细胞毒性检测方法

1. 国外检测体外细胞毒性的方法有哪些

国外检测体外细胞毒性比较常用的方法有
MTT比色法，XTT比色法，利用线粒体内部酶的活性，将特定的四唑盐类进行转化，然后通过酶标仪进行检测
LDH法，通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性，来检测细胞毒性
其他还有细胞增殖度法，检测碱性磷酸酶活性等

2. 求助各位朋友，测试细胞毒性的方法

测试细胞毒性的方法，目前还是蛮多的，检测细胞存活与增殖的方法主要包括观察DNA合成含量和检测细胞代谢活性两种，前者主要是DNA前体物质（胸腺嘧啶核苷类似物）掺入法，比如BRDU、EDU法；后者主要为MTT、XTT、MTS、CCK-8、WST-1及WST-8法等，在后者中现在最主流的就是CTG法。

3. 测细胞毒性有什么实验

MTT法或者结晶紫染色法都可用于体外实验检测药物或者病毒对细胞的毒性

4. 细胞毒性等级如何确定

根据RGR值,参照《美国药典》毒性分级法[8]评价细胞毒性,评价标准为:① RGR值≥75%,细胞毒性等级为0或1级,合格;② RGR值为50%～74%,细胞毒性等级为2级,应结合细胞形态综合评价; RGR值≤49%,细胞毒性等级为3～5级,不合格.
USP XXII,NF XVII [S].United States Pharmacopeial Convention,Inc,1990:2069.

5. 医用血管材料细胞毒性检测一般用什么细胞

国外检测体外细胞毒性比较常用的方法有MTT比色法，XTT比色法，利用线粒体内部酶的活性，将特定的四唑盐类进行转化，然后通过酶标仪进行检测 LDH法，通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性，来检测细胞毒性 其他还有细胞增殖度法，检测碱性磷酸酶活性等。

6. 细胞毒试验基本原理

T淋巴细胞转化实验的基本原理
T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原（如PHA、ConA）刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化.淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一.
T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原（如PHA、ConA）刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化.淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一.
淋巴细胞转化试验有形态计数法、MTT 法和同位素法三种.MTT 法即四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法.MTT 是一种噻唑盐,化学名3-（4,5-二甲基-2-噻唑）-2,5-二苯基溴化四唑,水溶液为黄橙色.小鼠脾细胞受到ConA 作用后发生增殖活化,其胞内线粒体琥珀酸[工业电器网-cnelc]脱氢酶活性相应升高,MTT 作为其底物参与反应,形成蓝色的甲臜（Formazan）颗粒沉积于细胞内或细胞周围,经盐酸─异丙醇溶解后为蓝色溶液,可用酶标测定仪测定细胞培养物的OD 值,测定波长570nm.根据OD 值的大小计算反应体系中细胞增殖程度.
3H-TdR 掺入法：细胞增殖的基本条件或前提为细胞质和细胞核的复制,这是正常细胞增殖过程缺一不可的前提.一般来说,一个细胞周期可大致分为四期,即G1 期、S期、G2 期和M期.其中S期为DNA合成期,主要功能活动为DNA合成.3H-TdR即（甲基-3H）胸腺嘧啶核苷（[3H-methyl]thymidine）,是DNA合成的前体.加入细胞培养液中后被细胞摄取作为DNA合成的原料.细胞合成的DNA越多,则所掺入的3H-TdR就越多,因此,检测所掺入的3H-TdR就可反映细胞增殖的程度.因该方法有同位素污染问题,故我们实习中仍用MTT法

7. NK细胞毒性检验的方法

方法首先将外周血单个核细胞（PBMCs）与K562细胞以3：1比例混合，2h后加入莫能菌素，1．5h后加入CD107a和CD56标记抗体，流式细胞仪分析CD107a阳性细胞的频率。其次观察CD107a抗体孵育时间、不同效靶比例对CD107a阳性细胞检测的影响。最后观察该方法与传统LDH释放法检测NK细胞毒活性的一致性。结果NK细胞活化后可在其表面检测到高水平表达的CD107a分子，效靶细胞孵育结束后加入CD107a抗体可降低检测背景，低效靶比例同样具有检测敏感性。该方法与LDH释放法的检测结果一致。结论利用CD107a抗体标记检测NK细胞毒活性的方法具有快速、敏感、所需效应细胞少的优点。

8. 病菌毒性测定方法有哪些

Wolfe等提出了田间直接测定法和室内测定法，后者又可分菌落计数法和孢子计数法

(1)田间直接测定:在田间暴露一组单基因鉴别品种幼苗，经一定时间后取回，保湿，使降落在叶片上的孢子萌发和侵入，在发病后测定每一个品种产生的病斑数，据此计算毒性频率以标准感病品种上的病斑数为计算的基数

(2)室内间接测定:有两种方法，第一种为病斑计数法，将所采集的混合病叶样本用沉降塔接种一套鉴别品种叶段，离体培养，发病后以各品种叶段上的病斑数与感病品种叶段的病斑数比较，计算毒性频率第二种方法为孢子计数法，用沉降塔接种盆栽幼苗或离体叶片，接种叶发病产孢后，洗脱孢子，配制孢子悬液，用血细胞计数板镜检计数孢子数目，换算单位叶面积产孢数，据以计算毒性频率

用上述方法，都可得到单个毒性因子单独出现的频率(实测值)，根据这一频率，可计算2个或多个因子组合的频率(理论值)各个鉴别品种上所得孢子，可用来再接种整套鉴别品种，计算各毒性因子频率，用此第二次测得的基因频率，可计算具有2个毒性因子的表型频率(实测值)，若再将每个品种产生的孢子，第三次接种整套鉴别品种，用所得结果，就可进一步估计具有3个毒性因子的频率(观测值)