区分野毒感染和疫苗的检测方法

㈠ 非洲猪瘟野毒与疫苗毒的区分，猪瘟特效药

非洲猪瘟野毒与疫苗毒一般需检测3个基因来区分，用CD2v基因或MGF360基因或两个全做来检测，野毒三个基因都为阳性，疫苗毒CD2v/MGF360为阴性。非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒所引起的疾病，病猪会有发烧、食欲减退、无精神、呼吸困难等症状，在耳朵、鼻子等部位也会有紫斑。

一、非洲猪瘟野毒与疫苗毒的区分

1、区分方法

一般可检测3个基因来区分非洲猪瘟野毒与疫苗毒，用p72基因检测非洲猪瘟病毒后，再用CD2v基因或MGF360基因或两个全做检测感染的是野毒还是疫苗，野毒三个基因都为阳性，疫苗毒的CD2v/MGF360为阴性。

2、非洲猪瘟简介

（1）非洲猪瘟是我国重点防范的一类动物疫情，其发病过程短，最急性以及急性感染死亡率高达100%，是由非洲猪瘟病毒所引起的疾病。

（2）该病主要危害猪的脾脏、淋巴结、肾脏、肝脏、心脏等部位，病猪的体温会出现升高至41-42℃，食欲明显减退，没有精神，还会出现呼吸困难的症状，同时在耳朵、鼻子、腿部、腹部以及腋下等部位会出现明显的紫色斑。

（3）一般病猪在发热后第七天死亡，或症状出现1-2天后就会死亡。

二、猪瘟特效药

1、治疗猪瘟的特效药

治疗猪瘟一般没有特效药，平时多以预防为主，通常可注射猪瘟弱毒疫苗进行预防。猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，该传染性大，发病率和死亡率均高。

2、预防猪瘟的方法

（1）实行自繁自养，如果需要从外地购买猪种，运回后需隔离饲养半个月左右，确定无病且注射了疫苗，才能混群饲养。

（2）做好猪圈舍、周边环境、管理用具的卫生消毒工作，定期消毒，及时清理粪便，避免有细菌滋生。

（3）发生猪瘟后，可用大剂量猪瘟疫苗（10-30头份）肌肉注射，剂量一般为0.5头份/kg体重。

㈡ 请问猪伪狂犬病非免疫阶段监测结果该怎么看

后备种猪、种公猪、引种猪群发现伪狂犬病抗体阳性者，坚决予以淘汰。所有后备种猪和引进种猪，只有在确保伪狂犬病抗体阴性的前提下方能并群饲养。育肥猪（10周龄以上）的伪狂犬病抗体检测结果，作为养殖场伪狂犬病循环的重要监视靶标，需加以重视。如出现疑似病例，应立即开展病原学检测，淘汰确诊病例，鼓励有条件的养殖场直接淘汰临床疑似猪。必要时对同栏和同舍猪进行紧急免疫，做好消毒和生物安全措施，防止舍间扩散。养殖场经历免疫净化阶段工作，达到免疫净化水平后，可根据本场生物安全水平和周边疫情风险，自主选择性逐步退出免疫，开展本阶段的非免疫净化工作。由于目前绝大部分猪场使用伪狂犬病gE基因缺失疫苗，采用gE-ELISA方法可以对该病进行鉴别诊断。对于gE抗体阳性猪，可分为感染发病猪、感染康复猪或者健康仔猪(母源抗体)3种情况。对于gE抗体阴性猪，可分为健康猪、或猪刚感染野毒抗体尚未转阳2种情况。gB抗体为保护性抗体，由于gB抗体无法区分疫苗毒和野毒，且不能确定gB抗体水平高低与免疫时机、临床发病之间的关系，所以，在目前猪群普遍感染伪狂犬野毒的情况下gB抗体检测意义有限。对感染带毒猪的脑、肾、扁桃体等组织PCR(gE片段)检出率相对较高。对于PCR检测为阴性的猪，可能为健康猪或是组织病料含毒量低、检测方法不敏感等情况。

㈢ 猪场明明已经做了防疫，为什么还会得病

文图 山东大区冯德永

近几个月，笔者在市场走访时，不少猪场老板反映向笔者近期猪场出现的一些让人头痛的问题：母猪流产、产死胎、屡配不孕或刚产完的小猪出现死亡、腹泻、有呼吸道和神经症状、产后存活3-4天后又出现伤亡现象，并且出现的猪场比例还不小。不少猪场老板对此一头雾水，明明已经打了疫苗，保健药也用了为什么还会出现这种情况？

想要知道具体的原因，我们还先得从几个猪场出现的实际情况说起。

{猪场案例一}

聊城一猪场，小猪出生健康，3天后死亡

养殖情况：母猪存栏130多头。2017年10月17日猪场老板打电话说近阶段母猪产的小猪头2-3天表现健康，3天以后小猪就开始出现腹泻，紧接着出现死亡。情况严重的母猪会产出很多死胎，成活小猪比例不大，但母猪临床症状不明显。第二天，笔者到猪场查看实际情况并与老板沟通交流猪场情况。老板告诉笔者疫苗做得很好，并且注射的疫苗防病种类也很齐全全。笔者随后解剖了几个病死小猪，并取样拿到聊城大学畜禽疾病防制研究所的化验室进行化验。

死亡后的小猪

在化验室里进行解剖

猪场一检 测报 告（20171018）

检测材料：血样5

检测方法：使用标准试剂盒ELISA方法及猪瘟胶体金检测卡检测。

项目：蓝耳抗体、抗原；猪瘟抗体、抗原；伪狂犬gE抗体、圆环抗体

仪器：美国BIO-RAD M680全自动酶标仪

ELISA检测结果：

1.样本蓝耳抗体80%（4/5）呈阳性，抗原基本呈阴性。

2.样本圆环抗体全部呈阳性。

3.样本猪瘟抗体基本呈阳性，抗原40%（2/5）部分呈阴性。

4.样本伪狂犬gE抗体呈阳性。

判断：

（1）如果蓝耳和圆环没有免疫，这表明野毒普遍感染。

（2）猪瘟基本正常，部分存在野毒感染问题。应该来源于母体。

（3）伪狂犬gE抗体均呈阳性，表明野毒感染。

总结：此前有蓝耳、圆环和伪狂犬的野毒感染，感染情况严重。加之新环境的应激。严重发病。

建议：

（1）增加蓝耳病和圆环疫苗免疫。

（2）调整伪狂犬的免疫程序或更换新型疫苗。

附：抗原抗体检测原始结果

*黑色为阳性，红色为阴性

{猪场案例二}

河南濮阳猪场，乳猪死亡速度快，母猪屡配不孕

养殖情况：母猪存栏100多头。乳猪没有临床疾病症状，就出现死亡，死亡速度快，死亡率高。母猪出现屡配不孕，有的甚至出现流产，流产概率达到10-15%之间。在与老板交流过程中得知猪场防疫没问题，防疫程序已经使用了好几年，疫苗采用大公司产品，防疫方面应该是做得比较到位。11月26日笔者抽血到聊城大学畜禽疾病防制研究所来进行化验室进行化验。

猪场二检 测报 告（20171129）

检测材料：血样5

检测方法：使用标准试剂盒ELISA方法及猪瘟胶体金检测卡检测。

项目：蓝耳抗体、猪瘟抗体、伪狂犬gE、GB抗体、圆环抗体

仪器：美国BIO-RAD M680全自动酶标仪

ELISA检测结果：

1.样本母猪的猪瘟、蓝耳、圆环抗体呈阳性，抗体正常。样本母猪的伪狂犬gB、gE抗体呈阳性。表明野毒感染。

2.样本仔猪的蓝耳、伪狂犬gB抗体呈阳性、伪狂犬gE抗体成阴性。

3.样本仔猪的猪瘟、圆环抗体呈弱阳性。

判断：

1.母猪的猪瘟、蓝耳、圆环抗体水平充足，免疫有效；如果以上疫苗都已正常防疫，表明正常。

2.伪狂犬野毒阳性，建议更换非Bartha经典毒株的疫苗。

3.仔猪的猪瘟、圆环、伪狂犬抗体水平不高，建议加强免疫，其中，1号患螨虫的仔猪猪瘟抗体水平偏低。（不知道是第几次免疫，可以在免疫的时候使用一些好的免疫增强剂同时用，如转移因子、黄芪多糖等）

结论：主要是伪狂犬的野毒感染。

附：抗原抗体检测原始结果

*黑色为阳性，红色为阴性

{猪场案例三}

河南濮阳猪场，母猪突然流产

养殖情况：母猪存栏80多头。近段时间猪场母猪无任何临床症状，突然出现流产，已有十几头母猪出现流产症状。笔者与老板沟通得知，猪瘟、蓝耳、伪狂犬、圆环疫苗都已经注射过。

通过实验室检测结果我们先看一下实际情况如何：

猪场三检 测报 告（20171203）

检测材料：血样6

检测方法：使用标准试剂盒ELISA方法检测

项目：猪瘟、圆环、蓝耳、伪狂犬GB抗体

仪器：美国BIO-RAD M680全自动酶标仪

ELISA检测结果：

1.母猪样本1、3、4、5猪瘟、伪狂犬gB、蓝耳呈阳性，免疫起到了效果。

2.仔猪样本猪瘟及伪狂犬gB呈阳性，免疫效果良好。

3.仔猪样本猪瘟及伪狂犬gB呈阴性，未起到免疫效果。

4.除样本的圆环呈弱阳性，样本的圆环呈阴性，建议加强圆环的免疫或者更换圆环疫苗。

结论：结合主诉，伪狂犬gB正常的情况下，出现流产或不稳定的情况，表明gE野毒感染存在（虽然未测）。圆环抗体水平较低，是次要原因。

建议：调整伪狂犬和圆环的免疫。

附：抗原抗体检测原始结果

*黑色为阳性，红色为阴性

根据近段时间猪场的发病情况和猪场化验室检测的情况来看，现在猪场确实存在一些防疫漏洞和不科学的地方，导致我们猪场本来能通过防疫来减少的疾病，还不断地的出现。而母猪的生产不断出现意外，导致母猪生产性能下降，猪场效益降低。

为什么猪场疫苗做了猪还会得病？

为什么按防疫程序进行的防疫，猪场的生物安全提高却也不明显？

现就化验室检测结果与猪场临床表现来进行分析，猪场想要达到正确、有效果的防疫，如下一些建议值得猪场老板进行考虑：

1.每年最好做两次抗体、抗原的实验室检测，来判断我们的防疫程序、防疫的种类是否符合自己的猪场实际情况。母猪、保育猪可按8--10%的比例进行抽血化验。

2.要确保猪场饲喂的饲料没有霉菌毒素，特别是自配料的客户，更要检测原料的霉菌毒素的含量，把控好原料质量。霉菌毒素对猪的健康影响很大，对防疫效果也有很大的影响。

3.要确保饲喂饲料营养全面、均衡，饲喂的饲料能满足猪的生长阶段的营养和生理需求，这样的猪才能健康。所以饲料一定要选择一个大公司：有科学技术含量高的配方、有先进的加工工艺、有质量保证的原料来源、有精密的检测设备，有了这些才有质量的保障。

4.要想提高免疫效果，在防疫时添加免疫增效剂效果很明显。防疫对象要符合防疫时的阶段，符合防疫对动物健康的要求。

5.要想有好的防疫效果，疫苗的质量至关重要

（1）我们要选择有研发能力、有生产资质的大公司。

（2）疫苗的物流过程也很重要，疫苗要选择有正确保存疫苗能力的单位，买来后我们自己也要按厂家要求进行保存。

（3）疫苗防疫要正确操作：正确的注射部位、正确的注射器械、正确的注射剂量。

【冯老师猪经】

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㈣ 猪伪狂犬病的诊断鉴别

猪伪狂犬病在临床上类似病有链球菌性脑膜炎、水肿病、食盐中毒等。
（1）链球菌性脑膜炎：除有神经症状外，还有皮肤出血、肺炎及多发性关节炎症状，白细胞数增加，青霉素等抗生素治疗有良性效果。
（2）水肿病：多发生在断奶幼猪，眼睑浮肿，体温不高，声音改变，胃壁和肠系膜水肿。
（3）食盐中毒：吃盐过多，体温不高，喜欢喝水，有出血性胃肠炎，无传染性。

㈤ 哪些设备可以检测猪病尤其是常见的猪病。

猪场的常见病主要是传染病和寄生虫病，尤以前者最为严重。因此，实验室检测的重点主要是猪传染病。猪传染病分为细菌性传染病和病毒性传染病，细菌性疾病的实验室检测方法主要有涂片镜检、分离培养、生化试验、动物试验、血清型鉴定及药敏试验等，属于传统的实验室检测方法，操作繁琐，需要的时间长。
病毒性疾病检测常用方法主要有 3 种 ：
一是胶体金检测卡试纸条，如猪瘟、猪伪狂犬病、猪蓝耳病等，分为抗原检测卡和抗体检测卡，检测所需时间短，但其敏感性较低，且检测结果只能提供阳性、弱阳性、阴性的半定量结果，无法提供数值性的检测结果。因此，该方法目前只能作为初筛诊断试剂，用于疾病的辅助诊断。同时，也无法区分是疫苗抗体还是野毒抗体 ;
二是抗体(抗原)检测 ELISA试剂盒，目前，常用的猪瘟、猪伪狂犬病、猪蓝耳病、猪圆环病毒病、猪口蹄疫等，既有国产的，也有进口的，操作方便，检测结果快，但需要酶标仪，并且抗体ELISA 检测试剂盒，除猪伪狂犬病等少数试剂盒外，其他大多无法区分疫苗抗体和野毒抗体，往往需要根据抗体水平升高的幅度和抗体离散度、临床表现等来进行判断，并且有些国产试剂盒与进口试剂盒检测结果存在一定差异。
三是PCR 检测方法，科研院所、大专院校及部分畜牧局系统应用较多，检测结果准确，但需要配套仪器，如 PCR 基因扩增仪、电泳仪、凝胶成像系统等，投入费用高，操作条件要求高，需要专业人士才能操作。
其他，如血凝试验、中和试验、凝集试验及琼脂扩散试验等，要么操作复杂、技术要求高，需要昂贵仪器，需要一定条件的实验室才能开展，要么特异性较低，也不适合大批量样品的检测。

㈥ 猪瘟检测方法有哪些

发病特点：在自然情况下，只是猪和野猪感染发病，任何年龄、品种、性别的猪都可以发病；本病在任何季节都可以发生。不按期进行预防注射的地区，一旦发病，在短期内，可造成广泛的流行。发病和死亡都很高。在常发地区或注射密度不很高的地区，可呈零星散发。病猪是主要的传染来源。传染途径主要是消化道，也可通过呼吸道、眼结膜及皮肤伤口感染。猪只的买卖、运输、尸体处理不当、内品卫生检验不严，兽医卫生措施执行不力，人、动物和昆虫等都可成为间接的传染媒介，促进本病的发生和流行。通过胎盘传染使仔猪患病，成为防制中十分棘手的问题。临诊症状：猪瘟与发生败血症的猪丹毒、猪肺疫和仔猪副伤寒在症状方面很相似，较准分开，应注意区别诊断。猪瘟的临诊特点是：体温升高到40.5～42C稽留热；有脓性结膜炎；病初便秘，后腹泻；在病猪耳后、腹部、四肢内侧等毛稀皮薄等处，出现大小不等的红点或红斑，指压不褪色；公猪有包皮发炎，用手挤压时，有恶臭混浊液体射出，急性病例，多在1周左右死亡。死亡率可达60﹪～80﹪；小猪有神经症状；慢性猪病，体温时高时低，食欲时好时坏，便秘与腹泻交替发生，病猪明显消瘦、毛焦臁糜，行走不稳。一般病程可达20天或以上，死亡居多。 病理剖检变化：急性猪瘟主要呈现败血症变化，有诊断价值的变化是：皮肤或皮下有出血点；颚凹、颈部、鼠蹊、内脏淋巴结肿大，呈暗红色，切面周边出血；肾脏色淡，不肿大，有数量不等的小点出血；脾脏边缘梗死；喉头粘膜、会厌软骨、膀胱粘膜、心外膜、肺及肠浆膜，粘膜有出血。慢性病猪特征的变化是有盲肠、结肠及回盲口处粘膜上形成扣状溃疡。

㈦ 什么是野毒感染

感染伪狂犬野毒后，各阶段的猪只主要表现为突然不吃食、发烧、后腹部起伏较快、张口呼吸喘气、咳嗽症状并不大明显，部分猪只流鼻水或浓鼻涕、哺乳期或保育猪出现神经症状，嘴有白沫或唾液粘稠可拉丝状，水泄、呕吐、气喘、母猪感染发烧、喘气、流产等症状。抗生素治疗无明显效果表现、死亡前有嘴巴一张一合呼吸困难的症状。兽医工作者按流感治疗用药无确切效果。

现将治疗方法分享给养殖场及技术服务工作者，供大家参考。

肺炎症状表现的发病群体
1.肌注四川华神兽用生物制品有限公司的伪狂犬三基因缺失SA-215疫苗，体重50斤以下1.5头份；体重50斤以上2~3头份；

2.同时全群投药饮水仙锋-70（30%阿莫西林·克拉维酸钾1000克）、甘草颗粒1000克、清热宁、板青颗粒1000克、南极冰1000克/吨水（用2~3天）；

3.张口呼吸困难的个体治疗，以200斤体重示例：肌注长效头孢10毫升、地米5毫升、鱼腥草10毫升、二氢丙茶碱4~6毫升一侧，阿米卡星10毫升、高热清（柴胡）10毫升、速尿6~8毫升打另一侧；

4.饲料拌药：泰康宝500克、林可康1000克、巨力康2000克、肝胆颗粒1000克或肺喘清2000克/吨饲料。注意一定要同时投药防止继发感染。

脑炎症状表现个体
1.打扑伪优SA-2151~2头份；

2.在4~6小时后，以40斤左右为例：吊甘露醇200毫升，青霉素1000万、地米10毫升、速尿4毫升，另外肌注磺胺嘧啶钠10毫升。

水泄、呕吐、气喘的哺乳仔猪
1.打扑伪优SA-2151头份；

2.五联清10毫升、清开宁10毫升、0.5%恩诺沙星2毫升、林可或阿米卡星2毫升、硫酸阿托品2毫升混合后各肌注2~3毫升。

以上方案从打苗同投药饮水拌料起计时24~48小时内基本康复。

㈧ 猪伪狂犬病本底调查阶段的监测结果如何处理

生物安全是防止传染病传入猪场、在猪场内传播以及传出猪场的各种措施。其中有些是关键的，如引种安全、装猪台管理、运猪车消毒、灭鼠、灭蚊蝇、犬猫的控制、外来人员控制等，最终目的是严防伪狂犬病毒，特别是新毒株的引进。引种不管猪场是阳性还是阴性，一定要引进伪狂犬野毒阴性的种猪，首先要了解供种猪场的伪狂犬病状态，然后需要逐一检测，gE抗体阳性猪最好淘汰。隔离在隔离期间需要认真观察并定期检测，若有gE抗体转阳者，需要坚决淘汰。装猪台管理装猪台是外界通向猪场生产区的门户，很多疾病是从此传入猪场的，因此需要采取单向流动，出来的猪不能返回。装完猪后需要彻底的冲洗和消毒，而且污水不能倒流。运输车辆运输车辆需要全方位冲洗消毒和干燥，因为他是污染最严重的，特别是去屠宰场的车辆。