肌醇的液相检测方法

‘壹’ 怎样用液相色谱法测蒸馏出的乙醇浓度

原理：首先是利用重铬酸钾氧化乙醇成为醋酸。3CH3CH2OH+2K2CrCO7+8H2SO4 →3CH3COOH+2Cr2(SO4)3+2K2SO4+11H2O，氧化乙醇后剩余的重铬酸钾则与碘化钾作用，生成游离的碘。K2Cr2O7+6KI+7H2SO4 →4K2SO4+Cr2(SO4)3+7H2O+3I2 最后游离的碘再被硫代硫酸钠还原，2Na2S2O3+I2→ 2NaI+Na2S4O6 从而根据氧化乙醇所消耗的重铬酸钾量计算出乙醇含量。

参考检测方法：
1、试剂制备：
（1）0. 1 N 标准重铬酸钾溶液： 精确称取重铬酸钾 4. 9g，溶解后移入1 000ml 容量瓶中，稀释到刻度。
（2） 0. 1 N 硫代硫酸钠溶液： 称取硫代硫酸钠约 25 ， 溶解后移入1 000ml 容量瓶中， 稀释后定容至刻度。
（3） 硫代硫酸钠溶液的标定： 吸取标准重铬酸钾溶液20ml 于500ml 的三角瓶中， 用量筒加入浓硫酸5ml 及碘化钾 2g， 盖塞在暗处 放置 5min， 加水约 200ml， 用待标定的硫代硫酸钠溶液滴定， 当溶液由橙色为 止 。 从 硫 代 硫 酸 钠 的 用 量 计 算 出 浓 度 。
2 、样品的测定
（1） 微量乙醇的提取： 称取样品适量，置烧瓶中，连接冷凝器在瓶底加热蒸馏，收集蒸馏液于100ml 容量瓶中，达到刻度为止，盖上瓶塞，混合均匀。
（2） 乙醇的氧化： 在200ml的三角瓶中放入0. 1 N 的重铬酸钾20ml，用量筒取浓硫酸5ml， 缓缓地倒入，然后滴入蒸馏液10ml， 并不断振荡， 连接冷凝管， 放在石棉网上加热回流，使瓶中溶液轻微煮沸 10min。
（3） 游离碘的生成：待回流过的溶液冷却后，用水冲冷凝管，使全部溶液无损地盛在200ml三角瓶中，然后小心地将溶液移入500ml三角瓶，用水约 200ml 冲洗200ml的三角瓶，同时加入碘化钾1g , 盖塞，放置暗处5min 。
（4）滴定：自滴定管中滴入0.1N的硫代硫酸钠溶液，当溶液的颜色由橙色变成浅黄色时， 加淀粉溶液 5ml，继续滴定溶液由兰色变为绿色为止，记下消耗的硫化硫酸钠溶液的毫升数。0.0115—消耗1毫克当量的重铬酸钾所能氧化的乙醇克数。

‘贰’ 如何正确的进行液相色谱法的含量检测

要得到准确可靠的HPLC定量结果你需要：
1.
有准确可靠的标准品来源和正确的配制过程。
2.
正确样品的前处理比仪器参数的设置更为重要，消除被测组分可能存在的干扰物。
3.
有合适分离度的柱子，确保被测组分可以完全分离。
4.
选择合适的流动相，采用等度洗脱还是梯度洗脱看被测组分间的分离效果。
5.
确保仪器的有良好的稳定性，否则请选择一个合适的内标物校正。液相的稳定性通常还比较好，若液相的稳定很差，表明仪器存在着严重的故障需要立即进行维修。
6.
选择合适的检测器，一般来讲选择性的检测器（如DAD,FLD,VWD）灵敏度高于通用性检测器（如RID），通用性检测器不适合测定痕量水平的组分，对不同含量水平的被测组分，选择合适的检测器非常重要。

‘叁’ 保健品铅、汞等重金属物的国家检测方法与标准(国标)

如果是吃的保健品,那可以参考下列标准:
GB/T
5009.12-2003
食品中铅的测定
GB
2762-1994
食品中汞限量卫生标准
SN/T
0448-1995
出口食品中汞和砷的测定
GB/T
5009.74-2003
食品添加剂中重金属限量试验
GB/T
20380.1-2006
淀粉及其制品
重金属含量
第1部分:原子吸收光谱法测定砷含量
GB/T
20380.2-2006
淀粉及其制品
重金属含量
第2部分:原子吸收光谱法测定汞含量
GB/T
20380.3-2006
淀粉及其制品
重金属含量
第3部分:电热原子吸收光谱法测定铅含量
GB/T
20380.4-2006
淀粉及其制品
重金属含量
第4部分:电热原子吸收光谱法测定镉含量
其它相关标准:
GB/T
22246-2008
保健食品中泛酸钙的测定
GB/T
22250-2008
保健食品中绿原酸的测定
GB/T
22252-2008
保健食品中辅酶Q10的测定
GB/T
22249-2008
保健食品中番茄红素的测定
GB/T
22248-2008
保健食品中甘草酸的测定
GB/T
22244-2008
保健食品中前花青素的测定
GB/T
5009.217-2008
保健食品中维生素B12的测定
GB/T
5009.193-2003
保健食品中脱氢表雄甾酮(DHEA)的测定
GB/T
5009.194-2003
保健食品中免疫球蛋白IgG的测定
GB/T
5009.195-2003
保健食品中吡啶甲酸铬含量的测定
GB/T
5009.196-2003
保健食品中肌醇的测定
GB/T
5009.197-2003
保健食品中盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、烟酰胺和咖啡因的测定
GB/T
5009.170-2003
保健食品中褪黑素含量的测定
GB/T
5009.171-2003
保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定
GB
22244-2008
保健食品中前花青素的测定
GB
18281.1-2000
医疗保健产品灭菌
生物指示物
第1部分:通则
GB
18281.2-2000
医疗保健产品灭菌
生物指示物
第2部分:环氧乙烷灭菌用生物指示物
GB
18282.1-2000
医疗保健产品灭菌
化学指示物
第1部分:通则
GB/T
19971-2005
医疗保健产品灭菌
术语
SN/T
1568-2005
进出口保健(功能)食品检验规程
GB/T
19972-2005
医疗保健产品灭菌
生物指示物选择、使用及检验结果判断指南
GB
18281.3-2000
医疗保健产品灭菌
生物指示物
第3部分湿热灭菌用生物指示物
GB
18278-2000
医疗保健产品灭菌确认和常规控制要求工业湿热灭菌
GB/T
20367-2006
医疗保健产品灭菌
医疗保健机构湿热灭菌的确认和常规控制要求
GB/T
23788-2009
保健食品中大豆异黄酮的测定方法
高效液相色谱法
GB/T
22251-2008
保健食品中葛根素的测定

‘肆’ 护肤品检测方法

.有淡淡的清香，挤在手上应该是水融，没有油腻感的。

2.用火烧，把洗面奶放入勺内，用火烧，如果溅油，就不是好的洗面奶，如果越烧越像牛奶一样，说明是好的洗面奶。

3.拿PH试纸来试试就知道了，直接把它挤到试纸上你就会知道了。

化妆水

1.用力摇，摇完之后看泡泡：a.泡泡很少，说明营养少。 b.泡泡多但是大，说明含有水杨酸。水杨酸洁肤的效果较好，但刺激性大易过敏。 c.泡泡很多很细，而且很快就消失了，说明含酒精。不要长期的使用，容易伤害皮肤的保护膜。 d.泡泡细腻丰富，有厚厚的一层，而且经久不消，那就是好的水。

2.质量好的无酒精味。不好的使用时有清凉感，闻起来有些酒精味。

3.一般化妆水都有颜色，如果储存地点不当，经常受阳光的照射或是存放时间过久，颜色会变淡；

4.爽肤水的瓶子是非透明的，绝对不要买。因为无法鉴别。

乳液

1.闻味道。好的产品纯净，不需要浓重的香料来压抑产品异味。

2.拿一杯清水，把乳液倒进水里一点点，如果浮在水上边，证明里边含油石酯（这是现在化妆品不推荐用的）晃一晃，水变成了乳白色，证明了里边含乳化剂，这样的化妆品是不好的。

如果倒在水里，乳液下沉到底部，证明不含油石酯，这样的是可以用的。油石酯会伤害皮肤，造成皮肤干燥缺水，因为他是堵塞毛孔的主要原因，久而久之，毛孔会越来越大。

面霜

1.放一点在普通勺里，拿火烧，直到完全烧尽，如果有黑色残渣，那是各种添加剂，越多证明添加剂越多，然后放一根棉芯在勺里，把棉芯点着，你会看到那个水会冒黑烟,这样的产品也是不好的。

2.保湿的产品，很多都是矿物油制成的，你把他们涂到纸上，过一会把多余的擦掉，如果保湿的话纸就会起皱的，如果是矿物油所制的话你就会发现那是透明的

3.你也可以拿产品挤放到铁制的调羹上，然后下面有火来加热，如果含有矿物油的话那油就会冒出来的！

4.面霜装罐时，如果是填装技术良好、质地细致的成品，它的表层会呈现均匀光洁的形态，不会有大小孔出现。

‘伍’ 液相色谱仪操作及原理

工作原理：

流动相通过输液泵流经进样阀，与样品溶液混合，流经色谱柱，在色谱柱中进行吸附、分离，最后每一组分分别经过检测器转变为电讯号，在色谱工作站上出现相应的样品峰。

液相色谱仪操作过程：

1、开机操作：

①打开液相色谱仪电源，用Harb相连接时，注意Harb电源，打开计算机，打开Bootp Server(一般启动时已打开）。

②自上而下打开个组件电源，Bootp Server里显示有信号时（有六行字符），打开工作站（先打开Online)。

③打开冲洗泵头的10%异丙醇溶液的开关（需用针捅抽），控制流量大小，以能流出的Z小流量为准。

④注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的容积低于Zdi限会自动停泵，注意洗泵溶液的体积，及时加液。

⑤使用过程中要经常观察液相色谱仪工作状态，及时正确处理各种突发事件。

2、先以所用流动相冲洗系统一定时间（如所用流动相为含盐流动相，必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相），正式进样分析前30min左右开启D灯或W灯，以延长灯的使用寿命。

3、建立色谱操作方法，注意保存为自己命名的Method，勿覆盖或删除他人的方法及实验结果。

4、使用液相色谱仪手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒，洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上，并排除针筒中的气泡。

5、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤。

6、实验结束后，一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上，再用甲醇冲洗。冲洗过程中关闭D灯、W灯。

7、关机时，先关闭泵、检测器等，再关闭工作站，然后关机，Z后自下而上关闭液相色谱仪各组件，关闭洗泵溶液的开关。

8、使用者须认真履行液相色谱仪使用登记制度，出现问题及时向老师报告，不要擅自拆卸仪器。

‘陆’ 液相色谱怎么选择检测方法

简单说9个字“出得来”、“分得开”、“跑得快”

出得来：所要检测的物质要能被检测到。要针对物质的特性要考虑检测器的选用及参数设定，以及流动洗脱力的强弱。
分得开：所有的检测组份要能完全分离，之间不相互干扰。要考虑流动相溶剂的选择；比例的优化；流动相PH的控制，是否要加离子对试剂；色谱柱的选型等凡是影响色谱分离因素都要考虑到。以进行优化。
跑得快：在满足可检测性与完全分离的条件下，进一步优化各项条件，以达到快速检测，降低分析运行时间，提高检测效率。

你所说的“10——90， 5——35,60——100，45——95等”应该是指的梯度洗脱吧？

‘柒’ 高效液相色谱法检测保健食品中肉碱的含量要怎么检测

高效液相色谱法检测保健食品中肉碱的含量

1范围

建立了高效液相色谱法测定保健食品中肉碱含量的方法。

本法适用于以肉碱为主要原料的保健食品中肉碱的测定。

2原理

用0.5mmol/l盐酸溶液超声提取样品中的肉碱，用反相高效液相色谱法分离。标准样品的保留时间是定性的，外部标准方法是定量的。

3试剂和材料

注：除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

3.1 试剂

3.1.1 磷酸氢二钾（K2HPO4）。

3.1.2辛烷磺酸钠(C8H19NaO3S)。

3.1.3 盐酸（HCl）。

3.1.4磷酸（H3PO4）。

3.1.5硅藻土（SiO2）：化学纯。

3.1.6乙腈(C2H3N)：色谱纯度。

3.2 试剂配制

3.2.1盐酸溶液（0.50 mmol/L）：吸收4.2 ml盐酸，用水稀释，体积为100 ml。然后取1mL上述溶液，用水稀释，定容至1L·L~(-1)。

3.2.2缓冲液：分别称取磷酸氢二钾8.7g，辛烷磺酸钠0.4325g，溶于水，稀释至1L，用磷酸调节至pH 2.5。

3.3 标准品

肉碱（C7H15NO3）：纯度≥98%或经国家认证认可的标准物质..

3.4 标准溶液配制

3.4.1肉碱标准储备液（1.0 mg/ml）：肉碱标准品25 mg（精确至0.1 mg）精密称取25 ml容量瓶中，溶于盐酸溶液中，定容至刻度，摇匀。

3.4.2肉碱标准工作液：标准肉碱标准保留液在5 mL瓶中，用盐酸稀释至规模化，经0.50 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL准确吸收，得到0.10 mg/mL、0.20 mg/mL、0.40 mg/mL、0.60 mg/mL、0.80 mg/mL、1.0mg/mL的标准工作液。

4仪器

4.1高效液相色谱法：配备紫外检测器或二极管阵列检测器。

4.2平衡：灵敏度为0.1mg和0.01mg

4.3 超声波提取器。

5分析步骤

5.1 试样制备

5.1.1 试样处理

5.1.1.1 固体试样

样品粉碎混合均匀称取0.1g~2g（精确至0.001g）（含待测组分约5mg~50mg）。将盐酸溶液加入50ml容量瓶中，超声提取10min，冷却，用盐酸溶液稀释至刻度，混匀，过滤，计数一次滤液毫升数，收集滤液，经0.45um水相膜过滤，取连续滤液进行检测。

5.1.1.2 软胶囊试样

样品被切开、挤压和混合，重量为0.1g≤2g(精确到0.001g)，加入相同量的硅藻土，进行均匀分散研究，并说其中一部分(精确到0.001g，约5 mg~50 mg)，被测组分用塞状三角瓶转移到250 ml，吸收盐酸溶液50 ml，加入三角瓶，称重，填充超声萃取10 min，冷却，与盐酸溶液混合，在毫升中丢弃初始滤液，收集滤液，经过0.45μm的水相滤膜，取滤液进行测量。

5.1.1.3 液体试样

精密测量：1毫升～5毫升（含约5毫克～50毫克的待测组分），35毫升盐酸溶液加入50毫升容量瓶，超声提取10分钟，冷却，用盐酸溶液稀释，混合，过滤，丢弃一级滤液毫升，收集滤液，通过0.45微米水相滤膜，取连续滤液进行测定。

5.1.2 稀释

根据样品中肉碱的含量，将溶液中的肉碱稀释至0.10mg/mL~1.0mg/mL。用盐酸溶液。

5.2 色谱参考条件

5.2.1柱：C18柱：4.6*250 mm，5微米或同性能柱。

5.2.2流动相：缓冲溶液90 10。

5.2.3流量：0.8ml/min。

5.2.4 检测波长：210nm。

5.2.5 进样量：20μL。

5.3 标准曲线的制作

将肉碱标准工作液(3.4.2)分别从低浓度到高浓度注入高效液相色谱(HPLC)中，并测定相应的峰面积。以标准工作液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线

5.4待测溶液的测定

在相同的色谱条件下，将待测液（5.1.1.1，5.1.1.2，5.1.1.3，5.2.1）注入高效液相色谱法按保留时间定性测定峰面积，按标准曲线计算待测溶液中肉碱的浓度

6 分析结果的表述

试样中肉碱含量按式（1）计算：

X—固体样品中肉碱含量为g/100g，液体样品中肉碱含量为g/100ml。

根据每毫升毫克标准曲线(毫克/毫升)计算待测溶液中肉碱的浓度。

V—试样的稀释体积，单位为毫升（ml）；

M/L-取样质量，以克(G)为单位；抽样量，以毫升(毫升)为单位；

F——稀释倍数；

100——单位转换；

1000——单位转换。