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hbeag检测最常用的方法

发布时间:2023-01-20 18:22:13

㈠ 检验实习总结范文5篇

检验专业在临床实习的时候,不同的实习环节有其特殊性,所以带教老师必须针对具体情况,思考如何提高带教工作质量。下面是我给大家带来的检验 实习 总结 范文 _检验实习 个人总结 5篇,以供大家参考,我们一起来看看吧!

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▼ 检验实习总结范文篇一:

时间飞逝,三年的在校生活结束了,20_年_月_日,我来到__医院实习,在检验科主任和各科室老师的带领下,将4年来所学的理论与实践相结合。 实习环境

__医院是。。市最大的集医疗、教学、科研、预防保健和院内,外急救为一体的国家“三级甲等”现代化综合医院。医院拥有先进的仪器设备,各方面的条件都很好,为病人提供了良好的就医环境。检验科的老师们有较强的专业技能,分工明确,工作认真、负责,为学生树立了很好的榜样。老师们严格要求学生,认真耐心的指导学生,使我们受益匪浅。

__医院检验科共分为九个科室,血液化验室属于血液科。从。。年月。日至__年。。日,我依次到体液化验室,采血室,发光免疫室,免疫室,细胞室,微生物,生化,血常规,病区化验室,血液化验室进行学习。

1. 生化

临床生物化学检测主要有肝功能、肾功能、心功能、电解质、血脂、肿瘤标志物等常规检测项目。在生化室,我了解了美国贝克曼C_9AL全自动生化分析系统和罗氏P800的使用及原理:光电比色原理。了解了仪器每日要进行质控、定标、维护等工作,注意确保仪器中的试剂量,掌握了生化检验标本的采集、存放、处理及玻璃器皿的清洁。注意溶血和脂血对实验结果的影响。由于生化是标本量较大,所以在做每一项工作时一定要认真仔细。

2.血液化验室

在血液化验室,我学会了使用凝血四项分析仪,了解了凝血四项中各项的正常参考值及临床意义,D-二聚体的检测 方法 。血片和骨髓片都是由医生自己采集、自己染色、自己分类,因此看的机会不多,但基本上可以认识粒系、红系各阶段细胞、淋巴细胞、浆细胞、巨核细胞。

3.病区化验室

病区化验室中尿液与血液检测的仪器与尿常规和血常规中的一样,除此之外还学会了脑脊液、浆膜腔积液的检测及如何用血沉管加血沉

4.采血室

在采血室,我掌握了静脉采血的方法,各检测项目应该用哪种真空采血管,各个真空采血管所含的抗凝剂不同。红色采血管不含抗凝剂,一般用于生化项目和免疫血液学试验;绿色采血管含肝素钠、肝素锂抗凝剂,一般用于生化项目的检测;紫色采血管含有EDTA-K,用于血液学和免疫血液学试验;浅蓝色采血管的抗凝剂为枸盐酸钠:血液=1:9,用于凝血试验;黑色采血管的抗凝剂为枸缘酸盐:血液=1:4,用于红细胞沉降率试验。

5.血常规

在血常规,我熟练掌握了微量吸管的使用,末梢血采集的方法,学会了使用_S-800i血液分析仪和全自动血沉分析仪,了解了各项目的临床意义。

6.体液化验室

在短短的一个月里,我学会了如何使用优利特URIT系列全自动尿液分析仪及其检测原理,尿液的镜检,尿液标本的采集、保存、及注意事项,粪便、前列腺液、阴道分泌物的检验。通过看课本,我掌握了尿液、粪便、前列腺液、阴道分泌物中各检验项目的临床意义。

(一)尿液干化学分析仪的检测原理:

(1)组成:通常由机械系统、光学系统、电路系统3部分组成

(2)尿干化学试带:测试的项目为维生素C(VC)、白细胞(WBC)、酮体(KET)、亚硝酸盐(NIT)、尿胆原(URO)、胆红素(BIL)、蛋白质(PRO)、葡萄糖、尿比重(SG)、隐血(BLD)、酸碱度(PH)。

(3)检测原理:尿液中相应的化学成分使尿多联试带上各种含特殊试剂的膜块发生颜色变化,颜色深浅与尿液中相应物质的浓度成正比,将多联试带置于尿液分析仪比色进样槽,各膜块依次受到仪器光源照射并产生不同的反色光,仪器接受不同强度的光信号后将其转换为相应的电讯号,再经微处理器由公式计算出各测试项目的反射率,然后与标准曲线比较后较正为测定值,最后以定性或半定量的方式自动打印出结果。

(二)尿有形成分分析仪的检测原理:应用流式细胞术和电阻抗分析的原理

7.微生物

在这一个月的时间里,我学会了各种标本的接种方法及各种标本中常出现的细菌,基本上可以认清常见的几种细菌如大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、变形杆菌、草绿色链球菌、真菌。学会了氧化酶试验和触酶试验的操作。革兰染色的操作步骤,DL-96细菌测定系统随机体外诊断试剂板的使用及如何用DL-96细菌测定仪读取DL-96试剂板。此外还学会了血培养瓶的安装、墨汁染色和肥达氏反应试验的操作,了解了VersaTREK血培养仪的使用及检测原理。耐药的常见细菌有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌、产超广谱B-内酰胺酶(ESBLS)格兰阴性细菌(主要是肺炎克雷伯、大肠埃希菌发现有ESBLS)、泛耐药和多重的鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌、真菌。

8.发光免疫

在发光免疫室,我学会了如何使用贝克曼仪器,了解了各个项目及其临床意义。

(1)贫血筛查:铁蛋白、叶酸、维生素B12

(2)唐氏综合筛查:人绒毛膜促性腺激素(β-HCG),甲胎蛋白(AFP),雌三醇(E3)

(3)激素七项:促黄体生成素(LH),促卵泡刺激素(FSH),雌二醇(E2),孕酮(Prog),秘乳素(PRL),睾酮(Testo),雌三醇(E3)

(4)垂体功能检测:生长激素(hGH),促卵泡刺激素(FSH),促黄体生成素(LH),泌乳素(PRL),促甲状腺激素(TSH)

(5)甲状腺功能检测:甲状腺球蛋白(Tg)、抗甲状腺球蛋白抗体(Tg-Ab)、甲状腺过氧化物酶抗体(Tpo-Ab)、游离T3 (FT3)、游离T4 (FT4)、促甲状腺激素(TSH)

(6)心肌损伤标记物:肌红蛋白、肌钙蛋白

(7)其他检测项目:血β-HCG、皮质醇、地高辛

9.免疫室

甲肝、乙肝五项定性、丙肝、优生五项、人类免疫缺陷病毒抗体和梅毒螺旋抗体的检测都是酶联免疫试验,按照试剂盒中的 说明书 操作,在操作过程中,一定要注意洗板这一环节,否则会出现假阳性。乙肝五项定量是用瑞士帝肯RMP-150型全自动酶免疫检测系统进行检测的,乙肝表面抗原和HBeAg均采用双抗体夹心法,抗-HBs采用双抗原夹心法,抗-HBe和抗HBc均采用竞争抑制法。抗核抗体(ANA)的检测采用的是间接免疫荧光法,总的ANA检测在临床诊断和鉴别诊断中是一个极为重要的筛选试验,ANA阳性者进一步检测各亚类ANA抗体对明确诊断、临床分型、病情观察、预后及治疗评价都有重要意义。抗ENA抗体谱的检测最常用的是免疫印迹技术,不同特性的抗ENA抗体在各中自身免疫性疾病中的阳性率有明显差异,在协助诊断和鉴别诊断自身免疫疾病方面具有重要的临床意义。与小血管炎相关的自身抗体(ANCA)检测最常用ELISA法。抗角蛋白抗体(AKA)的检测常采用间接免疫荧光分析法,对于早期诊断类风湿关节炎具有重要的临床意义。抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)的检测最常用ELISA,是诊断类风湿关节炎的一个高度特异性的新指标。此外,我还学会了糖化血红蛋白和尿微量白蛋白的检测 。

10.细胞室

北京同方神火 报告 系统与高倍显微镜联合应用于咽拭子,尿道分泌物、阴道分泌物中支原体的检测,学会了用精子质量分析仪检测精子,学会了使用血流变分析仪及检测时的注意事项。

实习收获

短短的十个月的实习结束了,也意味着四年的大学生活即将结束。在这短短的十个月里,我深刻体会到医学检验工作者的重要性,检验结果的重要性。病人手中一张张的报告单看似简单,其实这是经过一位位老师的质控、实验、检测、检查、复核这一步步慎重操作得出的,每一步都马虎不得。检验人员不仅要对专业学问牢记在心,也要有大量的操作实践经历。作为一位检验人员,一定要认真、仔细、负责的对待每一项工作。在生活上,我学会了如何与带教老师沟通、相处,如何与病人沟通,如何搞好与 其它 学校的实习生之间的关系。 毕业 实习是完成医学检验专业全部教学计划的最后阶段,是实现培养目标的一个重要环节,学生通过毕业实习,将所学的理论知识融入临床实践,以巩固专业知识和专业技能,进一步达到培养和提高学生分析能力,解决问题和独立工作能力,并增强学生对社会的适应能力。在实习过程中,我们不仅要学会理论联系实践,还要学会如何与病人沟通及培养自己良好的 人际交往 能力,为毕业后独立工作打下坚实的基础。总之,这次实习我学到了很多,一定会对我今后的工作和生活起很大的帮助。

谢辞

感谢。。。学校给我提供了一个良好的学习环境,感谢老师们4年来对我的谆谆教导,感谢__医院检验科的老师们对我的耐心指导,感谢一路陪我走过来的朋友们,在以后的道路上,我会更加努力!一起加油!

▼ 检验实习总结范文篇二:

炎热的六月末,我们终于开始了盼望已久的实践。想着终于有机会走进检验科,可以从实践中理解自己所学的专业,心中便充满了期待。由于初次接触检验科的工作,我们又是第一批开始实践的同学,心中难免很既兴奋又紧张。老师介绍的每一个操作要点、注意事项,我们都会牢记在心。短短十天亲眼目睹了三个科室——生化,免疫,临检的忙碌,发现了原来工作和学习是有着天壤之别的。

首先是生化,这里的工作基本都是流水线,在这里,不仅要对专业知识充分掌握,还要对检验仪器具有一定的知晓,因为不知道什么时候仪器就会出故障,这个时候还需要懂得如何 修理 机器。在这里需要人工操作的就不得不说回血了。这是为了方便病人或者医生对报告有所疑问时,来重新检验时使用的。不仅是为了对病人负责,也是自己作为医护人员的一个责任。

第二个科室就是免疫,与生化不同的是,免疫需要的是大量的手工操作。由于很多是微量试验,就会差之毫厘,失之千里。老师也不敢轻易让我们来操作。很多时候就是做一些简单的实验,在老师的旁边听一些实验的讲解。有了这种直观的 学习方法 ,使我们在课堂上苍白的理论和单纯的图文变得具体、形象起来。

第三个科室便是临检了,其实也是分为血液和体液的。在血液临检,看着自动做分析的流式细胞仪,再回想老师课堂上所讲解的内容,又有了更深的理解。而在体液临检,老师经常会让我们来看看样本。在临检呆的这几天,又对刚刚结束的临床检验基础学有了进一步的认识,看到了更多的样本,而这些来自不同人的、或阳性或阴性的样本才是我们今后所要面对的。

都说现在的医患关系紧张,在这里实践时,也有幸在咨询台站过。与患者打交道更多的是需要耐心,多说一个您好,或许就会拉近医生与患者的距离,少了一份猜疑,多了一份信任。

曾经有人说,检验科的工作三个月就可以轻松上手,很简单。然而,真正来到这里体验过之后,就会发现检验工作并不是想象中那么的简单。就好像病人手中一张张的报告,看似简单,其实这是经过一位位老师的质控、实验、检测、审查、复核,这一步步谨慎操作得出的,每一步都马虎不得。虽然在外人看来检验人员每天都做着相同的工作,但是当意外或者特殊症状出现时,才能发现日复一日的积累是有意义的,这就是为什么检验人员不仅仅要求对专业知识牢记在心,也更需要大量的实际操作 经验 。

此次实践,虽然只有短短的两个星期,可是却使我了解了很多关于检验科工作的情况,认识了很多老师。对于这个专业和自己的未来又有了一些新的认识,更加明确了将来的目标。总之,这次实践收获颇丰。真的非常感谢学校和医院的老师们给了我们这么好的一个机会让我们对自己所学的专业有了充分的认识。

▼ 检验实习总结范文篇三:

_年暑假,本小组(第二批生化科实践小组)于_医院检验科实践,为期两周的实践虽然很短暂,但学到的东西却很多。

记得去实践的第一天,懵懵懂懂的我们傻傻地站在那里看着老师忙来忙去,连个忙都帮不上。不过在老师的教导下我们渐渐学会使用各种仪器,熟悉整个操作流程……第二天我们基本上就自己开始找事情干,遇到不懂的再向老师请教,一天天就这么过来,我们也在一天天的工作中慢慢积累知识。

我们在免疫ⅰ、免疫ⅱ、临床生化、临床检验(血常规、尿常规)、脱落细胞各科室轮转实习的过程中,遇到了很多和蔼和严厉的老师,他们的谆谆教导使我们不断进步,可以说这次实践把原来课本上的很多知识都运用到了实际操作中,但也学到了很多书本上学不到的知识,比如说很多操作需要注意细节:24h尿的取样、elisa加样、操作血细胞分析仪……在帮助老师做实验的同时,有些老师经常会给我们提出一些问题(虽然有时候回答不上来),然后老师会给我们讲解知识点,在学习到新知识的同时也巩固了原来学过的内容,还有的老师会抽空给我们讲解各种仪器的工作原理,让我们对各种仪器有一个初步的了解和认识。

本次实践能够成功落下帷幕,首先要感谢系领导和辅导员陈瑞明老师、应雅韵老师,是他们努力为我们争取到了这次难得的机会,然后要感谢检验科彭奕冰老师的热情接待,最后要感谢在外面实践过程中热情教导的老师,他们有毛客自老师、支立明老师、陆秋涯老师、陆怡德老师、孟俊老师、石厚荣老师、王剑彪老师、金叶老师、温丽蓉老师、袁勤老师,叶挺军老师、皎皎老师。

总之,这次实践受益匪浅,在充实了暑假生活的同时学到了很多知识。

▼ 检验实习总结范文篇四:

临床实习是医学检验专业学生将所学的理论知识与实践相结合,获得全面发展,最终走向临床一线的必不可少的关键一环。其目的是使学生在实际工作中学会运用理论知识,增强操作技能,培养分析问题、解决问题和独立工作能力。医学检验专业由于其内容繁多、检测复杂、发展迅速,作为一个带教老师怎样来完成临床实习教学任务将是关键。十几年来,我们科室先后承担了不同层次的临床实习教学任务,在此过程中我们进行了积极的探索。现将我们在临床检验实习带教过程中的点滴体会总结如下:

1、敬业爱岗,注重职业道德 教育 。

作为教学医院,培养出来的学生不单是技术上要过硬,思想上、作风上更要过硬。首先要成为一个合格的医务工作者,要有献身医学事业、全心全意为伤病员服务的思想,没有这一思想做基础,医术再高也是空谈。所以,一定要加强职业道德教育,特别是对那些没有工作经历的学生来说这一点更为重要,这将对他们的一生的发展产生深远的影响。强调组织纪律、遵守 规章制度 、着重培养实习学生不怕苦、不怕累的思想和一丝不苟、敬业严谨的工作作风。由于临床检验是一项又脏又累又苦的工作,这时就要着重培养实习学生不计名利、热爱本专业的思想,同时,还应向学生讲明临床检验实习的重要性,让学生在工作中时刻严格遵守规程、做到一丝不苟,培养其严谨的工作作风。

2、抓基础,突出重点,因材施教。

由于学生在学校把主要精力放在理论学习上,因此他们大多动手能力差,操作不正规,而检验工作需要极强的动手能力。所以,这就要从最基础的基本操作着手,从一点一滴做起,不管生化检验、血液检验、免疫检验还是微生物检验,实习教学主要是以各项常规检测为主导,重点掌握基本理论的运用,基本操作技能的掌握,对一些常规检测项目的检测方法、原理和注意事项都加以详细讲解和示范;而对于一些简单的纯形态学的内容则简而言之;对于一些传统的项目检测方法则少讲(如尿糖、尿淀粉酶的测定、脑脊液、抗O、肥达氏反应等)。

另外,还应注意根据生源特点因材施教,不可层次不分。对于大多数检验本科生来说,基础理论好,动手能力强,接受能力快,所以对这些人应加强新理论、新技术和新知识的学习。以使他们知识水平能进一步的向深度和广度发展。

3、加强质量管理,定期举行专题讲座。

质量是检验科各项工作的关键,每次检验结果质量的高低都直接关系到临床的诊断和治疗,关系到病人的生命。从实习同学到科室的第一天起我们就要求其牢固树立“质量第一”的观念。无论是分析前标本的采集、还是分离,都是严格把关的。

▼ 检验实习总结范文篇五:

光阴似箭,日月如梭。一年的实习生活很快就过去了,回首过去的一年,内心不禁感慨万千。本人于--年8月被医院正式接纳为检验科实习生。在这一年实习中,自己不断加强学习,提高政治素质和业务素质,准确自我定位,努力做好本职工作,现将一年来的实习情况汇报短短的几个月,在医院党政领导的正确领导下,在检验科主任的带领下,我认真学习各专业知识,锐意进取,求真务实,发扬与时俱进的工作作风,坚持“以病人为中心”的临床服务理念,立足本职岗位,踏踏实实做好医疗服务工作。总结主要有以下几项

一。兢兢业业,做好本职工作

作为检验科的一员,既是医生的眼睛,也是医生的助手,把握自身职责,这是我任职以来的又一准则。应用自己所学的知识,收集到老师的意见,学习到外地的经验,提出意见和建议,给医生当好参谋。到目前为止,己基本能满足医院各类病人检测参数要求;为保证各类病人检测数据的准确性,在检验、检测的全过程中严格按照《全国临床检验操作规程》和《产品说明书》进行操作,在过去的一年中所出据的检验报告基本能达到准确。在检验业务上能坚决贯彻医疗安全第一的理念,杜绝了医疗事故的发生。更进一步提高医疗服务质量、改善服务态度来争取病人的信任。

二。专业知识、工作能力和具体工作

日常的临床检验工作,虽然工作比较繁忙,做起来有一定的困难,如很多手工加样工作,我以前就没做过,但为了搞好工作,服从领导安排,积极支持科主任工作,我不怕麻烦,虚心向老师学习、自己摸索实践,在很短的时间内熟练掌握了手工加样工作,明确了工作程序,提高了工作能力,在具体工作中形成了一个比较清晰的工作思路,能够顺利的开展工作并熟练圆满地完成本职工作。为了弥补自己专业知识的空缺,我每天不断的要求自己要把这些知识补上,这不管对自己还是在以后 面试 打下一个牢固的基础。

三、工作态度和勤奋敬业方面

“医者父母心”,本人以千方百计解除病人的疾苦为己任。我希望所有的患者都能尽快的康复,于是每次当我进入病房时,我都利用有限的时间不遗余力的鼓励他们,耐心的帮他们了解疾病、建立战胜疾病的信心,默默地祈祷他们早日康复。热爱自己的'本职工作,能够正确认真的对待每一项工作,热心为大家服务。认真遵守劳动纪律,保证按时出勤,有效利用工作时间,坚守岗位,加班加点按时完成工作。

四、在工作中也收到了来自各方面的批评和指正,我都一一进行了整改,收到了良好的效果。

在过去自己实习的几个月中,在院领导和科主任的领导下,自己兢兢业业,勤奋工作,虽然取得了一些成绩,但由于自己各项素质尚须进一步提高,工作中难免出现这样和那样的问题和错误,比如个别工作做的还不够完善,这有待于在今后的工作中加以改进。我衷心的希望各位领导和老师们能及时地给予批评和指正,新的一年意味着新的起点、新的机遇、新的挑战,我决心再接再厉,更上一层楼,努力开创工作新局面,使思想觉悟和工作业绩再上一个新水平,为总院的发展做出更大的贡献。


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㈡ elisa试剂盒实验原理

上海科艾博生物(COIBO)科技
从大的方面说ELISA属于酶免疫技术。 免疫酶技术是将酶作为标记物,标记抗体或抗原后,与相应的抗原或抗体发生反应,通过标记酶相应底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量的检测依据。
目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA),如果要分类的话,它属于异相固相酶免疫技术。所谓异相是指在检测时不需要将酶标记抗原抗体和游离抗原抗体分开,所谓固相就是指的ELISA的96孔板固相载体了。看下面均相酶免疫测定的原理图:
ELISA的主要原理很简单,有这么三个, 1、包被 抗原或者抗体能以物理性吸附于固相载体表面,可能原理是蛋白质和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,吸附之后能保持抗原抗体反应等免疫活性; 2、标记 抗原或者抗体可通过共价键与酶连接成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫活性和酶的催化特点; 3、显色 酶结合物与相应包被在固相载体的抗原或者抗体结合后,也被固定在固相载体上,加入酶的底物之后可出现显色反应,根据反应的颜色深浅可计算抗原或者抗体的相对含量。ELISA 实验设计根据检测对象的不同,我分别给童鞋们介绍抗原的检测方法设计和抗体的检测方法设计。抗原的检测设计 1、双抗夹心法 针对至少2个抗原决定簇的多价抗原。首先介绍一下抗原决定簇,抗原决定簇就是决定抗原性的特殊化学基团,也叫抗原表位,理论上一个抗原决定簇能诱导产生一种单克隆抗体(可能有童鞋又要问单克隆抗体是神马东东了,以后介绍啊)。由6-12氨基酸或碳水基团组成,它可以是由连续序列(线性表位)组成或由不连续的蛋白质三维结构(构象表位)组成。临床上具有2个抗原决定簇的多价抗原有很多,比较常见有HBsAg、AFP、HCG等大分子抗原。检测步骤也简单,就是包被、洗涤、加样、洗涤、加样、洗涤、显色。具体说来是先将纯化的相应抗体包被在固相载体上,再加入待测样品,若其中含有待测抗原就会与固相抗体结合,洗掉杂质后,再加入酶标记的检测抗体进行反应,洗掉多于的酶标抗体后,加入底物显色,显色与否以及颜色的深浅就代表了待测抗原是否存在以及相对含量了,简单吧。
对于双抗夹心法检测大分子抗原要注意几点,1.固相抗体和酶标检测抗体一定是分别针对待测抗原的两个不同抗原决定簇,不然两个抗体就会为争同一个决定簇而打架,会出现假阴性的不良结果;2.如果检测的样本是血清,就要注意风湿病患者体内内风湿因子RF这种奇葩异种抗体的存在,它能够神奇地结合固相抗体和检测抗体,造成假阳性的不良结果;3.包被的固相抗体含量一定是高于样品中的抗原含量,不然检测到的含量会比实际含量低;4.如果有童鞋想高端省事一些,将待测样品与酶标检测抗体同时加入固相载体,在酶标检测抗体高于样品中的待测抗原的情况下,会出现假阴性结果,这种现象书本叫钩状效应。 2、竞争法 针对小分子抗原。这种方法也可以用于大分子抗原,只是相对双抗夹心法这种强悍的策略,竞争法完全没有优势,所以竞争法只在检测小分子这个边缘地带发挥余热了。临床上主要用于T3、T4、孕酮等激素以及药物等。检测步骤与双抗夹心法更简单,包被、洗涤、加样、洗涤、显色,少了一步加样的过程,但是设计上复杂一些,首先将纯化的相应抗体包被在固相载体上,然后每组样本需要分两组,一组同时加入事先混匀好的酶标检测抗原和样本的混合物,一组只加入酶标记抗原,两组颜色只差便是待测抗原的含量,有点晕啊。
对于竞争法也需要注意一点,酶标记抗原和待测样本一定要事先混匀好,然后同时加入固相载体,不然会造成不公平竞争,检测出现偏差;抗体的检测设计 就方法来说,有间接法、双抗原夹心法、竞争法和捕获法四种设计。 1、 间接法,这个是检测抗体最常用也最简单的方法。操作步骤与双抗夹心一样,只是包被是纯化的相应抗原而不是抗体了,加入样品后洗涤,再加入的酶标记抗抗体,然后显色,颜色深浅与样品中待测抗体的浓度正相关。这个间接法的原理和步骤与双抗夹心一样一样的,为了区分就把包被抗原检测抗体叫做间接法了,以此类推,之前的双抗夹心法也可以叫做直接法,命名其实就是这么回事,规则多了就容易让人糊涂。间接法也有一些自己的特点,1.酶标记抗抗体可选择性检测抗体的亚型,可用于鉴别感染时期,如果是IgM那么提示感染早期;2.酶标抗抗体检测抗体特异性不高,容易产生假阳性,如果封闭不完全,可出现全板阳性,挺吓人的。临床上常用该方法检测抗HCV抗体、抗HEV抗体、抗CMV抗体、抗HSV抗体、抗沙眼衣原体抗体等等。
2、 双抗原夹心法,这个完全是山寨双抗夹心法的。原理和步骤也与双抗夹心一样一样的,与间接法相比,具有优越的灵敏度和特异性,但不是很常用,因为就目前的技术条件,想得到能用于ELISA检测的纯化抗原还是有一定的难度。临床上常用于检测HIV抗体初筛,TP抗体和抗HBs抗体等,这些检测对特异性和灵敏度,准确性都要求特别高。
3、 竞争法,和检测抗原设计的竞争法完全一致,临床上用的不多,我仔细总结了一下两个很具有代表性的,也各具特点。1、抗HBc抗体,检测方法与抗原相同,包被抗原之后,分两组,一组加入预先混匀的酶标抗体和待测样品,一组只加入酶标抗体,两组的显色之差可代表待测抗体的相对含量,需注意的是待测抗体与酶标抗体是同一物质;2、抗HBe抗体检测,方法与抗原竞争法设计稍有区别,包被的抗HBe抗体后,检测也分两组,一组先加入酶标HBeAg再立即加入待测样品,一组只加酶标HBeAg,两组显色之差代表待测抗体的相对含量,这种设计中包被抗体和待测抗体是同一物质。值得注意的是混合组不是事先混匀再加入,而是先加入待测抗体后再加入酶标抗原。所有的这些复杂的注意事项确实很容易把人搞晕,但是童鞋们只需要记住一条,竞争很残酷,我们就要想尽一切办法保证竞争的公平性,这样就不会错。
4、 捕获法,这种方法比较少用,由于具有识别抗体类型的优点,仅用于需要早期诊断的急性感染或者具有爆发性感染的疾病,如HAV-IgM、HBc-IgM、ToRCH等等。原理还是逃不脱经典的双抗夹心,具体方法是先包被能识别抗体类别的抗抗体,洗涤后加样品,再洗涤,加酶标记抗原,洗涤后显色,这些步骤闭上眼睛都能写出来。

最后说两句,与抗原检测不同,抗体检测的设计不是根据抗体的结构特点了,这么多种设计方法,童鞋们用的时候就会选择障碍了,掌握2个原则,1.实验要求,如果需要特异性和准确性特别高,那肯定是双抗原夹心法,要求马马虎虎,那就间接法,如果要明确抗体类型,最好的选择就是捕获法了;2.实验成本,与纯化抗体不一样,有时候想要获得纯化的抗原是非常困难的,更别说两种不同的纯化抗原了,所以双抗原夹心法临床上用的并不多。ABS-ELISA顺便说一下ABS-ELISA设计,其实是和上面说的一样的,通过亲和素-生物素系统(ABS)方法显色反应,增加检测灵敏度而已,但是增加操作步骤与实验成本,而且现在单克隆抗体的技术越见成熟,抗体特异性和亲和力大大提高,灵敏度已经不是问题,所以这些次等装备已经不常用。
结果判定最后和童鞋说说ELISA结果判定,分定性和定量两种。对于定性试验,参比阴、阳性对照的吸光度,以P/N或者S/CO比值形式报告。1. P/N比值是指(待测样本-空白对照)/(阴性样本-空白对照),一般以P/N≥2.1判为阳性,或许求知欲旺盛的童鞋会问,那么竞争法用P/N比值怎么判,呵呵,这里先不说,卖个乖,你可以网络或者私信我啊;2. S/CO比值,S是待测样本吸光度值,CO为CUT-OFF值,通常取值阴性对照平均值的2.1倍。S/CO比值≥1为阳性,竞争法S/CO比值≤1为阳性。定量检测没有什么可说的,老老实实做标准曲线,既锻炼实验操作能力,又可作为实验内部参照。
记得有这么个规定,定性检测不能目测判断,要凭借酶标仪检测,定量要在每次实验都得与待测样本相同实验条件下绘制标准曲线,有一难度,但是为了对实验负责,你就从了吧。

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