军团菌感染的检测方法

❶ 社区获得性肺炎的检查

1.实验室检查（1）痰液取深部痰液作革兰染色，若有较纯的细菌出现如均为革兰阴性杆菌则可能是流感嗜血杆菌/革兰阴性需氧菌，如为革兰阳性菌呈双式葡萄状排列，则可能是真实的病原菌，此时对痰液作相应的可疑菌的对流免疫电泳是敏感和特异的检测法。（2）血标本一般取早、晚期双份血标本，对早期血标本进行细菌培养，分离鉴定病原菌，常用血清凝集试验法确定，对其他病原如支原体、鹦鹉热衣原体、病毒和军团菌等则可用酶联免疫测定法，荧光素标记抗体法检测血清中相应抗体。凡酶联免疫（ELISA法）IgM阳性或IgM双份血清有4倍升高者即可做出病原学诊断。建立的聚合酶链反应（PCR法）可直接快速检测病原的特异性核酸序列，快速准确地作出诊断。尿标本：常用乳胶凝集试验法测定病原菌抗原（如肺炎链球菌抗原和流感嗜血杆菌B型抗原等)。（3）下呼吸道分泌物获取分泌物较好方法是支气管肺泡灌洗法（BAL）。带塞导管（TPC）法或经皮肺穿刺抽吸法。用这些方法之一种获取标本后可进行病原分离培养。亦可进行快速PCR体外扩增法在较短时间内做出病原学诊断。对于广泛受到临床医生重视的军团菌所致社会获得性肺炎的实验诊断已建立了多种方法。但每种方法单独用于军团菌感染的诊断都是困难的。因此通常强调同时使用多种方法对该菌作诊断，在我国临床常采用的方法是直接荧光素标记抗体法。此方法需要多种标荧光素的抗体，才能在较短的时间完成。DNA探针测定法是特异且敏感的方法，可在数小时内完成对标本的检测，已有商品化检测试剂供应是一种快速检测军团菌感染的较好方法。2.X线检查在肺炎的诊断中有两个最主要的目的：一是证实有无肺炎存在，二是明确病变部位。高质量的X线后前位胸片有助于显示左侧心脏后区的病变，即便如此，凡是肺炎患者都应该拍侧位X线胸片，以助病变的定位。肺炎的X线表现取决于病变部位（肺泡或肺间质）、病变范围（肺泡、小叶、肺段或大叶）、病变性质（化脓性、非化脓性），以及病变的感染途径（如血源性或气源性），同时还与病因及病原体种类密切相关。因此，通过分析病变部位、范围、形态及分布特点等，有时对推测病因及病原体种类有帮助。肺炎阴影的动态改变对于肺炎与其他阴影的鉴别诊断有重要意义。

❷ 细菌的微生物学检验包括哪些程序

细菌的微生物学检验包括哪些程序：
微生物包括：细菌、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体以及病毒，它个体微小、种类繁多、与人类关系密切。涵盖了有益跟有害的众多种类，广泛涉及食品、医药、工农业、环保等诸多领域。微生物指标是衡量食品安全最常见、最重要的因素之一 。食品中如果含有超出一定数量的微生物，不仅会使食物变质、腐败、失去营养价值，而且还会危害人类的健康和安全。
微生物菌种检测
检测产品：
大肠杆菌、大肠埃希氏菌、菌落总数、酵母和霉菌数量、绿脓杆菌、李斯特氏菌、沙门氏菌、霍乱弧菌、阪崎肠杆菌、志贺氏菌、溶血性链球菌、商业无菌、金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌、无菌测试、微生物限量、肠道球菌数、下菌落总数等；
微生物菌种检测
检测项目：
【常规项目】
菌落总数、大肠菌群、大肠杆菌、霉菌、酵母菌等；
【致病菌】
沙门氏菌、单核增生李斯特氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、弯曲杆菌属、阪崎肠杆菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽孢杆菌、大肠埃希氏O157：H7/NM、致泻大肠埃希 氏菌、溶藻弧菌等；
微生物菌种检测
【其他】
军团菌、乳酸菌、罐头食品的商业无菌、肠杆菌科、嗜渗酵母、粪链球菌、粪大肠菌群、肠杆菌属、厌氧菌落总数、厌氧亚硫酸盐还原菌、需氧嗜温菌芽孢、厌氧嗜温菌芽孢、嗜热嗜酸菌、嗜热菌落总数、白色念珠菌等；
【实时PCR快速检测】
沙门氏菌、单核增生李斯特菌、大肠杆菌O157:H7/NM；
【抗菌性测试】
塑料制品，陶瓷，其他抗菌材质；
【药典常规测试】
USP 62，Ch。
微生物菌种检测
检测标准：
食品微生物学检验菌落总数测定 GB 4789.2-2016.
食品微生物学检验大肠菌群计数 GB 4789.3-2016.
食品微生物学检验沙门氏菌检验 GB 4789.4-2016 (不测血清分型)
食品微生物学检验 志贺氏菌检验 GB 4789.5-2012.
食品微生物学检验副溶血性弧菌检验 GB 4789.7-2013 (不测血清分型、神奈川试验)
食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验 GB 4789.10-2016.
食品微生物学检验 β型溶血性链球菌检验 GB 4789.11-2014.
食品微生物学检验 蜡样芽孢杆菌检验 GB 4789.14-2014.
食品微生物学检验 霉菌和酵母计数 GB 4789.15-2016.
食品卫生微生物学检验 调味品检验 GB/T 4789.22-2003.

❸ 嗜肺军团菌的微生物检查

一般取下呼吸道分泌物、肺活检组织或胸前积液等标本进行细菌学检查。 用BCYE培养基分离细菌，再根据肺炎特性、菌落特征、生化反应作出鉴定，但往往结果出现较晚。 可将标本用一只荧光标记抗体进行直接荧光实验，既特异又可做出快速诊断。 可用ELISA、RIA及乳胶凝集等试验检测标本中该菌特异性抗原或用PCR技术检查该菌核酸进行快速诊断。

❹ 军团菌感染简介

目录

• 1 拼音
• 2 英文参考
• 3 概述
• 4 疾病名称
• 5 英文名称
• 6 军团菌感染的别名
• 7 分类
• 8 ICD号
• 9 流行病学
• 9.1 传染源
• 9.2 传播途径
• 9.3 易感人群
• 9.4 流行特征
• 9.5 根据传播特点分类
• 10 军团病的病因
• 11 发病机制
• 12 军团病的临床表现
• 12.1 军团病
• 12.2 庞提阿克热
• 13 军团病的并发症
• 14 实验室检查
• 15 辅助检查
• 16 军团病的诊断
• 16.1 流行病学资料
• 16.2 临床资料
• 16.3 实验室检查
• 17 鉴别诊断
• 18 军团病的治疗
• 19 预后
• 20 军团病的预防
• 21 相关药品
• 22 相关检查
• 附：
  • 1 治疗军团菌感染的穴位

1 拼音

jūn tuán jūn gǎn rǎn

2 英文参考

legionellosis

3 概述

军团病是嗜肺军团杆菌（legionellosis）所引起的以肺炎为主的感染，又称为军团病（legionella disease）。病原菌主要来自污染的水源，自呼吸道侵入。临床上分为两种类型：一种以发热、咳嗽和肺部炎症为主的肺炎型；一种以散发为主，病情较轻，仅表现为发热、头痛、肌痛等，而无肺部炎症的非肺炎型，称为庞提阿克热（Pontiac fever）。

1976年美国宾夕法尼亚州退伍军人军团在费城一个旅馆开会，约4400名代表及家属 *** 有221人相继发生肺炎，其中34人死亡。军团病由此而得名。6月后分离并鉴定出病原体同一种过去未曾加以分类的细菌，遂命名为嗜肺军团菌。以后的回顾性研究发现军团病在1957年就已有流行发生，而致病菌则在1943年即被分离。我国自1982年以来南京、北京等地相继报告有本病出现。

军团病可并发腹膜和胰腺炎，肺梗死，脑水肿等。体外药物敏感度试验表明军团菌对多种抗菌剂敏感，包括红霉素、利福平、氨基糖苷类抗生素、β内酰胺类中的青霉素类、氯霉素、磺胺甲恶唑/甲氧芐啶（复方磺胺甲恶唑）、多西环素和氟喹诺酮类等。但动物体内实验表明β内酰胺类抗生素、氯霉素、四环素类及氨基糖苷类抗生素无效。

未经适当治疗的病例，军团病病死率一般为15%～20%，多死于呼吸衰竭。并发急性肾衰竭时，病死率上升为53%。医院内感染的病死率可达60%。经特殊治疗者，病死率为5%左右。有效的早期治疗预后良好。痊愈者除少数神经系统症状严重的可遗留轻微失语和遗忘外，可完全恢复。

4 疾病名称

军团病

5 英文名称

legionnaires disease

6 军团菌感染的别名

legionellosis infection；军团杆菌感染；军团菌感染

7 分类

感染内科 > 细菌性感染

8 ICD号

A48.1

9 流行病学

9.1 传染源

军团菌可自河水、土壤等标本中分离。尚未证明人和动物为传染源。

9.2 传播途径

病原菌通过呼吸道传播。已证实在开挖土壤、河渠时可有军团病暴发流行。空调器、冷却水及湿润器、喷雾器内的水均可受本菌污染。本病传播同饮食无关。已排除人间接触传播。

9.3 易感人群

人群普遍易感，以中老年人多见。男性多于女性。受同一来源的病菌侵袭后，约1%～5%受袭者发病。散发病例约占全部肺炎病例的3%～4%。40岁以上中年和老年人易于发病，但婴幼儿亦可发生。散发病例中医院内感染占5%，院内感染的肺炎中可占20%以上。吸烟者、慢性肺部和心脏疾病、肾上腺皮质激素的应用、糖尿病、恶性肿瘤、器官移植、放射治疗、慢性酒精中毒等均是军团病的主要诱因。有慢性病患者，长期接受血液净化治疗或肾移植患者、肿瘤患者、应用免疫制剂者以及嗜烟酗酒者易患军团病。因此军团病常为一种机会性感染。

病后6～7日血清特异性抗体滴度上升，5周达高峰，数月下降。庞提阿克热有二次暴发流行报道。流行病学调查提示有隐性感染。

9.4 流行特征

军团病呈世界性分布，已有数十个国家有本病报告，但主要在发达国家流行。军团病或呈散发，或呈点状暴发流行。国内报道多数为散发病例，一年四季均可发病，但以夏秋季多见。1982年，我国南京首次证实了军团菌病；1989年北京郊区发生3次军团菌肺炎的暴发流行；1994年上海也出现了军团菌病例。

9.5 根据传播特点分类

根据传播特点可将军团菌病分为以下几种：

①医院获得性感染：多数院内军团菌病患者是由于其他疾病而住院治疗的患者，这些患者在自身免疫力低下的情况下受到军团菌感染而并发军团病。

②社区获得性感染：在日常生活环境和公共场所中受到军团菌感染而致病的情况也比较多见。

③旅行获得性感染：患者患病前10天内离家至少一个晚上，可能是在宾馆、饭店、车船、营地等环境中获得感染。此类感染目前日渐增多，欧洲旅行获得性军团菌病监测网1996年报告旅行获得性军团菌病占军团菌病的16%。

④职业获得性感染：某些特殊职业使得工作人员在作业中接触军团菌污染源的机会较高，而逐渐感染军团菌病。此类报道虽少，但涉及特殊职业及其特殊的劳动保护。

⑤办公室获得性感染：此类感染近年在城市中越来越普遍，与职业无关，感染者通常为在密闭、通风不良的空调办公室中工作的员工。

虽然军团菌生活在水中，但是人们不会由于饮用了含有军团菌的水而感染。军团菌感染的主要途径是经呼吸道感染。军团菌的菌体微小，人在正常呼吸时，会将空气中含有军团菌的气溶胶同时吸入呼吸道内，导致军团菌病。气溶胶是军团菌传播、传染的重要载体。供水系统可通过水龙头、淋浴、涡流浴、泡泡浴、人工喷泉等方式形成气溶胶。水龙头和淋浴是院内军团病的主要气溶胶形成动因。冷却塔和空调系统的空调风机可将冷却水或冷凝水吹到空气中，形成气溶胶。目前生活中能够形成气溶胶的其他设施和环境条件还有空气加湿器、温泉、玻璃窗防凝喷雾剂、蒸汽熨斗以及多雾的天气等。办公室获得性感染的污染源多为冷却塔和空调系统；医院获得性感染的污染源多为供水系统、呼吸治疗器、超声波加湿器等。在开挖土壤的工地附近亦可有军团病暴发流行。但人与人之间的传播则未见报道，散发病例的周围亦无继发病例。据某些国家健康人群调查，1%～20%的血清中有本菌特异抗体，说明军团菌可导致亚临床感染。

10 军团病的病因

嗜肺军团杆菌（Legionella pneumophila）为染色浅淡、革兰阴性多形性短小杆菌，2～5×0.3～0.9μm，偶见丝状体（8～20μm），无芽胞，其基因组大小为2.5×109，比立克次体、支原体和衣原体的基因大得多。本菌革兰染料染色困难，Giensa染呈红色，有些可见鞭毛，用改良Dieterle饱和银染色法，显示分布在细胞内外的深棕色至黑色杆菌，直接荧光抗体染色法检查本菌，则更为特异。

本菌需氧和2.5%二氧化碳，Ph6.0～7.0、温度为35℃时生长最好，而在普通培养基中不生长，需在加有半胱氨酸和焦磷酸铁的Mueller—Hinton培养基中生长，亦可在炭酵母浸液琼脂中生长。

本菌有20余种血清型，目前已知与人有关的至少有10余种血清型，其中第1种第1型为主要流行株。我国可能为1种5或6型。

本菌广布自然界，对外界环境抵抗力强，在蒸馏水中可存活2～4个月，在自来水中可存活一年左右。0.1%石炭酸、戊二醛、盐酸（pH1.7），2%福尔马林、70%酒精在试管内有杀灭作用。

根据细胞壁组成、生化反应和DNA杂交研究，军团杆菌和过去已知的病原菌无关，故构成单独一个科。军团菌科（Legionellaceae）仅有一个属，即军团菌属（Legionella）。该属至目前已发现42种，64个血清型，其中约19种自患者分离（表1）；其余则自环境分离。我国已定型者有Lp1，Lp3，Lp5，Lp6，Lp9等。引起疾病者主要是嗜肺军团菌（L.pneumophila，Lp）和麦氏军团菌（P.micdadei）；嗜肺军团菌有15个血清型，约90%属血清Ⅰ型。军团杆菌为革兰阴性杆菌，（0.3～0.9）μm×（2～4）μm，偶见丝状体，有鞭毛，多数为一根，位于顶端，需氧，有动力。病菌在普通培养基中不生长。最适宜的培养基为药用炭酵母浸出液琼脂（BCYE）。菌落于2～4天后生长，直径为1～2mm，平或微凸，边缘整齐。在FG（FeeleyGorman）琼脂培养基中，3～5天培养可见针尖大小菌落，在紫外线照射下可发出黄色荧光。多数菌种过氧化化氢酶弱阳性，硝酸盐酶和尿素酶阴性，仅利用淀粉而不利用其他糖类。生化鉴定一般对鉴定本菌用处不大，常以生长和形态为基础，最后作血清学鉴定。本菌的胞壁含有14～17个碳的支链脂肪酸，和其他细菌不同，可用气相色谱仪检测。军团菌可产生多种酶和毒素，包括蛋白酶、膦酸酯酶、脱氧核糖核核糖核酸核糖核酸酶、β内酰胺酶，以及细胞毒素，可能与毒力有关。本菌有内外二种毒素，其结构和其他革兰阴性杆菌略有不同，不含羟基脂肪酸，而含2酮3脱氧辛酸和特殊支链脂肪酸。细菌在自然环境中生活在淡水中、生物膜上，在蒸馏水中可存活2～4个月，河水中3个月，在自来水中存活1年左右。军团菌的生长可得到一些自由生活原虫的支持，或在其体内寄生，如阿米巴。原虫和军团菌相互作用，且原虫可改变军团菌的毒力。

11 发病机制

嗜肺军团菌（Lp）对人体的损害可分为间接损害作用和直接损害作用。

间接损害作用是从对肺泡巨噬细胞（Mφ）的作用开始的，研究发现，嗜肺军团菌（Lp）被肺泡巨噬细胞（Mφ）吞噬后，能抑制吞噬体与溶酶体融合，并能调节单核吞噬细胞内的pH值，以适宜其生存和繁衍；嗜肺军团菌（Lp）通过干扰细胞的除极变化而俘获肺泡巨噬细胞（Mφ），成功地完成免疫逃逸，并利用肺泡巨噬细胞（Mφ）的营养因素继续生存繁衍，进而裂解肺泡巨噬细胞（Mφ），导致肺泡上皮和内皮的急性损害，并伴水肿和纤维渗出。军团菌亦可通过诱导细胞凋亡的方式产生损害作用。嗜肺军团菌（Lp）的直接损害作用则主要是其产生的溶血素、细胞毒素和酶类等的作用。吸入的病菌由巨噬细胞所吞噬，并在其吞噬泡内繁殖，产生细胞毒素，杀死巨噬细胞，并侵入其他巨噬细胞。抗体的存在似不能阻止病菌的繁殖，而细胞介导免疫则起重要的抗感染作用。淋巴细胞受抗原 *** 而产生的细胞因子可抑制细菌在巨噬细胞内繁殖。此后抗体、补体和多核粒细胞可将病菌消灭。多数患者病变局限于肺部。实变病灶多呈大叶性分布，小部分为局灶性或斑块状分布。死亡病例一般双肺均被累及，上叶和下叶受累的机会无显着差异。实变区肺组织有充血、水肿和局灶性出血，常伴有少量纤维素性胸膜炎。显微镜检查主要为纤维素性化脓性肺炎、肺泡内有大量中性粒细胞浸润，同时有大量吞噬细胞、纤维蛋白和中等量的红细胞及蛋白碎屑。部分患者有急性弥漫性肺泡损害，表现为透明膜形成，肺泡上皮坏死、脱落和再生，血管内皮细胞肿胀和变性，以及间质有少量炎性细胞浸润。电镜观察毛细血管及上皮细胞基膜仍完整，提示正常的结构和功能可以恢复。支气管常无明显累及，故患者咳脓痰者不多。采用改良Dieterle饱和银染色、吉姆萨染色，病原菌可于吞噬细胞、中性粒细胞内及细胞外见到，但非特异性。直接荧光抗体染色阳性细菌则为特异性者。胸腔以外的脓肿罕有见到。庞提阿克热的发病机制尚不明了。根据流行病学和细菌学资料，在同一建筑单位受空调系统的气溶胶吸入的人群中，多数人发病。空调系统的水受军团菌和其他多种细菌污染。本病的潜伏期为12～36h。此时期太短，难以用细菌的侵入及繁殖解释。可能为水内多种细菌毒素所引起；或对水中多种微生物的一种免疫反应。

12 军团病的临床表现

军团病主要表现为两种临床类型，即军团病和庞提阿克热。

12.1 军团病

军团病潜伏期2～10天，平均5.5天。临床表现难于和肺炎球菌等引起的肺炎相区别。病情轻重不一，本节所述为典型病例。前驱症状有乏力、低热和食欲减退。约12～48h后突起高热，体温持续，可高达40℃以上，伴有反复发作的寒战。全身肌肉酸痛。约20%患者有恶心和呕吐，有时伴腹痛（10%～20%），25%～50%则有水样腹泻。病后2～3天有干咳，有时咳出少量黏痰，偶可带有血丝，很少有脓痰。30%～40%有胸痛，常因咳嗽、呼吸而加重。随着肺炎加重，患者出现气急。体格检查患者早期呈急性病容，汗多，呼吸增快，约半数患者有相对缓脉，肺部有细湿啰音。继而肺部出现明显实变体征（25%），严重者有发绀，少数可有呼吸衰竭。约20%可有意识朦胧、精神错乱、谵妄、神志不清等，少数患者可有幻觉。个别患者发生休克。约10%可发生急性肾衰竭，严重者表现为少尿或无尿，轻者仅为轻度肌酸酐和尿素氮增高。消化道出血偶可见到。随病程进展，阴影扩大呈大叶性，密度加深。在病情高峰期，约65%患者有双侧多叶性病变。胸腔积液虽不少见，但一般并非大量。多数病人体温于病程8～10天逐渐下降，呼吸系统症状和一般情况好转，但如患者原有其他疾病或免疫力减退，则病情较重，易于发生呼吸衰竭，病程亦可迁延，且可并发肺脓肿或吸收延迟等。未经特效治疗者病死率为10%～30%；而免疫缺损患者病死率可达80%。死亡原因多数为呼吸及多器官衰竭。肺外军团杆菌感染极为少见，包括透析通道感染、鼻窦炎、心包炎以及脑、皮肤、肠道脓肿、人工瓣膜心内膜炎、腹膜炎等。

12.2 庞提阿克热

庞提阿克热病潜伏期约24～48h。一个建筑物内受同一种病菌侵袭后超过90%可以发病。起病急，患者有发冷、寒战、发热、乏力、肌痛和头痛。部分患者有干咳、喉部和胸骨后不适感、恶心、腹泻和眩晕。个别患者有意识朦胧、记忆力减退、噩梦、失眠等。体格检查除体温升高和心率加速外，余无异常。患者无肺部炎症表现。胸部X线检查亦为阴性。病程2～5天，病情恢复顺利，属自限性疾病。

13 军团病的并发症

军团病可并发腹膜和胰腺炎，肺梗死，脑水肿等。

14 实验室检查

军团病患者白细胞总数在（10～20）×109/L。之间，中性粒细胞比例增多，有核左移现象。血沉增快。尿检查约10%有蛋白和显微镜血尿。少数患者有血肌酸酐和尿素氮升高。肝功能试验检查可有丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、堿性磷酸酶、胆红素升高。肌酸磷酸激酶（MM同工酶）升高亦不少见。低钠血症、低磷血症亦可见。个别患者有肌球蛋白尿、肾衰竭或弥散性血管内凝血。脑脊液检查常为阴性，少数有压力增高、单核细胞升高至（25～100）×106/L。痰液和气管内吸取物革兰染色仅见少量中性粒细胞而不能发现占优势的细菌，普通培养未能分离致病菌。特异诊断需要从临床标本中分离病原体，确认病原菌或其抗原存在于组织或体液，以及特异抗体4倍以上的增长。军团杆菌可从痰液、胸腔积液或肺组织以BCYE培养基分离。

15 辅助检查

X线胸部检查大都先累及单侧，表现为边缘模糊的圆形阴影或片状支气管肺炎。

16 军团病的诊断

军团病由于很难和其他病因引起的肺炎鉴别，故临床诊断困难。确诊有赖于病原学和免疫学检查。

16.1 流行病学资料

夏秋季发病，有使用空调湿化系统、喷水淋浴等历史。年龄40岁以上，吸烟，有慢性肺部疾病或心脏疾病，应用肾上腺皮质激素，以及发生在医院内，或有应用呼吸治疗器者，均应考虑本病。

16.2 临床资料

有肺炎而首发症状为腹泻者、虽全身症状严重而呼吸道症状不明显者、肺炎而伴有神经系统症状者、肺炎而呼吸道分泌物普通培养阴性者、对β内酰胺抗生素治疗无效的肺炎患者，均要考虑本病。

16.3 实验室检查

军团病患者白细胞总数在（10～20）×109/L。之间，中性粒细胞比例增多，有核左移现象。血沉增快。尿检查约10%有蛋白和显微镜血尿。少数患者有血肌酸酐和尿素氮升高。肝功能试验检查可有丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、堿性磷酸酶、胆红素升高。肌酸磷酸激酶（MM同工酶）升高亦不少见。低钠血症、低磷血症亦可见。个别患者有肌球蛋白尿、肾衰竭或弥散性血管内凝血。脑脊液检查常为阴性，少数有压力增高、单核细胞升高至（25～100）×106/L。痰液和气管内吸取物革兰染色仅见少量中性粒细胞而不能发现占优势的细菌，普通培养未能分离致病菌。特异诊断需要从临床标本中分离病原体，确认病原菌或其抗原存在于组织或体液，以及特异抗体4倍以上的增长。军团杆菌可从痰液、胸腔积液或肺组织以BCYE培养基分离。一般在35～37℃相对湿度70%～80%，2.5%～5.0%二氧化化碳进行培养。菌落2～5天可以见到。由于临床标本污染，可加入对军团菌无抑制作用的抗生素。美国疾病控制中心推荐用头孢噻吩4μ/ml、多黏菌素E16U/ml、万古霉素0.5μg/ml、放线菌酮80μg/ml。对可疑的菌株可作直接荧光抗体染色检查和生化反应，必要时作细菌脂肪酸的气相色谱分析和DNA杂交试验。如培养阳性，特异性为100%。呼吸道分泌物涂片革兰染色常不着色。吉姆萨染色可在细胞内外见到淡紫色细长细菌。吉姆萨染色被染成红色，背景为绿色。Dieterle饱和银染色亦常阳性，但以上各种染色均非特异性检查。直接荧光检测呼吸道标本是一种较为快速的诊断方法，灵敏性33%～70%，特异性96%～99%以上。近年来发展用单克隆抗体作直接免疫荧光染色，特异性强，不与铜绿假单胞菌产生交叉反应。检测军团菌血清抗体的方法主要有间接免疫荧光染色（IFA）、酶联免疫吸附试验（EIASA）及放射免疫测定等。其中以IFA临床应用最多，灵敏性40%～70%，特异性90%以上。急性期和恢复期双份血清抗体效价增加4倍以上，并达≥1∶128为阳性。本法取恢复期血清需时较久（1～3个月），且可能与其他细菌的抗体起交叉反应。用酶免疫法检测尿液中可溶性抗原，可作参考性早期诊断。灵敏度为70%，特异性高达100%，主要用于嗜肺军团菌血清1型感染。近来本法有商品试剂盒（德国Biotest公司的产品），可检出嗜肺军团菌1～14型和其他常见军团菌。DNA探针技术亦已用于检测呼吸道标本，诊断快速，灵敏性50%～60%，特异性99%。聚合酶链反应（PCR）检测军团菌目前主要用于检测环境水标本以及医院内呼吸器或透析液体，以便快速得出结果。荧光定量PCR方法比普通PCR定性检测法更准确。

17 鉴别诊断

军团病除与肺炎球菌和其他细菌性肺炎相鉴别外，更应与痰培养阴性而不典型的肺炎相鉴别，后者包括支原体肺炎、鹦鹉热、寇热、兔热病、病毒性肺炎和组织胞浆菌病等。庞提阿克热的诊断依据临床表现、流行病学等特点和血清学检查。

18 军团病的治疗

体外药物敏感度试验表明军团菌对多种抗菌剂敏感，包括红霉素、利福平、氨基糖苷类抗生素、β内酰胺类中的青霉素类、氯霉素、磺胺甲恶唑/甲氧芐啶（复方磺胺甲恶唑）、多西环素和氟喹诺酮类等。但动物体内实验表明β内酰胺类抗生素、氯霉素、四环素类及氨基糖苷类抗生素无效。

临床观察表明，红霉素为首选药物。在一次暴发流行中，以红霉素治疗者病死率为5%，不用红霉素而用其他抗菌剂者病死率为24%。红霉素的治疗效果较好，可能与其脂溶性及易于透入巨噬细胞有关。对病情重而不能口服者，推荐应用红霉素500～1000mg,1次/6h，静脉滴注；儿童剂量为15mg/kg体重，1次/6h，静脉滴注。疗程至少2周。有脓肿形成时应将疗程延长。病情较轻者可用红霉素0.5，4次/d，口服，疗程2周。疗程不足者可导致复发。病情严重者可加用利福平治疗，300mg～600mg，2次/d，口服。近年来大环内酯类抗生素中的罗红霉素（300mg/次，2次/d）、阿奇霉素（500mg/次，1次/d）、克拉霉素（500mg/次，1次/12h）等组织浓度较红霉素高，副作用则较轻，故可代替红霉素。可能的其他抗菌剂选择为多西环素（100mg/次，2次/d，口服）、磺胺甲恶唑/甲氧芐啶（复方磺胺甲恶唑）[以甲氧芐啶15mg/（kg·d）计算，分3次口服]以及环丙沙星（500mg/次，3次/d，口服）和左氧氟沙星（200mg/次，1次/12h，口服）。由于氟喹诺酮类药物在实验动物研究中较红霉素更为有效，故应继续积累临床用以治疗军团病的经验。青霉素、头孢菌素、氨基糖苷类抗生素治疗军团病无效，故不宜应用。一般在应用有效抗菌剂后1～4天，症状开始好转，寒战、神志改变、肌痛等首先消失，体温亦开始下降，恢复至正常约需时1周。肺部浸润的吸收则更为缓慢。支持疗法对重症患者极为重要，尤其是有呼吸衰竭、休克或急性肾衰竭时。呼吸器辅助呼吸、体液的补充、血管活性药物以及透析等均应按病情需要而及时应用。

• 人体体表面积计算器
• BMI指数计算及评价
• 女性安全期计算器
• 预产期计算器
• 孕期体重增长正常值
• 孕期用药安全性分级（FDA）
• 五行八字
• 成人血压评价
• 体温水平评价
• 糖尿病饮食建议
• 临床生化常用单位换算
• 基础代谢率计算
• 补钠计算器
• 补铁计算器
• 处方常用拉丁文缩写速查
• 药代动力学常用符号速查
• 有效血浆渗透压计算器
• 乙醇摄入量计算器

医学网络，马上计算！

19 预后

未经适当治疗的病例，军团病病死率一般为15%～20%，多死于呼吸衰竭。并发急性肾衰竭时，病死率上升为53%。医院内感染的病死率可达60%。经特殊治疗者，病死率为5%左右。有效的早期治疗预后良好。痊愈者除少数神经系统症状严重的可遗留轻微失语和遗忘外，可完全恢复。

20 军团病的预防

至今尚无有效的军团菌疫苗。本病的预防主要针对受军团菌污染的水源进行消毒。由于在多种环境中均可分离到军团菌，故目前一般采取的方针是如有军团病发现时，应对该医院或机构进行监测，包括采样进行细菌培养及PCR快速检测。如发现水源被污染，应给予消毒处理。目前采用的方法为氯化法（1×106）或间歇性高氯化法（50×106）。但该法易腐蚀管道，具一旦将氯化程度降低，军团菌又可重新被检出，故理想的消毒措施，尚有待进一步研究。

21 相关药品

氧、药用炭、过氧化氢、尿素、核糖核酸、二氧化碳、头孢噻吩、黏菌素、万古霉素、红霉素、利福平、青霉素、氯霉素、磺胺、磺胺甲恶唑、甲氧芐啶、复方磺胺甲恶唑、多西环素、四环素、罗红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星

22 相关检查

尿素氮、丙氨酸、天冬氨酸

治疗军团菌感染的穴位

• 扁桃体

  组织，它把腭扁桃体与邻近器官隔开，有阻止腭扁桃体感染扩散的屏障作用。扁桃体可产生淋巴细胞和抗体，故具...

• 足上廉

  或痉挛，膝关节肿痛。配伍：上巨虚配天枢、曲池，治菌痢。上巨虚配支沟、大肠俞，治便秘。上巨虚配天枢、...

• 上巨虚

  关节肿痛。上巨虚穴的配伍：上巨虚配天枢、曲池，治菌痢。上巨虚配支沟、大肠俞，治便秘。上巨虚配天枢、...

• 巨虚上廉

  或痉挛，膝关节肿痛。配伍：上巨虚配天枢、曲池，治菌痢。上巨虚配支沟、大肠俞，治便秘。上巨虚配天枢、...

• 巨灵上廉

❺ 军团菌的鉴定方法

1. 细菌培养法
军团菌为革兰氏阴性杆菌，专性需氧，胞内寄生菌。军团菌最初是从以军团菌病人肺组织感染的豚鼠中分离出来的。这种方法虽然有较高的可靠性，但非常昂贵，而且费时费力，不久就被平板培养法所取代 。目前标准培养基为活性碳酵母浸膏琼脂平板，也称军团菌生长平板(BCYE)。接种在 BCYE 平板上的样品在温度为35-37ºC，培养10天，在浓度为2.5% CO2 的环境下培养更有利于军团菌的生长。军团菌的菌落通常呈白色、灰色、有荧光。军团菌在 BCYE 平板上生长而在平板和半光氨酸缺失 BCYE-Cys 平板上不生长。
2.血清学玻片凝集法
军团菌感染l周左右可检测出血清中军团菌特异性IgM抗体，2周左右可检测到特异性IgG抗体。
现已发现嗜肺军团菌有15个血清型。其中，嗜肺军团菌血清1型（Lp1）与人类疾病关系最密切，其次为血清4型（Lp4）和6型（Lp6）。
3.核酸扩增法
核酸扩增技术，即聚合酶链式反应（polymerase chainreaction，PCR），其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸，作为引物，对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端，然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增，使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。
常规PCR：鉴定标准是通过电泳来判断是否有扩增的核酸片段以及扩增产物的大小是否正确。
实时荧光PCR：通过对实时荧光PCR反应的每一个循环产物进行荧光信号的实时监测来判断分析。

❻ 致病菌感染的微生物学检查基本程序是怎么样的

病原微生物种类繁多，变异迅速，快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展前进着。目前，应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因芯片、多聚酶链反应等，该文对这些检测技术进展做一综述。 对人和动物具有致病性的微生物称为病原微生物，又称病原体，有病毒、细菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、真菌、放线菌、朊粒等。这些病原微生物可引起感染、过敏、肿瘤、痴呆等疾病，也是危害食品安全的主要因素之一。近年来出现的SARS、高致病性禽流感、西尼罗病毒感染等疾病的传染性极强，往往造成世界性大流行，因此对病原体的检测必须做到快速、准确。常规病原学检测方法操作繁琐，检测周期长，而且对操作人员技术水平要求比较高。随着医学微生物学研究技术的不断发展，病原学诊断已不再局限于病原体水平，深入到分子水平、基因水平的检测手段不断出现并被应用于临床和实验室 J。核酸分子杂交技术、PCR技术、基因芯片技术等检测方法，自动化程度高，快速省时、无污染、结果精确，可以准确灵敏地鉴定病原微生物。1 传统的病原微生物的检测方法传统的病原微生物学实验室检查以染色、培养、生化鉴定等为主，将标本直接涂片染色镜检和接种在培养基上进行分离培养是对细菌或真菌感染性疾病进行病原学诊断的常用方法。1．1 直接涂片镜检病原微生物体形体积微小，大多无色半透明状，将其染色后可借助显微镜观察其大小、形态、排列等。直接涂片染色镜检简便快速，对那些具有特殊形态的病原微生物感染仍然适用，例如淋球菌感染、结核分枝杆菌、螺旋体感染等的早期初步诊断。直接涂片镜检不需要特殊的仪器和设备，在基层实验室里仍然是十分重要的病原微生物检测手段。1．2 分离培养与生化反应 分离培养主要用于临床标本(如血液、痰、粪便等)或培养物中有多种细菌时对某一种细菌的分离。细菌的生长繁殖需要一定时间，检测周期较长，不能同时处理批量样本。为解决这一问题，各种自动化培养和鉴定系统不断产生，传统鉴定方法也在逐步改进，大大加快了检验速度。例如Microscan WalLCAway全自动微生物分析仪，可同时做细菌鉴定和药敏试验，检验500多个菌种。苛养菌如肺炎链球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌等对营养要求比较高，常规培养阳性率低。雍刚 等将不要同比例的葡萄糖、玉米淀粉、生长因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌剂加入到巧克力培养基中制成了新型淋病奈瑟菌培养基，大大提高了淋病奈瑟菌的分离培养率。苏盛通等在营养琼脂中加人了中药红枣、赤小豆培养甲型链球菌、乙型链球菌、肺炎链球菌等细菌，生长指数明显高于血平板。1．3 组织细胞培养 活组织细胞培养适于专营活组织细胞内生存的病原体，包括病毒、立克次体、衣原体等。不同病原体敏感的组织细胞是不一样的，将活细胞从病原体敏感的动物组织中取出在体外进行原代培养或用病原体敏感细胞系进行传代培养，再将病原体接种于相应的组织细胞中后，病原体可在其中繁殖增长，引起特异性的细胞病变效应。也可以将病原体直接接种于敏感动物体内，引起相应组织器官出现特异的病理学改变。往往可以根据这些特异的病变对病原体进行鉴定。2 血清学与免疫学检测血清学检测是通过已知的抗体或抗原来检测病原体的抗原或抗体从而对病原体进行快速鉴定的技术，简化了鉴定步骤，常用的方法包括血清凝集技术、乳胶凝集实验、荧光抗体检测技术、协同凝集试验、酶联免疫测试技术等。酶联免疫技术的应用大大提高了血清学检测的敏感性和特异性，不仅可检测样本中病原体抗原，也可检测机体的抗体成分。幽门螺奸菌在我国人群感染率高达50％ ～80％ ，应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测唾液中抗HP抗体来诊断HP感染，其结果满意。乙型肝炎病毒(HBV)在我国人群中感染率极高，ELISA应用于乙型肝炎病人早期血清学诊断的效果最为明显。临床上致病菌往往和非致病菌混合在一起，如何从这些细菌中分离出目标菌是关键。免疫磁珠分离技术(IMBS)是近年来发展起来的在微生物检测领域中一种新技术。其基本原理是将特定病原体的单抗或多抗或二抗偶联到磁珠微球上，通过抗原抗体反应形成磁珠一目标病原体复合物或磁珠一一抗一目标病原体复合物，在外部磁场磁力的作用下，将目标病原体分离出来。目前已经开发出了针对各种病原体的免疫磁珠，如大肠埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、军团菌等，广泛应用到各级科研和实验室 。经IMBS分离出的白色念珠菌可直接在显微镜下检测，检测时间缩短至4 h。IM—Bs还可以和其它检测技术联合来检测病原菌，免疫磁珠分离得到的目标菌可继续用于分离培养使大肠埃希菌0157最低检测限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g～；IMBS结合聚合酶链反应(IMBS—PCR)可对培养条件比较特殊的细菌如苛养菌、厌氧菌进行快速检测，肉类中的产毒素型产气荚膜梭菌经IMBS．PC