人肠道分泌型siga检测方法

㈠ 引起肠道感染的大肠埃希菌有哪些其常用检验方法如何

(1)产肠毒素大肠埃希菌(ETEC)引起霍乱样肠毒素腹泻(水泻)。能产生两种肠毒素。一种为不耐热肠毒素(LT)、另一种为耐热肠毒素(sT)。检测LT-般使用改良Elek法；检测ST-般使用乳鼠胃内灌注法。
(2)肠侵袭性大肠埃希菌(ELEC)引起志贺样腹泻(粘液脓血便)。一般使用豚鼠角膜侵袭力试验。
(3)肠致病性大肠埃希菌(EPEC)主要引起婴儿腹泻。用EPEC多价诊断血清作凝集试验。
(4)肠出血性大肠埃希菌(EHEC)此菌中最具代表性的是0157：H7血清型，可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征。一般检测是直接筛选不发酵山梨醇的菌落(无色菌落)，生化反应证实为大肠埃希菌，再经乳胶凝集试验测0157抗原。
(5)肠凝聚型大肠埃希菌(EAggEC)可引起腹泻，用液体培养加凝集试验检测细菌对细胞的粘附性或用：DNA探针技术。

㈡ SIGA有哪些成分

有IgA（d）、J链和SC。

分子结构：

人体内的免疫球蛋白A（IgA）有两个彼此独立的体系，黏膜免疫球蛋白A和血清免疫球蛋白A。血清免疫球蛋白A可分为3类：单体IgA、多聚IgA以及SIgA，而sIgA只占血清免疫球蛋白A的1%。sIgA是一种复合体，主要由IgA（d）、J链和SC组成。

而J链分子中存在由二硫键构成的2个半胱氨酸的残基以及IgA（d）特定的分子残基。而SC则是多聚IgA的受体，它可以同IgA的亚甲基之间以二硫键的形式结合，二硫键被破坏后，SC便可以游离出来。黏膜IgA大多数都是sIgA。

(2)人肠道分泌型siga检测方法扩展阅读：

作用研究：

分泌型免疫球蛋白A（SIgA）是含有分泌片和J-链的二聚体，存在于初乳及黏膜分泌物如泪液、唾液、胃肠道及呼吸道分泌物中，由黏膜中浆细胞分泌产生，提供机体抵抗微生物入侵的第1道防线，与溶菌酶和乳铁蛋白一起，在眼组织的局部体液免疫中发挥作用。

sIgA与SC能优先活化人的嗜酸性粒细胞，并诱导其降解和产生过氧化物，从而调节体内与粘膜嗜酸性粒细胞有关的疾病和一些过敏性疾病。在激活巨噬细胞方面，sIgA与IgA 在功能上有差异。

Marjolein等用炎症介质诱导一种转基因小鼠的Kupffer细胞表达FcaR1，发现sIgA不能通过这个受体启动巨噬细胞的活动，而血液中的与细菌结合的IgA则可调节巨噬细胞的吞噬活动。

㈢ SIgA是什么

SIgA是分泌型免疫球蛋白A。

由J链连接并含分泌片的同源二聚体IgA。可分泌至外分泌液中，主要存在于乳汁、唾液、泪液和呼吸道、消化道、泌尿生殖道等黏膜表面，参与局部黏膜免疫。

免疫球蛋白A简介：

免疫球蛋白A（简称为IgA）。IgA分两种类型：即血清型IgA和分泌型IgA。血清型IgA存在于血清中，血清IgA具有某些IgG和IgM的免疫功能，特异性IgA能中和血液中的抗原，同时也出现替代性补体免疫系统。

分泌型IgA存在于分泌液中，例如：唾液、泪液以及乳汁当中，均含有IgA抗体。分泌型IgA是机体局部黏膜抗感染免疫的主要抗体。故又称黏膜免疫抗体。IgA不能通过胎盘。新生畜血清中无IgA抗体，但可从母乳中获得分泌型IgA。

㈣ 壁细胞如何分泌盐酸

子，病毒颗粒和细菌表面都带有不同的抗原，所以都能引起体液免疫。抗原和BCR的种类都非常多，在体液免疫中B淋巴细胞的BCR直接与抗原结合。一种B淋巴细胞表面只有一种BCR。一种抗原侵入体内，只有带有与这种抗原互补的BCR的B淋巴细胞才能与之结合，只有得到选择刺激的B淋巴细胞克隆才能得到扩增(克隆选择学说)。 (一)B细胞产生浆细胞和记忆细胞 第一步：B细胞表面的受体分子与互补的抗原分子结合后，活化、长大，并迅速分裂产生一个有同样免疫能力的细胞群——克隆(CLONE)、无性繁殖系。其中一部分成为浆细胞，产生抗体；一部分发展为记忆细胞(MEMORY CELL)。 第二步：需要巨噬细胞和TH细胞的参与。Mφ表面带有MHCⅱ分子，它们吞噬入侵的病原体，抗原分子经Mφ处理后表达在细胞膜上，夹在MHCⅱ分子的沟中。TH细胞表面带有不同的受体，能识别Mφ表面MHC+特异的抗原分子结合物。B细胞表面带有MHC分子，可和特异的抗原分子结合，TH细胞可刺激结合AG的B细胞分化。这一步比第一步作用更强大。 (二)浆细胞产生抗体 浆细胞一般停留在各种淋巴结。每一个浆细胞每秒钟能产生2000个抗体，它们寿命很短，经几天大量产生抗体之后就死去，而抗体则进入血液循环发挥生理作用。 浆细胞产生的抗体Y两短臂末端高变区与抗原结合，抗体的柄端(FC)可与吞噬细胞(如巨噬细)上的受体结合而使抗原—抗体复合物被吞噬。 (三)记忆细胞与二次免疫反应 记忆细胞也分泌抗体，它们寿命长、对抗原十分敏感，能“记住”入侵的抗原。 当同样抗原第二次入侵时，能更快的做出反应，很快分裂产生新的浆细胞和新的记忆细胞，浆细胞再次产生抗体消灭抗原。这就是二次免疫反应。它比初次反应更快，也更强烈。 体液免疫的两个关键： (1)产生高效而短命的浆细胞，由浆细胞分泌抗体清除抗原； (2)产生寿命长的记忆细胞，发生二次反应立即消灭再次入侵的同样抗原。 体液免疫功能的检测 临床上一个反复发作的化脓感染，常使医生想到患者是否有免疫缺陷病，一般原发免疫缺陷发病年龄很小，而继发免疫缺陷病人多在30岁以上。绝大多数免疫缺陷病人多表现为体液和细胞免疫同时受损，所以应全面检查这两方面的功能。遗憾的是，目前应用的检测方法的局限性，其结果常难以得出明确结论。 一、免疫球蛋白的定量检测 1．血清免疫球蛋白的测定 血清免疫球蛋白（IG）的测定是检查体液免疫功能最常用的方法。由于目前还没有发现由IGD和IGE缺陷所致疾病，所以通常检测IGG、IGM、IGA，这三类IG就可以代表血清IG的水平（表20-2）。检测发现三类IG水平均明显低下，就可考虑体液免疫缺陷。但在分析儿童IG水平时，应注意IG的水平随年龄而变化。体液免疫功能缺陷首先考虑患者血清IG 水平，如果所有类别IG水平均降低，即称为一般性联低丙种球蛋白血症。如果免疫球蛋白水平极度低下，或IGG、IGM、IGA,三类IG总量低于2MG/ML则称为严重低丙种球蛋白血症或无丙种球蛋白血症(AGAMMAGLOBULINEMIA)。如果只一种或两种IG水平降低，则称为异常丙种球蛋白血症（DYSGAMMAGLOBULINEMIA）。一般性低丙种球蛋白血症多见于继发性免疫缺陷病。无丙种球蛋白血症常见于原发免疫缺陷病。但是常有约50%IGA缺陷病人无临床症状，伴有反复感染的IGA缺陷病人常同时有IGG的缺陷。常规的定量检测血中IG的方法是单向免疫扩散和免疫比浊法。 2．分泌型IGA(SIGA)的测定 SIGA是粘膜抗感染的重要因素，但是粘膜抗感染还包括少量渗出的IGM和IGG，还有细胞免疫的作用。由SIGA缺陷病人常可检测出针对牛奶或其他食物蛋白的沉淀抗体和自身抗体，说明机体对抗原蛋白质吸收异常，同时也存在免疫调节系统的功能紊乱。一般来说血清IGA缺陷病人常伴有SIGA缺陷，反之亦然。说明在机体中血清IGA和SIGA之间有某种生物相关性。最近也有报导少数SIGA缺陷病人的血清IGA水平正常，因而分别检查血清中和分泌液中IGA水平还是有必要的。目前用免疫比浊法可较精确地测定分泌液中IGA时和IGM和IGC水平。在用单向免疫扩散和免疫比浊法定量IGA时，因抗血清是针对这两型共有的α链的，故不能区分SIGA和血清来源的IGA。而应用抗分泌小体的抗体用酶免疫分析法，可区分血清IGA和分泌型IGA,并可对SIGA进行定量。 二、常见抗体的测定 检测体液免疫功能的另一种方法是定量测定正常人体内的几种常见的抗体水平。常见的抗体通常是指嗜异性凝集素、抗溶血素O抗体以及麻疹病毒、脊髓灰质炎病毒的抗体。 在严重免疫缺陷病人缺乏上述抗体，常见抗体的缺损可验证或支持免疫蛋白测定的结果。然而对于比较复杂的免疫缺陷，由于这类抗体主要反映过去的免疫应答能力，此外这种初次应答能力持续期短，易于消退，所以对新近发生的继发性免疫缺陷的诊断帮助不大。

㈤ 肠道致病菌的分类及常用检测方法

根据可培养细菌的数量分类在肠道菌群中，可以培养到的细菌有400余种，依据其数量多少可以分为主要(优势)菌群(predominantmicroflora)和次要菌群(sub—dominantmicroflora)。

①主要(优势)菌群：指肠道菌群中数量大或种群密集度大的细菌，一般在10～10cfu/g以上，包括类杆菌属、优杆菌属、双歧杆菌属、瘤胃球菌属和梭菌属等专性厌氧菌，通常属于原籍菌群。优势菌群是对宿主发挥生理功能的菌群，在很大程度上影响着整个菌群的功能，决定着菌群对宿主的生理病理意义。

②次要菌群：数量在10～10cfu/g以下，主要为需氧菌或兼性厌氧菌，如大肠杆菌和链球菌等，流动性大，有潜在致病性，大部分属于外籍菌群或过路菌群。

检测方法：

1、采样及稀释

（1）按无菌操作法将检样25g（或25mL）放于含有225mL无菌水的三角瓶中（瓶内预置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。固体检样最好用无菌均质器，以8000～10000r/min的速度离心1min，做成1：10的稀释液。

（2）用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1Ml，注入含有9mL无菌水的试管内，振摇混匀，做成1：100的稀释液，换用1支lmL灭菌吸管，按上述操作依次作l0倍系列稀释液。

（3）根据食品的卫生要求或对检验样品污染情况的估计，选择三个稀释度，每个稀释度接种3管。也可直接用样品接种。

2、乳糖初发酵试验

即通常所说的假定试验。其目的在于检查样品中有无发酵乳糖产生气体的细菌。将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1mL以上者，用双倍乳糖胆盐发酵管。

lmL及1mL以下者，用单倍乳糖胆盐发酵管。每一个稀释度接种3管，置36±1℃温箱内，培养24±2h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产气者，则按下列程序进行。

3、分离培养

将产气的发酵管分别划线接种于伊红美蓝琼脂平板，置36±1℃温箱内培养18～24h，然后观察菌落形态并作革兰氏染色、镜检并作复发酵试验。

4、乳糖复发酵试验

即通常所说的证实试验，其目的在于证明经乳糖初发酵试验呈阳性反应的试管内分离到的革兰阴性无芽胞杆菌，确能发酵乳糖产生气体。

在上述选择性EMB培养基上，挑取可疑的大肠菌群菌落1～2个进行革兰染色，同时接种乳糖发酵管，置36±l℃温箱内培养24±2小时，观察产气情况。

凡乳搪发酵管产气，革兰染色为阴性反应的无芽胞杆菌，即报告为大肠菌群阳性；凡乳糖发酵管不产气或革兰染色为阳性，则报告为大肠菌群阴性。

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有益菌菌群的生理功能：

如果肠内有益菌菌群占优，肠内黏膜呈现粉红色，表示肠内环境相当良好。

1、吸收水分，粪便较软，较易排泄

在胃部分解消化的食物，经由小肠吸收营养后，成为粘稠状物体送至大肠。然后再经过18小时将水分及矿物质吸收，就变成容易排泄的粪便。肠道内环境良好时，粪便的软硬适中，排便会较为顺利。

2、缓和的蠕动，能顺利将粪便排出

借由肠的蠕动，将粪便缓慢的推送至肛门。如果蠕动过快或太慢，都将影响粪便的构成，导致便秘或者腹泻。而如果肠内干净，则蠕动的速度就相当的有规律，粪便可顺利排出。

3、有助维他命的合成

比菲德氏菌等好菌能维护肌肤的健康，并具有合成有助热量产生的维他命B1、B2及B6等，以及与止血、骨骼形成有关的维他命K等之功用。健康的肠道，好菌会不断繁殖，维他命的合成也可顺利进行。

4、迅速排出有害物质

健康的肠道并非完全没有坏菌的存在，有害物质多少会产生。当然还包括，吃进体内的食品化学添加物或是无法成为营养成分的物质。只要肠内环境良好，这些物质在开始危害身体前就被排出体外。

5、避免病原菌的侵害

比菲德氏菌等好菌可以刺激并提高身体的免疫机能，而且易引起食物中毒等病原菌因具怕酸特质，所以像是含有好菌的乳酸饮料或健康食品等，都可抑制病原菌在肠内繁殖。

肠道有益菌菌群除了以上功能之外，对人体还有营养作用，如糖尿病、高血压、高血脂等。B族维生素和非必需氨基酸对人类的毛发具有重要的作用，当缺少这些营养元素，会导致头发脱落或毛发发黄、发叉，容易折断等现象。

㈥ 大肠杆菌的检测方法有哪些

大肠杆菌的检测方法有以下几种：一、大便常规化验加大便潜血化验，如果化验结果提示有细菌感染，那么就需要完善大便培养加药敏试验，进一步明确感染细菌的类型和敏感抗生素类型，从而可以作为大肠杆菌的一种监测方法。二、肛门或者直肠内分泌物化验，也可以作为大肠杆菌这种细菌的一种监测手段。三、大肠杆菌还可以在其他部位出现，比如口腔、胃部、呼吸道等，如果在口腔，进行口腔内分泌物化验可以化验出大肠杆菌感染，如果在胃部，进行胃镜检查后病例组织活检可能检出大肠杆菌。如果是呼吸道，进行痰培养加药敏试验，可以化验出大肠杆菌。总之大肠杆菌的检测通常都是标本化验发现的。

㈦ 分泌型免疫球蛋白A（sIgA)

分泌型免疫球蛋白A（sIgA)是一种非常重要的抗体分子，在人体抵抗疾病的第一道防线起决定性作用。

英文全称：secretory immunoglobulin A，简称sIgA。

人体抵抗疾病的第一道防线是人体黏膜。人体黏膜的表面积约为400平方米，为人体皮肤面积的200倍，是病原微生物等抗原性异物入侵机体的主要门户，sIgA作为黏膜免疫的主要抗体，担负着重要的免疫功能。

黏膜免疫系统(Mucosal immune system，MIS)是指广泛分布于呼吸道、胃肠道、泌尿生殖道黏膜下及一些外分泌腺体处的淋巴组织。近年来发现该系统不仅具有一般性的屏障作用，而且还参与机体的体液免疫和细胞免疫过程，是执行局部特异性免疫功能的主要场所，在机体内环境的调节中起重要作用。

在人体黏膜中，呼吸道黏膜又特别重要。

呼吸道黏膜免疫系统(respiratory passage mucosa immune system，RMIS)是黏膜免疫系统的一个重要组成部分，是机体最先接触大量病毒、细菌等吸入性抗原的部位。分泌型免疫球蛋白A(slgA)是呼吸道黏膜表面主要的抗体，它在防御病毒、细菌、抗原黏附于呼吸道黏膜表面起重要作用。

呼吸道黏膜表面是机体与外环境之间的一道有效的防御屏障，其最主要的特征是产生分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulin A，sIgA)。sIgA被认为是黏膜表面的免疫屏障，它能有效的抑制病原体粘附、定植或侵入黏膜表面，这种免疫排除作用能保护黏膜屏障的完整性和阻断病原体对机体的感染。

与普通的抗体分子相比，slgA具有许多优良特性：slgA分子中的J链将2个IgA单体接起来，由于每个IgA单体具有2个抗原结合部位，因此每个sIgA抗体即有4个抗原结合位点(四价)，从而比普通抗体分子具有更高的亲和力；slgA也具有很高的稳定性，其在黏膜表面的半衰期为IgG的3倍，其在人体外分泌道中的保护作用可以持续4个月以上。随着近年来人们对黏膜免疫在感染疾病过程中所扮演的角色进一步认识，slgA的作用被凸现出来，已成为黏膜免疫领域的一个焦点。

sIgA是免疫球蛋白A（immunoglobulin A，IgA）的一种。

免疫球蛋白A在正常人血清中的含量仅次于IgG，占血清免疫球蛋白含量的10～20%。

从结构来看，IgA有单体、双体、三体及多聚体之分。

按其免疫功能又分为血清型及分泌型两种，sIgA即分泌型IgA。

血清型IgA存在于血清中，其含量占总IgA的85%左右。血清型IgA虽有IgG和IgM的某些功能，但在血清中并不显示重要的免疫功能。

分泌型IgA存在于分泌液中，如唾液、泪液、初乳、鼻和支气管分泌液、胃肠液、尿液、汗液等。分泌型IgA是机体粘膜局部抗感染免疫的主要抗体。故又称粘膜局部抗体。

IgA不能通过胎盘。新生儿血清中无IgA抗体，但可从母乳中获得分泌型IgA。新生儿出生4～6个月后，血中可出现IgA，以后逐渐升高，到青少年期达到高峰。

目前有关slgA的研究主要包括：slgA的基本结构(IgA、J链、SC)和功能关系，以及slgA与黏膜免疫有关疾病的研究进展。而与之相关的给药载体也有陆续的报道和发现，相信随着人们对sIgA结构、生物学功能及其临床研究应用，对口服疫苗、黏膜疫苗等新型给药载体的深入研究，必将给新药、疫苗的研发以及临床防治黏膜免疫疾病带来广阔的前景。

RMIS由有结构的黏膜滤泡和广泛分布在黏膜固有层中的弥散淋巴组织构成。黏膜滤泡主要指鼻相关淋巴组织(NALT)和支气管相关淋巴组织(BALT)。NALT和BALT是免疫应答的传入淋巴区，抗原由此进入MIS(黏膜免疫系统)，这些外来抗原被呼吸道黏膜上皮细胞摄取，通过抗原提呈细胞及膜细胞将抗原运送给T、B细胞，引发免疫应答，进而发挥免疫清除效应。弥散淋巴组织是免疫应答的传出淋巴区，浆细胞和致敏淋巴细胞通过归巢机制迁移至弥散淋巴组织，抗体和致敏淋巴细胞在此发挥生物学功能

黏膜免疫的一个重要特征就是产生分泌型抗体IgA(secretory immunoglobulin A，slgA)，slgA是黏膜表而分泌量最多的免疫球蛋白，且不易被一般的蛋白酶破坏，为黏膜免疫系统的主要效应分子。

1 slgA的结构

slgA最早是20世纪60年代由Tomasi等首先发现存在于外分泌液中的一种抗体，主要存在于乳汁、胃肠液、呼吸道分泌液等外分泌液中。其分子结构由2个IgA单体，l条J链和1条分泌片(secretory piece，SC)组成。

1．1 IgA的类型

人类IgA分为两种，即血清型IgA和分泌型IgA。血清型IgA主要存在于血清中，约占血清总Ig的12％一20％，大多数为单聚体，主要由肠系膜淋巴组织中的浆细胞产生。与血清型IgA不同，分泌型IgA(sIgA)大多为二聚体结构(也有三聚体或四聚体结构)，主要位于乳汁(初乳中含量最高)、唾液、泪液中。人体外分泌液中的slgA主要以二聚体和高分子量的形式存在，正是sIgA的这种特异性多价结构，能够使病原体聚集、固定并最终在黏膜表面被中和，这也解释了为什么slgA对抗原的亲和力远远大于单体IgA。

1．2 分泌片SC的结构与功能

分泌成分(secretory component，SC)又称分泌片(secretory piece)是多聚免疫球蛋白受体(plgR)的胞外段部分，由黏膜上皮细胞及外分泌腺上皮细胞合成。分泌片(sC)的分子量为79．6 kDa，包含5个免疫球蛋白可变区(D1一D5)，每个可变区都含有100到110个残基，共连有42个非结构化的氨基酸。

SC分子中包含有各种多聚糖链，有七个N一糖基化位点，这些糖基化位点约占SC总分子量的22％。多聚糖链具有细菌复合物潜在的结合位点，研究发现SC能够结合致病性大肠杆菌，抑制其在HEp一2细胞中的传染性，此作用与SC含有的糖链呈剂量依赖性。SC在分泌液中也存在一种游离态的形式，与固定SC相似，游离态的SC可以直接参与机体的非特异性免疫防御，抑制病源微生物对黏膜表面的黏附。

SC主要的功能是保护slgA和介导细胞内多聚免疫球蛋白的转运。SC能守卫上皮细胞免遭微生物的入侵，保护slgA，使之不受环境中酶的破坏。其作用机制可能为：slgA的分泌片高度稳定，其多糖侧链具有防止蛋白酶降解的作用，分泌片对抗体分子的包裹使整个抗体分子变得十分稳定。此外，由于每分子slgA的转运都需要消耗一分子的SC，要使slgA分泌至黏膜表面并形成隔离保护层，调节SC的表达在黏膜免疫保护作用方面有重要意义。

1．3 J一链的结构

J一链是一个相对保守，15—16Kd的多肽链(含137个氨基酸)，在抗体生成、细胞分泌抗体过程中结合到多聚体IgA或多聚体IgM的半胱氨酸残基上。J一链是由B细胞产生，但并非所有B细胞都产生J链。J链的表达局限于黏膜固有层，游离的J链并未在细胞外发现，仅仅作为多聚体免疫球蛋白复合物的一部分，这就表明J链对IgA的分泌以及聚合有很重要的作用。Johansen等发现，J链对于保持与SC的亲和力有着重要的作用。因此说J链是SC结合IgA的重要媒介。

2 slgA的合成与分泌

接触到黏膜表面的病原微生物和抗原，首先被专门的抗原识别细胞(M细胞)识别， M细胞内陷形成一个口袋形状，将识别过的病原微生物和抗原摄入到M细胞的”口袋”内，传递给抗原提呈细胞(APCs)。APCs将这些抗原分解成抗原碎片，同时激活T辅助细胞产生细胞因子IL-4，IL-5，IL-6，IL-l0和转化生长因子β(TGF-β)。在这些细胞因子的协助下，B细胞增生并发育为成熟的浆细胞，分泌多聚体免疫球蛋白A(polymeric immunoglobulin，plgA)。plgAs必须经过跨膜转运穿过上皮细胞到达黏膜表面，才能发挥特异性保护作用。这一过程需要多聚体免疫球蛋白受体(polymeric immunoglobulin receptor，plgR)的参与。该受体位于黏膜上皮细胞的底外侧，由上皮细胞产生。pIgA与plgR结合，形成pIgR-plgA复合物，上皮细胞胞吞该复合物，在跨膜转运过程中，plgR发生裂解反应，plgR的细胞外部分裂解形成SC。pIgR—plgA复合物与SC结合，穿过黏膜上皮细胞到达黏膜表面，最终形成slgA。

3 介导sIgA分泌的主要细胞因子

调节sIgA的合成、分泌以及slgA介导的免疫应答都依赖于T细胞的辅助，主要是黏膜相关淋巴组织的T细胞和其分泌的细胞因子。根据产生细胞因子谱的不同，Th细胞分为Thl和Th2两种类型，Thl细胞主要分泌IL-2、IFN-Y、TNF、TGF-B等细胞因子；Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等细胞因子。目前多数文献报道较为一致的是，IL-4和TGF-13促进B细胞发生IgA类型转换，从而增强sIgA的产生，Th2细胞因子IL-5、IL-6和IL—10也可以增强IgA分泌，促进IgA定向性B细胞的分裂。比较有意思的是IFN-Y对slgA的影啊，Austin等人认为IFN-Y通过拮抗IL-4抑制IgA抗体的分泌。Amin等则在HT-29单层细胞的体外实验中发现，Thl型细胞因子IFN-y和Th2型细胞因子IL-4可促进IgA穿过肠道上皮增加IgA的跨膜转运。究竟IFN-Y对sI酣的调节是正性作用，还是负性作用，有待于实验进一步验证。

4 slgA的生物学功能

呼吸道是机体与外界环境接触最为密切的部位，而呼吸道黏膜覆盖在整个呼吸道表面，成为机体抗病原微生物侵袭的第一道防线。sIgA作为黏膜免疫系统的效应分子在呼吸道黏膜抗感染中发挥关键作用，sIgA的主要功能包括：(1)阻止病原微生物的黏附：病原微生物引起感染的首要条件是其黏附在组织细胞上，进而生长繁殖，形成集落并在局部定居，而sIgA能够阻止病原微生物黏附于黏膜表面，保护黏膜不受损害。其机制可能是sIgA可通过空间构象凝集、捕获黏膜层的病原体，并与之表面特异性结合位点结合，抑制他们的运动，使其丧失黏附能力。(2)中和细胞内病毒：通常情况下，抗体对细胞内的抗原几乎不起作用，但是sIgA能抑制细胞内病毒的复制、转录及组装。形成的slgA-病毒免疫复合物被plgR转运到粘液腔内，经呼吸道纤毛运动或肠蠕动排除体外。(3)溶解细菌：血清型IgA及slgA均无直接杀菌作用， 但可激活补体的C3旁路途径，与溶菌酶、补体共同引起细菌溶解。(4)调理吞噬作用：sIgA一旦分泌到肠腔就会与黏液混合，形成一层保护膜包被在上皮表面， 它能直接与病原微生物或食物抗原形成抗原一抗体复合物，以便于巨噬细胞的吞噬和清除。国内外有关的报道很多，但是最近报道在体内多形核细胞和体外kupffer细胞实验中清晰的证明，启动吞噬作用的是血清型IgA而非SIgA。

5．sIgA在临床中的应用

5.1 慢性结膜炎

刘钧等检测慢性眼结膜炎患者泪液SIgA和溶菌酶含量的变化，结果显示，慢性眼结膜炎患者泪液SIgA水平在治疗前非常显着地高于正常人组，经抗生素和中医中药治疗后2周，泪液水平已明显下降，但与正常人组比较，差异仍有显着性。提示慢性眼结膜炎患者泪液sIgA和溶菌酶含量的变化对临床观察预后有重要的价值。

5．2 口腔疾病研究

王统伍研究牙周病患者治疗前后血清IL-6、ha-CRP和唾液sIgA水平的变化的关系，结果显示，牙周病患者治疗前血清IL-6、ha-CRP和唾液sIgA水平均高于正常人。此外，还证实了血清IL-6、ha-CRP水平和唾液sIgA水平呈正相关关系。血清IL-6、ha-CRP和唾液sIgA水平的测定，可以做为了解牙周病病情、观察疗效的重要的指标。与此研究结果相反，Akopian研究发现唾液sIgA水平低下将引起口腔慢性炎症及感染。

5．3 呼吸道感染疾病的研究

唾液中含有的抗感染物质主要是分泌型IgA(sIgA)。在多种呼吸道感染性疾病过程中，唾液slgA含量可有显着的变化。顾涛研究表明，慢性支气管炎患者唾液sIgA在治疗前非常显着地高于正常人组。可能是由于慢性支气管炎患者在呼吸道受到病毒或细菌感染时，黏膜局部产生免疫应答，sIgA的合成和分泌增加，从而发挥局部免疫作用。陆婉秋研究儿童支气管哮喘与唾液中slgA相关性，发现健康儿童唾液中sIgA含量水平明显高于哮喘初诊及治疗组，提示健康儿童黏膜免疫功能强于哮喘初诊及治疗组，哮喘儿童存在黏膜免疫功能低下。因此，通过测定唾液slgA的含量不仅可以了解患者黏膜局部的免疫状态，在某种程度上还有助于疾病的早期诊断。

5．4 泌尿生殖系统疾病研究

孙彬彬等探讨测定阴道分泌物中slgA含量的对细菌性阴道病、滴虫性阴道炎、混合感染的诊断价值。认为阴道分泌物中sIgA含量的测定，可作为细菌性阴道病、滴虫性阴道炎、混合感染的辅助诊断措施或疗效观察手段之一。该研究结果与黄晓敏等实验结果相同。比较符合国内外一些学者的报道，从而说明局部黏膜免疫在病原菌感染中的作用和地位。

初次尿路感染患者的尿液中，其sIgA浓度较正常人尿液中的浓度高，在离体和在体的实验研究都证明sIgA对预防反复尿路感染的发生有较大的作用。刘杰等研究发现下尿路感染时尿液中slgA水平与非感染时尿液sIgA水平无明显变化，而肾盂肾炎病人尿液中slgA水平明显升高。该结果与David Greenwell报道一致，此研究提示slgA在上尿道和下尿道分泌有明显不同，这种差异是由于上尿路感染时分泌slgA能力增强，抑制细菌的粘附，而下尿路不产生slgA所致。因而测定尿中slgA在上尿道感染和下尿道感染的临床定位诊断有很重要的意义。

5．5 slgA与疫苗

迄今为止，大多数疫苗都是通过注射来刺激全身免疫系统产生血清型抗体对抗引起疾病的病原体。与注射疫苗相比，口服疫苗使用比较方便，也避免了注射器可能带来的疾病传染。随着基因工程的飞速发展和植物转化技术的完善，利用植物生物反应器可生产方便、廉价、有效、不需要纯化就可直接口服的疫苗口引，即通过抗原蛋白基因在植物可食部位的表达，直接食用后激发人体黏膜免疫系统产生抗体，预防疾病。

霍乱弧菌是人类霍乱的病原体，而霍乱毒素(cholera toxin，CT)是霍乱弧菌的重要致病因子，是已知致腹泻肠毒素中毒性最强的肠毒素。霍乱的保护性免疫作用研究表明，免疫后全身或局部产生的抗体IgG和IgM虽有作用，但不是主要的，通过肠道黏膜局部产生并分泌到肠道黏膜表面的抗体sIgA在对抗CT方面，发挥最重要的保护作用。霍乱毒素B亚基(CT-B)不具备毒性，不能导致腹泻，同时保留强免疫原性及佐剂活性，因此，CT—B被认为是研制霍乱疫苗的重要候选抗原。Arakawa等进行了转基因以植物口服疫苗的小鼠实验，他们用表达了霍乱弧菌B亚基的生马铃薯喂小鼠，结果刺激小鼠产生血清型抗体IgG和slgA，保护小鼠不受霍乱毒素的影响。

【根据网络信息整理】

㈧ 分泌型IgA的介绍

分泌型IgA，是在肠道黏膜免疫当中起到关键作用的是分泌型免疫球蛋白A(Secretory Immunoglobulin A, SIgA)。

㈨ 设计一个实验检测某人体液免疫功能

常有两种方法，
1．血清免疫球蛋白的测定
血清免疫球蛋白（Ig）的测定是检查体液免疫功能最常用的方法。由于目前还没有发现由IgD和IgE缺陷所致疾病，所以通常检测IgG、IgM、IgA，这三类Ig就可以代表血清Ig的水平（表20-2）。检测发现三类Ig水平均明显低下，就可考虑体液免疫缺陷。但在分析儿童Ig水平时，应注意Ig的水平随年龄而变化。体液免疫功能缺陷首先考虑患者血清Ig水平，如果所有类别Ig水平均降低，即称为一般性联低丙种球蛋白血症。如果免疫球蛋白水平极度低下，或IgG、IgM、IgA，三类Ig总量低于2mg/ml则称为严重低丙种球蛋白血症或无丙种球蛋白血症（agammaglobulinemia）。如果只一种或两种Ig水平降低，则称为异常丙种球蛋白血症（dysgammaglobulinemia）。一般性低丙种球蛋白血症多见于继发性免疫缺陷病。无丙种球蛋白血症常见于原发免疫缺陷病。但是常有约50%IgA缺陷病人无临床症状，伴有反复感染的IgA缺陷病人常同时有IgG的缺陷。常规的定量检测血中Ig的方法是单向免疫扩散和免疫比浊法。
2．分泌型IgA(SIgA）的测定
SIgA是粘膜抗感染的重要因素，但是粘膜抗感染还包括少量渗出的IgM和IgG，还有细胞免疫的作用。由SIgA缺陷病人常可检测出针对牛奶或其他食物蛋白的沉淀抗体和自身抗体，说明机体对抗原蛋白质吸收异常，同时也存在免疫调节系统的功能紊乱。一般来说血清IgA缺陷病人常伴有SIgA缺陷，反之亦然。说明在机体中血清IgA和SIgA之间有某种生物相关性。最近也有报导少数SIgA缺陷病人的血清IgA水平正常，因而分别检查血清中和分泌液中IgA水平还是有必要的。目前用免疫比浊法可较精确地测定分泌液中IgA时和IgM和IgC水平。在用单向免疫扩散和免疫比浊法定量IgA时，因抗血清是针对这两型共有的α链的，故不能区分SIgA和血清来源的IgA。而应用抗分泌小体的抗体用酶免疫分析法，可区分血清IgA和分泌型IgA，并可对SIgA进行定量。