化是平行的.即认为ANA在狼疮活动期阳性率和滴度均增高，在缓解期阳性率和滴度均减低.但总的来说ANA抗体阳性与疾病的活动相关性不大. （2）其他结缔组织病:可见于盘状红斑性狼疮、皮肌炎、类风湿关节炎、硬皮病、干燥综合征、血管炎等.在非狼疮性结缔组织病中，ANA阳性率为50%，ANA作为自身免疫性结缔组织疾病的筛选试验必须强调中高滴度. （2）正常人:只有少数ANA阳性.一般当血清稀释度1:4时，男性有3%阳性，女性有7%阳性，而80岁以上健康老年人阳性率可达49%. （3）其他疾病:消化系疾病（如慢活肝、溃疡性结肠炎）、造血系统疾病
Ⅳ 临床免疫检验常用的分析技术
临床免疫检验常用的分析技术
临床免疫检验常用的分析技术有哪些你知道吗?下面是我为大家带来的临床免疫检验常用的分析技术的知识，欢迎阅读。
一、免疫标记技术：2种分类
1.(1) 免疫组化技术(immunohistochemical technique): 用于组织切片或其他标本中抗原抗体的定位(2)免疫测定(immunoassay): 用于液体标本中抗原或抗体的测定.
2.(1) 免疫荧光技术 (2) 酶免疫技术 (3) 放射免疫技术(4) 金标技术(5)化学发光技术
酶免疫技术—固相酶免疫技术―酶联免疫吸附测定(ELISA)
ELISA方法类型与操作步骤
双抗体夹心法：检测抗原最常用的方法
原理(操作步骤)： (1) 特异性抗体包被载体形成固相抗体. (2) 洗去未结合的抗体和杂质. (3) 加入待测样品，使其中相应抗原和固相抗体呈特异性结合成复合物. (4) 再洗涤除去未结合的物质.(5) 加酶标抗体，使之与固相上的抗原呈特异性结合.(6) 经充分洗涤后除去未结合的游离酶标记抗体.(7) 加入相应酶的底物，固相化的酶催化底物变成有色产物，颜色反应的程
度与固相上抗原的量有关.
适用范围：检测抗原的最常用方法 ,用此方法检测的`抗原，应至少有2个以上结合位点，故不能用以测定半抗原物质。
2、竞争法：(可用于测定抗原或抗体)
原理(操作步骤)：以测定抗原为例(1) 将特异性抗体包被载体，使形成固相抗体,(2) 洗去杂质，待测孔中同时加待测标本和酶标记抗原，使之与固相抗体反应。如待测标本中含有抗原，则与酶标记抗原共同竞争结合固相抗体。待测标本中抗原量越多，酶标记抗原结合量越少(3) 洗涤除去游离酶标记物后，加底物显色(4) 结果是不含受检抗原的对照孔，其结合的酶标记抗原最多，显色最深。对照孔与待测孔颜色深度之差代表受检标本中的抗原量。待测孔越淡, 标本中抗原量越多。
3、间接法：(可检测各种相应抗体)
原理(操作步骤)：(1) 将特异性抗原包被载体，使形成固相抗原; (2) 洗去未结合的物质,加入待测样品，使其中待测的特异性抗体与固相抗原相结合形成固相抗原抗原复合物;(4)再经洗涤后，固相上仅留下特异性抗体; (5) 加酶标抗人球蛋白(酶标抗抗体)，使与固相复合物中抗体结合，从而使待测抗体间接标记上酶;(6) 洗涤除去多余的酶标抗体，固相结合酶量就代表待测抗体的量; (7) 最后加入底物显色，其颜色深浅可代表待测抗体量。
免疫荧光法---抗核抗体的检测
二、沉淀反应
可溶性抗原与相应抗体特异性结合所出现的反应。反应分为两个阶段:(1) 抗原抗体特异性结合;(2) 形成可见的免疫复合物。
三、凝集反应
细菌和红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后，出现肉眼可见的凝集(agglutination)现象。
凝集反应的发生分为两个阶段：(1)抗原抗体的特异结合;(2)出现可见的颗粒凝聚。
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