‘壹’ 细菌分子鉴定的方法有哪些
一般从DNA、RNA和蛋白质这三个方面鉴定。将三种物质分别提取出来,各自进行鉴定。鉴定的方法可以用你提到的这些。
1.核酸杂交:简单的说,就是将需检测的核酸与标记的分子结合使得未知核酸可以被检测到。
2.脉冲场凝胶电泳:利用电场让不同大小的带电DNA分子以不同的速度移动,从而将不同大小的分子分开。可分离10kb--10mb的DNA分子。
3.16S rRNA :16S rRNA所对应的 16S rDNA基因在微生物基因组中具有高度保守性;对16S rDNA而言,如果出现3个碱基以上的差异就可以断定细菌不属于同一种属。它具有高度的灵敏性,而且不需要培养,检测指标也很单一。可以快速检测未知微生物或致病微生物。
4.RAPD:对整个未知序列的基因组进行多态性分析的分子技术。先进行PCR扩增,然后电泳分离染色,在紫外透视仪上检测多态性。
5.质粒质谱分析法:我只了解过蛋白质的质谱分析技术,质粒的没有了解过。
蛋白质:将蛋白质酶解成小肽段并混合基质,用激光将呈离子化气体状态的待测物喷射,经电场到达检测器,根据到达的时间分析肽段的分子质量。
‘贰’ 化学分析法中较常用的检测方法是
(1) 化学分析法:目前常规的糖类检测方法如斐林氏法、高锰酸钾法等化学分析方法只能测定总还原糖,不能测定其他糖含量。
(2) 气相色谱法:气相色谱法也可用于糖类测定,但由于糖类本身不具挥发性,须进行衍生化处理后才能用气相色谱检测。
(3) 高效液相色谱法。高效液相色谱法(HPLC)更适用于糖类检测,样品无需衍生化,分辨率高,重现性好,特别适用于某些热敏性糖类和多糖分子量的检测。迪信泰检测平台提供HPLC、LC-MS检测多种糖类服务。
检测器
(1) 示差折光检测器:可直接测定,操作简便,但灵敏度较低;
(2) 紫外检测器或光检测器:灵敏度较高,但由于糖类本身在紫外区没有吸收或不产生荧光,因此样品需提前进行衍生化,操作较复杂。
(3) 蒸发光散射检测器:对于没有紫外吸收、不产生荧光或电活性的物质均能检测,通用性好,灵敏度高,可用于梯度洗脱。
流动相
一般为水、乙腈和甲醇的混合溶液,影响流动相的因素主要有以下几种:
(1) 配比:由糖类的组分含量、分子量范围、结构组成等决定,且有研究表明水的比例越高,分离速度越快,但若出现果糖和葡萄糖色谱峰重叠,分离效果则会下降。
(2) 流速:也是影响分离效果的主要因素之一,若流速增大,保留时间缩短但分离效果下降,若流速过快,则会缩短色谱柱的使用寿命,不同的色谱柱,其配合柱效的最佳流速也不同。
(3) 检测温度:会影响色谱的检测结果,有研究发现提高温度,可以缩短保留时间,但分离效果下降,降低温度更有利于峰分离。
(4) pH:一般使用中性的有机溶剂或水进行提取。为了避免离子化,检测物质呈碱性时,可以增大流动相pH,检测物质呈弱酸性时,可以降低流动相pH。
‘叁’ 化学检测的方法有哪些
化学检测的方法有哪些
一般分有机颜料,如酞青绿等;无机颜料如氧化铁红、钛白;染料如还原桃红、分散橙等.聚烯烃、PVC色母粒采用的是颜料,一般说染料不可用于聚烯烃着色,否则会引起严重迁移.
二、分散剂主要对颜料表面进行润湿,有利于颜料进一步分散,并稳定在树脂中,同时必须与树脂相容性好,不影响着色产品品质.聚烯烃色母粒分散剂一般采用低分子量聚乙烯蜡或硬酯酸锌等.工程塑料色母粒分散剂一般采用有极性低分子量聚乙烯蜡、硬酯酸镁、硬酯酸钙等.三、载体树脂
使颜料均匀分布并使色母粒呈颗粒状.选择载体需考虑与被着色树脂的相容性,还要考虑母粒应有良好分散性,因此载体的流动性应大于被着色树脂,同时被着色后不影响产品质量.如选用熔体指数较大的同类高聚物,使母粒的熔体指数较高于被着高聚物,以保证最终制品的色泽一致.
‘肆’ DNA检测的方法都有哪些
DNA检测
技术有很多,主要分为定性和定量方法。给你举几个:1,分子杂交技术,(包括southern杂交,northern杂交,基因芯片等)分子杂交分析的基本原理是基于DNA探针检测变性而且固定在硝酸纤维素膜上的宿主细胞DNA。这些探针可以不依赖宿主细胞DNA来制备,例如用随机引物制备探针。探针上标记酶﹑生物素﹑放射性同位素﹑地高辛(Dig)等。由于地高辛标记核酸探针,操作方便、灵敏度高,已标记的探针在4℃贮存可达两年之久,方便随时应用,所以现在常采用地高辛标记核酸探针,用光标记法将光敏Dig标记到探针上,制成光敏-Dig-核酸探针,再与固定在硝酸膜上的靶核酸进行靶DNA分子杂交,使之与抗Dig-碱性磷酸酶结合,最后可用不同的检测方式进行检测,
发光检测
和显色检测均可,灵敏度可达10pg以下2,基于DNA结合蛋白的方法Threshold®
Immunoassay分析系统是基于两种DNA序列非特异性蛋白,单链DNA(ssDNA)结合蛋白(SSB)和抗ssDNA
的单抗。检测的基本过程是当生物素—DNA单链结合蛋白和尿素酶—抗ssDNA
的单抗与变性的宿主细胞DNA结合最终形成复合物,通过亲合素将此复合物连接到生物素—硝酸纤维素膜,在通过洗涤所有非特异性的被洗脱掉,最后放于有
尿素溶液
的读数仪,尿素酶催化尿素分解成NH3和CO2
导致PH值发生变化,读数仪根据PH值的变化换算成DNA的量,从而达到检测残余DNA含量的目的。3,PCR法,其中以实时定量PCR法最为突出荧光定量
PCR是基于PCR扩增时,在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,产物的增加可以通过荧光信号指示,通过实时监控PCR体系中的荧光信号,对样本中初始模板进行定量分析。定量PCR可实时检测产物量,通过加入已知浓度的
标准样品
绘制标准曲线,然后根据待测样品在标准曲线中的位置推算初始模板的浓度,从而达到检测残余DNA含量的目的。此外,对DNA的定量技术也有很多,可以看下这篇文章《核酸定量技术及其在生物检测中的应用》
‘伍’ 分子检测的方法有哪些,怎么检测癌症,谢谢。
使用光普分析可以知道蛋白质的种类而知其作用。癌症的发现通常是照光发现肿瘤后作肿瘤切片培养,如果发现其细胞可无限繁殖则是癌症,反之则是良性肿瘤
‘陆’ 什么是分子诊断,通俗易懂,能举个例子最好。
分子诊断:应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术,称为分子诊断。分子诊断是预测诊断的主要方法,既可以进行个体遗传病的诊断,也可以进行产前诊断。分子诊断的材料包括DNA、RNA和蛋白质。
分子诊断主要是指编码与疾病相关的各种结构蛋白、酶、抗原抗体、免疫活性分子基因的检测。
技术种类分子诊断是当代医学发展的重要前沿领域之一,其核心技术是基因诊断,常规技术包括:
(1)聚合酶链式反应(PCR);
(2)DNA测序(DNA sequencing);
(3)荧光原位杂交技术(FISH);
(4)DNA印迹技术( DNA blotting );
(5)单核苷酸多态性(SNP);
(6)连接酶链反应(LCR);
(7)基因芯片技术(gene chip)。
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‘柒’ 简述分子诊断常用方法
分子成像检验
分子成像检验是指活体内生物过程在细胞和分子水平上特征的显示,在分子水平上借助化学和生物制剂的作用以无创的方式成像的检测方式。为深入揭示疾病生理病理过程有关机制,以及对疾病和治疗进行实时、动态、细致、无创、靶向性的探测和跟踪提供了有效手段。
检查前准备
根据所采取方法的不同采取相应的准备措施,如放射性放射性核素分子成像、光学分子成像前需排除药物过敏;磁共振分子成像应详细了解病史,确保无任何金属或磁性物质植入体内等。
操作方法
常用的方法有放射性核素分子成像、磁共振分子成像、光学分子成像、超声分子成像、CT分子成像、多模式分子成像等。可以通过分子探针与靶点直接反应成像;也可以通过报告基因间接转录某种蛋白质基因后,其表达产物被报告探针检测,报告探针与报告基因的表达产物特异性结合之后被成像设备检测到而进行的成像;还可利用替代标志物探针来反映内源性分子或基因生物过程的下游结果等。
临床意义
分子探针与体内特定研究目标结合,可以定量地反映生物过程中分子水平上的变化。
1.肿瘤的应用
在肿瘤血管成像、基因成像、肿瘤细胞凋亡成像,肿瘤间质成像、受体成像和肿瘤代谢成像等肿瘤血管成像在肿瘤研究中占重要位置。
2.心血管应用
可帮助探讨动脉粥样硬化、心肌缺血、心肌无力、心力衰竭等心血管病的发病机制。如在动脉硬化研究中,针对硬化斑块成分、尖性细胞、增殖的平滑肌细胞,纤维蛋白及纤维蛋白原等设计不同探针,对斑块进行分析和诊断。
3.神经系统应用
利用放射性核素分子成像和磁共振脑功能定位成像方法对脑神经病变、肿瘤性疾病进行研究,如脑退行病变中的阿尔茨海默症、帕金森病等。
4.其他
分子成像从核酸-蛋白质、蛋白质-蛋白质分子间相互关系及生物特征表达反映发病机制,也为其他系统疾病的早期预警诊断和治疗提供基因水平评估方法。
‘捌’ 请问核磁检测分子结构的方法和质谱有什么区别
这两个东西都玩过,应该是两种不同的仪器。虽然都可以用作结构鉴定。首先核磁共振无法测定分子量,这个是先要纠正的。核磁共振主要分为两种,核磁共振氢谱和碳谱,都是通过氢原子和碳原子的化学环境不同进行分辨的。不同的氢在核磁谱里面出不同的峰,比如甲基的峰一般出在化学位移在2ppm左右的地方,羟基出在低场。根据出峰的位置和峰强和耦合常数进行解析,可以得到完整分子结构,当然前提是知道分子量,核磁共振是目前结构解析中最权威的工具。
质谱通过其他分子碰撞得到碎片检测母离子和子离子的碎片进行解析。
一般要得到确定的分子结构,要同时给出氢谱和质谱图,同时附上解析过程。
‘玖’ 分子病理检测包括哪些
分子病理检测主要包括费氏检测以及荧光定量PCR检测、一代基因测序、二代基因测序检测。病理检测由原先的形态学为基础的检测,现在逐步进入到细胞和分子水平,即分子病理检测。分子病理检测主要包括费氏检测以及荧光定量PCR检测、一代基因测序、二代基因测序检测。荧光定量PCR检测主要为AM式方法,主要用于肺癌的EGFR和KRAS检测,用于指导肺癌病人的靶向治疗。
‘拾’ 什么是分子水平的检测
生物上高中部分知识上共包括 三个水平的检测 分别是细胞水平 细胞器水平 分子水平 。 一般来说 细胞培养 细胞融合 核移植 属于细胞水平的操作 核移植也可以归为细胞器水平的操作 高中课本没有提到 所以不用探究 分子水平的高中也只学了三个 dna分子杂交技术 dna—rna分子杂交技术 抗原—抗体杂交技术
以上为自己总结 希望能报道您