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磷酸肌酸酶检测方法

发布时间:2023-02-16 03:56:50

㈠ 血清肌酸激酶简介

目录

1 拼音

xuè qīng jī suān jī méi

2 英文参考

SCK

serum creatine kinase

3 概述

肌酸激酶(CK)又称肌酸磷酸激酶,能可逆地催化肌酸和三磷酸腺苷生成磷酸肌酸和二磷酸腺苷的反应。在pH中性条件下,逆反应为正反应的2~6倍,即以ATP生成为主,以保证组织细胞的供能。而正向反应利于线粒体内氧化磷酸化生成的ATP,以磷酸肌酸的形式进入细胞液,满足细胞生理活动之需要。CK广泛存在于骨骼肌、心肌和脑组织中,以横纹肌最多,心肌和脑组织中次之。而肝脏、红细胞和其他器官均不含此酶,血清中含量极微。CK测定主要有肌酸显色法、酶偶联法,还有荧光法和生物发光法。

4 血清肌酸激酶的医学检查

4.1 检查名称

血清肌酸激酶

4.2 分类

血液生化检查 > 酶类测定

4.3 取材

血液

4.4 血清肌酸激酶的测定原理

(1)肌酸显色法:磷酸肌酸和二磷酸腺苷(ADP)在CK作用下生成ATP和肌酸,后者与双乙酰和α萘酚结合生成红色化合物,其颜色的深浅与酶活性成正比。

(2)酶偶联法:CK催化ADP与磷酸肌酸之间的反应,产生ATP,偶联己糖激酶(HK)及葡萄糖6磷酸脱氢6磷酸脱氢酶(G6PD)的催化反应。HK催化葡萄糖被ATP磷酸化,形成葡萄糖6磷酸(G6P)。G6PD催化G6P被NADP+氧化成6磷酸葡萄糖酸内酯(6PG)和NADPH,后者的生成速率与CK活性成正比。

4.5 试剂

(1)肌酸显色法:

①TrisHCl缓冲液(pH7.4):称取Tris 2.42g,加蒸馏水100ml,0.2mol/L HCl 88.8ml,无水硫酸镁0.34g,调pH至7.4,室温可保存数月。

②12mmol/L磷酸肌酸溶液:称取磷酸肌酸钠盐43.6mg,加蒸馏水10ml,溶解后于-25℃或冰箱内冰盒中保存。

③4mmol/LADP溶液:称取ADP钠盐23.3mg,加蒸馏水10ml溶解,保存-25℃或冰盒中。

④混合底物溶液:临用前将试剂1、2及3等量混合,在9ml混合液中加盐酸半胱氨酸31.5mg,调pH7.4,置冰盒中可保存1周。若空白管吸光度太高,表明游离肌酸产生,应弃去重配。

⑤50g/L硫酸锌溶液:准确称取ZnSO4·7H2O 5g,加蒸馏水少许溶解,并稀释至100ml。

⑥60g/L氢氧化钡溶液:称取Ba(OH)2·8H2O 6g,溶于100ml热蒸馏水中,煮沸数分钟,冷却后加蒸馏水至100ml过滤。

取5ml 50g/L ZnSO4溶液,加少许蒸馏水和酚酞指示剂2滴,用Ba(OH)2溶液滴至出现粉红色为止。根据滴定结果,用蒸馏水稀释Ba(OH)2溶液,使其恰与等体积的ZnSO4溶液中和。

⑦贮存堿溶液:称取NaOH 30g,无水碳酸钠64g,加入蒸馏水溶解,并稀释至500ml,置塑料瓶保存。

⑧α萘酚溶液:称取α萘酚400mg,加贮存堿溶液10ml。需新鲜配制,否则空白管吸光度偏高。

⑨双乙酰溶液:先配成10g/L水溶液,冰箱可保存数月。临用前用蒸馏水作20倍稀释。

⑩1.7mmol/L肌酸标准液:精确称取无水肌酸22.3mg,加蒸馏水至100ml,冰箱可保存数月。

(2)酶偶联法:目前各实验室多购买商品试剂盒,国际临床化学联合会(IFCC)推荐的配方为:300U/L HK,2000U/L G6PD,2.0mmol/L ADP,5.0mmol/L AMP,10mmol/L 5腺苷二磷酸,2.0mmol/L NADP,20mmol/L NAC,30mmol/L磷酸肌酸,20mmol/L葡萄糖,10mmol/L醋酸镁,2.0mmol/L EDTA,0.1mmol/L咪唑缓冲液(pH 6.7)。

4.6 操作方法

(1)肌酸显色法:按表1操作。

混匀,在540nm波长,空白管调零比色,读取吸光度。

(2)酶偶联法:各实验室可根据本室的自动分析仪型号及说明书编程,主要参数为:340nm波长,37℃,标本与试剂体积比为1∶50,延迟时间60s,反应时间60s,动力法。

4.7 正常值

(1)肌酸显色法:8~60U/L(0.5~3.6U)。

(2)酶偶联法:男24~195U/L,女24~170U/L。

4.8 化验结果临床意义

CK测定主要用于心肌梗死的诊断,对其他系统疾病的诊疗也具有一定意

义。

(1)急性心肌梗死,在发病2~4h开始升高,12~48h达到峰值,2~4天恢复正常,其升高程度较AST、LDH大,且出现早,与心肌损伤的程度基本一致,且心电图不易诊断的心内膜下心肌梗死和复发性心肌梗死时CK活性亦升高。动态监测有助于心肌梗死的病情观察和预后估计。

(2)多发性肌炎、进行性肌营养不良、严重肌肉创伤等CK亦明显升高。

(3)脑血管意外、脑膜炎、全身性惊厥、休克、破伤风等CK活性亦升高。

(4)甲状腺功能低下,某些感染性疾病,恶性高热,剧烈运动,各种插管及手术,肌肉注射氯丙嗪、抗生素等CK亦增高。

(5)甲状腺功能亢进,系统性红斑狼疮,慢性关节炎及应用类固醇制剂、避孕药和化疗可使CK活性降低。

4.9 附注

(1)肌酸显色法:

①肌酐、精氨酸、胍乙酸等也可与α萘酚及双乙酰产生颜色反应。故肾功能衰竭患者应用自身血清做空白对照,以消除肌酐的影响。

②α萘酚为白色或略带黄色之结晶,颜色过深,应在乙醇中重结晶后再用。

③Mg2+为激活剂,半胱氨酸提供巯基,氢氧化钡和硫酸锌沉淀蛋白并中和反应。

④血清CK活性>200U/L时,应用已知CK活性正常的血清稀释后重测,其结果乘以稀释倍数。

(2)酶偶联法:

①最好使用血清作标本,也可用肝素抗凝血浆,因CK活性不稳定,室温仅能稳定4h,4℃仅稳定8~12h,故标本采集后应尽快分离血清,及时测定。不能及时测定,应避光、低温保存。温度升高引起的酶失活为不可逆的。

②红细胞内不含CK,轻度溶血无影响,但中、重度溶血可因红细胞内释放出的AK、ATP及G6P,使CK值假性升高。

③Mg2+、Ca2+、Mn2+对该酶有激活作用,Cl-、SO42-、PO43-、枸橼酸、氟化物可抑制其活性。

4.10 相关疾病

㈡ 体检,磷酸肌酸激酶超高,要1700多,同时血压85-142

一、血压稍高,磷酸肌酸激酶ch先看一下磷酸肌酸激酶正常值:
无机磷法:0-200U/dL
比色法:M(男):0.55-7.5U/dL
F(女):1.45-4.0U/dL
磷酸肌酸激酶增高。在心肌或骨骼肌受损时,此酶会增高,但您无相应的病史和症状,您若体检前有较剧烈的运动此酶也会增高。
二、做这个检查的意义
磷酸肌酸激酶增高。在心肌或骨骼肌受损时,此酶会增高,但您无相应的病史和症状,您若体检前有较剧烈的运动此酶也会增高。
中文名称:血清磷酸肌酸激酶
英文名称:CPK
化验介绍:磷酸肌酸激酶(CPK),主要存在于骨骼肌和心肌,在脑组织中也存在,是参与体内的能量代谢的一种酶。在临床上主要用于诊断心肌梗塞。心肌梗塞患者发病后2-4小时,血液中此酶活动即开始升高。比血清中谷草转酸酶和乳酸脱氢酶的活力变化都出现得早。
临床意义:
(1)心肌梗塞后,CPK较谷草转氨酶和乳酸脱氢酶特异性高,但持续时间短,2-4天恢复正常。
(2)病毒性心肌炎,CPK也可升高,对诊断及预后有参考价值。
(3)进行性肌营养不良、多发性肌炎以及肌肉损伤时CPK也可升高。
(4)严重的心绞痛、心包炎、房颤、脑血管意外、脑膜炎以及心脏手术等,CPK可见升高。
肌酸磷酸激酶及其同功酶的升高是急性心肌梗死的一个重要诊断指标。肌酸磷酸肌酶是一种酶,并证实主要存在骨骼肌、心肌和脑组织中,而胃肠道、子宫、肾和膀胱只有微量的浓度。血清中的肌酸磷酸激酶升高,说明组织中有细胞坏死,这些酶有两个组成部分,肌肉部分和脑部分。血浆中证实有3种同功酶,BB-CPK、MM-CPK和MB-CPK。MB-CPK主要存在心肌组织中,可用免疫学或电泳测定的方法测得结果。
酸磷酸激酶(CPK)过高,说明你的心血管不好,需要注意身体了
尽量不要抽烟,喝酒,少吃胆固醇过高的食品

㈢ 肌酸激酶

磷酸肌酸激酶增高。在心肌或骨骼肌受损时,此酶会增高,但您无相应的病史和症状,您若体检前有较剧烈的运动此酶也会增高。

中文名称:血清磷酸肌酸激酶
英文名称:CPK

化验介绍:磷酸肌酸激酶(CPK),主要存在于骨骼肌和心肌,在脑组织中也存在,是参与体内的能量代谢的一种酶。在临床上主要用于诊断心肌梗塞。心肌梗塞患者发病后2-4小时,血液中此酶活动即开始升高。比血清中谷草转酸酶和乳酸脱氢酶的活力变化都出现得早。

临床意义:
(1)心肌梗塞后,CPK较谷草转氨酶和乳酸脱氢酶特异性高,但持续时间短,2-4天恢复正常。
(2)病毒性心肌炎,CPK也可升高,对诊断及预后有参考价值。
(3)进行性肌营养不良、多发性肌炎以及肌肉损伤时CPK也可升高。
(4)严重的心绞痛、心包炎、房颤、脑血管意外、脑膜炎以及心脏手术等,CPK可见升高。

正常值:无机磷法:0-200U/dL
比色法:M(男):0.55-7.5U/dL
F(女):1.45-4.0U/dL

肌酸磷酸激酶及其同功酶的升高是急性心肌梗死的一个重要诊断指标 。肌酸磷酸肌酶是一种酶,并证实主要存在骨骼肌、心肌和脑组织中,而胃肠道、子宫、肾和膀胱只有微量的浓度。血清中的肌酸磷酸激酶升高,说明组织中有细胞坏死,这些酶有两个组成部分,肌肉部分和脑部分。血浆中证实有3种同功酶,BB-CPK、MM-CPK和MB-CPK。MB-CPK主要存在心肌组织中,可用免疫学或电泳测定的方法测得结果。

酸磷酸激酶(CPK)过高,说明你的心血管不好,需要注意身体了

尽量不要抽烟,喝酒,少吃胆固醇过高的食品

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㈣ 肌营养不良的确诊方法你了解吗

肌营养不良是一种比较可怕的疾病,通常会导致人体产生许多不可逆的伤害。大家在遇到肌肉营养不良的时候,一定要找一些确诊的方法,从而帮助自己确定肌营养不良的症状和具体的诱发因素。下面是比较常见的肌肉营养不良的确诊方法,希望能够大家能够尽快识别肌肉营养不良的问题。
血清磷酸肌酸激酶会有明显的上升,高出正常数十,有时候是几百倍,这在其它肌病很少见。在临床症状基本不会太明显,容易导致其他的异常疾病。但当疾病晚期、肌纤维都发生变性时,这种血清磷酸肌酸激酶在体内的含量反而可能下降。
肌电图。这是常用的肌营养不良诊断方法,通常可以通过肌电图来观赛出自己的身体健康水平,呈典型肌病表现,而且病变周围的神经传导速度正常。
肌肉活检:在显微镜的观察上面,可以观测得出肌纤维出现不等的广泛变性坏死,而且还间接存在深染肌纤维。这种容易导致纤维组织增生,造成了新营养不良的问题。
遗传学诊断通常能够初步判断出肌营养不良,对活检肌肉组织采用抗肌萎缩蛋诊断,而且还可以运用血DNA序列分析,并且能够证明抗肌萎缩蛋白基因发生了突变或缺失。遗传学的的检验方法,能够帮助人体快速得出肌肉组织的萎缩情况。

㈤ 心肌酶4项检查,哪4项检查的时候要注意哪些

目前心肌酶四项检查:
1、乳酸脱氢酶(LDH):心梗、肝脏疾病、恶性肿瘤、部分血液疾病。
2、肌酸磷酸激酶(CK):心肌炎、脑血管意外、甲状腺机能减退。
3、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB):急性心梗、特性优于肌酸磷酸激酶。
4、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDE):心梗、 肌营养不良、叶酸、B12缺乏。
由于心肌酶检查是抽血检查,所以需要注意一些事项!
抽血化验前一天,饮食不应有太大变化。不要大吃大喝,特别不要喝酒,不要进食过于油腻或太甜、太咸的食物,以免影响化验结果。另外,不要有剧烈运动。

㈥ 肌酸激酶高

正常啊,可以继续运动。 看看下面内容: 人体内多种组织和器官内含有肌酸激酶,其分布不均。主要分布在骨骼肌的肌纤维内。因此,运动容易使血清肌酸激酶活性升高,其原因是因为运动时缺氧,代谢产物堆积,供能相对不足等原因引起肌细胞膜通透性升高,或肌细胞膜受到损伤,促使酶从细胞内释放增加,酶进入血液循环,其中尤以肌肉牵拉的机械性损伤或产生血肿等原因较为重要。不同的运动负荷,包括长距离自行车、滑雪及马拉松跑对机械性影响较大,可以导致血清肌酸激酶的活性升高,特别是大强度的马拉松跑后4小时后开始升高,8小时达高峰。跳跃、短跑等短时间激烈运动是冲击性运动,也引起血清肌酸激酶活性升高。运动员在比赛后,肌酸激酶可上升至734 IU/L左右(正常值200IU/L以下),与急性心肌梗死病人数值相近,但运动员血清肌酸激酶来自骨骼肌。 为了避免运动后血清肌酸激酶的升高,检查血清肌酸激酶时应避免激烈的运动,以免临床误诊。 以下是CPK增加的原因,也是临床诊断的依据: 1.各种类型肌营养不良均可发生CPK活力升高,其中假肥大型肌营养不良酶的活力约可达正常的10--50倍。 2.肌肉创伤可使CPK活力升高。 3.剧烈运动、手术、肌肉注射也可引起此酶活性升高。 4.脑血管意外、脑膜炎、甲状腺机能低下等也可使CPK活力升高。 5.急性病毒性或风湿性心肌炎时CPK活性可达正常时的5倍。 6.急性心肌梗时,早期阳性检测率高,特异性强,酶活力上升程度与疾病严重程度相一致。

㈦ 磷酸肌酸底物法是速率法吗

磷酸肌酸底物法是速率法。

速率法a通常用在酶活性测定时,反应曲线上肯定有成线性的区域,而两点速率法又称固定时间法或一级动力学法,利用的是一级反应,在仪器上的区别主要是前者会有一个检测线性区线性度,利用最小二乘法拟合直线,计算速率;而两点速率法没有线性度检测,直接用吸光度差除以时间计算。

反应原理

CK催化CrP转变成Cr,同时ADP磷酸化成ATP,然后进行酶偶联反应。反应式如下:上述反应式中,第一步CK反应产生ATP,用HK/G6PD(己糖激酶/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)偶联反应,最终使NADP转变成NADPH,可在340nm波长进行监测。

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