A. 测定氨基酸含量的方法有几种
1)称干重法.可用离心法或过滤法测定.优点:可适用于一切微生物,缺点:无法区别死菌和活菌.
2)比浊法.原理:由于微生物在液体培养时,原生质的增加导致混浊度的增加,可用分光光度计测定.优点:比较准确.
3)测含氮量,大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致,根据含氮量再乘以6.25即可测得其粗蛋白的含量.
4)血球计数板法.优点:简便、快速、直观.缺点:结果包括死菌和活菌.
5)液体稀释法.对未知菌样作连续的10倍系列稀释,经培养后,记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查MPN表,再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量.优点:可计算活菌数,较准确.缺点:比较繁琐.
6)平板菌落计数法.取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基,经培养后计算原菌液的含菌数.优点,可以获得活菌的信息.缺点:操作繁琐,需要培养一定时间才能获得,测定结果受多种因素的影响.
B. 如何检测氨基酸的纯度
一般是测透光率
分光光度计测定:每个公司有自己的测定标准
一般来说
工业级:透光率达到92%---95%
食品级要达到:95%---98%
有的通过超滤膜的氨基酸的透光率甚至测定时99%或1
C. 蛋白质及氨基酸的测定有哪些方法求大神帮助
楼主你好: 测定蛋白质最基本的方法是定氮法,即先测定样品中的总氮量,再由总氮量计算出样品中蛋白质的含量。蛋白质含量测定最常用的方法是凯氏定氮法,它是测定总有机氮的最准确和操作较简便的方法之一,在国内外应用普遍。此外,双缩脉法、染料结合法、酚试剂法等也常用于蛋白质含量测定,由于方法简便快速,故多用于生产单位质量控制分析。 蛋白质及氨基酸的测定 蛋白质是生命的物质基础,是构成生物体细胞组织的重要成分,一切有生命的活体都含有不同类型的蛋白质。人体内的酸碱平衡、水平衡的维持;遗传信息的传递;物质的代谢及转运都与蛋白质有关。人及动物只能从食品得到蛋白质及其分解产物,来构成自身的蛋白质,故蛋白质是人体重要的营养物质,也是食品中重要的营养指标。 蛋白质是复杂的含氮有机化合物,分子量很大,它们由20种氨基酸通过酰胺键以一定的方式结合起来,并具有一定的空间结构。不同的蛋白质其氨基酸构成比例及方式不同,故各种不同的蛋白质其含氮量也不同。蛋白质可以被酶、酸或碱水解,最终产物为氨基酸。氨基酸是构成蛋白质的最基本物质,在构成蛋白质的氨基酸中,亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸和缬氨酸等8种氨基酸在人体中不能合成,必须依靠食品供给,故被称为必需氨基酸,它们对人体有着极其重要的生理功能,常会因其在体内缺乏而导致患病,或通过补充而增强了新陈代谢作用。所以食品及其原料中蛋白质和氨基酸的分离、鉴定和定量具有极其重要的意义。 蛋白质的测定 测定蛋白质最基本的方法是定氮法,即先测定样品中的总氮量,再由总氮量计算出样品中蛋白质的含量。蛋白质含量测定最常用的方法是凯氏定氮法,它是测定总有机氮的最准确和操作较简便的方法之一,在国内外应用普遍。此外,双缩脉法、染料结合法、酚试剂法等也常用于蛋白质含量测定,由于方法简便快速,故多用于生产单位质量控制分析。 微量凯氏定氮法 本法适用于各类食品中蛋白质的测定。 1.原理 食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸胺。然后碱化蒸馏使氨游离,用过量硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。反应过程分为三个阶段,用反应式表示如下。 ①消化 2NH2(CH2)2COOH 4-13H2S04一(NH。)2S04+6C02+12S0=+16H20 (NH4)2S04+2Na()H一2NH3十+2H20+。Na2S04 2NH3+4H3803—,(NH4)2 B207+5H20 ③滴定 (NH4)2 B2 07+2HCl+5H20—NH4C1+4H3803 2.仪器 ①消化炉。 ②凯氏定氮蒸馏装置。 3.试剂 所用试剂均用不含氨的蒸馏水配制。试剂均为分析纯。 ①CuS04。 ②K2SO。 ③浓H2SO。 ④2%H。BO。溶液。 ⑤混合指示剂:1份O.1%甲基红乙醇溶液与5份O.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份O.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 ⑥饱和氢氧化钠:500 g氢氧化钠加入500 mL水中,搅拌溶解,冷却后放置数日,澄清后使用。 ⑦0.01 toolI.一’或0.05 toolL叫HCl标准溶液(需用无水碳酸钠标定后使用)。 4.操作步骤 ①样品消化:精密称取O.2~2.0 g固体样品或2~5 g半固体样品或吸取液体样品5~20mI。,放人500 mI。干燥凯氏烧瓶中,加人O.2 g硫酸铜、3 g硫酸钾及20 mL浓HzSOa,于凯氏瓶口放一小漏斗,并将其以45。角斜支于有小孔的石棉网上。(更多详细咨询请参考国家标准物质网 www.rmhot.com )用电炉以小火加热,待内容物全部碳化,泡沫停止产生后,加大火力,保持瓶内液体微沸,至液体变蓝绿色透明后再继续加热微沸30 min。冷却,小心加入20 mL水,再放冷至室温,移人100 mL容量瓶中,并用少量水洗烧瓶洗液并人容量瓶,在加水至刻度,混匀备用。除不加样品外,取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸,按同一方法做试剂空白消化。 ②水蒸气发生瓶内装水至约2/3处,加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。 ③向接收瓶内加入10 mL 2%硼酸溶液及混合指示液l滴,并使冷凝管的下端插入液面下,吸取lO mI。样品消化稀释液由小玻璃杯流人反应室,并以10 mL水洗涤小烧杯使之流人反应室内,塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将3~10 mL饱和氢氧化钠溶液倒人小玻璃杯中,提起玻璃塞使其缓缓流入反应室,立即将玻璃塞盖紧,并加水于小玻璃杯中以防漏气。加紧螺旋夹,开始蒸馏。蒸汽通人反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏2~5 min,移动接收瓶,使冷凝管下端离开液面,然后用少量中性水冲洗冷疑管下端外部,再蒸馏1 min取下接收瓶,以0.01 molI.叫或O.05 molL1HCl标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。同时吸取10 mI_,试剂空白消化液按③操作。 5.计算 6。说明 ①干样用称量纸称重连纸一同消化,空白管同样放称量纸消化。 ②含糖量高和油脂高的样品消化时容易溢出,加热要缓慢。 ③氨是否蒸馏完全,可用pH试纸测试馏出液是否为碱性来判断。 ④实验前必须仔细检查蒸馏装置的各个连接处,保证不漏气。所用橡皮管、塞子须浸在氢氧化钠(10%)中,煮沸10 min,然后水洗、水煮,再用水洗。 ⑤小心加样,切勿使样品沾污凯氏烧瓶口部和颈部。
D. 列举三种氨基酸的定量分析方法,说明其工作原理。
就给你找到两种,将就着看吧..你找到了另一种,再告诉我一下
1、化学分析法——甲醛滴定法
甲醛滴定法用于氨基氮的测定, 可以测出样品中总氨基酸的含量,其原理是在中性或弱碱性水溶液中,氨基酸的α—氨基与醛类反应生Schiff碱:α—氨基酸与甲醛反应生成亚甲基亚氨基衍生物
2、分光光度法——茚三酮法
茚三酮是一种能使氨基酸生成在可见光区有吸收的衍生试剂。该方法的基本原理是经阳离子交换柱分离出的氨基酸与茚三酮混合,经加热反应后,一级胺与之生成蓝紫色化合物,二级胺与之生成黄色化合物。两种衍生物使用双通道紫外检测器同步检测,检测波长分别为570nm 和436nm。
E. 国标 氨基酸的检测方法
国家标准检测食品中的氨基酸是采用先将食品中蛋白质经盐酸水解成为游离氛基酸,经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后,与印三酮溶液产生颜色反应,再通过分光光度计比色浏定氨基酸含量。
F. 请教:氨基酸序列的测定方法
有两种方法,一是直接测序列法,常用Edman降解法,在弱碱性条件下多肽连N端氨基酸(阿尔发)与PITC反应,标记为苯氨基硫代甲酰蛋白质。肽链中的第一个肽键变弱,在无水酸的存在下发发生降解,第一个氨基酸(AA1)经过分子重排成为PTH-AA1结合层析技术即可确定氨基酸的性质。C端氨基酸残基分析,可用;羧基肽酶,肼解法;二是串联质谱测定多肽链氨基酸测序。
氨基酸(amino acid):含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称。生物功能大分子蛋白质的基本组成单位,是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。是含有碱性氨基和酸性羧基的有机化合物。氨基连在α-碳上的为α-氨基酸。组成蛋白质的氨基酸均为α-氨基酸。
G. 氨基酸的检测方法有哪些
1. 分光光度法氨基酸检测:主要是利用氨基酸与衍生剂发生化学反应,产生蓝紫色化合物,该化合物在某一波长处有最大吸收峰,根据吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生剂为茚三酮。
2. 毛细管电泳法氨基酸检测:根据分离原理的不同,可分为毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电电泳、毛细管等速电泳以及胶束电动力学毛细管电泳。其中,毛细管区带电泳和胶束电动力学毛细管电泳可用于氨基酸检测。
3. 近红外光谱法氨基酸检测:利用有机化合物的含氢基团在特定波长区域跃迁,产生光谱的变化,结合统计学方法间接地实现氨基酸的定量检测。
4. 气相色谱法氨基酸检测:将氨基酸衍生化处理变为容易气化的物质,根据气态样品中各组分在流动相和固定相中的分配系数的不同,实现对氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色谱法氨基酸检测:是最常用的一种氨基酸检测方法。由于大多数氨基酸本身没有紫外吸收和荧光反应,因此需要对样品进行衍生化处理将其转化为有紫外吸收和发射荧光的物质,衍生可分为柱前衍生和柱后衍生。
H. 食品中还有哪些方法测定游离氨基酸含量思考题
茚三酮显色法。
游离氨基酸总量测定常用方法为茚三酮显色法,氨基酸为水溶性物质,在pH为8.0的缓冲溶液中与茚三酮同时加热,可形成紫色络合物,在吸收波长570纳米处可检出光密度值,从而计算出游离氨基酸总量。
天然产的氨基酸的结构上都具有共同特点在羧基邻位α—碳原子上有一个氨基,因此称α—氨基酸。天然蛋白质由不同的α—氨基酸,通过肽键结合而成的复杂高分子化合物,结构和组成十分复杂。
(8)功能饮料氨基酸检测方法扩展阅读:
游离氨基酸测量要求规定:
1、近红外光波长介于可见区与中红外区之的电磁波,波数范围为12500~4000cm。近红外光谱(NIR)分析技术为一种间接的分析技术,通过建立校正模型对样品进行定性或者定量分析。
2、利用酶标记的抗原或酶标记的抗体作为主要试剂,通过复合物中的酶催化底物呈色反应来对待测物质进行定性或定量。
3、将生物识别元素与目标物质结合的物理传感器,具有高特异性和灵敏度、反应速度快、成本低等优点。
I. 检验氨基酸用什么方法
1.茚三酮反应,氨基酸与其发生反应缩合成蓝色物质。除开脯氨酸和羟脯氨酸,他们与其反应生成黄色衍生物。
2.桑格反应,氨基酸与其反应会生成黄色的2,4-二硝基氨基酸,可以用于鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸。
3.艾德曼反应(DNFB反应),即氨基酸与苯异硫氰酸反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸。
J. 测定氨基酸
用高相液相质谱仪可以测氨基酸含量,取标准氨基酸作标准曲线,用质谱作检测器。看有没有质谱信号,应该是没有问题,如果没有信号,则进行衍生,例如苯肼等。不同浓度标准氨基酸提取离子流图的峰面积作标准曲线。最后检测样品,计算含量。