血清铁结合力检测方法

A. 总铁结合力的测定

建立一种灵敏度高、选择性好的铬天青B血清总铁结合力的直接测定法。方法 在pH4．5的条件下，结合铁从转铁蛋白释放，铬天青B与血清中的铁和过量的铁标准液发生显色反应，再加入碱性缓冲液，在pH7．8的条件下，转铁蛋白从铁和铬天青B复合物中吸引铁与其结合，溶液的吸光度值下降与血清总铁结合力浓度呈正比。对反应条件和方法性能进行系统研究。结果 显色络合物的最大吸收波长为630nm，线性可达130．0μmol/L，回收率为98．3%～99．2%，批内变异系数为2．7%，批间变异系数为3．8%，与碳酸镁作吸附剂的手工比色法比较有良好相关性，回归方程为Y=0．994X+0．40，r=0．993。70例健康成人血清总铁结合力含量为51．3～76．3μmol/L。结论 该法试剂稳定，具有操作快速、灵敏、简便和结果准确等优点，适宜于血清总铁结合力的手工测定和自动化分析。

B. 检测铁蛋白的方法有哪些

检测血清FER的方法有放射免疫测定法、酶免疫测定法、免疫比浊法、化学发光免疫分析法等。
目前临床主要采用免疫透射比浊法通过全自动生化仪检测和化学发光免疫分析仪进行检测。前者的检测原理是将兔抗人铁蛋白抗体交联于胶乳颗粒上，与待测样品中铁蛋白在液相中相遇，立即形成抗原抗体复合物，并形成一定浊度，与通过同样处理的校准品比较，即可计算出样品中FER的含量。该方法测定范围宽，精密度、准确度高，特异性好，是一种简单、快速、准确的自动化分析方法。
化学发光免疫分析法（以贝克曼公司ACESS全自动化学发光免疫分析仪为例）原理是采用双抗体夹心法检测待测样品中的铁蛋白，包被介质为磁性微粒子，以增大与抗原的接触面积，提高敏感性，标记的酶为ALP，底物为贝克曼研制的AMPPD，经ALP水解后可以长时间持续、稳定发光，除了有免疫透射比浊法的特异性高、精密度高、测定范围宽以外，敏感性也大大提高。