亚群功能检测方法

A. 淋巴细胞亚群

[项目名称]T淋巴细胞亚群测定

[参考值]
免疫荧光法、桥联酶免疫检测法、SPA花环法：
CD3+细胞阳性率71．5％±6．2％
CD4+细胞阳性率45．7％±5．3％
CD8+细胞阳性率27．9％±5．0％
CD4／cD8比值为1．66±0．33
流式细胞术：
CD3+细胞阳性率61％一85％
CD4+细胞阳性率28％～58％
CD8+细胞阳性率19％一48％
CD4/CD8比值为0．9--2.0

[临床意义]T淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫功能的重要指标，且对某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等)的辅助诊断，分析发病机制，观察疗效及监测预后有重要意义。
1．CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者。
2．CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫病，如SLE、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。
3．CD4／CD8比值异常：艾滋病患者比值显着降低，多在0．5以下。比值降低的还有：SLE肾病、传染性单核细胞增多症、急性巨细胞病毒感染、骨髓移植恢复期等。比值增高见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生排异反应。
希望对你能有所帮助。

B. 今天检查淋巴细胞亚群

淋巴细胞亚群分析正是检测免疫功能的重要指标
它能反映机体当前的免疫功能、状态和平衡水平，并可以辅助诊断某些疾病（如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等），对分析发病机制，观察疗效及检测预后都有重要意义

一、什么是淋巴细胞亚群？

人体的免疫细胞包括T细胞、B细胞、NK细胞等。T细胞主要参与细胞免疫，表达CD3抗原；B细胞主要参与体液免疫，表达CD19抗原；NK细胞表达CD16和/或CD56，在机体中不依赖抗原刺激自发地发挥细胞毒效应。其中，T细胞又包括辅助T细胞（Th）和抑制T细胞（Ts），它们分别表达CD4和CD8。

2、CD4+/CD8+细胞比值改变：表明机体细胞免疫功能紊乱。不管是CD4+或CD8+细胞数发生变化均影响该比值。（1）CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂患者。（2）CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。（3）CD4/CD8>2.5表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免疫反应，见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。（4）CD4/CD8<1.4称为“免疫抑制”状态，常见于：A.免疫缺陷病，如艾滋病时的比值常显着小于0.5；B.恶性肿瘤；C.再生障碍性贫血、白血病；D.某些病毒感染。CD4/CD8降到1.0以下为“倒置”，是较为明显的异常。（5）若移植后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生排斥反应。

3、NK细胞（CD3-CD16+和/或CD56+）能够介导对某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒性作用。

四、什么人该检测淋巴细胞亚群？

原则上来讲，在机体的免疫（防御、自稳、监视）功能受损的情况下要考虑检查淋巴细胞亚群，下面列出了一些常见情况：

（1）免疫防御功能受损（反复、严重、多重感染，常规治疗效果不佳）

（2）免疫自稳和耐受功能受损（过敏性疾病、自身免疫/炎症疾病表现）

（3）免疫监视功能受损（肿瘤性改变）

（4）其他特殊情况（血常规中淋巴细胞明显异常、家族免疫缺陷病史、长期使用免疫抑制剂）

近年来，新的细胞表面位点的发现、新单克隆抗体的问世、高新仪器的更新换代等都为淋巴细胞亚群检测的发展提供了可能性，进一步为临床诊断和治疗提供指导和帮助。希望大家也能多多了解和关注淋巴细胞亚群检测，为自己的免疫功能保驾护航。

C. T淋巴细胞可分为哪些亚群有何功能

T细胞是相当复杂的不均一体、又不断在体内更新、在同一时间可以存在不同发育阶段或功能的亚群，但分类原则和命名比较混乱，尚未统一。按免疫应答中的功能不同，可将T细胞分成若干亚群，一致公认的有：
辅助性T细胞（Helper T cells,Th），具有协助体液免疫和细胞免疫的功能；
抑制性T细胞（Suppressor T cells,Ts），具有抑制细胞免疫及体液免疫的功能；
效应T细胞（Effector T cells,Te），具有释放淋巴因子的功能；
细胞毒性T细胞（cytotoxic T cells,Tc），具有杀伤靶细胞的功能；
迟发性变态反应T细胞（Td），有参与Ⅳ型变态反应的作用；放大T细胞（Ta），可作用于Th和Ts，有扩大免疫效果的作用；
处女或天然T细胞（Virgin or Natural T cells），他们和抗原接触后分化成效应T细胞和记忆T细胞；
记忆T细胞（Tm），有记忆特异性抗原刺激的作用。T细胞在体内存活的时间可数月至数年。其记忆细胞存活的时间则更长。
其中，Th细胞又被称为CD4+细胞，因为其在表面表达CD4(cluster of differentiation 4）。通过与MHCⅡ（主要组织相容性复合体，major histocompatibility complex）递呈的多肽抗原反应被激活。MHCⅡ在抗原递呈细胞（antigen presenting cells,APCs）表面表达。一旦激活，可以分泌细胞因子，调节或者协助免疫反应。Tc细胞又名为CD8+细胞，其表面表达CD8.这类细胞可以通过MHCI 与抗原直接结合。
流式细胞分析仪FCM根据淋巴细胞表面标志的不同来检测各淋巴细胞亚群：
淋巴细胞主要包括T淋巴细胞（CD3+），B淋巴细胞（CD19+），NK细胞（CD16+CD56+），

T淋巴细胞
其中T淋巴细胞可进一步测定辅助/诱导T淋巴细胞（CD3+CD4+）、抑制/细胞毒T淋巴细胞（CD3+CD8+）、CD4+T细胞纯真亚群（CD4+CD45RA+/ CD4+CD45RA+62L+）和记忆亚群（CD4+CD45RA-/ CD4+CD45RO+）、功能亚群（CD28+）、激活亚群（CD38+、HLA-DR+）、凋亡亚群（CD95+）等。
T细胞按照功能和表面标志可以分成很多种类：
1、细胞毒T细胞（cytotoxic T cell）：消灭受感染的细胞。这些细胞的功能就像一个“杀手”或细胞毒素，因为它们可以对产生特殊抗原反应的目标细胞进行杀灭。细胞毒T细胞的主要表面标志是CD8，也被称为杀手T细胞。
2、辅助T细胞（helper T cell）在免疫反应中扮演中间过程的角色：它可以增生扩散来激活其它类型的产生直接免疫反应的免疫细胞。辅助T细胞的主要表面标志是CD4。 T细胞调控或“辅助”其它淋巴细胞发挥功能。它们是已知的HIV的目标细胞，在艾滋病发病时会急剧减少。
3、调节/抑制T细胞（regulatory/suppressor T cell）：负责调节机体免疫反应。通常起着维持自身耐受和避免免疫反应过度损伤机体的重要作用。调节/抑制T细胞有很多种，目前研究最活跃的是CD25+ CD4+ T细胞。
4、记忆T细胞 (memory T cell)：在再次免疫应答中起重要作用。但暂时没有发现记忆T细胞表面存在非常特异的表面标志物，相信随着研究的深入，人们对记忆T细胞将会有一个更深入的了解。

D. T细胞亚群检测有何临床意义

检测淋巴细胞亚群可以了解患者机体的免疫功能是否处于平衡状态。某种细胞亚群所占百分比过高或过低，都提示存在免疫功能的紊乱。

T淋巴细胞亚群在某些临床疾病，如自身免疫性疾病、免疫缺陷性疾病、变态反应性疾病、病毒感染、恶性肿瘤等均有异常改变。因此，T淋巴细胞亚群的检测对控制这些疾病的发生发展、了解疾病的机制、指导临床治疗都有极其重要的意义。

目前，最为快速和准确的T细胞亚群的检测方法是流式细胞术荧光标记法，即用抗人T细胞表面分化抗原的单克隆抗体进行免疫荧光标记，通过流式细胞仪检测T淋巴细胞各亚群的百分率或绝对计数。

(4)亚群功能检测方法扩展阅读：

T细胞亚群检测临床上常用来观察的指标：

1、CD3＋：成熟T淋巴细胞的标志；

2、CD3＋CD4＋CD8－：T辅助／诱导细胞的标志；

3、CD3＋CD8＋CD4－：T抑制／杀伤细胞的标志；

4、CD25＋：白介素2受体的标的标志，即激活的T淋巴细胞。

健康人外周血T淋巴细胞亚群的参考范围为：CD3＋：61％～85％；CD3＋CD4＋CD8－：28％～58％；CD3＋CD8＋CD4－：19％～48％；CD4＋／CD8＋：0.9～2.0。

E. T淋巴细胞亚群的检查过程

在前散射(FSC)和侧散射(SSC)的二维Dot-plot图中，划出淋巴细胞区，然后对淋巴细胞作FITC和PE的荧光强度检测，荧光Ⅰ(FL1)为FITC，滤过片为(530±10) nm带通，荧光Ⅱ(FL2)为PE，滤光片为(575±10) nm带通。数据分析时，在确定每次检测阳性细胞百分率之前，根据isotype的非特异性荧光强度设定界限，以确定双阴性、双阳性和单阳性区。

F. Th亚群检测方法有哪些呢

Th亚群的检测可以通过胞内染色检测不同亚群分泌的特异性细胞因子，此时需要用到刺激剂PMA，离子霉素，BFA刺激Th亚群细胞分泌表达细胞因子，在加入对应的胞内细胞因子抗体染色分析来鉴定Th亚群；也可以通过检测Th亚群表达的特异性趋化因子受体来鉴定。不同Th亚群所分泌的特异性细胞因子和表达的趋化因子受体可以咨询苏州奕赛生物科技有限公司，BioGems品牌在中国的唯一合法代表，网络网友为您解答问题，望采纳。

G. 免疫学的检测方法

免疫学检测方法可分为体液免疫和细胞免疫。