1. 简述农产品质量检测一般方法有哪些
1.农药残留检测。常见的农药残留检测方法有酶抑制法、免疫分析法与无损检测法。酶抑制法，以生物学为基础，通过乙酰胆碱酯酶对相关农药的快速反应进行检测。具有生物学的不稳定性与专一性特点，不适宜大范围使用，但因其廉价便捷性，目前在果蔬检测方面应用较多，采用酶抑制法进行检测时应当注意选用高质量酶试剂。免疫分析法，多用于食品检测方面，应用该方法可快速识别样品的异样状态。无损检测法，能够在最大程度上保留农产品营养与外形，是如今较为先进的综合型农药检测技术，具有较高的商业价值，基于该技术，应用较多的是红外光谱与X光衍射检测方法，采用该方法，应当注意避免损害农产品质量。
2.兽药残留检测。常见的兽药残留检测方法有酶联免疫吸附试验法（ELISA）与放射免疫检测法。ELISA，主要通过对样品进行定量分析的方式，检测样品兽药残留含量，具有高特异性与高度灵敏性，在检测畜牧农产品时较为常用。应用该方法应当选用高质量试剂，也可以通过试纸条、荧光检测仪等检测器具进行检测，提高检测质量。放射免疫检测法，主要通过同位素识别抗原抗体，具有高精准度，因此，在抗生素检测方面效果显着，同样适用于兽药微生物残留检测。
3.微生物残留检测。在农产品质量安全检测中，对微生物残留的检测同样重要，主要检测农产品生物毒素，常见的有生物毒素确证检测技术与快速检测技术。生物毒素确证检测技术，在实践中主要应用高效液相色谱法，也可以结合应用高效液相色谱法与质谱检测法，主要检测农产品中的黄曲霉素、棒曲酶毒素等。快速检测技术，常用检测方法为荧光检测技术、免疫层析检测技术等，在检测一般微生物时较为常用，同样需要选用高质量核心试剂。
4.重金属残留检测。含有铅、汞、铜等元素的重金属一旦残留于农产品上，不仅威胁产品安全，被人食用后严重的甚至会引发中毒，因此，必须重视对农产品重金属的检测。目前，我国重金属检测技术还处于发展阶段，较常应用的是荧光检测法、电感耦合等离子质谱检测法以及原子吸收检测法，主要检测农产品重金属残留。随着我国社会经济发展，重金属残留对农产品的危害越来越大，加强检测技术研究力度刻不容缓。
2. 求助，请问乙酰胆碱的提取方法有哪些，谢谢各位大神！！！！
目的研究中药水提物对乙酰胆碱酯酶的抑制活性。方法选取24味中药做研究对象。应用传统的水提的方法制备中药提取物。使用改进了的Elman比色法检测24种中药的水提物对兔大脑乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果黄柏的水提物有显着的乙酰胆碱酯酶抑制活性,在50μg/ml浓度下抑制率达75.58%,IC50值为20.03μg/ml。厚朴的水提取物在50μg/ml浓度下抑制率为43.95%,其IC50值为127.17μg/ml。益智仁的水提物有较弱的乙酰胆碱酯酶抑制活性。结论黄柏等中药提取物对乙酰胆碱酯酶具有很好的抑制活性。
3. 乙酰胆碱酯酶测定方法
乙酰胆碱酯酶 乙酰胆碱酯酶 acetylcholine esterase 简称AchE（也称真性胆碱酯酶）：活性高,选择性水解Ach的必需酶，能使乙酰胆碱（ACh）水解成胆碱和乙酸。 乙酰胆碱酯酶 acetylcholine esterase EC3.1.1.7。胆碱酯酶中的I型（即true choli-neesterase）废物特异性高，因为只分解以乙酰胆碱为中心的狭窄范围的底物，故特此这样称呼。 一、AchE在神经肽代谢中的作用 Chubbe等的研究证明，AchE具有羧肽酶和氨肽酶的活性。在体外，AchE能水解脑啡肽（Enk）和P物质（SP），但不能水解生长抑素（Som）和血管加压素（VSP）等。进一步的研究证明，AchE作为肽酶，其水解肽的活性部位和作为酯酶的活性部位不同。值得注意的是，神经系统许多非胆碱能的，含大量AchE的神经元同时亦含有各种神经肽类物质。如脊髓背根节的SP能细胞即是AchE强阳性。 最近的研究显示，高度纯化的来自电鳗电器官或牛血清的AchE具有蛋白酶样或外切酶的活生。对于血清蛋白质，AchE能发挥C端残基的清除作用。此外，AchE的蛋白酶样作用还得到分子生物学证据的支持，氨基酸分析显示，AchE蛋白质分子与蛋白酶样内切酶以及血清羧肽酶的氨基酸序列相似。在它们的C端36个残基范围内，有40%氨基酸序列和蛋白酶的活性片段相同。 二、AchE的电生理和行为效应 （一）AchE的树突/胞体释放 树突/胞体释放是神经分泌的一种特殊形式。黑质多巴胺神经元属非胆碱能，似乎很少接受胆碱能传入投射，但黑质细胞内含有大量AchE。研究发现，脑内的AchE可以有膜结合型和非膜结合型（可溶的）两种形式，黑质多巴胺能神经元的树突或胞体能够将AchE（可溶型）分泌到细胞外液中，称为AchE树突释放现象。显然，AchE的树突释放现象和Ach的释放无关。因为应用胆碱能阻断剂或拮抗剂并不能影响AchE的树突释放。同时，AchE在脑室内的分布以及脑脊液中的含量都和Ach不一致，由于电镜观察在黑质内没有发现树树突触的存在，所以黑质内经树突或胞体释放出的物质能相对自由的扩散。因此，在黑质AchE可能发挥一种非突触性的调节作用，以调节黑质一纹状体投射神经元的胞体对其远端树突传入信号的敏感性。 （二）AchE的电生理及行为效应 研究发现细胞外AchE能改变黑质多巴胺神经元的电活性及动物的运动行为。大剂量应用时，AchE抑制黑质多巴胺能细胞的自发放电，但在生理学剂量时它能增加黑质细胞的放电频率。Creenfield通过体外培养细胞内记录方式发现在灌流中加入AchE能引起黑质细胞膜的显着超极化，并伴有膜输入电阻的降低，用不可逆性的胆碱酯酶抑制剂苏曼（soman）预先处理AchE，然后将其加入脑片培养液中，不能改变AchE对膜的电学性质的影响。上述实验表明，AchE对黑质多巴胺能神经元膜有电学特性的作用与AchE水解Ach作用无关，并还具有高度结构特异性。 应用微电极直接将AchE注射到大鼠的黑质内，结果引起大鼠的运动行为改变，表现为行动迟缓和木僵状态。一次AchE注射后大鼠的行为变化可持续相当长的时间，其机制尚不清楚。推测在生理状态下，AchE从黑质多巴胺能细胞的树突释放后，能对其本身和邻近细胞的生理活动产生一定影响，这可能是一种新的神经元之间局部联系或自身后馈调节的方式。
4. 乙酰胆碱酯酶法测农药的特点
乙酰胆碱脂酶法操作简单,速度快,不需要昂贵仪器,适应于现场监测和对，大规模食品的筛选检测,被广泛用于野外农药残留快速检验。可用于农药残留检测 的酶有羧酸酯酶、丁酰胆碱酯酶及乙酰胆碱酯酶,前两种酶受干扰因素多,假阳性 率高,专一性低 。
5. 人体怎样能合成乙酰胆碱酯酶
乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase, AChE)是一种主要存在于人类和动物中枢神经系统的乙酰胆碱水解酶,其基本功能为催化水解神经递质-乙酰胆碱(Acetylcholine, ACh)导致神经冲动传递的终止,从而维持胆碱能神经的正常生理功能。医学上的神经系统疾病,例如老年痴呆症和帕金森病等多与人体内乙酰胆碱酯酶功能受到影响有关。 有机磷农药(Organophosphorus pesticides, OPs)与AChE结合会形成磷酰化ChE,磷酰化ChE很稳定,使酶失去催化水解ACh的能力并逐渐老化,造成ACh在体内的积累,最终导致胆碱能神经先兴奋后抑制。高含量的OPs可导致惊厥、呼吸困难、心律不齐、缺氧等急性中毒症状,低含量的OPs亦可经长期慢性毒害导致心脏、肝脏、肾和其他器官的损害。 乙酰胆碱酯酶生物传感技术具有灵敏度高、分析速度快、成本低、能在复杂体系中进行在线连续监测等优点。近年来,乙酰胆碱酯酶生物传感器已成为有关AChE及相关物质检测研究最活跃的领域之一,建立新型的、有效的乙酰胆碱酯酶生物传感分析技术对于健康、食品、环境监测等仍然是一个热门而有意义的研究课题。本论文围绕开发易于操作、价格低廉和高灵敏信号转换的AChE生物传感方法开展了一些研究工作,主要内容如下： (1)基于尼罗红吸附纳米金的AChE荧光法检测有机磷。纳米金由于具有消光系数大、吸收光谱宽等优良的光学性质,常被用作为荧光共振能量转移(FRET)的受体,是一种理想的荧光淬灭剂。第2章中将荧光物质尼罗红非共价吸附在纳米金的表面,利用纳米金有效淬灭尼罗红的荧光,形成一个低背景的荧光信号。当存在AChE催化体系时,AChE催化底物硫代乙酰胆碱水解生成硫代胆碱,后者可与尼罗红竞争结合纳米金形成强的Au-S键,促使尼罗红从纳米金表面解吸附,并且产生一种比尼罗红荧光更强的新荧光产物,体系荧光大大增强。当存在有机磷时,AChE的活性被抑制,水解产物硫代胆碱减少,最终解吸附下的尼罗红产物——新荧光物质相应地减少。利用纳米金淬灭荧光的独特光学性质,成功构建了一种简单、易操作、高灵敏的AChE荧光检测方法。 (2)信号增强型的AChE荧光法高灵敏分析检测有机磷。信号增强型分析法是从低的背景信号开始,加入少量的待测物便能形成可检测信号,这使其具有更高的信噪比。
6. 如何测定蔬菜中残留农药
一般常用两种方法：
酶抑制法和色谱法
酶抑制法：
原理：有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死，根据这一昆虫毒理学原理，用在对农药残留的检测中。加入反应试剂后，用分光光度计测定吸光值随时间的变化值，计算出抑制率，判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药的残毒情况。 乙酰胆碱酯酶+有机磷或氨基甲酸酯类农药——→酶活性被抑制
乙酰胆碱酯酶+样本提取液——→
1. 活性被抑制——→样本中含有有机磷或氨基甲酸酯类农药
2.活性正常 ——→样本中不含有有机磷或氨基甲酸酯类农药
如以乙酰硫代胆碱（AsCh）为底物，在乙酰胆碱酯酶（AchE）的作用下乙酰硫代胆碱（AsCh）水解成硫代胆碱和乙酸，硫代胆碱和二硫双对硝基本甲酸（DTNB）产生显色反应，使反应液呈黄色，在分光光度计410nm处有最大吸收峰，用分光光度计可测得酶活性被抑制程度（用抑制率表示）。
速测卡用的也是这个原理，但是这个方法只能只能知道或许含有有机磷和氨基甲酸酯类农药。而且不能定性定量的检测，只是一个表征。
色谱法：
前处理过程，取3KG的样品，用食品加工机打碎，然后称取25克，加入乙腈提取液均浆，过滤，加入食盐，震荡，静置分层，然后去上层有机相10毫升，到氮吹仪上吹至近干，用丙酮转移，定容到5毫升，混匀，过膜，装入1.5毫升的样品瓶中，上气相色谱仪（FPD），外标法，能检测有机磷，讲吹近干的提取液，用正己烷烷、正己烷和丙酮的混合液转移，过弗洛里矽柱到15毫升，再氮吹至5毫升以下，用正己烷定容到5毫升，转移到样品瓶，上气象色谱仪（ECD）能检测有机氯农药。
其他种类的农药，吡啶类、除草剂等就要上液相色谱仪，或者是质谱仪！
7. 求教各位关于乙酰胆碱酯酶的提取和纯化
石杉碱甲
1、从中草药千层塔中提取石杉碱甲的方法
2、石杉碱甲及其衍生物或其盐的注射用缓释微球及其制备方法
3、石杉碱甲衍生物,其制备方法和用途
4、乙酰胆碱酯酶抑制剂石杉碱甲的提取方法
我公司与中国农业大学的专家合作，历时3年研制开发的农药残毒快速检测仪，以及与其配套的试剂乙酰胆碱酯酶和酶片、显色片日前获国家专利。
这种农药残毒快速检测仪，采用酶抑制法检测有机磷及氨基甲酸酯类农药残留。运用固态可变光及样液脱色去杂技术，使检测误差大大降低，所用酶源是山东京蓬生物药业股份有限公司独自从敏感家蝇头部提取的乙酰胆碱酯酶，检测成本较进口酶低50%以上，仪器采用文字和语音双重提示操作，使用简便；四个检测通道均能独立检测，互不影响，单独检测一个样品只需10分钟，如果连续检测时间不超过2分钟，农药残毒快速检测仪，电源为3节一号干电池，打破了一般仪器不能用于田间地头的情况。
检测使用试剂（酶片、显色片）采用了一系列新处理技术，使之常温下即可储存，使用起来也非常方便（用时剪下一片即可）。酶片中的乙酰胆碱酯酶为我公司独自从敏感家蝇中提取制做的（注：本公司为中国大陆唯一一家生产乙酰胆碱酯酶的厂家），其敏感性和稳定性皆优于进口酶源
8. 请问 有机磷农药的检测有哪些方法,哪些又是最新的方法
在检测技术方面，方法有很多，主要有酶抑制法、酶联免疫法、光度法、色谱法及质谱法等。目前国际上已普遍采用多残留检测技术。这些方面的建立得益于气质联用（GC-MS）、液质联用（LC-MS）技术的应用以及常规使用的气相色谱仪（GC）、液相色谱仪（LC）技术上新的突破，并提高农药定性定量、多农残检测、快速检测等方面发挥着巨大的作用，色谱法以成为目前检测的主流仪器。
2.1 酶抑制法
酶抑制法是利用杀虫剂可以抑制乙酰胆碱酯酶或是羧酸酯酶的活性的原理而建立的，即乙酰胆碱酯酶或羧酸酯酶与样品反应，若酶的活性受到抑制，则表示该类杀虫剂的存在。因为酶的活性与杀虫剂的含量有关，测定酶活性的抑制率，即可得杀虫剂的残留量。应用抑制原理快速测定法只能判断是否有过高的有机磷和氨基甲酸酯农药，而不能判断超标的具体农药品种和残留量，因此只能作为快速测定方法。
2.2 酶联免疫测试法
酶联免疫检测法是利用化学药物在动物体中有促进其产生免疫抗体的原理，将某种农药与大分子化合物的复合体注入实验动物体内，使其对该种农药产生抗体，然后将抗体的抽取物与蔬菜样品农药残留抽取物进行离体试验，以比色的方式确认农药的残留量。这种结果精确、灵敏度高、特异性强，可采用试剂盒检测。但是，在实际应用中，农药种类繁多，制备抗体的难度较大，具有一定的盲目性。
2.3 气相色谱及其联用技术
气相色谱是一种简易、快速、高效和灵敏的现代分离分析技术，是农药残留测定不可或缺的手段，由于农药的种类很多，不同类型的农药，结构差异很大，而每一种检测器仅能对一类或几类原子和官能团进行响应，因而不同类型的农药常常需要采用不同类型的检测器，加上农药的残留一般都比较低，所以检测器的选择十分关键，如分析有机氯和拟除虫菊酯类农药采用电子捕获检测器（ECD）、分析有机磷农药采用火焰光度检测器（FPD）、分析含氮农药和氨基甲酸酯类农药采用氮磷检测器（NPD）。高灵敏的检测器可以检出1×10-10～1×10-12g的组分，适合农药微量和痕量分析。
气相色谱—质谱联用技术发挥气相色谱的高分离能力，又可发挥质谱法的高高鉴别能力，适用于多组分混合物中未知组分的定性鉴定，简化了多农残检测的分析步骤，而采用SIM模式仅对待测组分的定性离子进行采集，减少了杂质峰的干扰，提高了灵敏度。
2.4 液相色谱及其联用技术
相对于GC，液相色谱的适用性更广，可分析高沸点、热不稳定、非挥发性化合物。液相色谱质谱联用（LC-MS）对分析技术和仪器的要求高，具有检测灵敏度高、选择性好、定性定量同时进行、结果可靠等优点。但液相色谱与质谱之间的接口技术比较复杂，因此LC-MS在检测农药残留方面落后于GC-MS。由于目前LC-MS接口技术还没有真正地实现标准化，加之LC-MS对操作者的水平和仪器要求比较高，因此它在农残检测方面没有GC-MS普及。但LC-MS的飞速发展已成为发达国家在各种基质中微量极性农药检测手段。在多农残残留分析中，LC-MS技术使用最多的是四极质量分析器。由于质谱仪通用性，LC-MS在多种类多成分的农药残留检测中越来越广泛，如我国标准GB/T 20776-2006建立的粮谷中372种农药残留的LC-MS方法和国外环境样品中多农残分析。
3.CTI华测检测农药残留测试服务
CTI华测检测作为食品检测领域权威第三方检测机构，在诸多农残检测技术具有国际先进检测技术，同时获得中国合格评定国家认可委员会（CNAS）和国家计量（CMA）资质认可。华测检测可提供各国标准的农药残留检测服务，助您的产品通往日本、欧美顺利通关。根据企业的不同需求，华测检测农药残留测试服务如下：水胺硫磷、氧化乐果、克百威等约500种农药残留扫描，多农残检测324项（应对日本“肯定列表制度”），应对日本通过检测项目248项，日本厚生省57项有机磷农药列表测试服务，中国与欧盟常见农药185项，l 34项高毒农药一齐分析
9. 蔬菜水果中有机磷农药的残留如何检测
便携式农药残留速测仪及卡片的检测原理和使用方法便携式农药残留速测仪是根据国家标准方法GB/T5009.199 — 2003 )速测卡法(纸片法)而专门设计的仪器.主要用于果,蔬,茶,粮食,水及土壤中有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测,特别适用于农产品质量检测站的快速检测,果蔬生产基地和专业户采摘前田间地头检测,农贸批发销售市场现场检测,酒楼,食堂,家庭果蔬茶加工前安全检测. 检测原理: 仪器的检测原理是利用速测卡中的胆碱酯酶(卡②)可催化靛酚乙酸酯(卡①)水解为乙酸和靛酚,由于有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的活性有强烈的抑制作用,因此,根据显色的不同,即可判断样品中含有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留情况.①② 使用方法:(1)开机 按住面板上的"开 / 关"键约2秒钟,仪器开机(开机后再次按次键可关机):按[模式]键切换至"温度",当温达到40℃时,仪器发出一声提示音,预热完成,可以开始测试.(2)装片 将速测卡撕去上盖膜对折后再展开,插入压纸条下的各通道加热板上(注意卡①一端在上方,卡②一端在下方),检查速测卡放置位置是否正确,速测卡中间的虚线应与压条对齐,不要歪斜.(3)取样 选择有代表性的蔬菜或瓜果皮 ,擦去表面泥土,剪成一平方厘米左右碎片,取5克放入带盖瓶中,加入10毫升纯净水或缓冲溶液震荡50次(有条件拥护可配备超声波清洗器搅拌),静置2分钟以上,每批最好做9个检样,同时做一个纯净水或缓冲液的空白对照,每剪完一个样品,尖刀要洗净后方可处.理另一个样品,以免交驻污染.用移液抢取80微升样品液加到白色药片上. 如果检测是在采样现场或条件简陋的情况下进行,可直接在待检蔬菜叶尖部位滴2-3滴洗脱液,用另一片菜叶尖部在滴液处轻轻摩擦,使蔬菜表面的残留农药充分溶入洗液中.然后滴一滴在(卡②)上.(4)测试 按〈启动〉键,反应开始倒计时10分钟("反应"指示符亮)当听到仪器发出急促的蜂鸣提示音时关闭上盖,显色开始倒计时3分钟("显色"指示符亮):待仪器出缓和的蜂鸣提示音时,打开仪器上盖,进行结果判定.结果判定与空白对照卡比较,若(卡②)不变色或略有淡黄色均为阳性结果,不变黄为强阳性结果,说明农药残留量较高,显黄色色为弱阳性结果,说明农药残留量机对较低.(卡②)变为橘黄色或与空白对照卡相同,为阴性结果.附加说明本方法是生物化学反应,应尽可能避免一些物理和化学因素对酶活性的影响.反应最适酸碱度为PH7.5左右,检样偏酸或偏碱时应改用磷酸缓冲液浸提处理. 反应中,药片表面应保持湿润,最好将每一批样品处理好后统一加样,以免是过长蒸发干. 葱,蒜,萝卜,芹菜,茭白,蘑菇及番茄汁液中含有对酶活性有影响的植物次生物质,容易产生假阳性.处理这类样品时,不宣剪切过碎,浸提时间不宜过长,以免液汁过多释放影响检测检测结果.必要时可采用整株(体)蔬菜浸提的方法进行测定.农药速测卡在常温条件下有效期为壹年,贮存时要求放在阴凉,干燥和避光处,有条件者放于4℃冰箱中最佳.农药速测卡开封后最好在三天内用完,如一次用不完可存放在干燥器中.农药速测卡果蔬农药残留快速检测卡是用对农药高度敏感的胆碱酯酶和显色剂做成的酶试纸,可以快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯这两大类用量较大,毒性较高的杀虫剂的残留情况,选用的酶对甲胺磷敏感,抗干扰性强,操作简便,不需要配制试剂,不需要专业的技术培训,可以不需要任何仪器设备单独使用,也可配套农药残留快速检测仪使用,提高检测效率.产品容易贮存,携带方便,是现场检测的最佳方法.
10. 乙酰胆碱显色反应
［摘要］目的：研究胆碱酯酶测定两种方法对检测有机磷农药中毒的影响.方法：分别用丁酰胆碱（以下称丁法）和乙酰胆碱（以下称乙法）作底物,检测丁酰胆碱酯酶和乙酰胆碱酯酶.并对300例结果进行了分析,结果：异常率（少于参考值）丁法为2．3％；乙法为1．6％40经χ2检验,两者无明显差异结论：两种方法均可作为有机磷农药中毒指标.≯关键词］有机磷中毒；乙酰胆碱酯酶；丁酰胆碱酯酶有机磷中毒在基层比较常见c有机磷化合物是胆碱酯酶的强烈抑制剂,使其活性降低,故临床检测胆碱酯酶是诊断有机磷中毒的重要手段．．．．．．