手消毒效果检测采样方法

❶ 采集样本后如何做手部消毒

采集样本手部消毒的方法为：将 2-3毫升的溶液喷在手上无须用水冲洗，即可达到消毒净手的目的。

将消毒喷雾或消毒凝胶取于掌心，掌心相对手指合拢相互揉搓。一手握住另一手的大拇指旋转揉搓，将一手五指指尖并拢在另一手的掌心处揉搓。如手腕有露出的，需要对手腕也进行揉搓消毒。

非常时期，病毒通过飞沫和接触传播，那么更需谨慎和认真对待手部的清洁。即使穿着睡衣“自闭”在家，也请在每顿餐前、接触孩子老人和其用具前都认认真真进行手部消毒或清洗。可以因为囤不到口罩不出门，但不能因为不出门就不洗手。

(1)手消毒效果检测采样方法扩展阅读：

手部消毒的介绍如下：

如使用含酒精的消毒制品，尤其需要注意防火安全，不可进行空气消毒、大面积喷洒，也不能带上公共交通工具，以防火灾。喷雾型不含酒精的消毒剂，如熠洁康消毒剂喷雾型则还可以对家中、办公场所、公共场所等地面。

病毒学国家重点实验室联合研制的熠洁康消毒剂，可杀灭病毒、细菌和芽孢，且可以直接接触皮肤发挥作用。这些含消毒剂的免洗洗手液都可以让致病菌快速地丧失活性，无法起到致病作用。

❷ 消毒测试方法

目前检测多仍采用一些条件致病菌为间接指标。肠道传染病以大肠杆菌为指标，呼吸道传染病以溶血性链球菌为指标。肝炎病毒近年表面抗原，DNA聚合酶以及电镜观察，甲肝病毒分离等为指标。医|学教育网搜集整理如消毒前后均未检出大肠杆菌或溶血性链球菌，则可以消毒后自然菌总数率低的百分率评价，消毒后自然菌总数下降80%以上为效果良好，降低70%为较好。减少60%以上为一般，减少60%以下为不合格。
具体检查方法：
1.物品表面检查
在消毒物品相邻部位划出2个10cm2范围，消毒前后别以无菌棉签采样，接种后培养24～48小时观察结果。
2.排泄物检查
消毒前后各取0.2ml排泄物的稀释液接种肉汤管，医学教|育网搜集整理37℃培养24小时后再取样转种相应的培养基，24～48小时后观察结果。
3.空气消毒效果检查
一般用自然沉降法。消毒前后在消毒的空间不同平面和位置。放置4～5个平面，暴露5～30分钟后盖好，培育24～48小时观察结果。

❸ 如何进行手的微生物监测采样

用无菌棉签在手上采样,再涂抹到灭菌好的固体培养皿上,做好记号,生物试验书上有呀,以前还做过这样的试验,具体步骤要看书了.

❹ 外科手消毒监测的细菌菌落总数是多少

外科手消毒：监测的细菌菌落总数应≤5cfu／cm2。卫生手消毒：监测的细菌菌落总数应≤10cfu／cm2。

手卫生采样方法、采样时间：在接触患者、进行诊疗活动前采样。采样方法：被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；

将棉拭子接触操作者的部分剪去（建议采用采样拭子与帽盖接合在一起的运送培养基管），投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。

(4)手消毒效果检测采样方法扩展阅读

3．1手卫生handhygiene

为医务人员洗手、卫生手消毒和外科手消毒的总称。

3．2洗手handwashing

医务人员用肥皂（皂液）和流动水洗手，去除手部皮肤污垢、碎屑和部分致病菌的过程。

3．3卫生手消毒antiseptichandrubbing

医务人员用速干手消毒剂揉搓双手，以减少手部暂居菌的过程。

3．4外科手消毒surgicalhandantisepsis

外科手术前医务人员用肥皂（皂液）和流动水洗手，再用手消毒剂清除或者杀灭手部暂居菌和减少常居菌的过程。使用的手消毒剂可具有持续抗菌活性。

3．5常居菌residentskinflora

能从大部分人体皮肤上分离出来的微生物，是皮肤上持久的回有的寄居菌，不易被机械的摩擦清除。如凝固酶阴性葡萄球菌、棒状杆菌类、丙酸菌属、不动杆菌属等。一般情况下不致病。

❺ 消毒效果如何检测

实施有效的消毒措施以杜绝和降低环境中的病原体、切断传播途径，是控制目前冠状病毒转播的重要措施之一。为巩固防控成果，规范和强化各行各业做好消毒质量控制和消毒效果评价，保证消毒效果，国家卫健委发布《新冠肺炎疫情期间现场消毒评价标准》等3项推荐性卫生行业标准。

消毒效果检测标准

GB15982-2012《医院消毒卫生标准》

WS310.3-2009《医院消毒供应中心第3部分:清洗消毒及灭菌效果监测标准》

GB15981-1995《消毒灭菌的方法及评价标准》

GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》

消毒效果评价单位

中科检测

开展现场消毒效果评价，实验室检测能力已涵盖市场上所有消毒产品所涉及的国家标准和行业标准，能通过国际通行标准，为市场紧缺的低温消毒剂和冷库专用消毒设备提供测试和效果鉴定，具备灭活技术先进、质量数据可靠、检测能力强等特点，是国内消毒领域综合检测实力强的检测机构之一。

消毒效果评价对象

• 消毒剂消毒效果评价：邻苯二甲醛、戊二醛、过氧乙酸、二氧化氯、酚类、胍类、季铵盐类、醇类、含溴、含碘消毒剂等；

• 消毒机消毒效果评价：臭氧、紫外、等离子空气消毒机。

疫情肆虐，消毒是控制感染的重要环节，消毒的成功与否直接影响公众或患者的安全，消毒效果检测是检验消毒效果的重要措施。

消毒效果检测

❻ 归纳概括细菌检验方法

10种常用的细菌检测方法

一、[3H]脱氧胸苷摄入法测定细胞数：
1、用RPMI-1640培养液洗涤对数生长期（培养3天）的CTLL-2细胞两次，每次250×g离心10分钟，洗去培养液中残存的IL-2。
2、用台盼蓝（1% Trypan blue）染色法计数细胞并决定细胞的活力，用10%小牛血清的RPMI-1640培养液悬浮细胞至1×105/ml。
3、在96孔细胞培养板中每孔加0.1ml倍比稀释的标准IL-2或待测样品，每个稀释度三个复孔，标准IL-2从40 IU/ml稀释到0.019 IU/ml（8～10个稀释度），阴性对照孔不加IL-2。
4、每孔加0.1ml细胞悬液，在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养18～24小时。每孔加10μl（0.5μCi或1.85×104Bq）[3H]脱氧胸苷，继续培养4小时。
5、用多头细胞收集器将细胞收集到玻璃纤维滤纸上，用3%醋酸水溶液滤纸3次，洗去游离的[3H]TdR。将滤纸置液体闪烁瓶中，加入5ml闪烁液。在液体闪烁仪上计数细胞摄入的同位素活性（每分钟放射性计数，cpm），根据仪器效率换算成dpm（每分钟衰变数）。
6、用dpm值对样品稀释倍数作图。在图上，标准IL-2的曲线与待测样品的曲线应当呈平行的S型，说明是同样的分子反应。比较同样dpm处的不同稀释倍数，决定待测样品的相应浓度。
二、MTT检测法：
1、取96孔细胞培养板，每孔中加0.1ml含2×104～10×104靶细胞的培养液（含10%小牛血清的RPMI-1640培养液），在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养2～3小时让细胞帖壁（如果是悬浮细胞可直接进行下一步）
2、用RPMI-1640培养液2～10倍递次稀释细胞因子标准品，根据情况2～5倍递次稀释待检样品，每孔加0.1ml稀释的标准品和待检样品，每个稀释度3个重复孔。对照孔6个：3个阳性对照孔，每孔加0.1ml含大剂量细胞因子的RPMI-1640培养液，3个阴性对照孔，每孔加0.1ml RPMI-1640培养液。在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养24～48小时或预定的时间。
3、吸去培养液，用PBS洗涤一次（如为悬浮细胞，应在吸去上清液前离心培养板）。
4、每孔加0.1ml PBS和10μl MTT染液，在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养4～6小时。
5、每孔加0.1ml酸化异丙醇，也可用含10% SDS的10mmol/L HCl代替酸化异丙醇，在振荡器上振荡混匀，让还原产物充分溶解。置酶联检测仪上测定光密度（OD）值，检测波长570nm，参考波长630nm。以OD值对样品稀释度作图，比较标准曲线和待测样品曲线即可求得待测样品中细胞因子的含量。
三、XTT检测法：
用XTT代替MTT可省去溶解还原产物结晶的步骤，XTT可以被活细胞中的代谢酶还原成黄色水溶性的代谢产物（formazan）。代谢产物在OD450处有吸收峰。
四、MTS检测法：
1、培养IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞或HT-2细胞（检测IL-2），或者IL-3依赖细胞株FDC-P1细胞或FL5.12细胞（检测IL-3）到对数生长期。
2、取96孔细胞培养板，每孔加0.1ml含1×104～2×104上述细胞之一的DMEM培养液（加10%小牛血清）。
3、每孔加0.1ml系列稀释的待测细胞因子（IL-2或IL-3）样品或细胞因子标准品，在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养24小时。
4、每孔加20μl MTS/PMS混合液，继续培养3～4小时显色。
5、检测前摇晃培养板10秒钟，混匀颜色。在酶联检测仪上，波长570nm（或490nm，或570nm和690nm）处检测各孔的光吸收值（OD）。用样品稀释度对OD值（OD570、OD490或OD570/OD690）绘制剂量-反应曲线，根据标准品曲线计算样品中细胞因子的量。
五、NAG检测法：
1、按MTT检测法培养细胞和用不同稀释度的细胞因子处理细胞。
2、吸去培养液，用PBS洗涤两次（如为悬浮细胞，应在吸去上清液前先离心）。
3、每孔加60μl NAG染液，在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养4小时。
4、每孔加90μl终止液，混匀后置酶联检测仪上测定光密度（OD）值，检测波长402nm。以OD值对样品稀释度作图，比较标准曲线和待测样品曲线即可求得待测样品中细胞因子的含量。
六、AlamarBlueTM摄入法：
1、按MTT检测法培养细胞和用不同稀释度的细胞因子处理细胞。
2、在培养结束前24小时加入Alamar Blue染料，96孔细胞培养板每孔20μl。
3、在培养结束后，直接在酶联检测仪上测定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收在570nm，用OD570减去OD600即为活细胞还原的Alamar Blue染料，颜色深浅与活细胞数成正比。
七、碱性磷酸酶检测法（AKP法）：
1、按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间，用PBS洗去死亡细胞，洗两次。
2、向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液（0.2mol/L 硼酸，1mmol/L MgCl2，1.2mmol/L甲伞基磷酸）。在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养3小时。
3、在荧光计数仪上测定荧光的量。根据测定已知不同数目细胞的荧光量作出标准曲线，根据标准曲线可得到各孔中的活细胞数。
八、三磷酸腺苷检测法（ATP法）：
1、ATP反应液（Bio-Orbit）是粉末状混合物，含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在－20℃长期保存。
2、在已经完成促增殖或抑生长试验后的96孔细胞培养板中（每孔含100μL细胞培养液），每孔加0.1ml ATP释放因子，室温中反应5分钟。取另一块96孔细胞培养板，从第一块板的各孔中吸0.1ml细胞溶解物到第二块板的相应各孔。
3、在低于25℃中，将第二块板置自动多孔荧光检测仪中。用自动加样器，每孔加入20μl ATP反应液，立即检测10秒钟的荧光强度。温度升高，检测敏感性就下降。
4、用RLU（Y轴）对细胞因子标准品的稀释度（X轴）作标准曲线，根据标准曲线确定待测样品中细胞因子的含量。
九、染料染色法测定细胞数：
1）结晶紫检测法：
1、在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-164细胞的培养液（含10%小牛血清的RPMI-1640培养液），37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁。
2、用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品，根据需要3～5倍递次稀释待检样品，每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品，每个稀释度3个重复孔。对照孔6个，3个阳性对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培养液，3个阴性对照孔各加100μl RPMI-1640培养液。继续培养18～24小时。
3、甩去培养液，用PBS小心洗涤一次，每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定细胞30秒钟。
4、吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml结晶紫染液，室温中放置20分钟。
5、轻轻甩去染色液，用蒸馏水洗涤各孔，将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。
6、测定前，每孔加0.1ml 33%醋酸脱色，充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度（OD）值对样品稀释度作图，比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活性
2）NBB检测法：
1、在用细胞因子处理靶细胞以后倾去培养液，倒置培养板于吸水纸上吸干培养液。再用100μl磷酸缓冲盐水小心洗去死细胞，用吸水纸吸干培养液。
2、每孔加100μl NBB染液，室温中染色30分钟。轻轻染液。用吸水纸吸干染液。</P< p>
3、每孔加100μl福尔马林固定液固定15分钟。用自来水轻轻洗去固定液，倒置培养板，用吸水纸吸干染液。
4、每孔加150μl 50mmol/L氢氧化钠。轻轻振荡培养板直到染料全部溶解并均匀分布。在分光光度计上读取各孔在620nm处的光密度（OD）值。计算TNF的活性。
3）美蓝染色检测法：
1、用细胞因子处理靶细胞，在含100μL细胞培养液的检测孔中，每孔加0.02ml 25%戊二醛固定活细胞15分钟，用自来水缓缓洗去死细胞和固定液。
2、每孔加0.1ml 0.05%美蓝染液，染色20分钟，用自来水缓缓冲净染液，晾干。
3、每孔加0.2ml 0.33mol/L盐酸溶解美蓝，振荡混匀。在665nm波长处测定光吸收度。计算TNF的活性。
4）中性红染色检测法：
1、用细胞因子处理靶细胞，在含100μL细胞培养液的检测孔中，每孔加50μl 5%中性红染液。继续培养2小时。
2、小心倒去培养液。用200μl Hanks液洗涤细胞1次。小心倒去培养液，减少细胞丢失。
3、每孔加100μl脱色液，在摇床中轻轻摇晃溶解30分钟。在550nm波长处测定OD值。
十、直接计数细胞：
1、如果靶细胞是帖壁细胞，在细胞因子作用适当时间后，用生理盐水洗去死亡细胞，用0.25%胰蛋白酶液消化细胞。加适量生理盐水吹打，使细胞分散成单个细胞。直接在血细胞计数板上计数细胞。
2、如果靶细胞是悬浮细胞，则需要用染色剂区分死细胞和活细胞然后再计数。通常用台盼蓝染色细胞，活细胞可以排除进入细胞的台盼蓝而不着染，死细胞着染呈深蓝色。
3、计数血细胞计数板上4个大方格中的全部活细胞，按下式计算活细胞数：活细胞数（个/ml）＝计数的全部活细胞数×10 000×2×1/4。

❼ 医疗机构消毒效果监测时,如何对物表进行采样

摘要 手卫生效果的监测方法 1．采样时间在接触患者、进行诊疗活动前采样。 2．采样方法被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱水液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指跟到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉试子放入装有10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。 细菌菌落数总数计算方法： 细菌菌落总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×稀释倍数/采样面积（cm2）3．手消毒效果应达到如下相应要求： a）卫生手清毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2 b）外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝ 2 空气消毒效果的监测方法 1、采(全文还有577字)

❽ 内镜消毒效果监测采样方法有哪些

4.1消毒内镜采样
4.1.1采样方法：
4.1.1.1监测采样部位为内镜的内腔面。
4.1.1.2 用无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集。及时送检。
4.1.2 菌落计数：将送检液用漩涡器充分振荡，取0.5ml，加入2只直径90mm无菌平皿，每个平皿分别加入已经熔化的45℃-48℃营养琼脂15ml-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，于35℃培养48小时后计数。
4.1.3 计算：两平皿平均菌落数×20
4.2灭菌内镜及附件
4.2.1腹腔镜、宫腔镜、膀胱镜、关节镜、脑室镜等。
4.2.2 内镜附件：活检钳、细胞刷、切开刀、导丝、碎石器、网篮、造影导管、异物钳等。
4.2.3采样地点：生物安全柜、手术室、无菌室等。
4.2.4采样方法：用无菌棉拭子涂抹后，剪去手接触部分，放入10ml采样液的试管中。及时送检，2小时内检测
4.3致病菌检测：将送检液用漩涡器充分震荡，取0.2ml分别接种90mm血平皿、中国兰血平皿和SS平皿，均匀涂布，35℃培养48小时，观察有无病菌生长。
4.4增菌：SCDLP（金葡、铜绿假单胞）、 葡萄糖肉汤（乙型溶血性链球菌）、SF（亚硒酸盐增菌液）、GN（志贺氏增菌液）、乳糖胆盐发酵管。
4.5致病菌：金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌。
5. 结果判定
5.1消毒后的内镜合格标准为：细菌总数<20cfu/件，不能检出致病菌；
5.2灭菌后内镜合格标准为：无菌检测合格。
5.3 内镜结构复杂,关节多、孔道细长 (2--6英尺，直径 几毫米)，
5.4.使用时, 易沾挂血液、黏液、组织、排泄物等。
5.5.胃镜在应用后，可有105-1010cfu/mL的生物负载。
5.6.支气管镜在清洗前, 平均负载为6.4×104cfu/mL。

❾ 卫生手消毒效果监测标准是什么

卫生手消毒效果应达到的要求是细菌数应≤10cfu/cm2。

卫生与消毒是两个不同的却是紧密相连的概念。卫生是指用机械的方法，如用打扫、冲洗等，使养鸡场的鸡舍、运动场、通道等保持清洁卫生，做到无粪便、无分泌物、无杂草杂物、无污水等。

因为这些灰尘、粪便、污水污物等往往混有病原微生物和寄生虫卵，极易造成疾病的发生和传播。在打扫后实现清洁卫生的情况下，再进行消毒，这样才能提高消毒的效果和达到消灭病原体的目的。

因为有机物的存在，不仅能阻断消毒药物对病原体的作用，还能降低消毒药的药效，甚至使消毒药发生化学反应而失效。

正确的消毒方法：

1、居室消毒。

将84消毒液大约按照1:24的比例兑水，消毒的时间大约要30分钟左右。消毒的方法可以利用擦拭、喷洒或者拖洗的方式，在消毒后还要用清水进行洗净。使用时带上口罩和橡胶手套，可以大大降低化学物质的危害。

2、餐具消毒。

水开后放入餐具煮15~20分钟即可。但煮时一定要记住水一定要漫过所煮的餐具。此法既简便又安全。如果是病毒性肝炎患者用过的食具，可以煮20~30分钟。

❿ 卫生手消毒效果达到:监测的细菌菌落总数不高于多少

卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2，外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2

采样方法：被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的棉拭 子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。

(10)手消毒效果检测采样方法扩展阅读

保证卫生手消毒的效果：速干手消毒剂取液要足量确保湿润揉搓；消毒剂要全手覆盖确保不留死角；揉搓步骤同流动水洗手确保消毒效果；

揉搓至消毒剂彻底干燥确保消毒时间。当手部有明显污染时应选用流动水洗手；当手部无明显污染时宜选用卫生手消毒。