‘壹’ 怎么检测牛奶酸度
新鲜的牛奶具有一定的酸度,这是奶中的酸性物质自然产生的。牛奶挤出后存放过程中,由于微生物分解乳糖,使牛奶酸度升高。如果酸度过高,就影响牛奶的品质,导致不能食用或不能用于加工乳制品。
评定牛奶的酸度,通常用滴定酸度法。测定时,取100毫升牛奶(也可取10毫升牛奶,这时需将碱液的消耗数乘以10),用酚酞作指示剂,以0.1N的氢氧化钠滴定,按所消耗的毫升数来表示,消耗1毫升为1°T(称T度)。正常牛奶的酸度通常为16~18°T。
生产上,还利用酒精试验,检测牛奶的新鲜程度。方法是:以72%酒精与等量牛奶混合,5秒钟内,观察有无凝块出现。没有凝块,说明牛奶较新鲜。但该方法并不直接反应牛奶的酸度。
‘贰’ 怎么鉴别乳酸菌
都要求无菌操作
菌种的分离 取lmL卤汁以10倍递增稀释方法(一份酸奶,九份无菌水,再取一份第一只管中溶液,加九份无菌水,依次类推),将其稀释至1/10~10的-10次幂(我打不上去),然后从不同浓度稀
释液中分别取lmL倾注在平皿中,再倒入培养基相混合,待培养基凝固后倒置于30~C恒温下
培养48h。挑取长势良好的单个茵落划线分纯,直至纯化(茵落单个大小一致,革兰氏染色镜
检,茵体一致)。结果分离得到3株不同菌株,分别编号为菌株1、菌株2、菌株3。再分别转移
到试管斜面上进行保存。
分离用培养基:牛肉膏5g,蛋白胨10g,氯化钠5g,蒸馏水1 000 mL,琼脂20g,pH7.0—7.2
;保存用斜面培养基:酵母膏1% ,碳酸钙2% ,葡萄糖1% ,琼脂2% ,pH 7.0。
培养条件
将分离出的菌株1、菌株2、菌株3分别接种在上述4种不同的培养基上,
在30。【=恒温条件下培养48h后观察并测定其培养结果。
测定方法 菌落总数采用逐级稀释法来计数;pH值用pHS一2C酸度计测定;乳酸定性
及含量测定依据食品检验技术
1I.2.1乳酸菌的分离与筛选的试验程序 自然发酵酸菜汁液一稀释一培养一挑起单菌落染色、镜检一挑
选革兰氏阳性球菌单菌落一Ⅲ号培养基一挑选溶钙圈大的球菌反复在Ⅲ号培养基上几次纯化筛选一单菌落优
良菌株一试管穿刺低温保存。
1.2 1.2 乳酸菌的鉴定 用光学显微镜、放大镜进行乳酸菌的形态特征鉴定。生理生化特征鉴定:产乳
酸定性试验——乳酸纸层析法0- 、过氧化氢酶(接触酶)反应⋯、明胶水解反应 、硫化氢反应 、乳酸菌
发酵营养型试验0 、耐盐、酸、温度试验。
1.2.I.3 乳酸菌的保存⋯ 采用定期移植低温保藏法。培养基配方:葡萄糖1% 、蛋白胨0 2% 、
l(}l2PQ|0.2%、琼脂20%、pH值7 0,分装试管,121。c灭菌30min。将使用对数生长期后期的细胞进行穿刺
培养,然后密封存于冰箱玲藏室内(5qc左右),2个月移植1次。
1.2.2 分离乳酸菌的生理特点试验
1 2 2.1 最适生长温度的测定OD值以同温下不接种培养基作对照,定期取出接种培养基在721分光光度
计上,用最大吸收光波长 =6001RIifl测定。
1.2.2.2 生长周期的测定oD值(方法同上);pH值:PHB一4pH计;可滴定酸(以乳酸计):吸取ImL菌液
加入9Ⅱ1L蒸馏水,加入1~2滴酚酞,用0.1NNaOH滴定。
1.2 2.3 最适pH值的测试、最适盐浓度的测试。
供试样品及培养基
分离用样品:泡菜汁、酸奶及西红柿均为市售
分离用培养基:①BCP培养基:酵母膏2 5g,蛋白胨5g,葡萄糖5g,溴甲酚紫0 04g,琼脂15g,
蒸槽水lO00ml,pH7 0;②MRS培养基见文献 。
菌种保藏用培养基:脱脂乳培养基:新鲜牛乳离心去掉上层乳脂,下层奶液分装试管,105℃
灭菌20mln。
菌利 鉴定用培养基见文献 6。
1 2 方法
1 2 1 乳酸菌的分离纯化 取泡菜汁、酸奶、西红柿表面洗液进行梯度稀释,分别用倾注法、涂布
法和划线法在BCP和MRS培养基平板上进行菌种分离。挑取在BCP平板上有透明目的菌落,在
MRS平扳上有溶钙圈的菌落,反复纯化至纯种,挑菌至脱脂牛奶试管中保存
1.2 2 乳酸菌复筛对初筛菌株进行革兰氏染色,保留革兰氏阳性菌株.并对其所产乳酸能力进
行定性、定量分析,筛选出产酸高的菌株保存,再把产酸高的菌株经萝l、汁发酵 】,进一步选择产
酸高、_l】味纯正的菌株保存鉴定
1 2 3 乳酸定性测定果用纸层析法。溶剂系统为乙醇:浓氨水:水=80:5:15,显色剂为0 04%
的溴甲酚紫酒精溶液。层析时将乳酸、柠檬酸配成1% 的标准溶液,两种标准溶液 及乳酸发酵液
均点样3 .上行层析,显色与标准样比较
1.2 4 乳酸的定量测定采用气相色谱法,利用苄酯化法制备乳酸衍生物,将待测乳酸菌株在产
酸培养基内37"C培养3d,离心。取上清液剃备衍生物,气相色谱分析含量。气相色谱工作条件为:
EGS色谱柱,柱温160'C,气化温度180'17.,检测器温度l70"C,载气为N,。
1.2 5 菌种鉴定根据《简明第八版伯杰细菌鉴定手册》 和《一般细菌常用鉴定手册》[6 对复筛
出的菌株的形态、生理生化、碳源利用等方面进行系统鉴定,并提取乳酸菌株DNA,采用熔链温度
法捌G+C%含量 J。
‘叁’ 用高效液相方法测乳酸含量是乳酸为什么有两个响应峰
有机酸是白酒中重要的呈香呈味物质, 在白酒微量芳香成分中占很大比例, 有机酸在白酒中的含量的高低直接影响酒质的好坏, 所以定量分析白酒中有机酸的含量,对指导白酒酿造、勾兑有重大作用。目前,利用气相色谱仪可以分析白酒中乙酸、丙酸、丁酸、己酸等有机酸,但是由于乳酸在FID 上没有响应,所以在气相色谱仪上直接进样不能分析白酒中的乳酸。利用高效液相色谱仪直接进样,可同时分析出白酒中乳酸、乙酸的含量,此方法快速、准确度高、检测浓度范围宽,同时弥补了气相色谱仪不能直接分析乳酸的缺点。
‘肆’ 乳酸,琥珀酸的化学检测方法大神们帮帮忙 我想了解该怎样分离乳酸 化学方法怎样来检测乳酸
乳酸沸点122℃ 琥珀酸沸点235℃ 可以用蒸馏 琥珀酸常温下为固体,乳酸为液体 很容易区别
‘伍’ 工业乳酸含量检测方法,酸碱滴定法怎么分析
很简单,将一定量的乳酸溶于水中,以酚酞做指示剂,用标准氢氧化钠溶液滴定就可以了。