青霉菌的检测方法

A. 兽药中，测定青霉素含量的时候，用高效液相色谱法测定，需要用流动相A和流动相B ，是双泵加呢还是单泵

1、如果你的流动相组分由不同的比列组成，那么最好用双泵，洗脱效果好，这样可以使不同组成得到更好的分离。也可以使用单泵，但效果要差一点。
2、流动相A和B按一定比例一次加进去的话，这样可能会使流动相的某组分进入的量不准确，造成分离度不好。如果由A泵、B泵分开同时进入流动相，这样流动相组分比列较准确，这样洗脱效果更好。
3、如果你的流动相有三个组分以上，可以使某些量少、相容性好组分混合再进流动相，例如，以甲醇-醋酸-水（35:4:61）可以让醋酸和水混合为一项。另外，如果在探索色谱条件的时候，还可以适当调整流动相的比列，这样更容易确定流动相。

B. 青霉菌落形态特征描述

青霉的营养体为无色或淡色的菌丝体，菌丝各细胞之间有横隔膜，细胞内通常为多核，整个菌丝体分为伸入营养基质中吸取营养的基质菌丝和伸向空气中的气生菌丝，在气生菌丝上产生简单的长而直立的分生孢子梗。

顶端以特殊的对称或不对称的扫帚状的方式分支，称为帚状枝，分支为多极的分生孢子梗最后产生许多瓶梗，在瓶梗上着生分生孢子链，分生孢子为球形至卵形，呈绿色，蓝色或黄色，即通常看到的各种青霉菌落特有的颜色。

其分类：

青霉属于曲霉科，青霉和曲霉都为常见属，二者的主要鉴别特征是孢子梗的排列不同，曲霉的孢子梗是辐射状排列，呈头状，青霉与人类生活息息相关。少数种类能引起人和动物的疾病；许多种青霉能造成柑桔，苹果，梨等水果的腐烂；

对工业产品，食品，衣物也造成危害；在生物实验室中，它也是一种常见的污染菌，加强通风，降低温度，减少空气相对湿度，可以大大减轻青霉的危害。

但在另一方面，青霉对人类非常重要，在工业上，它可用于生产柠檬酸，延胡索酸，葡萄糖酸等有机酸和酶制剂；非常名贵的娄克馥干酪，丹麦青干酪都是用青霉酿制而成的；

最着名的抗生素——青霉素就是从青霉的某些品系中提取而来，它是最早发现，最先提纯，临床上应用最早的抗生素；当前发现的另一重要抗生素——灰黄霉素，是由灰黄青霉产生的，是抑制诸如脚癣之类的真菌性皮肤病的最好抗生素。

C. 微生物里菌落周围的透明圈越大说明什么，这种现象是出现在平板划线还是涂布划线

两种划线方法都可能出现。菌落周围的透明圈表明菌落周围的其他菌种被该菌种产生的某物质杀死，例如青霉菌产生青霉素；

通过平板划线而获得微生物纯培养物的方法，又称平板划线法。是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。通过反复划线分离，可获得微生物的纯种。

(3)青霉菌的检测方法扩展阅读：

划线的具体形式很多，一种有效的方法是将一个平板分成不同面积的4区，A区面积最小，作为待分离菌的菌源区，B和C区是逐级稀释的过渡区，D区面积最大，以便有机会出现较多的单菌落供选用

注意点：平板应较硬、较厚、表面干燥；划完A区后必须烧去接种环上的残菌，待冷却后再划B区；线条宜平行、密集、整齐，以充分利用平板面积。具体分区及操作方法见图。

D. 怎么从发霉的橘子皮里提取青霉菌具体的步骤。做实验要用。

在实验室条件下,用柚子培养青霉菌时，需将柚子制成培养基，经过灭菌后再接种青霉菌。然后从青霉菌中提取青霉素，但这种方法获得的青霉素量十分微小

E. 怎么培养青霉菌

操作难度：★★★

实验方法：

日常生活中，人们常常跟各种霉菌打交道。有的霉菌给人带来好处，比如米曲霉、千万霉、青霉和根霉等等。有小部分霉菌能够引起人和动植物的病害，比如某些霉菌能使人长头癣、脚癣以及番茄腐烂等等。

好，下面以青霉菌为例，了解一下简易的霉菌的培养方法。

把新鲜的橘子皮（如果是干橘子皮，先用水泡软，晾至半干）放在20~25℃的地方，最好是阴暗潮湿的地方。三五天后，你就可以发现橘子皮的内表面上长出许多小绒毛，这就是霉菌菌丝体。开始看到的是白色菌丝，过两天，这些白色菌丝的尖端变成了青绿色，这就是青霉菌，青绿色的粉末就是青霉菌的孢子。随着时间的延长，菌丝和孢子越来越多，整个橘子皮的内表面都长满了青霉菌。有时候，你还可以在橘子皮上看到红色、黄色、粉色或黑色等不同颜色的斑点。这是因为感染了其他霉菌的缘故。如果你要培养比较纯的青霉菌，就把第一次培养的橘子皮上的青霉菌，用一根牙签（或火柴棍）把它刮下来，抹到另一个新鲜的橘子皮上，进行第二次培养。这样经过两三次的纯化培养以后，橘子皮上长出来的就基本上都是青霉菌了。

知识延伸：

微生物学工作者培养霉菌，常用液体培养基。什么是培养基呢？简单说，就是用人工配制的适合微生物营养要求的混合物质。这个混合物质一般包括碳水化合物、含氮物质、矿物盐类和水等。现在，也顺便介绍一下液体培养基的配制方法：

把马铃薯削去皮，切成小碎块，称出200克放在1000毫升水里，再煮半小时（煮开后用小火）。然后，用纱布把汤滤出来，再加进一些冷开水，使汤还变成1000毫升。最后在这1000毫升的马铃薯汤里加入20克白糖，这就做成了培养基。

F. 英国科学家弗莱明在发明抗生素---青霉素的过程中进行了如下探索：【观察及思考】：培养细茵的培养基中，

实验设计原则：一个探究实验中只能有一个实验变量，其他因素均处于相同理想状态，这样便于排除因其他因素的存在而影响、干扰实验结果的可能；对照实验是在研究一种条件对研究对象的影响时，所进行的除了这种条件不同之外，其他条件都相同的实验．其中不同的条件就是实验变量．
（1）弗莱明在进行实验之前，对观察到的现象青霉素能抑制细菌生长进行了假设，该假设是：青霉菌可能产生了不利于细菌繁殖的物质．
（2）青霉菌和细菌由于不含叶绿体，不能进行光合作用制造有机物，只能吸收现成的有机物维持生活，因此营养方式是异养．二者必然争夺营养物质，所以形成了一种竞争关系．
（3）为了证明青霉素确实是青霉菌产生的，而不是培养液或培养基中的其他物质引起的，则应设计对照实验，方法是设置一组不加青霉素培养液的培养基，看上面有无细菌生长，这一组就是对照组．实验变量是：是否有青霉素．若对照组实验结果为有细菌生长，则整个实验的结论是青霉菌能抑制细菌生长．
（4）此小题属于开放题型，答案合理即可．解答时可以从他的治学态度上，也可从实验中得到的启发等等均可．比如：要善于发现问题；在设计对照实验时要注意控制单一变量；学习他的严谨的治学态度．
故答案为：（1）青霉菌可能产生了不利于细菌繁殖的物质；
（2）竞争；
（3）对照 没有培养过青霉菌的培养液加入培养基中，观察对细菌的影响；细菌正常生长有细菌生长；
（4）要善于发现问题；在设计对照实验时要注意控制单一变量；学习他的严谨的治学态度．（开放性试题，符合题意的答案即可）