A. 炎症因子有哪些
推荐分别了解其定义。
细胞因子:细胞因子(cytokine,ck)是免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导多种细胞产生的低分子量可溶性蛋白质,具有调节固有免疫和适应性免疫、血细胞生成、细胞生长、apsc多能细胞以及损伤组织修复等多种功能。细胞因子可被分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子超家族、集落刺激因子、趋化因子、生长因子等。
炎症因子:炎症因子主要是指参与炎症反应的各种细胞因子,按照分类主要有以下几种:tnf-α
、il-1β、il-6、tg
f-β。炎症因子的作用主要是诱导我们身体内的t淋巴细胞的增值和分化。现在就为大家简单介绍以上几种细胞因子。
炎症介质:炎症的血管反应和白细胞反应都是通过一系列化学因子(例如,花生四烯酸代谢产物)的作用实现的。参与和介导炎症反应的化学因子称为化学介质或炎症介质(inflammatory
mediator)。
B. 常用的细胞因子检测方法有哪些
(1)生物学检测法:又称生物活性检测,是根据细胞因子特定的生物活性而设计的检测法。生物活性检测法又可分为: 1、细胞增殖法; 2、靶细胞杀伤法; 3、细胞因子诱导的产物分析法; 4、细胞病变抑制法。
(2)免疫学检测法:细胞因子均为蛋白或多肽,具有较强的抗原性,可利用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定量检测细胞因子,常用的方法包括ELlSA、RlA及免疫印迹法
(3)分子生物学方法:目前公认的细胞因子的基因均已克隆化,较容易地得到某一细胞因子cDNA探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探针。常使用斑点杂交、Northernblot、逆转录PCR,细胞或组织原位杂交等。具有灵敏、快速等优点,甚至从l~10个细胞中就可检出其中的特异mRNA
C. 细胞因子检测可以用哪些方法,简述其原理
细胞因子主要是指由内分泌细胞分泌的一类可以参与免疫应答的蛋白多肽。对于细胞因子的检测方法主要有三种:细胞生物学检测、免疫学检测和分子生物学检测。细胞因子的发现依赖于其生物学活性,因此,建立了生物分析法用于细胞因子的检测。随后,用于检测实验溶液(如组织培养上清液)中细胞因子的免疫分析法被建立,并不断用于实验室研究。但准确地、可重复地测定细胞因子具有一定困难,主要原因是众所周知的细胞因子的含量极低(大部分都是以pmol/L计),同时存在着源于异嗜性抗体,类风湿因子以及特异的和非特异的细胞因子结合蛋白等[1,2] 的显着干扰。
D. 测细胞因子含量常用的 elisa 方法为
有一个朋友来找我咨询用流式检测细胞因子的问题,他之前用ELISA 检测细胞因子的话,发现样本量需求很多,然而有些样本量又比较少怎么办呢,那么接下来我来对比几种检测细胞因子的优缺点,供各位大大们阅读参考啦~
细胞因子(cytokine,CK):是由免疫细胞(如单核、巨噬细胞、T细胞、B细胞、NK细胞等)和某些非免疫细胞(内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等)经刺激而合成(一般是免疫细胞)、分泌的一类生物活性物质分泌的蛋白质,在体内广泛参与免疫调节及炎症反应、组织修复、刺激造血系统、刺激细胞的增殖与凋亡等重要生理活动,在抵抗外来病原及维持机体内环境平衡中均起重要作用。
细胞因子的作用方式:自分泌作用、旁分泌作用、内分泌作用。
细胞因子的作用特点:多效性、重叠性、协同性、拮抗性和双重性。
根据产生细胞因子的细胞种类不同分类:白细胞介素(interleukin, IL)、干扰素(interferon, IFN)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)、转化生长因子-β家族(transforming growth factor-β family, TGF-β family)、集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF)、趋化因子(chemokinefamily)、生长因子(growth factor,GF)等。
细胞因子的检测方法一般分为生物学、分子生物学测定法及免疫学(重点介绍)
1、生物学测定法 其原理是根据细胞因子对特定的依赖性细胞株(即靶细胞)的促增殖作用,以增殖细胞中的DNA的合成或酶活性为指标,间接推算出细胞因子的活性单位,如对IL-1、IL-2等细胞因子活性的检测。亦可根据某些细胞因子对特定靶细胞的杀伤效应或对病毒的抑制作用进行测定,如对肿瘤坏死因子及干扰素的生物活性测定。
2、分子生物学测定法 目前采用的技术有各种印迹法、斑点杂交、原位杂交和PCR等。通过检测细胞内细胞因子的基因组成或mRNA量,推算出细胞因子的合成量。
3、免疫学检测法 其基本原理是将细胞因子作为抗原进行定量检测。如免疫斑点法、ELISA法、免疫印迹法和流式细胞仪等均已用于细胞因子的检测。
细胞因子的检测方法对比
1、酶联免疫吸附实验(ELISA)
原理:使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。由于酶的催化频率很高,故可放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。
优点:避免特异性抗体直接标记,便宜。
缺点:所需样本量多、每次仅能测定一项细胞因子、操作步骤和测定时间过长、酶联反应所致的人工假象
2、流式细胞仪(CBA)
原理:利用微小、分散的颗粒捕获液体待测物,并利用流式细胞仪检测类似“三明治”的颗粒——待测物复合体所散发的荧光,从而测定待测物的数量。
优点:所需样本量少、快速(实验6-8h可以完成)操作简便、灵敏度高、重复性好、高效(同一个样品可以同时检测多个因子)、安全、接近生物体的分析条件(全血检测保留细胞及生化微环境更准确反应了体内状况)。
E. 如何检测组织中炎症细胞因子
检测细胞因子的方法主要有生物学检测法、免疫学检测法和分子生物学检测法。
1、生物学检测法
2、免疫学检测法
3、分子生物学方法
F. 如何通过流式细胞术测定炎性因子的量
现在最常用的是采用荧光微球为基础的系统,可以同时检测数十种细胞因子。有好几个厂家都有出品。
比如BD公司出的BD™ Cytometric Bead Array (CBA)
G. 请教:细胞因子,炎症因子,炎症介质的异同
推荐分别了解其定义。
细胞因子:细胞因子(cytokine,CK)是免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导多种细胞产生的低分子量可溶性蛋白质,具有调节固有免疫和适应性免疫、血细胞生成、细胞生长、APSC多能细胞以及损伤组织修复等多种功能。细胞因子可被分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子超家族、集落刺激因子、趋化因子、生长因子等。
炎症因子:炎症因子主要是指参与炎症反应的各种细胞因子,按照分类主要有以下几种:TNF-α
、IL-1β、IL-6、TG
F-β。炎症因子的作用主要是诱导我们身体内的T淋巴细胞的增值和分化。现在就为大家简单介绍以上几种细胞因子。
炎症介质:炎症的血管反应和白细胞反应都是通过一系列化学因子(例如,花生四烯酸代谢产物)的作用实现的。参与和介导炎症反应的化学因子称为化学介质或炎症介质(inflammatory
mediator)。
H. 炎症因子有那些
主要炎性介质种类,血管扩张组胺、缓激肽、pge2、pgd2、pgf2、pgh、no,血管通透性增高组胺、缓激肽、c3a、c5a、ltc4ltd4、lte4、paf、p物质、活性氧代谢产物