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细胞自噬检测方法

发布时间:2022-01-14 18:41:00

㈠ 简述细胞自噬过程

a、吞噬泡噬过程存在于膜的形态变化,体现了膜的流动性特点,a正确;b、线粒体是有氧呼吸的场所,氧气在线粒体中被消耗,线粒体功能退化,氧气的消耗量减少,b正确;c、细胞及时清除受损的线粒体,维持了细胞内部环境的相对稳定,c正确;d、当细胞养分不足时,细胞“自噬作用”一般都会增强,为细胞提供更多的养分,d错误.故选:d.
形态学上:凋亡会染色体固缩,染色加深,细胞膜内陷形成凋亡小体,最后细胞解体;自噬是形成双层膜的自噬泡,包裹胞质内的物质,然后与溶酶体融合消化掉内容物。
生理意义上:凋亡是正常的细胞死亡途径,凋亡后,细胞必定死亡;自噬只是细胞在高胁迫的环境中的一种应急机制,旨在为自身提供营养或者降解掉错误折叠蛋白等,不一定引起死亡。
分子机制上:凋亡主要是caspase通路;自噬主要通过mtor通路

㈡ 用吖啶橙染色检测细胞自噬为什么只有绿色荧光

荧光显微镜下观察:凋亡细胞体积缩小,呈现核固缩,沿核膜呈点状、新月状或杆状,镜下可见四种细胞形态:活细胞,核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞,核染色质着绿色但呈固缩状;非凋亡的死亡细胞,核染色质着橘红色并呈正常结构;晚期凋亡细胞,核染色质着橘红色但呈固缩状。因为有早期凋亡(绿色)和晚期凋亡细胞(橘红色)!

㈢ 线粒体自噬的激活如何检测

随着对生物体内氧自由基检测手段的提高,如电子顺磁共振(ESR)的应用,人们线粒体钙反常也会损伤线粒体膜,如Ca2+可激活PLA2,使膜脂降解〔37〕

㈣ 检查自噬的金标准是

正确答案:C
解析:电镜检查是检测自噬的金标准
。胞质中出现大量双膜自噬体和自噬溶酶体是细胞自噬的主要形态特征
。因此,本题最佳答案是C

㈤ 细胞自噬过程

细胞自噬(autophagy)是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物 )中进行降解并得以循环利用。

㈥ 自噬相关研究如何做

你初步研究思路是什么呢,是观察自噬情况吗,还是一个整体的自噬研究呢,先对细胞进行自噬诱导或抑制,然后对自噬过程进行观察和检测。自噬检测方法也很多种,是传统的WB还是通过GFP-LC3呢?呵呵,先说说你的想法吧。

㈦ 自噬流怎么检测

1.检测LC3II/LCI: lc3参与自噬的形成,自噬形成时,胞浆型LC3(即LC3-I)会酶解掉一小段多肽,转变为(自噬体)膜型(即LC3-II),LC3II升高代表自噬的启动;

2.检测P62:P62可以通过自噬来降解,因此P62可以反映自噬的强弱。当LC3 II升高,P62同时降低,表明自噬流通畅;如果LC3II 升高,P62升高,表明自噬起始正常,但下游不通,吞噬体和溶酶体不能融合。

3.除此之外,当自噬减退,如何鉴别其发生在自噬形成阶段OR自噬降解障碍呢?
可以通过RFP-GFP-LC3双标腺病毒检测。GFP在酸性环境中降解,红绿荧光merge后通过merge后出现的黄色斑点即只是自噬体.红色的斑点指示自噬溶酶体。如吞噬体和溶酶体能正常融合,那么红色荧光多于黄色荧光,如自噬下游阻滞,吞噬体和溶酶体不能正常融合,则主要为黄色荧光。

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