细胞检测方法

㈠ 关于细胞膜通透性的检测方法，有哪些

当细胞膜的通透性发生改变时，一些正常情况下不能透过细胞膜的外部物质进入细胞的量增多，正常细胞内的有些物质也易于释放到细胞外，检测细胞通透性变化的方法也就是基于这样的原理而设计的。常用的细胞膜通透性的检测方法有：
（1）死/活细胞染色法 ： 使用选择性死/活细胞染色的特殊染料如不易穿透活细胞膜的台盼兰、苯胺黑及用于活细胞着色的中性红、健那绿、亚甲蓝、甲苯胺蓝等，通过染色区分死活细胞并计数来间接判断细胞膜通透性的改变情况。该方法简单，方便，价廉；但灵敏度和精确性差。
（2）荧光标记法 ： 使用二乙酸荧光素（FDP）、碘化丙啶（PI）或异硫氰酸荧光素钠标记的荧光染料与细胞共孵育，用流式细胞仪检测荧光染色阳性细胞的比率。此法其实是（1）法的“荧光”版，但其在灵敏性和准确性方面明显要优于后者。

（3）硝酸镧(La)示踪法： 在正常的生物组织中镧微粒可沉积于细胞间隙，但不能穿过具有1~ 2nm 微小间隙的细胞膜性结构(包括细胞膜和细胞器膜)，也不能穿过细胞间的紧密连接。在膜性结构通透性增高时， 镧微粒则可进入细胞、细胞器和紧密连接内， 并在电镜下显示， 镧盐标记技术被认为是一种有效的监测细胞膜通透性变化的标记技术。
（4）LDH释放法： 在正常情况下，细胞内大分子物质LDH 是不能通过细胞膜的， 但在细胞膜受损伤而通透性增加时，可通过受损的细胞膜释放出来。LDH 能较好地反映细胞膜损伤程度。类似的还有检测细胞外K+的漏出率等。
还有一些检测指标是针对不同细胞的一些特殊成分变化而设计。原则都是检测正常细胞内、外某类些物质的比例变化情况。

㈡ 常见免疫细胞检测方法

可以去生物公司去买和你做试验的细胞相对应的试剂盒
因为你说的是常见的
所以一半的生物公司应该都可以买到

㈢ 细胞活性检测的方法有多少种

细胞活性测定方法有台盼蓝染色法、克隆（集落）形成法、 3H 放射性同位素掺入法、 MTT 法等。其中 MTT 法以其快速简便，不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测的特点而得到广泛的应用。但 MTT 法形成的 Formazan 为水不溶性的，需要加有机溶剂溶解，由于在去上清操作时会有可能带走小部分的 Formazan ，故有时重复性略差。为了解决这个问题，研究人员又开发了很多种水溶性的四氮唑盐类：如 XTT 、 CCK-8 （ WST-8 ）等。

㈣ 细胞免疫功能检测常用有哪几种方法

细胞免疫（CMⅠ）是由多种细胞相互作用的结果。免疫细胞间相互作用导致多种细胞因子的释放。因此细胞功能测定不仅涉及T细胞的数量和功能与包括各类因子活性测定，因此评价机体的细胞免疫功能不仅程序复杂，且很难标准化。
一、迟发型过敏反应的体外检测方法
皮肤试验和接触性过敏的诱发是检测迟发型过敏反应（DTH）的两种常用方法。皮肤试验中诱发对曾经使病人致敏的抗原的再次应答，而接触性过敏是测试受者对从未接触过的物质发生致敏的能力。
1．皮肤试验 用皮肤试验诊断DTH，常用的抗原有结核菌纯蛋白衍生物（PPD）、腮腺炎病毒、念珠菌素等，在人类试验时在前臂皮内注射少量可溶性抗原，24～48小后，测量红肿硬结的大小，硬结直径大于10mm即被看作为阳性。表明受试者对该病原菌有了一定的细胞免疫能力，若皮试无反应，可用更高浓度的抗原重复试验，若仍无反应即为阴性，需排除皮试技术误差，也可能受试者从未接触过此抗原，也可能由于细胞免疫功能缺损，或由于细胞免疫功能缺损，或由于严重感染（麻疹、慢性播散性结核）造成的无反应性。
2．接触性过敏常应用低分子量化合物如二硝基氯苯（DNCB）诱生接触性过敏。化合物与皮肤蛋白质结合而导至DTH反应。在动物试验时，初次皮肤上涂抹DNCB后间隔7～10天再激发刺激，则皮肤出现即为阳性。此试验人类已不使用。
二、细胞免疫的体外检测方法
体外检测淋巴细胞的数量和功能，最易采集的是血标本，首先需分离或纯化淋巴细胞，一般使用萄聚糖-泛影葡胺配成比重为1.077的淋巴细胞分层液，当将血液重叠于淋巴细胞分层液之上离心时，由于红细胞（1.092）、多形核白细胞（1.090）、淋巴细胞（1.070）的比重不同而相互分开。淋巴细胞和单核细胞在血浆和分层液交界处形成一薄层。仔细分出这一薄层的细胞，其中淋巴细胞占80%，单核细胞占20%，淋巴细胞中T细胞占80%，B细胞占4%～10%，其作为非DT、非B细胞。
1．T细胞计数
（1）E花环法：人类T细胞表面有SRBC受体（CD2）能与SRBC结合形成玫瑰花环样结构，将经分层液分离现的RBM悬液与SRBC在含有血清的平衡盐水中混合，经37℃培养5～10分钟放4℃过夜，取细胞悬计数，外周血淋巴细胞中约70%～80%淋巴细胞结成花环即为T细胞。目前此方法已用来分离T细胞，而不用做T细胞计数。
（2）用单克隆抗体计数T细胞：将人的PBM分成三等份，分别用小鼠抗人CD3、CD4和CD8的单克隆抗体作第一抗体与细胞结合，再用FITC标记的兔抗小鼠IgG抗体作第二抗体进行间接免疫荧光染色，在荧光显微镜下或流式细胞仪检测结果，在PBM中被CD3抗体染上荧光的细胞称为CD3 细胞即总T细胞。正常人在PBM中T细胞占70%～80%。正常人的CD4 细胞和CD8 细胞之和应与CD3 细胞数一致。CD4 细胞与CD8 细胞的比值正常人约为2/1而艾滋病患者则比值小于1.7。
2．T细胞活化试验 T细胞能被非特异的物质称为有丝分裂原所激活而向淋巴母细胞转化。T细胞转化过程可伴随有DNA、RNA、蛋白质的合成增加，最图导致细胞分裂。在光学显微镜下可计数转化后的淋巴细胞数，也可用氚标记的胸腺嘧啶核苷（3HTdR）掺入正在分裂的淋巴细胞，用液闪测定仪检查掺入正在分裂的淋巴细胞，用液测量仪检查掺入的3H-TdR的多少确定淋巴细胞转化率。最近有一种不用同位素，又可用仪器测量的淋巴细胞增殖反应的检查法，称为MTT检测法，MTT是一种甲氮唑盐，它是细胞线粒体脱氢酶的底物，细胞内的酶可将MTT分解产生蓝黑色甲（fromazan）产物。该产物的多少与活性细胞数正相关。结果可用酶标检测仪（595mm）测量汇丰银行密度，做为MTT法的检查指标。此法的结果与3H-TdR掺入法平行，并能反应试验中的活细胞数。
3．细胞毒试验 TC细胞、NK细胞、LAK细胞、TIL细胞对其靶细胞有直接的细胞毒（杀伤）作用。常用的栓测细胞毒效应的方法是51Cr-Na2Cro4盐水溶液与靶细胞胞混合，于37℃培养1小时左右，51Cr即可进入靶细胞，与胞浆蛋白结合，洗去游离的51Cr后，即可得到51Cr标记的靶细胞，将待检细胞毒性的细胞与51Cr标记的靶细胞混合（比例约为50：1或100：1）靶细胞被杀伤越多，释放到上清液中的液游离的51Cr越多，且不能被其他细胞吸收。用γ射线测量仪检测上清液中的cpm值，即可计算出待检细胞杀伤活性的高低。
细胞毒试验检测Tc细胞效应功能是否健全，及经IgG介导的ADCC效应，或NK细胞在抗肿瘤免疫中的作用是有意义的。
4．混合淋巴细胞的反应（MIR） 是体外研究T细胞的较好的方法，双向MLR常被用来筛选骨髓移植的供体。来自不同供体的淋巴细胞分别与病人的淋巴细胞混合培养4～5天，在最后8小时掺入51TdR掺入法测T细胞的反应性。或用细胞毒法观察受刺激的T细胞与活的靶细胞混合（靶细胞来自与刺激细胞相同的个体）如果T细胞受刺激后产生了细胞毒T细胞，可杀死活的细胞，根据靶细胞释放51Cr的多少算出T细胞移动抑制因子）和LIF（白细胞移动抑制因子）来评估细胞免疫功能。近年来应用测定IL-2的免疫酶技术，操作简单，并能定量以取代了MIF和LIF的测定。单个核细胞与分裂原一起培养24小时，然后测定清液中的IL-2活性。在细胞免疫功能缺损时，特别是AIDS病人，IL-2分泌明显降低。而有些疾病，如多发性硬化、类风湿关节炎、移植排斥反应等病人体内血清中IL-2水平升高，表明病人T细胞活性增高。发生移植排斥反应的病人尿中IL-2也可升高。
也可用酶联免疫吸附试验测定各种体液中活化的T细胞脱落的IL-2受体（CD25），一般来说IL-2的水平和IL-2受体水平是平行的，IL-2和IL-2受体的检测可用于对某些疾病的监测，如移杆排斥、自身免疫病以及接受免疫抑制治疗的病人。
对体外培养的细胞进行细胞因子产生能力检测是检查细胞培养上清液中细胞因子的生物活性或抗原性。现已可用核酸杂交技术，即从组织中或细胞中提取RNA，与同位素或酶标记的该种细胞因子的cDNA探针作分子杂交试验，即印迹（dot blotting）或Northern印迹，若查出有某种因子的mRNA存在，即说明该细胞在所处培养条件下有产生某种细胞因子的能力。

㈤ CD4细胞的检测方法

检侧CD4细胞数的标准方法是使用流式细胞仪。季节、昼夜差、某些并发症和皮质醇类药物等可能会影响CD4细胞数，但性别、成人年龄、紧张、生理性应激和妊娠则对CD4的细胞数影响不大。此外，由于CD4百分率受各种变异因素的影响较绝对数受影响程度小，因此对于临床来说，6岁以上儿童的测定采用CD4细胞百分率比绝对数表示更有意义。
艾滋病患者的CD4细胞检测
CD4细胞是HIV/AIDS诊断、判断疗效及预后的主要免疫学检测指标，检测分绝对计数和相对计数两类，5岁以下儿童使用相对计数。现把正常范围和计数结果的临床意义简介如下：
在5岁以下儿童CD4细胞百分比>35%(<11月龄），或>30%(12月龄～35月龄），或>25%(36
月龄～59月龄），提示无免疫抑制；30%～35%(<11月龄），或25%～30%(12月龄～35月龄），或20%～25%(36月龄～59月龄），提示轻度免疫抑制；25%～29%(<11月龄），或20%～24%(12月龄～35月龄），或l5%～l9%(36月龄～59月龄），提示中度免疫抑制；<25%(<11月龄），或<20%(12月龄～35月龄）或<15%(36月龄～59月龄），提示重度免疫抑制。

㈥ 检测细胞生物学活性有哪些方法

根据每细胞定重量设计用于单细胞、细胞及丝状体微物测定定体积品通离或滤菌体离经洗涤再离直接称重求湿重丝状体微物滤用滤纸吸菌丝间自由水再称重求湿重论细菌品丝状菌品放已知重量平皿或烧杯内于一05℃烘干至恒重取放入干燥器内冷却再称量求微物干重 要测定固体培养基放线菌或丝状真菌先加热至50℃使琼脂熔化滤菌丝体再用50℃理盐水洗涤菌丝按述求菌丝体湿重或干重 除干重、湿重反映细胞物质重量外通测定细胞蛋白质或DNA含量反映细胞物质量蛋白质细胞主要含量比较稳定其氮蛋白质重要组元素定体积品离细胞洗涤按凯氏定氮测总氮量蛋白质含氮量一陆％细菌蛋白质含量占细菌固形物50％吧0％般陆5％代表些细菌则占一三％一四％种变化由菌龄培养条件同所产总含氮量与蛋白质总量间关系按列公式计算： 蛋白质总量＝含氮量×陆.二5 核酸DNA微物重要遗传物质每细菌DNA含量相恒定平均吧.四×`一0^(-5)`NG定体积细菌悬液所含细菌提取DNA求DNA含量再计算定体积细菌悬液所含细菌总

㈦ 血常规检查方法包括哪些项目

血常规检查即传统的血常规检查，现在统称为血液分析，血液分析有两种方法，即手工法和仪器分析法。手工法为传统方法，用显微镜检测，包括血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数和白细胞分类等四项。仪器分析法则除上述四项外，根据仪器的性能不同，并因白细胞分类不同而分为二分类机、三分类机和五分类机，通常以三分类为多。三分类机检查的各项参数见例表。 血液分析参考值(包括仪器分析法和手工法) 检查项目 英文缩写 正常参考值 血红蛋白 HGB或Hb 男(120-160)g/L 女(110-150)g/L 红细胞计数 RBC 男(4.0-5.5)×1012/L 女(3.5-5.0)×1012/L 红细胞压积 HCT 男(0.40-0.54)L/L 女(0.37-0.48)L/L 平均红细胞体积 MCV (80-92)fk 平均红细胞血红蛋白含量 MCH (27-31)pg 平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC (320-360)g/L 红细胞分布宽度 RDW 11.6-14.8% 血小板计数 PLT或BPC (100-300)×109/L 血小板压积 PCT 男0.108%-0.272% 女0.114%-0.282% 平均血小板体积 MPV (6.8-13.5)fk 血小板分布宽度 PDW 15.5%-18.1% 白细胞计数 WBC 成人(4-10)×109/L 儿童(5-12)×109/L 新生儿(15-20)×109/L 分类 DC ＾ 嗜中性粒细胞百分数 N或GRAN 50%-70% 嗜中性粒细胞绝对值 N或GRAN (2-7)×109/L 嗜酸性粒细胞百分比 E或EOS 0.5%-5.0% 嗜酸性粒细胞绝对值 E或EOS (0.02-0.5)×109/L 嗜碱性粒细胞百分比 B或BASO 0-1% 嗜碱性粒细胞绝对值 B或BASO (0-0.1)×109/L 单核细胞百分比 M或MONO 3-8% 单核细胞绝对值 M或MONO (0.12-0.8)×109/L 淋巴细胞百分数 L或LYM 20%-40% 淋巴细胞绝对值 L或LYM (0.8-4.0)×109/L 中间值细胞百分数 MID 3-10% 中间值细胞绝对值 MID (0.3-1.0)×109/L (文章出处：家庭医生报 2001年第28期)

㈧ 什么是细胞学检查有什么优缺点

细胞学（cytology）检查是指通过对患者病变部位脱落、刮取和穿刺抽取的细胞，进行病理形态学的观察并做出定性诊断，细胞学检查目前主要应用于肿瘤的诊断，也可用于某些疾病的检查和诊断，如内部器官炎症性疾病的诊断和激素水平的判定等。

一、细胞学检查的优点：

1、取材范围广，损伤很小或无损伤，经济、快速、安全。

2、常有较高的阳性率（主要用于区别良、恶性，如对许多癌的阳性率可达70-90%）。

3、尤其适用；于大规模的肿瘤普查，可对人体多种恶性肿瘤（尤为各器官的癌）起到初筛作用。

二、细胞学检查的缺点：

1、假阴性和假阳性比较高。

2、主要用于对肿瘤病变的定性（良、恶），而进一步判定肿瘤类型、亚型、浸润、转移等一般均有困难。因而仅是一种初步的定性诊断。

因此，对细胞学阳性（恶性）的患者，在做损害较大的治疗之前，要尽可能地做活检来印证细胞学诊断，并进行分类和分型等；而对细胞学阴性者，临床高度疑为恶性肿瘤，或者再多做几次细胞学检查或做活检等其它检查，以防漏诊。

(8)细胞检测方法扩展阅读

细胞学的标本可以是来自生殖道、呼吸道、消化道、泌尿道等分泌、排泄物中的脱落细胞。

也可以是经穿刺抽取的胸、腹、心包腔、关节腔、脑脊髓膜腔液体中的脱落细胞，还可以是经各种内窥镜刷涂片、印片采集的细胞，或经细针吸取（FNA）技术（针外径0.6-0.9mm）直接或在B超、X线引导下穿刺吸取出的全身各组织器官病变处的细胞等。

将这些细胞直接或经离心沉降等方法处理后涂片、固定、染色，在光镜下观察、诊断。一般几小时内即可出结果。主要目的是判定有无肿瘤细胞，是良性还是恶性。

㈨ 细胞内NADH的检测方法

晕 应该是 NADPH 还原性的辅酶2

具有还原性 咱们检测 看<高等生化大试验>和<普通生物学>