目的基因的检测的方法

㈠ 如何对目的基因进行检测与鉴定

可以从三方面对目的基因进行鉴定：

1、直接测定：按照目的基因组成制作DNA分子探针进行配对。

2、mRNA测定：根据目的基因组得出其转录的mRNA组成，利用探针检测。

3、蛋白测定：可应用PCR相应技术测定目的基因翻译的相关蛋白，也可采用免疫化学法导入蛋白抗体检测蛋白。

(1)目的基因的检测的方法扩展阅读：

对目的基因进行鉴定和检测的多种方法：

基因鉴定技术是一项生物学检测技术，人体细胞有总数约为30亿个碱基对的DNA，每个人的DNA都不完全相同，人与人之间不同的碱基对数目达几百万之多，因此通过分子生物学方法显示的DNA图谱也因人而异，由此可以识别不同的人。

所谓“DNA指纹”，就是把DNA作为像指纹那样的独特特征来识别不同的人。由于DNA是遗传物质，因此通过对DNA鉴定还可以判断两个人之间的亲缘关系。

基因鉴定的原理其实是DNA分子杂交，这种分子杂交是在缓冲液中进行的，由于DNA分子杂交时，两个分子相遇的机会不是很大，所以就需要众多的带有目的基因的DNA与待测的DNA分子。

而PCR技术就是将目的基因进行扩增的一种技术手段，所以在进行基因鉴定时并不是直接进行鉴定的，而是先进行PCR技术将目的基因扩增再进行鉴定。

网络-对目的基因进行检测与鉴定

㈡ 获取目的基因的常用方法是哪种

..刚好学到
基因工程流程的第一步就是获得目的DNA片段,如何获得目的DNA片段就成为基因工程的关键问题。所需目的基因的来源,不外乎是分离自然存在的基因或人工合成基因。常用的方法有PCR法、化学合成法、cDNA法及建立基因文库的方法来筛选

直接获取
1.从基因文库中获取 这个没什么就是现成的基因储存在受体菌上你用的时候提取出来就好了（基因组文库法 就是原教材中的用限制性内切酶直接获取。利用λ噬菌体载体构建基因组文库的一般操作程序如下：① 选用特定限制性内切酶， DNA进行部分酶解，得到DNA限制性片段② 选用适当的限制性内切酶酶解λ噬菌体载体DNA。③ 经适当处理，将基因组DNA限制性片段与λ噬菌体载体进行体外重组。④ 利用体外包装系统将重组体包装成完整的颗粒。⑤ 以重组噬菌体颗粒侵染大肠杆菌，形成大量噬菌斑，从而形成含有整个DNA的重组DNA群体，即文库。）经典解释
2.cDNA文库法（即原教材中提到的逆转录法）。cDNA文库，是指汇集以某生物成熟mRNA为模板逆转录而成的cDNA序列的重组DNA群体。虽然可用基因组文库法来获取真核生物的目的基因，但是由于高等真核生物基因组DNA文库比其cDNA文库大得多，相关工作量同样大得多。更为重要的是，在真核生物基因组中合有大量的间隔序列或内含子，但在大肠杆菌等原核生物中没有类似序列的存在，所以大肠杆菌不能从真核生物基因的初级转录本中去除间隔序列，即不能表达真核生物DNA。而在真核生物成熟mRNA中已不存在间隔序列（已在拼接过程中被去除），所以可以以真核生物成熟mRNA为模板，逆转录而成的cDNA可被大肠杆菌表达。因此，在基因工程中，cDNA文库法是从真核生物细胞中分离目的基因的常用方法。
3.直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。这种方法有如用猎枪发射的散弹打鸟，无论哪一颗弹粒击中目标，都能把鸟打下来。鸟枪法的具体做法是：用限制酶（即限制性内切酶）将供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入运载体，然后通过运载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞所提供的DNA（外源DNA）的所有片段分别在受体细胞中大量复制（在遗传学中叫做扩增），从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法吧带有目的基因的DNA片段分离出来。如许多抗虫，抗病毒的基因都可以用上述方法获得。

用“鸟枪法”获取目的基因的优点是操作简便，缺点是工作量大，具有一定的盲目性。

人工合成
1.(主要是序列已知的基因)。主要是通过DNA自动合成仪，通过固相亚磷酸酰胺法合成，具体过程可以网上查询，反正是可以按照已知序列将核苷酸一个一个连接上去成为核苷酸序列，一般适于分子较小而不易获得的基因。对于大的基因一般是先用化学合成法合成引物，再利用引物获得目的基因。
2.聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断；可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研 究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情，用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑
他只是给目的基因的扩增

好累~....

㈢ 对目的基因进行鉴定和检测，有多种方法和技术，从分子

基因鉴定时一定要先经过PCR技术，直接进行鉴定是不行的。
基因鉴定技术是一项生物学检测技术，人体细胞有总数约为30亿个碱基对的DNA，每个人的DNA都不完全相同，人与人之间不同的碱基对数目达几百万之多，因此通过分子生物学方法显示的DNA图谱也因人而异，由此可以识别不同的人。所谓“DNA指纹”，就是把DNA作为像指纹那样的独特特征来识别不同的人。由于DNA是遗传物质，因此通过对DNA鉴定还可以判断两个人之间的亲缘关系。
基因鉴定的原理其实是DNA分子杂交，这种分子杂交是在缓冲液中进行的，由于DNA分子杂交时，两个分子相遇的机会不是很大，所以就需要众多的带有目的基因的DNA与待测的DNA分子，而PCR技术就是将目的基因进行扩增的一种技术手段，所以在进行基因鉴定时并不是直接进行鉴定的，而是先进行PCR技术将目的基因扩增再进行鉴定。

㈣ 关于目的基因的检测

如果说只是要检测目的基因是否被成功导入，用这个方法就有点浪费了，一般都直接用标记基因就好了（比如荧光啊、抗药啊）。但如果是要检测目的基因是否在受体细胞成功表达，那么这是个很好的方法。首先，目的基因对于受体细胞来说，是个异物。目的基因指挥合成的蛋白质，在受体细胞中原来是没有的，当然会被受体细胞当成抗原来处理，然后受体细胞就会产生相应的抗体蛋白。如果你用目的基因指挥合成的蛋白质去侵染受体细胞的话，若目的基因已成功表达，那么之前产生的抗体必然就会与这个所谓的“抗原”发生特异性结合。

㈤ 目的基因怎么检测

可以利用抗生素
例如：大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因,当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒,并被转入受体细胞后,就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因.

㈥ 目的基因的检测

可以有很多种方法的~
可以像楼上所说的DNA杂交技术~
还可以用蛋白质检验~例如大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因，当这种质粒成为重组质粒并被转入受体细胞后，可根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得目的基因
还可以运用RNA杂交技术检验~具体过程像DNA杂交技术~不过是换成RNA~
还可以用抗原-抗体技术检验~例如转基因抗虫稻米~想知道目的基因是否起作用~捉些虫子进去~看看虫子会不会吃~不会吃就说明目的基因成功导入了~

方法应该还有很多~我所学的就是这些~希望对你有用~

㈦ 检测目的基因是否导入受体细胞的方法有哪几种

检测目的基因是否导入受体细胞的方法有以下两种：

1、农杆菌转化法（植物常用）

农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物和裸子植物的受伤部位（受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物，从而使农杆菌移向这些细胞），并诱导产生冠瘿瘤或发状根。

2、利用显微注射，或者灭活的病毒转导（动物常用）

转导由噬菌体将一个细胞的基因传递给另一细胞的过程。它是细菌之间传递遗传物质的方式之一。其具体含义是指一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中。细菌可以转化、转导。转化是利用细菌的某些特别菌株；转导是利用噬菌体。

(7)目的基因的检测的方法扩展阅读：

转导的类别：

（1）低频转导（LFT）

诱导溶源性细菌而产生的细胞裂解产物中，除含有正常的噬菌体外，还有极少数（约为10^(-6)）部分缺陷噬菌体。用诱导溶源性菌株得来的噬菌体进行转导时的转导频率不过10^(-6) ，称为低频转导。

（2）高频转导（HFT）

双重溶原菌在紫外辐射等因子的诱导下,原噬菌体容易被切割下来，产生等量的缺陷噬菌体和正常噬菌体，该裂解物称为高频率转导裂解物，用这样的裂解物去感染细菌，将比低频率转导裂解物产生多得多的转导子。

㈧ 目的基因的检测的步骤及方法

我是高二学生，课本上说的是用标记基因的抗性进行测试（这是检测目的基因是否导入受体细胞的方法）
用抗原抗体杂交技术的方法检测目的基因是否在受体细胞表达.
不知道你问的是哪个？

㈨ (4)检测该目的基因是否表达的方法是

先用realtime检测mRNA水平是否表达，如果本身就存在这个基因，就看“是否表达”提高了很多，然后再做westernblot检测蛋白水平是否表达，如果这个基因可以影响细胞的某些功能的话，再检测细胞的一些指标看是否有预期的变化。基因(遗传因子)是具有遗传效应的DNA片段(部分病毒如烟草花叶病毒、HIV的遗传物质是RNA)。基因支持着生命的基本构造和性能。储存着生命的种族、血型、孕育、生长、凋亡等过程的全部信息。

㈩ 目的基因是否表达的检测方法

最直接的就是检测目的蛋白，一般都是用western blot；如果是分泌蛋白，可以做ELISA；如果蛋白有特殊的功能（比如GFP，绿色荧光蛋白），也可以直接检测其功能（比如看有无绿色荧光）。间接的话，可以检测目的mRNA是否存在，用的是northern blot或者RT-PCR。要注意的是，因为翻译阶段有可能存在调控，所以有些情况下mRNA存在不代表蛋白存在，即基因转录了未必翻译。所以间接的手段一般作为旁证。