口蹄疫检测方法

A. 牛口蹄疫灭活疫苗的安全检测

（1）用体重350~450g豚鼠2只，各皮下注射疫苗2.0ml；用体重18~22g小鼠5只，各皮下注射疫苗0.5ml，观察7日，应不出现由疫苗引起的死亡或明显的局部和全身不良反应。 （2）用6月龄以上牛3头，各舌背面皮内注射疫苗20个点，每点0.1ml逐日观察，4日后，按推荐的接种途径各接种疫苗3头份，继续观察6日。均应不出现口蹄疫症状或由接种疫苗引起的明显毒性反应。

B. 猪病常用的血清学诊断方法有哪些

抗原和相应的抗体在动物体内或体外都能发生特异性结合反应，这种反应称为抗原抗体反应，习惯上把体内的抗原抗体反应称为免疫反应，体外的抗原抗体反应称为血清学反应，因为抗体主要存在于血清中。

血清学反应可以用已知的抗体检查未知的抗原，也可用已知抗原测定未知的抗体。人们根据抗体能与相应抗原发生反应并出现可见的抗原—抗体复合物的原理，设计了许多血清学诊断方法，不仅可以检测动物体内乃至体外的病原微生物，或其抗原性成分，而且还可以测定动物机体对病原微生物的侵袭或对其抗原成分的免疫反应。在抗原—抗体复合物成不可见状态时，可以通过琼脂扩散、凝集实验以及酶标记等指示系统，使其变为可见或可测状态。

目前已知的血清学诊断方法很多，现仅介绍几种在目前条件下规模化猪场通过学习都能做到的诊断方法：

（1）凝集试验猪病诊断过程中常用的操作方法有以下几种：

①全血平板凝集试验实践中主要用于细菌性疾病的抗体检测和抗原（经分离培养后）的鉴定。现举例用已知猪丹毒抗原（丹毒杆菌的纯培养液）测定被检猪血清中的抗体。其操作步骤如下：

a.材料猪丹毒凝集抗原，玻片，9号针头，酒精棉球，酒精灯，铂耳（取血环）等。b.操作用铂耳取已知抗原1滴，置于玻片上。用酒精棉球擦拭针头，铂耳在酒精灯上灼烧消毒。用针头刺破被检猪的耳静脉，以铂耳取血与玻片上的抗原等量混合，在2～3分钟内观察结果。c.结果判定出现颗粒状的凝集，为阳性反应。否则为阴性。

②试管凝集试验是一种定量法，用于测定被检血清或其他体液中有否某种抗体及其效价，可做临床的辅助诊断，或用于流行病学监测。在猪场中，本法常用于猪布氏杆菌病的诊断。

A.材料布氏杆菌病试管凝集抗原（1∶20倍稀释），布氏杆菌病阳性血清、阴性血清（1∶25倍稀释），稀释液（0.5 %石炭酸生理盐水），灭菌小试管，1毫升吸管，试管架，待检血清等。B.操作取试管7支置于试管架上，设阳性和阴性血清及抗原对照各1支，测定管4支，以后每增加1个样品，只需增加4支测定管。

按表10示意稀释血清，加抗原，完成后每支试管内应含1毫升液体。

C. 口蹄疫抗原如何检测

免疫检测法，如果有抗体的话，可以用ELISA检测，或者兰州兽医所有检测口蹄疫抗原的3ABC抗原ELISA检测试剂盒

D. 口蹄疫实验室检查方法有哪些

这个是在网上帮你找到的。

口蹄疫病毒具有多型性，而其流行特点和临床症状一样，其病毒属于哪一型，需经实验室检查才能确定。另外，猪口蹄疫与猪水疱病的临床症状几乎无差别，也有赖于实验室检查予以鉴别。首先将病猪蹄部用清水洗净，用干净剪子剪取水疱皮，装人青霉素（或链霉素）空瓶，最好采取3-5头病猪的水疱皮，冷藏保管，一并迅速送到有关检验部门检查。

传统的方法是补体结合试验和乳鼠血清保护试验。以后又采用反向间接血凝试验和琼脂扩散试验，近来常用酶联免疫吸附试验。据报道，酶联免疫吸附试验比反向间接血凝试验更灵敏可靠，阻断夹心酶联免疫吸附试验已用于进出口动物血清的检测。

E. 口蹄疫检测3abc试剂盒哪个好

口蹄疫检测3abc试剂盒很多加都不错 看你想用哪家的了

F. 口蹄疫疫苗颗粒度怎么测试

粒径测定仪。。。
你用的哪个厂家的？

G. 常用的诊断口蹄疫的方法有哪些

（1）根据流行特点：本病呈急性经过，流行性传播，主要侵害偶蹄兽，一般为良性转归。
（2）根据临床症状：一般表现在口腔黏膜、蹄部皮肤、乳房、乳头、鼻端、鼻孔形成水疱和溃疡。
（3）实验室诊断：由于口蹄疫的临诊特征与水疱性口炎、水疱病、水疱疹极为相似，为此不能作为确诊的依据，必须采取水疱液或水疱皮进行以下几方面的实验室诊断。
小鼠接种试验：将病料用青、链霉素处理后分别接种成年、2日龄和7～9日龄小鼠，如2日龄和7～9日龄乳鼠都发病死亡，可诊断为口蹄疫，如仅2日龄乳鼠发病死亡则为猪水疱病。
血清保护试验：通常采用乳鼠作血清保护试验。可用已知血清鉴定未知病毒，也可用已知病毒鉴定未知血清。
血清中和试验：可用于鉴定康复猪的抗体和病毒。采用乳鼠中和试验或细胞中和试验均可。此外，也可应用对流免疫电泳、反向间接血凝抵制试验、补体结合试验检测病毒或抗体，从而作出诊断。
抗酸性（pH5.0）试验：依据口蹄疫病毒对pH5.0敏感，而猪水疱病病能抗pH5.0的特性，可以鉴别这两种病毒。

H. 可做口蹄疫病毒杀灭试验检测机构有哪些

做口蹄疫病毒杀灭试验，病毒灭活效果试验检测，找专业可靠的第三方检测机构-中科院中科检测，具备CMA资质认证，能够严格按照相关病毒杀灭试验检测标准要求，检测出具CMA报告。
口蹄疫病毒杀灭试验检测标准：《消毒技术规范》（2002年版）2.1.10和《消毒剂灭活手足口病病毒效果的测试方法》团体标准

I. 口蹄疫的检测

1.蹄疫反转录聚合酶链反应（RT-PCR），用于检测疑似感染动物水疱皮或水疱液中所有血清型口蹄疫病毒，适用于口蹄疫病毒的检测、诊断和流行病学调查。
原理：利用异硫氰酸胍方法提取RNA，在反转录酶的作用下，以RNA为模板，以引物为起点合成与RNA模板互补的cDNA链。利用西安天隆科技有限公司生产的DTC型基因扩增仪，在TaqDNA聚合酶的作用下，经高温变性、低温退火、中温延伸的循环，使特异性DNA片段的基因拷贝数放大一倍。经过35个循环，最终使基因放大数百万倍。将扩增产物进行电泳，经溴化乙锭染色后，在紫外灯照射下，肉眼可见DNA片段的扩增带。该方法可以检测所有亚型的口蹄疫病毒，检测结果为阳性，需进一步采用分型诊断试剂盒进行进一步检测。
2.血清学试验 ，ELISA是目前检测FMDV感染较为常用的诊断方法，其与补结试验、中和试验及间接血凝抑制、免疫扩散沉淀试验相比较、具有灵敏、快速、价廉等优点。

J. 如何诊断与预防牛口蹄疫

口蹄疫俗称“口疮”、“蹄癀”，是由口蹄疫病毒引起的一种人和偶蹄动物的急性、发热性、高度接触性传染病。主要临床症状表现为口腔黏膜、唇、蹄部和乳房皮肤发生水疱和溃烂。

【病因】

该病由口蹄疫病毒引起。口蹄疫病毒是动物RNA病毒，呈圆形，直径20～25纳米，该病毒具有多型性、变异性等特点，目前全世界有7个主型：A、O、C、南非1、南非2、南非3和亚洲Ⅰ型。各型之间不能互相免疫，即感染了此型病毒的动物，仍可感染其他型病毒。各型的临床表现相同。该病毒对动物致病力特强，1克新鲜的牛舌皮毒，捣碎成糊状，稀释10⁷～10⁸倍后，取1毫升舌面接种牛，还能使牛发病。病毒存在于病牛的水疱、唾液、血液、粪、尿及乳汁中。病毒对外界抵抗力很强，不怕干燥，但对日光、热、酸、碱则均敏感。

【流行病学】

不同地区可表现为不同的季节性，牧区一般从秋末开始，冬季加剧，春季减轻，夏季平息，在农区，这种季节性不明显。病牛是传染源，传播途径是通过直接接触和间接接触，经消化道、损伤的黏膜、皮肤和呼吸道传染。口蹄疫病毒传染性很强，一旦发生，呈流行性，且每隔1～2年或3～5年就流行1次。有一定的周期性。

【症状】

潜伏期平均为2～4天，长者可达1周左右。病牛体温升高至40～41℃，精神不振，食欲减退，流涎。1～2天后，唇内面、齿龈、舌面和颊部黏膜出现1～3厘米见方的白色水疱，大量流涎，水疱破裂形成糜烂，病牛因口腔疼痛采食困难，进食减少或不进食。水疱破裂后，体温下降至正常，糜烂部位逐渐愈合。与水疱出现的同时或稍后，蹄部的趾间、蹄冠的皮肤也出现水疱，并很快破裂，病畜不愿意行走，严重者蹄匣脱落。在牛的鼻部和乳头上也出现水疱，之后破裂，形成粗糙的、有出血的颗粒状糜烂面。感染的怀孕母牛经常出现流产。病程为1周左右，病变部位恢复很快，全身症状也逐渐好转，如果发生在蹄部，病程较长，一般为2～3周，死亡率低，不超过1%～3%。但是如果病毒侵害心肌时，可使病情恶化，导致心脏出现麻痹而突然死亡。

【病理变化】

主要在口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤出现水疱及糜烂面。病毒毒素侵害心肌而死亡的牛心肌变性和出血，而且在心肌上可看到许多大小不等、形态不整齐的灰白色或灰黄色混浊、无光泽的条纹样病灶，称为“虎斑心”。

【实验室检查】

作病毒分离，采用鸡胚和细胞，培养分离病毒。血清学检查主要应用反向间接血凝试验、酶联免疫吸附试验等检测病毒抗原。

【预防】

口蹄疫由于发病率高、传播快和易造成大流行等特点，因此在防治上应本着“早、快、严、小”的原则，充分发动群众，严格执行各项兽医卫生防疫制度，采用综合性防疫措施。

（1）发生疫情时的措施

①发生疫情时应立即向上级和有关部门报告，并迅速采取病料（水疱和水疱液）送有关单位确诊、定型。

②划定疫区，严格封锁。疫点要求封死，人、畜、畜产品及用具等都不能出入，查明传染来源。

③对疫区内所有易感家畜进行普查，将病畜和可疑病畜立即隔离。同时对被病畜的分泌物、排泄物污染的场所、用具等用2%烧碱或2%甲醛溶液进行认真消毒。

④建成免疫带。为防止疫情继续蔓延扩大，对疫区和疫区外的受威胁区的易感家畜，立即用与当地流行的相同病毒型的、亚型的减毒活苗和灭活苗进行接种。以建立免疫带，这是综合性防疫措施中的一个重要环节。

⑤扑杀病畜，死畜应焚烧或深埋。

⑥疫区解除封锁的时间，经过全面消毒，报有关部门同意后，才可解除封锁。实践证明，凡疫情报告及时、隔离早、封锁严、消毒彻底的畜牧场，都能取得迅速控制和扑灭疫情的效果。

（2）平时的措施

①平时对家畜要严格检疫，每年夏秋季节用口蹄疫疫苗对牛、羊进行预防注射。

②加强饲养管理，搞好环境卫生和消毒工作。

此外，本病发生和流行时，人可因与病畜接触或饮乳偶尔感染。应注意人身防护。