重组c因子检测内毒素方法

⑴ 细菌内毒素检测步骤，详细的

检测方法: 1、每套器具中,注入80mL水,放置37度保温至少1小时. 这就是A溶液了。2、这种情况下，内毒素要求(限值)就是 0.25EU/mL. 3、买灵敏度是0.25EU/mL的鲎试剂。4、内毒素制备0.5EU/mL浓度，作为阳性对照，药典中的C溶液。5、制备B溶液，这个可能要用近似法来制备，取5EU/mL的内毒素溶液 0.2mL与1.8mL的A溶液混合，漩涡混合至少30秒，就成近似的B溶液了。6、加样反应，取 8 支鲎试剂，全部加0.1mL的细菌内毒素检查用水复溶。然后分别加A、B、C溶液，0.1mL， 还有加细菌内毒素检查用水，0.1mL， 每种溶液平行两管。7、放到37度水浴或干式的恒温仪中反应60分钟，就可以看结果了。8、B、C溶液的反应管必须要阳性，就是轻轻倒转180度过来，鲎试剂安瓿里的反应溶液形成了凝胶体，不滑落。 而D溶液，就是细菌内毒素检查用水那2管，必须要阴性，这样3个满足了，就说明你的试验成功了。最后看A溶液的反应情况，阳性就说明原套器具每套大于20EU。否则就合格，小于20EU了。 当然，1管阳性，1管阴性就要重新复查了，方法看药典。

⑵ 细菌内毒素的检测方法和原理是什么

我国药典收载的细菌内毒素检测方法为鲎试验法，包括2种方法，即凝胶法和光度测定法，后者又包括浊度法和显色基质法。当各种检测法得到的检测结果不一致时，以凝胶法的检测结果为准。
鲎试验法有定性和定量之分，其按试验方法还可进一步分为凝胶法、动态浊度法、终点浊度法、动态显色法和终点显色法。

原理：
凝胶法是应用鲎试剂可与内毒素发生凝集反应的原理来定性或半定量检测内毒素的一种鲎试验法，检测时鲎试剂需以除热原水（内毒素检查用水）复溶后使用，通过观察有无凝胶形成作为检测终点。
浊度法是通过检测鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化来检测内毒素含量的鲎试验法，其中动态浊度法检测反应混合物浊度升高至某一预先设定的吸光度时所需的时间或浊度升高的速率。
动态显色法和终点显色法都属显色基质法。显色基质法是通过检测鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物游离出生色团的多少来检测内毒素含量的鲎试验法，根据产物色度计算内毒素水平，又被称为比色法。

⑶ 细菌内毒素检测

热原系指由微生物产生的能引起恒温动物体温异常升高的致热物质。它包括细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。所以热原有外生致热原和内生致热原之分。
细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖（Lipoply Saccharide）和微量蛋白（Protein）的复合物，它的特殊性不是细菌或细菌的代谢产物，而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有内毒素生物活性的物质。
一般来说内毒素是热原,但热原不全是内毒素。欧洲药典委员会副主席J.Van Noordwijk提出：“严格地讲，不是每一种热原都具有脂多糖的结构，但所有已知的细菌内毒素脂多糖都有热原活性”。在药品生产质量管理规范（GMP）条件下，药品生产的质量控制一般可以接受的观点是：不存在细菌内毒素意味着不存在热原。
热原检查法系将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定的一种方法。
细菌内毒素检查法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。
细菌内毒素检查法，现已在《中国药典》2010年版二部、三部内广泛应用，但在《中国药典》2010年版一部内一个药品都未运用，这主要是由细菌内毒素检查法的持点所决定的：细菌内毒素检查法具有较家兔热原检查法灵敏、快速、简便易行、重现性好、结果准确等优点，目前细菌内毒素检查法已广泛应用于西药、生物制品。但同时也应该指出，细菌内毒素检查是一复杂的酶促反应过程，生产工艺的细微变化都可能引起其干扰的增加，然而根据中药制剂，成分复杂，影响因素多的特点，因此，中药注射剂一般还是采用传统的家兔热原检查法。但是对一些具有解毒降温作用的药物，因会干扰家兔的生理活性，引起体温下降，用家兔法检测不准，还是应考虑用细菌内毒素检查法。
由此可见，热原与细菌内毒素两者之间既有许多相同之处，但还是有区别的。同时，还要请各位同仁注意，不要将“热原”误写成“热源”。

⑷ 细菌内毒素的检验方式有什么

细菌内毒素检查法是判断供试品中细菌内毒素是否符合规定。 内毒素(Endotoxin)即革兰氏阴性菌细胞壁的脂多糖，其毒性成分为类脂A。菌体死亡崩解后释放出来。细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。

⑸ 内毒素测定的测定方法

1,凝胶法
2,动态浊度法
3,终点显色法
4,动态显色法
凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素的方法。凝胶法鲎试剂常见规格为0.1ml/支或0.5ml/支或者更大装量，使用时应加除热原水（细菌内毒素检查用水）复溶后使用。凝胶法是通过观察有无凝胶形成作为反应的终点。此法操作比较简单，经济，不需要专用测定设备，可以进行定性或半定量测定。
动态浊度法、终点浊度法、动态显色法、终点显色法，这四种方法都是定量检测内毒素的。

⑹ 细菌内毒素的试验要求应该怎么做急急急提前感谢啦

细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。
凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来检测或半定量内毒素的方法。我公司提供多种规格的灵敏度为0.03, 0.06, 0.125, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0 EU/ml的凝胶法鲎试剂。操作简便，经济，反应只需在37℃恒温水浴内进行。
浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程过程中浊度变化而定量测定内毒素含量的方法。目前，我公司有提供动态浊度法鲎试剂盒，配套微板鲎试仪ELU808使用，其检测范围宽，检测限可达到0.005EU/ml – 10 EU/ml，同时其样本检测量小，快速测定，多孔同时检测，可提高工作效率。
同时，有显色基质法鲎试剂盒定量测定内毒素含量，其检测时间短，抗干扰能力强，检测限为0.01EU/ml-1 EU/ml 。可配套使用微板鲎试仪ELU808 ， 通过96孔微板检测，最适宜的测定波长为405nm。也可使用分光光度计，通过试管检测，最适宜的测定波长为545nm。
凝胶法只能对样品中内毒素含量进行定性判断，也就是样品中的内毒素大于或小于某一个值，不能准确测定中样品的内毒素含量。而浊度法和显色基质法是定量测定内毒素含量的方法。

厦门市鲎试剂实验厂有限公司

⑺ 在检测内毒素中，哪些样品需要预处理方法是什么和检测方法

1、对于过酸、过碱或本身有缓冲能力的供试品，需调节被测溶液（或其稀释液）的PH值，可使用酸、碱溶液或适宜的缓冲液调节PH值。
2、酸或碱溶液须用细菌内毒素检查用水在已去除内毒素的容器中配制。
3、内毒素凝胶法或定量法。