检测目的基因的方法

Ⅰ 检测目的基因是否导入受体细胞的方法有哪几种

检测目的基因是否导入受体细胞的方法有以下两种：

1、农杆菌转化法（植物常用）

农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物和裸子植物的受伤部位（受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物，从而使农杆菌移向这些细胞），并诱导产生冠瘿瘤或发状根。

2、利用显微注射，或者灭活的病毒转导（动物常用）

转导由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。细菌可以转化、转导。转化是利用细菌的某些特别菌株；转导是利用噬菌体。

(1)检测目的基因的方法扩展阅读：

转导的类别：

（1）低频转导（LFT）

诱导溶源性细菌而产生的细胞裂解产物中，除含有正常的噬菌体外，还有极少数（约为10^(-6)）部分缺陷噬菌体。用诱导溶源性菌株得来的噬菌体进行转导时的转导频率不过10^(-6) ，称为低频转导。

（2）高频转导（HFT）

双重溶原菌在紫外辐射等因子的诱导下,原噬菌体容易被切割下来，产生等量的缺陷噬菌体和正常噬菌体，该裂解物称为高频率转导裂解物，用这样的裂解物去感染细菌，将比低频率转导裂解物产生多得多的转导子。

Ⅱ 检测目的基因是否表达的方法是

基因工程第四步中包括导入检测，转录检测和翻译检测，方法分别是DNA分子杂交技术、分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术。有的还可在个体水平是进行检测，如抗性检测等

Ⅲ 如何对目的基因进行检测与鉴定

可以从三方面对目的基因进行鉴定：

1、直接测定：按照目的基因组成制作DNA分子探针进行配对。

2、mRNA测定：根据目的基因组得出其转录的mRNA组成，利用探针检测。

3、蛋白测定：可应用PCR相应技术测定目的基因翻译的相关蛋白，也可采用免疫化学法导入蛋白抗体检测蛋白。

(3)检测目的基因的方法扩展阅读：

对目的基因进行鉴定和检测的多种方法：

基因鉴定技术是一项生物学检测技术，人体细胞有总数约为30亿个碱基对的DNA，每个人的DNA都不完全相同，人与人之间不同的碱基对数目达几百万之多，因此通过分子生物学方法显示的DNA图谱也因人而异，由此可以识别不同的人。

所谓“DNA指纹”，就是把DNA作为像指纹那样的独特特征来识别不同的人。由于DNA是遗传物质，因此通过对DNA鉴定还可以判断两个人之间的亲缘关系。

基因鉴定的原理其实是DNA分子杂交，这种分子杂交是在缓冲液中进行的，由于DNA分子杂交时，两个分子相遇的机会不是很大，所以就需要众多的带有目的基因的DNA与待测的DNA分子。

而PCR技术就是将目的基因进行扩增的一种技术手段，所以在进行基因鉴定时并不是直接进行鉴定的，而是先进行PCR技术将目的基因扩增再进行鉴定。

网络-对目的基因进行检测与鉴定

Ⅳ 目的基因是否表达的检测方法

最直接的就是检测目的蛋白，一般都是用western blot；如果是分泌蛋白，可以做ELISA；如果蛋白有特殊的功能（比如GFP，绿色荧光蛋白），也可以直接检测其功能（比如看有无绿色荧光）。间接的话，可以检测目的mRNA是否存在，用的是northern blot或者RT-PCR。要注意的是，因为翻译阶段有可能存在调控，所以有些情况下mRNA存在不代表蛋白存在，即基因转录了未必翻译。所以间接的手段一般作为旁证。

Ⅳ 关于目的基因的检测

如果说只是要检测目的基因是否被成功导入，用这个方法就有点浪费了，一般都直接用标记基因就好了（比如荧光啊、抗药啊）。但如果是要检测目的基因是否在受体细胞成功表达，那么这是个很好的方法。首先，目的基因对于受体细胞来说，是个异物。目的基因指挥合成的蛋白质，在受体细胞中原来是没有的，当然会被受体细胞当成抗原来处理，然后受体细胞就会产生相应的抗体蛋白。如果你用目的基因指挥合成的蛋白质去侵染受体细胞的话，若目的基因已成功表达，那么之前产生的抗体必然就会与这个所谓的“抗原”发生特异性结合。

Ⅵ 目的基因的鉴定方法有哪些

基因的鉴定方法：
间接识别法
在基因的间接识别法（Extrinsic Approach）中，人们利用已知的mRNA或蛋白质序列为线索在DNA序列中搜寻所对应的片段。由给定的mRNA序列确定唯一的作为转录源的DNA序列；而由给定的蛋白质序列，也可以由密码子反转确定一族可能的DNA序列。因此，在线索的提示下搜寻工作相对较为容易，搜寻算法的关键在于提高效率，并能够容忍由于测序不完整或者不精确所带来的误差。BLAST是目前以此为目的最广泛使用的软件之一。
若DNA序列的某一片段与mRNA或蛋白质序列具有高度相似性，这说明该DNA片段极有可能是蛋白编码基因。但是，测定mRNA或蛋白质序列的成本高昂，而且在复杂的生物体中，任意确定的时刻往往只有一部分基因得到了表达。这意味着从任何单个细胞的mRNA和蛋白质上都只能获得一小部分基因的信息；要想得到更为完整的信息，不得不对成百上千个不同状态的细胞中的mRNA和蛋白质测序。这是相当困难的。比如，某些人类基因只在胚胎或胎儿时期才得到表达，对它们的研究就会受到道德因素的制约。
尽管有以上困难，对人类自身和一些常见的实验生物如老鼠和酵母菌，人们已经建立了大量转录和蛋白质序列的数据库。如RefSeq数据库，Ensembl数据库等等。但这些数据库既不完整，也含有相当数量的错误。
从头计算法
鉴于间接识别法的种种缺陷，仅仅由DNA序列信息预测蛋白质编码基因的从头计算法（Ab Initio Approach）就显得十分重要了。一般意义上基因具有两种类型的特征，一类特征是“信号”，由一些特殊的序列构成，通常预示着其周围存在着一个基因；另一类特征是“内容”，即蛋白质编码基因所具有的某些统计学特征。使用Ab Initio方法识别基因又称为基因预测。通常我们仍需借助实验证实预测的DNA片段是否具有生物学功能。
在原核生物中，基因往往具有特定且容易识别的启动子序列（信号），如Pribnow盒和转录因子。与此同时，构成蛋白质编码的序列构成一个连续的开放阅读框（内容），其长度约为数百个到数千个碱基对（依据该长度区间可以筛选合适的密码子）。除此之外，原核生物的蛋白质编码还具有其他一些容易判别的统计学的特征。这使得对原核生物的基因预测能达到相对较高的精度。
对真核生物（尤其是复杂的生物如人类）的基因预测则相当有挑战性。一方面，真核生物中的启动子和其他控制信号更为复杂，还未被很好的了解。两个被真核生物基因搜寻器识别到的讯号例子有CpG islands及poly(A) tail的结合点。
另一方面，由于真核生物所具有的splicing机制，基因中一个蛋白质编码序列被分为了若干段（外显子），中间由非编码序列连接（基因内区）。人类的一个普通蛋白质编码基因可能被分为了十几个外显子，其中每个外显子的长度少于200个碱基对，而某些外显子更可能只有二三十个碱基对长。因而蛋白质编码的一些统计学特征变得难于判别。
高级的基因识别算法常使用更加复杂的概率论模型，如隐马尔可夫模型。Glimmer是一个广泛应用的高级基因识别程序，它对原核生物基因的预测已非常精确，相比之下，对真核生物的预测则效果有限。GENSCAN计划是一个着名的例子。
比较基因组学
由于多个物种的基因组序列已完全测出，使得比较基因组学得以发展，并产生了新的基因识别的方法。该方法基于如下原理：自然选择的力量使得基因和DNA序列上具有生物学功能的其他片段较其他部分有较慢的变异速率，在前者的变异更有可能对生物体的生存产生负面影响，因而难以得到保存。因此，通过比较相关的物种的DNA序列，我们能够取得预测基因的新线索。2003年，通过对若干种酵母基因组的比较，人类对原先的基因识别结果作了较大的修改；类似的方法也正在应用于人类的基因组研究，并可能在将来的若干年内取得成果。

Ⅶ 目的基因的检测的步骤及方法

我是高二学生，课本上说的是用标记基因的抗性进行测试（这是检测目的基因是否导入受体细胞的方法）
用抗原抗体杂交技术的方法检测目的基因是否在受体细胞表达.
不知道你问的是哪个？

Ⅷ 获取目的基因的方法有哪些（详细）

获取目的基因的方法主要有两种：

一是从供体细胞的DNA中直接分离基因,最常用的方法是“鸟枪法”又叫“散弹射击法",另一种是人工合成基因,这种方法有两条途径,

二是以目的基因转录的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,再在酶的作用下合成双链DNA,即目的基因,另一条途径是蛋白质的氨基酸序列,推测出信使RNA序列,再推测出结构基因的核苷酸序列,然后用化学的方法以单核苷酸为原料合成.

Ⅸ (4)检测该目的基因是否表达的方法是

先用realtime检测mRNA水平是否表达，如果本身就存在这个基因，就看“是否表达”提高了很多，然后再做westernblot检测蛋白水平是否表达，如果这个基因可以影响细胞的某些功能的话，再检测细胞的一些指标看是否有预期的变化。基因(遗传因子)是具有遗传效应的DNA片段(部分病毒如烟草花叶病毒、HIV的遗传物质是RNA)。基因支持着生命的基本构造和性能。储存着生命的种族、血型、孕育、生长、凋亡等过程的全部信息。

Ⅹ 检测目的基因

在含SNP位点的两侧的保守区设计引物，PCR扩增，对扩增片段（几百bp为宜）进行测序即可。