过氧化物检测方法

1. 过氧化物酶活性测定的方法有哪些

实验
48
过氧化物酶活性的测定（比色法）
过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶，它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，它的活性不断发生变化，因此测量这种酶，可以反映某一时期植物体内代谢的变化。
一、原理
在有过氧化氢存在下，过氧化物酶能使愈创木酚氧化，生成茶褐色物质，该物质在
470
nm
处有最大吸收，可用分光光度计测量
470
nm
的吸光度变化测定过氧化物酶活性。
二、实验材料、试剂与仪器设备
（一）实验材料
马铃薯块茎。
（二）试剂
1
．
100
mmol
／
L
磷酸缓冲液
pH6.0
（见附录）。
2
．反应混合液：
100
mmol
／
L
磷酸缓冲液（
pH6.0
）
50
mL
于烧杯中，加入愈创木酚
28
μl
，于磁力搅拌器上加热搅拌，直至愈创木酚溶解，待溶液冷却后，加入
30
%
过氧化氢
19
μl
，混合均匀，保存于冰箱中。
（三）仪器设备
分光光度计，研钵，恒温水浴锅，
100
mL
容量瓶，吸管，
离心机。
三、实验步骤
1
．称取植物材料
1
g
，剪碎，放入研钵中，加适量的磷酸缓冲液研磨成匀浆，以
4000
r
／
min
离心
15
min
，上清液转入
100
mL
容量瓶中，残渣再用
5
mL
磷酸缓冲液提取一次，上清液并入容量瓶中，定容至刻度，贮于低温下备用。
2
．取光径
1
cm
比色杯
2
只，于
1
只中加入反应混合液
3
mL
和磷酸缓冲液
1mL
，作为对照，另
1
只中加入反应混合液
3
mL
和上述酶液
1mL
（如酶活性过高可稀释之），立即开启秒表记录时间，于分光光度计上测量波长
470
nm
下吸光度值，每隔
1min
读数一次。
四、结果计算
以每分钟吸光度变化值表示酶活性大小，即以
ΔA
470
/[min
•
g
（鲜重）
]
表示之。也可以用每
min
内
A
470
变化
0.01
为
1
个过氧化物酶活性单位（
u
）表示。
过氧化物酶活性
[u/
（
g
•
min
）
]=
式中：
Δ
A
470
——反应时间内吸光度的变化。
W
——植物鲜重，
g
。
V
T
——提取酶液总体积，
mL
。
V
s
——测定时取用酶液体积
,
mL
。
t
——反应时间，
min
。

2. 怎样检测过氧化物的有效氧含量

以火电厂大气污染物排放标准为例（现行版本非2011年新标准）（脱硝设施一般也是用于大型火电厂的）标准中规定的排放浓度并非是实测污染物浓度需进行折算,其折算系数称为过氧系数折算方法为X*Y/1.4,式中X为实测污染物浓度,Y为实测过氧系数计算方式为21/（21-x）、x为实测烟道中氧含量,标准中规定的过氧系数为1.4（即式中会除以1.4）,所以要测量氧含量,氧含量越高折算后污染物的浓度越大,当实测氧含量超过6%时则折算值会大于实测值. 因为标准中计算烟气排放量是以标准干烟气形态（简称标干态）计,是在273k°,1个大气压,绝对湿度为0的条件下的烟气体积,而实测烟气中污染物浓度是湿烟气下的浓度需折算成干烟气下的浓度.

3. 常用于检测有机物中是否含有过氧化物的是ki淀粉

因为在空气中长期存放乙醚时，醚中的碳氢键由于生成过氧键而形成有机过氧化聚合物，聚合物不稳定，受热易分解，会引起爆炸等危险事故。因而必须检验是否有过氧化物。方法：将少量的醚用湿润的淀粉碘化钾试纸检验，试纸变蓝，说明有过氧化物生成。去除：用硫酸亚铁或亚硫酸钠溶液除去希望对你有用

4. 过氧化值检测国标

过氧化值表示油脂和脂肪酸等被氧化程度的一种指标。是1千克样品中的活性氧含量，以过氧化物的毫摩尔数表示。用于说明样品是否因已被氧化而变质。那些以油脂、脂肪为原料而制作的食品，通过检测其过氧化值来判断其质量和变质程度。
基本信息
_
中文名
_
过氧化值
_
_
检测意义
_
一定程度上可以反映食品的质量
_
_
作用
_
判断其质量和变质程度
_

_
表示
_
毫摩尔数
_
_
释义
_
油脂和脂肪酸等被氧化程度的一种指标
_
_
检测方法
_
滴定法和比色法
_
目录 1简介
2标准检测方法 3快速检测
4检测意义 5超标危害
折叠编辑本段简介
油脂氧化后生成过氧化物、醛、酮等。氧化能力较强，能将碘化钾氧化成游离碘。可用硫代硫酸钠来滴定。
过氧化值是衡量油脂酸败程度，一般来说过氧化值越高其酸败就越厉害!
因为油脂氧化酸败产生的一些小分子物质在体内对人体产生不良的影响，如产生自由基，所以过氧化值太高的油对身体不好 。
折叠编辑本段标准检测方法
在中国食品质量标准GB/T 5009.37-2003食用油卫生标准分析方法中，提及或介绍了对食用植物油中酸价、过氧化值、羟基价、游离棉酚(适用于棉籽油)、砷、苯并芘、黄曲霉毒素B1、残留溶剂、镍、非食用油、黄曲霉毒素的检测方法和标准，其中涉及到过氧化值的主要有两种检测方法滴定法和比色法。
折叠滴定法
试剂
1、饱和碘化钾溶液:称取14g碘化钾，加10ml水溶解，必要时微热加速溶解，冷却后贮于棕色瓶中。
2、三氯甲烷-冰乙酸混合液:量取40ml三氯甲烷，加60ml冰乙酸，混匀。
3、0.02mol/L硫代硫酸钠标准溶液:称取5g硫代硫酸钠(Na2S2O3 ·5H2O)(或3g无水硫代硫酸钠)，溶于1000ml水中，缓缓煮沸10分钟，冷却。放置两周后过滤备用。
4、10g/L 淀粉指示剂:称取可溶性淀粉0.50g，加入少许水调成糊状倒入50ml沸水中调匀，煮沸，临用时现配。
测定步骤
精确称取2.00-3.00g混匀的样品 ，置于250ml碘量瓶中，加30ml三氯甲烷-冰乙酸混合液(因为纯品对光敏感，遇光照会与空气中的氧作用，逐渐分解而生成剧毒的光气(碳酰氯)和氯化氢。可加入0.6%~1%的乙醇作稳定剂。能与乙醇、苯、乙醚、石油醚、四氯化碳、二硫化碳和油类等混溶)，使样品完全溶解;加入1.00ml饱和碘化钾溶液。紧密塞好瓶塞，并轻轻振摇0.5min，然后在暗处放置5min，取出加100ml水，摇匀。立即用硫代硫酸钠标准溶液滴定，至淡黄色时，加1ml淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失为终点，取相同量三氯甲烷-冰乙酸混合液、碘化钾溶液、水，按同一方法，做试剂空白试验。
测定结果的计算与分析
1、计算:
X=[(V-V0)×N×0.1269]/m
式中:X-样品的过氧化值，%。
V-样品消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml。
V0-空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积，ml。
N-硫代硫酸钠标准溶液的麾尔浓度，mol/L。
0.1269-1N硫代硫酸钠1ml相当于碘的克数。
2、分析:
油脂新鲜，其过氧化值不应大于0.15%。
折叠比色法
原理:试样用三氯甲烷-甲醇混合溶剂溶解，试样中的过氧化物将二价铁离子氧化成三价铁离子，三价铁离子与硫氰酸盐反应生成橙红色硫氰酸铁配合物，在波长500nm处测定吸光度，与标准系列比较定量。
试剂:盐酸溶液、过氧化氢、三氯甲烷+甲醇混合溶剂、氯化亚铁溶液、硫氰酸钾溶液、铁标准储备溶液(1.0g/L)、铁标准使用溶液(0.01g/L)。
仪器:分光光度计，10mL具塞玻璃比色管。
分析步骤
试样溶液的制备:精密称取约0.01g~1.0g试样(准确至刻度0.0001g)于10mL容量瓶内，加三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶剂溶解并稀释至刻度，混匀。
分别精密吸取铁标准使用溶液(10ug/mL)0,0.2,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0mL(各自相当于铁浓度0,2.0,5.0,10.0,20.0,30.0,40.0ug)于干燥的10mL比色管中，用三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶剂稀释至刻度，混匀。加1滴(约0.05mL)硫氰酸钾溶液(300g/L)，混匀。室温(10℃-35℃)下准确放置5min后，移入25px比色皿中，以三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶剂为参比，于波长500nm处测定吸光度，以标准各点吸光度减去零管吸光度后绘制标准曲线或计算直线回归方程。
试样测定:精密吸取1.0mL试样溶液于干燥的10mL比色管内，加1滴(约0.05mL)氯化亚铁(3.5g/L)溶液，用三氯甲烷+甲醇(7+3)混合溶剂稀释至刻度，混匀。以下按试样溶液制备中自"加1滴(约0.05mL)硫氰酸钾溶液(300g/L)??"起依法操作。试样吸光度减去零管吸光度后与曲线比较或代入回归方程求得含量。

5. 长久存放的乙醚使用前,为何要检查是否会含有过氧化物如何除去过氧化物

因为在空气中长期存放乙醚时，醚中的碳氢键由于生成过氧键而形成有机过氧化聚合物，聚合物不稳定，受热易分解，会引起爆炸等危险事故。因而必须检验是否有过氧化物。

方法：将少量的醚用湿润的淀粉碘化钾试纸检验，试纸变蓝，说明有过氧化物生成。

去除：用硫酸亚铁或亚硫酸钠溶液除去。

当乙醚中含有过氧化物时，在蒸发后所分离残留的过氧化物加热到100℃以上时能引起强烈爆炸； 这些过氧化物可加5%硫酸亚铁水溶液振摇除去。与无水硝酸、浓硫酸和浓硝酸的混合物反应也会发生猛烈爆炸。溶于低碳醇、苯、氯仿、石油醚和油类，微溶于水。

(5)过氧化物检测方法扩展阅读：

过氧化物分为无机过氧化物和有机过氧化物。过氧化物在纺织业，漂白工业里有重要的作用。过氧化物包括金属过氧化物、过氧化氢、过氧酸盐和有机过氧化物。周期表中ⅠA、ⅡA、ⅢB、ⅣB族元素以及某些过渡元素（如铜、银、汞)能形成金属过氧化物。

活泼金属(如钠、钾）在氧气中燃烧。(注：金属锂是活泼金属，但在氧气中燃烧只生成氧化锂。将活泼金属（如钾）溶解在液氨中，通入氧气。过氧化氢与盐作用。金属过氧化物都是强氧化剂，加热时释放出氧气，与稀酸作用，产生过水。