布鲁氏菌检测方法比较

1. 牛布病的检测方法都有哪些（至少四种）

吃没熟透的肉可能染上
布鲁氏菌
，这种细菌可能会导致持续性高热、
不规则热
或长期低热，同时伴有关节肌肉疼痛、乏力、多汗等。在温度高到70℃以上这种细菌就不能存活，因此建议吃肉时务必熟透后再吃。

2. 怎样确诊人患布鲁氏菌病

答：根据该病的流行特点、临床表现可以初步判断为疑似布病，确诊要采集病料送实验室检查。实验室常采取细菌分离鉴定、血清凝集试验和补体结合试验进行确诊。

3. 怎么判断羊是否得了布病

只有检查羊有没有这种病菌就可以了。布鲁氏杆菌是一种革兰氏阴性的不运动细菌，它作为细胞内寄生虫可以在很多种家畜体内存活。

一羊的用途

（1）羊肉是绝佳的食疗保健品，羊肉、羊血、羊骨、羊肝、羊奶、羊胆等等可用于多种疾病的治疗，具有较高的药用价值。羊肉有益血、补肝、明目之功效，对治疗产后贫血、肺结核、夜盲、白内障、青光眼等症有很好的效果。

（2）羊奶与牛奶相比，富含更多脂肪和蛋白质，是肾病病人理想的食品之一，也是体虚者的天然补品。妇女、老人气血不足、身体瘦弱、病后体虚等，可以多吃羊肉汤，滋养气血、补元阳、益气、疗虚安神、健脾胃、健体魄。

二养羊的注意事项

（1）怀孕母羊慎喂酒糟。怀孕母羊尽量不要饲喂酸性过大或含有酒精的饲料，例如白酒糟、青贮饲料等，不然将容易出现流产、弱羔等问题。公母分圈做好记录。

（2）母羊膘情不宜过肥。舍饲条件下，如果饲喂过剩，而母羊缺乏运动的话，这样便会造成母羊膘情过肥影响正常繁殖，易出现发情迟缓、配种困难、繁殖力低、生产困难等问题。

4. 布氏杆菌病是怎样一种病如何检测

布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的一种人畜共患的慢性传染病。传染途径是病牛或带菌牛，特别是在流产或分娩时，大量布氏杆菌随胎儿、胎水和胎衣排出，偶尔在乳、粪、尿以及阴道流出的恶露内发现。然后通过消化道、损伤或完整的皮肤、黏膜、结膜和交配而互相感染。病牛的临床特点是发生流产、胎衣滞留、子宫炎、不孕症、乳房炎、关节炎等，孕牛在7～8月时流产。公牛发生睾丸炎和附睾炎。人可通过与病牛的频繁接触及食入未严格杀菌的病牛乳、肉而感染。人患病的主要症状是呈波浪热、关节炎和睾丸肿胀，头和全身疼痛，有的发生骨质变形、流产等。
布氏杆菌的检验主要是采用两种血清学诊断方法：
（1）虎红平板凝集反应。采被检血清0.03毫升，加抗原0.03毫升与之混合，4分钟内观察反应并判定结果。凝集者判为阳性，不凝者判为阴性。对阳性反应的牛再进行试管凝集反应。
（2）试管凝集反应。操作方法：每份血清用5支小试管，第一管加入2.3毫升0.5%碳酸生理盐水；第二管不加；第三、第四、第五管各加入0.5毫升。用1毫升吸管吸取被检血清0.2毫升加入第一管内并混匀之，以该吸管吸取混合液分别加入第二管和第三管，每管0.5毫升。以该吸管将第三管混合液混匀，吸取0.5毫升加入第四管，混匀后，再从第四管吸取0.5毫升加入第五管混匀，弃去0.5毫升。如此稀释后，从第二管起，血清稀释度分别为1∶12.5，1∶25，1∶50，1∶100。然后先以0.5%碳酸生理盐水将抗原原液作20倍稀释，并加入上述各管（第一管不加，作为血清对照组），每管加0.5毫升，振摇均匀。加入血清后，第二至第五管各管混合液的容积均为1毫升，血清稀释度从第二管起依次为1∶25，1∶50，1∶100，1∶200。每次试验还应做阴性血清对照：阴性血清需取自未患过布氏杆菌病的牛，且先须以布氏杆菌抗原检定，证明确为阴性反应者。阳性血清对照：阳性血清通常取自人工免疫的牛，但亦可从送检血清中选取，其凝集价最好不低于1∶800。抗原对照：加1∶20抗原稀释液0.5毫升于试管中，再加入0.5毫升碳酸生理盐水。以上试管于充分振荡后置于37～38℃恒温箱中22～24小时，然后检查并记录结果。
判定标准：“++++”表示上层液体100%清亮，管底有极显着的伞状沉淀物。振荡时，沉淀物碎裂成花瓣状、块状和粒状（100%菌体被凝集）。“+++”表示凝集现象与四个加号相同，但上层液体75%清亮（75%菌体被凝集）。“++”表示上层液体50%清亮，管底有伞状沉淀物，振荡时碎裂成花瓣状、块状和柱状（50%菌体被凝集）。“+”表示上层液体25%清亮，管底有不很显着的伞状沉淀，或只有伞状沉淀的痕迹。振荡时，在液体中有可见小块和粒状物（25%）菌体被凝集。“-”表示无凝集现象。液体不透明，无伞状沉淀，有时细菌可能沉于管底，但振荡时又呈均匀混浊状态。牛以1∶100稀释度出现两个加号以上的凝集现象时，被检血清判定为阳性反应。以1∶50稀释度出现两个加号以上的凝集现象时，被检血清判定为可疑反应。可疑反应的牛，经过3～4周，须重新采血检验。如重检仍为可疑，应判定为阳性反应。

5. 布鲁氏杆菌病

是由布氏杆菌引起的人畜共患传染病。以母畜流产、不孕和公畜睾丸炎为特征。OIE将其列为B类疫病。

1 病原学
布氏杆菌属，为革兰氏阴性小杆菌，不形成芽胞。根据其病原性、生化特性等不同，可分为6个种20个生物型，其中羊种布鲁氏菌3个型、牛种布鲁氏菌9个型、猪种布鲁氏菌5个型，还有犬种布鲁氏菌、绵羊附睾种布鲁氏菌和沙林鼠种布鲁氏菌。
布氏杆菌对各种物理和化学因子比较敏感。巴氏消毒法可以杀灭该菌，70℃10分钟也可杀死，高压消毒瞬间即亡。对寒冷的抵抗力较强，低温下可存活1个月左右。该菌对消毒剂较敏感，2％来苏儿3分钟之内即可杀死。该菌在自然界的生存力受气温、湿度、酸碱度影响较大，pH7.0及低温下存活时间较长。

2 流行病学

布氏杆菌病广泛地分布于世界各地，能侵害多种家畜、野生动物和人类。家畜的感染总体上可分为两种类型：单一感染型和交差感染型。前者指家畜感染本种布氏杆菌，后者指由于牛、羊群共同放牧，通过相互间的接触造成羊群既感染羊种布氏杆菌又感染牛种菌，或牛群既感染牛种菌又感染羊种菌等。山羊和绵羊对羊种布氏杆菌最易感。牛对牛种菌易感，也可感染羊种菌和猪种菌。猪对猪种菌和羊种菌均易感。马和犬对羊、牛、猪三种布氏杆菌都有易感性，鹿对牛种菌和羊种菌易感。人类可以感染布氏杆菌。
病畜和带菌动物，特别是流产母畜是最危险的传染源。病菌存在于流产的胎儿、胎衣、羊水及阴道分泌物中。病畜乳汁或精液中也有病菌存在。
本病主要经消化道感染，也可经伤口、皮肤和呼吸道、眼结膜和生殖器黏膜感染。因配种致使生殖系统黏膜感染尤为常见。
本病一年四季均可发生，但有明显的季节性。羊种布氏杆菌病春季开始，夏季达高峰，秋季下降；牛种布氏杆菌病以夏秋季节发病率较高。

3 临床症状

本病潜伏期长短不一，牛布氏杆菌病一般在14～120天之间。潜伏期的长短，视病原菌的毒力、感染量及感染时母牛的妊娠期而定。
母牛主要表现流产，可发生于妊娠的任何时期，多见于6～8个月。多见胎盘滞留，失去生育能力。公牛出现睾丸炎及附睾炎。有些牛发生关节炎、黏液囊炎和跛行。
绵羊和山羊常见流产和乳房炎。怀孕母羊易感染，常发生胎盘炎，引起流产和死胎。流产发生于妊娠后的3～4月。母山羊常常连续发生2～3次流产。公山羊生殖道感染则发生睾丸炎。有的病羊出现跛行、咳嗽。绵羊副睾种布鲁氏菌感染其症状局限于副睾，常引起附睾肿大和硬结。非怀孕母羊也可感染，但一般是一过性的。
猪的明显症状也是流产。出现暂时性或永久性不育、睾丸炎、跛行、后肢麻痹、脊椎炎，偶尔发生子宫炎、后肢或其他部位出现溃疡。
犬可感染牛种、羊种和猪种布鲁氏菌，但多为隐性感染，呈散发性，少数出现发热。感染犬种布鲁氏菌的母犬，妊娠40～50天发生流产，产死胎和出现不育症，淋巴结肿大。公犬常发生副睾炎、前列腺炎和菌血症。
马可感染布氏杆菌的各个种，尤其对牛种和猪种菌最易感。多呈隐性感染，有的发生化脓性滑液囊炎，尤其在头部和肩部，常见“马肩瘘管”或“马颈背疮”。

4 病理变化

布氏杆菌最适宜在胎盘、胎衣组织中生长繁殖，其次是乳腺组织、淋巴结、骨髓、关节、腱鞘、滑液囊以及睾丸、附睾、精囊等。
特征病变是胎膜水肿，严重充血或有出血点。子宫黏膜出现卡他性或化脓性炎症及脓肿病变。常见有输卵管炎、卵巢炎或乳房炎。公畜精囊中常有出血和坏死病灶，睾丸和附睾肿大，出现脓性和坏死病灶。

5 诊断

5．1 根据临床症状和病理变化可做出初步诊断，确诊需进一步做实验室诊断。
5．2 实验室诊断
在国际贸易中，指定诊断方法为缓冲布氏杆菌抗原试验(BBAT)、补体结合试验和酶联免疫吸附试验。替代诊断方法为荧光偏振测定法(FPA)。
病原检查：抹片镜检(取病畜胎盘绒毛膜表面及水肿区边缘触片染色镜检)、分离培养、动物试验。
血清学检查：缓冲布氏杆菌抗原试验(虎红平板凝集试验、缓冲布氏杆菌平板凝集试验)、补体结合试验(特异性高，但操作繁琐)、间接酶联免疫吸附试验、竞争酶联免疫吸附试验、全乳环状试验(可用于筛选病畜群)、血清凝集试验、布氏杆菌素试验(适用于流行病学调查，由于其敏感性低，不能单独作为正式的诊断试验)。
病料采集：通常采取流产胎儿、胎盘、阴道分泌物或乳汁。
5．3 鉴别诊断
应与弯杆菌病、沙门氏菌病、钩端螺旋体病、乙型脑炎、衣原体病和弓形虫病等有流产症状的疫病鉴别。

6 防治

坚持自繁自养。必须引进种畜时，要严格检疫2次，确认健康者才能混群。
在疫区，每年定期以凝集反应检疫2次，清净群每年至少检疫1次，检出病畜应扑杀并做无害化处理。阴性反应畜可预防接种菌苗进行预防。
被污染的畜舍、运动场、饲槽、水槽等用10％石灰乳或5％热火碱水严格消毒；病畜分泌物、排泄物等应做无害化处理或消毒深埋。
兽医、病畜管理人员、接羔员、屠宰加工人员，要严守卫生防护制度，特别在产仔季节更要注意。最好在从事这些工作前1个月进行预防接种，且需年年进行。

6. 实验室检测家畜布氏杆菌病的方法主要有哪些

1．血象白细胞半数正常或轻度减少，淋巴细胞相对或绝对增多，分类可达60%以上。血沉在各期均增速。久病者有轻或中度贫血。 2．细菌学检查患者血液、骨髓、乳汁、子宫分泌物均可做细菌培养。因牛种菌初分离困难。要求严格的环境，故各种标本最好采集两份，一份用含肝浸液的肉汤做培基，在CO2孵箱中培养；另一份放一般环境中孵育，培养时间不得短于2周。急性期阳性率高，慢性期低。骨髓标本较血液标本阳性率高。有人建议慢性布鲁氏菌病患者的血液接种到鸡胚卵黄中可获较高阳性率。 3．免疫学检查 （1）血清凝集试验（Wright试验）试管法较灵敏。患者多在第二周出现阳性反应，1：100以上有诊断价值。病程中效价递增4倍及以上意义更大。正常人可有低滴度的凝集素；某些传染病的假阳性率可达30%以上，如兔热病该凝集效价升高；注射霍乱疫苗的人90%可呈假阳性；接种布鲁氏菌活菌苗者，凝集效价也增高。诊断时要注意分析。另外由于抗体IgA、IgG、IgM量的比例不同，如IgA含量高则可出现患者血清低稀释度为阴性，高稀释度反为阳性的所谓前带现象。因此做该实验时应增大患者血清稀释范围。 （2）补体结合试验补体结合抗体主要为IgG，出现较迟，持续较久，一般1：16以上即为阳性。对慢性患者有较高特异性。 （3）抗人球蛋白试验（Coombs’tist）用于测定血清中的不完全抗体。不全抗体可阻断完全抗体与抗原的凝集反应，使凝集试验呈假阴性。Coombs试验是使不完全抗体与不可见抗原结合的复合物通过抗人球蛋白血清结合成块，直接可见。故凝集试验阴性者可作此检查。