病毒微生物学检测方法

㈠ 病原微生物中细菌常见检测方法有哪些

1、快速测试片技术法

快速测试片是指以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定食品中微生物的方法。

细菌总数检测纸片的研制始于 20 世纪 80 年代，其主要优点是简便、实用、经济、操作性强。近年来以滤纸和美国某公司的 Petrifilm 为载体的测试片已开始被广泛应用。

2、生物电化学方法

生物电化学方法是指通过电极测定微生物产生或消耗的电荷，从而提供分析信号的方法。微生物在滋生代谢过程中，培养基的电化学性质如电流、电位、电阻和电导等会发生变化，所以可以通过检测分析这些电化学参量的变化来实现对微生物的快速测定。

常见的有：阻抗分析法、电位分析法、电流分析法等。生物电化学方法具有测量快速、直观、操作简单、测量设备成本低和信号的可控性等特点。

3、微菌落技术

微菌落是指细菌生长繁殖早期在固相载体上所形成的只能借助于显微镜观察的微小菌落。微菌落技术具有快速、经济、实用的特点，其研究始于 20 世纪50年代，定量测定技术从 20 世纪 70 年代开始，国外已有报道将该法应用于水、食品中细菌总数的快速检测。

4、气相色谱法

气相色谱应用到微生物的检测中，主要是依据不同微生物的化学组成或其产生的代谢产物各异，利用上述色谱检测可直接分析各种体液中的细菌代谢产物、细胞中的脂肪酸、蛋白质、氨基酸、多肽、多糖等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

5、高效液相色谱法

利用高效液相色谱检测可分析各种体液中的细菌代谢产物、病原微生物等，以确定病原微生物的特异性化学标志成分，协助病原诊断和检测。

㈡ HTLV病毒的微生物学检查

病毒分离采用PHA处理的患者淋巴细胞，加入含IL-2的营养液培养3~6周，电镜观察病毒颗粒，并检测上清液逆转录酶活性，最后用免疫血清或单克隆抗体鉴定。抗体检测可用ELISA法、间接IFA和胶乳凝集法，也可用免疫印迹法和PCR法等检测抗原或病原体。血液中HTLV-Ⅰ抗体的存在即可诊断为该病毒感染；而血液中异常淋巴细胞数量的大量增生，同时证实这些淋巴细胞中有HTLV-ⅠDNA，则可支持成人T淋巴细胞白血病的诊断。

㈢ 脊髓灰质炎病毒微生物学检查法

脊髓灰质炎病毒引起脊髓灰质炎。该疾病传播广泛，是一种急性传染病。病毒常侵犯中枢神经系统，损害脊髓前角运动神经细胞，导致肢体松弛性麻痹，多见于儿童，故又名小儿麻痹症。

一、病毒型别与抗原性

已知脊髓灰质炎病毒有三个血清型，这三型病毒的核苷酸序列已经清楚，总的核苷酸数目为7500个左右。虽然有71%左右的核苷酸为三型脊髓灰质炎病毒所共有，但不相同的核苷酸序列却都位于编码区内，因此三型病毒间和试验无交叉反应。

用补体结合试验可查出病毒有两种抗原，一种称为D（致密)抗原，另一种称为C（无核心)抗原。前者存在于成熟的、有感染性的病毒颗粒中，是该病毒的中和抗原，具有型特异性。C抗原存在于经过56℃灭活，或者未成熟的空心病毒颗粒中，是一种耐热的抗原成份，与三型病毒的抗血清均呈补体结合阳性反应。

二、流行病学特点

本病一年四季均可发生，但流行都在夏、秋季。一般以散发为多，带毒粪便污染水源可引起暴发流行。引起流行的病毒型别以Ⅰ型居多。潜伏期通常为7～14天，最短2天，最长35天。在临床症状出现前后病人均具有传染性。

㈣ 微生物的传统检测方法有哪些

微生物的传统检测方法有哪些通过显微镜直接观察。一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度以及培养时间），同种微生物表现出稳定的菌落特征。这些特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面。因此可以通过显微镜观察菌落特征对微生物种类进行判断。使用选择培养基培养微生物或人为提供有利于目的菌株生长的条件。

㈤ 检测hav，hbv，hcv，hdv，病毒的微生物学检查可用什么方法

就目前来说，使用得最多的肯定还是免疫学的方法。比如酶联免疫法，化学发光法，金标法等等，免疫学的方法就是利用抗原抗体反应的特性来进行检测的。此外，现在还常见有分子生物学的方法。

㈥ 微生物的传统检测方法有哪些

传统检测有三种方法

1、直接显微镜观察，正常情况，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度以及培养时间），同种微生物表现出稳定的菌落特征。可以通过显微镜观察菌落特征对微生物种类进行判断。

2、选择培养基培养微生物或人为提供有利于目的菌株生长的条件，选择培养基，其作用是允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长。选择培养一般是通过观察微生物的同化作用类型或某一特征进行间接判断，得到的微生物往往并不只有一种，但是能够大致确定这些微生物存在的共有特征从而对其分类。

3、鉴别培养基，根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品。与选择培养相比，鉴别培养基的鉴别所得结果的范围比较小，一般可直接测定某微生物的种类。

㈦ 简述病毒病的微生物学诊断程序

简述病毒病的微生物学诊断程序
微生物学检查
（1）病料采集：取病畜禽的组织，肝，肺，脾等体液、分泌物及局部病灶的渗出液。 （2）镜检：对原始病料涂片进行革兰氏染色，镜检，应为革兰氏阴性。用印度墨汁等染料染色，可见清晰的荚膜。 （3）培养：同时接种鲜血琼脂和麦康凯琼脂培养基，37℃培养24h，观察细菌的生长情况，菌落特征、溶血性，并染色镜检。 （4）生化试验：多杀性巴氏杆菌在48h内可分解葡萄糖、果糖、单奶糖、蔗糖和甘露糖，产酸不产气。一般不发酵乳糖、鼠李糖、菊糖、水杨苷和肌醇。可产生硫化氢，能形成靛基质，MR和V-P试验均为阴性。接触酶和氧化酶试验均为阳性。溶血性巴氏杆菌不产生靛基质，能发酵乳糖产酸。能发酵葡萄糖、糖元、肌醇、麦芽糖、淀粉；不发酵侧金盏花醇、菊糖和赤藓醇。
动物试验
常用的试验动物有小鼠和家兔。实验动物死亡后立即剖检，并取心血和实质脏器分离和涂片染色镜检，见大量两极浓染的细菌即可确诊。
血清型或生物型鉴定
可用被动血凝试验、凝集试验鉴定多杀性巴氏杆菌荚膜血清群和血清型。用间接血凝试验测溶血性巴氏杆菌的血清型，根据生化反应鉴定该菌的生物型。（以上内容是我查到的资料，希望对你有所帮助！）

㈧ 微生物学的检查方法是有哪些

微生物学检查法

标本

因鼠疫传染性极强，采集标本时必须严格无菌操作。根据病型采取淋巴结穿刺液、肿胀部位组织液、脓汁，血液和痰等。人和动物尸体可取肝、脾、肺、病变淋巴结以及心血等。陈旧尸体取骨髓。将采集标本送至有严密防护措施的专门实验室进行检查，禁止在一般实验室进行操作。

直接涂片镜检

除血液标本外，一般均需涂片或印片，干燥后用甲醇固定，革兰染色或吕氏美兰染色，镜检。在不同材料中，菌体大小、形态有很大差异，除典型形态外，往往可见菌体呈多形态性，需加以注意。

分离培养与鉴定

血液标本需先置肉汤中进行增菌培养。分离培养一般选用血琼脂平板，28摄氏度24小时后，可见较小的露滴状菌落，继续培养则菌落增大至1～2毫米，中央厚而致密，周边逐渐变薄。取可疑菌落进行涂片染色镜检，噬菌体裂解试验，血清凝集试验，特异荧光抗体染色等作出鉴订。

血清学试验

可用于检查鼠疫耶尔森菌抗原或特异性抗体。敏感而特异的试验方法有ELISA、固相放射免疫分析，SPA协同凝集试验等。

检测核酸

用DNA探针杂交方法或PCR技术检测鼠疫耶尔森菌核酸，有助于鼠疫的诊断。PCR敏感性极高，蚤体内有10个鼠疫耶尔森菌感染即可用PCR技术检出。

诊断检查

诊断：取决于病人有接触史及肺部受累表现，病因诊断取决于痰、血或淋巴结吸出物革兰染色、培养，有条件的单位可作直接荧光素标记抗体染色，可提供快速的病因诊断。

㈨ 逆转录病毒微生物学检查

临**常用的实验室检测HIV感染指标，主要用于AIDS或HIV感染者的诊断并指导用药，监测高危人群以便及时发现传染源，控制其继续传播。
1.HIV-1抗体检测包括筛查试验（含初筛和复检）和确证试验。机体被HIV感染4～8周后，血清抗-HIV开始出现，6个月后均转为阳性。目前HIV-1/2抗体筛查方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、化学发光或免疫荧光试验、快速检测（斑点ELISA和斑点免疫胶体金等。确证试验常用的方法是免疫印迹法（WB）。如HIV-1抗体筛查两次均为阳性，则需蛋白印迹试验（Westernblot，WB）进行确证，方可报告HIV感染。
2.病毒载量测定病毒载量一般用血浆中每毫升HIVRNA的拷贝数（copies/ml）或每毫升国际单位（IU/ml）来表示。应用RT-PCR等方法检测病毒核酸，是检出早期HIV感染或无症状携带者急性发作，以及预测疾病进展和治疗效果的参考指标。
3.外周血CD4+T细胞数量测定应用流式细胞仪测定外周血中CD4+T细胞数量，用以判断HIV复制状态，了解机体的免状态和病程进展，确定疾病分期和治疗时机。
4.HIV基因型耐药检测耐药测定方法有基因型和表型，目前国内外多用基因型。HIV基因型检测出现HIV耐药，表示该感染者体内病毒可能耐药。HIV耐药检测结果可为艾滋病治疗方案的制定和调整提供重要参考依据。

㈩ 简述hiv的微生物学检测方法有哪些

主要有酶联免疫吸附试验（ELlSA）和免疫荧光试验（lFA）ELISA用去污剂裂解HIV或感染细胞液提取物作抗原IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测 如果发现阳性标本应重复一次 为防止假阳性 可做Western blot（WB 蛋白印迹法）进一步确证
WB法是用聚丙烯酰胺凝胶电泳将HIV蛋白进行分离 再经传移电泳将不同蛋白条带转移于硝酸纤维膜上 加入病人血清孵育后 用抗人球蛋白酶标抗体染色 就能测出针对不同结构蛋白抗体 如抗gp120、gp41、p24抗体 特异性较高
用ELISA检测p24抗原 在HIV感染早期尚未出现抗体时 血中就有该抗原存在 由于p24量太少 阳性率通常较低 现有用解离免疫复合物法或浓缩p24抗原 来提高敏感性
用PCR法检测HIV基因 具有快速 高效 敏感和特异等优点医学教育网搜集l整理 目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中
常用方法为共培养法 即用正常人外周血液分离单个核细胞 加PHA刺激并培养后 加人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中