抗dsdna常用的检测方法

A. 你好啊，想向你咨询些问题

你好！

“封闭抗体”的问题，我们暂且不论。

先述说你的这个问题：“我就是不明白为什么查那个自身抗体的抗双链时,按数值查时数值又会高,但在免疫内科查又是阴性,这是什么原因呢? ”
我的回答：不同的地方查抗dsDNA（双链）抗体的方法是不一样的。每个方法的敏感度和特异度也有差别。这样，针对同一份病人的样本进行检测，就可能会得出不同的结果。针对这种情况，建议采用可信度更高的方法进行检测确认。

总之，检查结果仅仅是个参考，我们要辨证看待。

最后说句，根据你的情况，我认为你的自身免疫状况是正常的。因为：“免疫全套十二项,除了免疫球蛋白M高出正常值两倍,补体C小了一点点.其他都正常”。

好了，祝你健康，早日怀上并产下健康可爱的宝宝！

B. 如何正确理解自身抗体实验室检测结果

1. 自身抗体滴度与疾病的相关性 有些自身抗体是高特异性指标。如抗Sm抗体对SLE、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体对AIH等，一旦出现阳性（即使是低滴度）， 基本上就可做出诊断。但如果这些指标为阴性，也不能排除相关疾病的存在。相反有些指标虽然在疾病中的阳性率比较高，但特异性差，在很多疾病甚至健康人群中均可出现阳性（如ANA），这种抗体只有在高滴度时，才对相关疾病有诊断意义。自身抗体的滴度不仅对疾病诊断非常重要，并且有些抗体的滴度(如抗dsDNA抗体)与疾病的活动度密切相关，可用于疗效和病程监控。 2. 关于抗核抗体(ANA)的滴度范围 检测ANA的标准方法为间接免疫荧光(IIF)法，最好用Hep-2细胞和灵长类肝冰冻组织切片作为检测基质。我科实验室采用的是 德国欧蒙公司Hep-2/猴肝检测ANA间接免疫荧光试剂盒。其起始稀释度为1:100，滴度超过1:320时，则提示自身免疫性疾病。由于不同检测系统的起始稀释度和滴度系统不同，检测到的滴度数值不能直接进行比较。对ANA的结果不仅要关心其定性和滴度结果，同时还应了解所用检测系统的实验基质和起始稀释度（正常参考范围）。我科实验室ANA (IIF)的临界值(起始稀释度)为1:100。 在正常人群中ANA阳性率3-15%，抗体滴度较低，在年龄大于60岁的正常人群中ANA阳性率可高达10-37%。 ANA滴度及临床意义如下： ANA滴度 荧光强度 临床意义 <1:100 - ANA阴性，血清标本中未检出抗核抗体。 1:100 (+) 可疑阳性，继续追踪观察。少数正常人群也可能阳性。 1:320 + 弱阳性，提示可能存在相关疾病。极少数正常人也可能阳性。 1:1000 ++ 中等阳性，提示可能存在相关疾病。 1:3200 +++ 强阳性，高度提示存在相关疾病。 1:10000 ++++ 很强的阳性，高度提示存在相关疾病。 3. 自身抗体检测方法对结果的影响 不同的检测方法对实验结果有一定影响，如抗dsDNA抗体检测常用的方法有ELISA、放射免疫分析法和间接免疫荧光法(IIF)。这 三种方法所能检测的抗体的亲和力差别很大，放射免疫法的特异性最高，IIF次之，ELISA较差。因此ELISA检出抗dsDNA阳性时，应用其它方法确认。 4. 自身抗体流行病学资料的积累 在IIF检测时，很多荧光模型相对应的靶抗原尚不清楚，且这些荧光模型的临床意义不明确。随着对自身免疫性疾病及其相关自 身抗体研究的深入，越来越多的以前认为没有临床意义的抗体成为新的研究焦点。因而对于这些结果，实验室也应该报告，以引起临床的重视，通过临床和实验室的共同努力，不断积累这些荧光模型的流行病学资料。 5. 为何患者ANA阳性，却无明显临床症状？ ANA阴性结果提示患者体内不存在抗核抗体。若患者仅仅出现ANA阳性结果而无其他临床表现或指征，则并不提示自身免疫性疾 病。主要原因如下： 1）ANA在健康人群中的阳性率约为3-15%，而且ANA的产生与患者的年龄相关，年龄在65岁以上的健康人群ANA阳性率可高达1 0-37%。另外健康人群在感染病毒的情况下，也可能出现ANA阳性，但这些抗体多为短暂出现。 2）一些药物治疗可能引起ANA阳性。因此ANA阳性需结合患者用药情况综合判断。 3)一些特殊疾病（如肿瘤）也可能导致ANA阳性。
目前已有的研究表明，自身抗体往往早于临床症状出现。对于SLE患者而言，至少有一种以上SLE相关自身抗体在临床诊断前即 已出现（最早达9.4年前，平均为3.3年），而且抗体与疾病特异性越高，出现的时间越晚。另外，随着SLE病情进展，抗体产生的数量逐渐增加（见参考文献[1]）。 6. 如何认识间接免疫荧光法ANA阴性，而印迹法靶抗原（SSA、Jo-1、M2、和dsDNA等）结果阳性的实验结果？ 客观上不同的检测方法学之间存在敏感度和特异性的差异。因此针对上述问题应根据靶抗原的实际结果，进行具体情况具体分析。 1）由于SSA和Jo-1抗原在真核细胞中的表达量不高，而且细胞固定剂对于抗原结构也可能产生影响，因此基于培养细胞作为基 质的间接免疫荧光法绝非抗SSA和Jo-1抗体的最佳检测方法（见参考文献[2]）。 2）抗线粒体M2抗体对PBC疾病的诊断具有良好的敏感性和特异性。有研究表明临床明确诊断的PBC患者样本，即使应用大鼠肾 检测抗线粒体M2抗体也可能出现荧光法阴性而重组抗原方法阳性的结果（见参考文献[3]）。 3）对于dsDNA抗体临床检测，由于不同实验体系中所应用的抗原来源不同、抗原呈现形式不同以及反应条件不同等因素的影响， 因此不同实验方法学之间的结果并不具备可比性（见参考文献[4]）。 7. 单独出现Ro52抗体阳性是否具有临床意义？ 目前已有的研究表明，抗SSA抗体主要提示干燥综合症、SLE和新生儿红斑狼疮等疾病。但Ro52抗体在许多疾病中（如风湿性疾 病、感染性疾病和自身免疫型肝病等）均有一定的发生率，因此单独Ro52抗体阳性结果缺乏疾病 ，需结合其他检测指标或临床症状综合判断。例如自身免疫性肝炎患者出现SLA/LP抗体和Ro52抗体同时阳性，则提示患者病情较重、预后较差。

C. anti-dsDNA是什么

抗双链DNA抗体

抗双链DNA抗体又称为抗天然DNA抗体，是抗核抗体的一种类型，几乎所有红斑狼疮病人都有该抗体的升高。目前认为，它在红斑狼疮的发病中起一定的作用，在一些病人中，DNA的大分子可存在于循环血液中或者粘附于多种器官的微血管上，如肾脏、肺和脑组织，与血液中的自身抗体结合，形成循环免疫复合物，导致组织损伤。目前抗双链DNA抗体多见于狼疮性肾炎中，约50％以上的狼疮性肾炎病人循环血液中的DNA浓度较正常健康人高。但为什么会增高，如何增高，目前还不得而知，相信随着科学的发展，这些难题可逐步得到解决。
一般认为抗双链DNA的效价与病情相平行，即病情活动时，抗DNA抗体效价升高，病情缓解时，效价降低。由于各地测定的方法不同，所以正常值也不同，一般来说，结合率要大于20％以上才有临床意义。

欢迎采纳 希望帮到你

D. 目前采用间接免疫荧光法检测患者血清中的dsDNA的最佳基质是

正确答案:A
解析：目前用于检测患者血清中的dsDNA的最佳方法是用马疫锥虫或绿蝇短膜虫作为基质进行间接免疫荧光法，因为这些血鞭毛寄生虫的虫体呈圆形或椭圆形，其动基体由纯净的环状dsDNA构成，除此以外通常不含有其他细胞核抗原
。能与动基体反应的自身抗体只有抗dsDNA抗体，故具有高度特异性
。

E. 核小体的检测技术

许多不同的技术已被用于检测AnuA，除了LE细胞试验以外，还有染色质包被的串珠乳胶凝集试验，以及免疫沉淀（用天然组织蛋白重组酸萃取的组织部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脱氧核苷蛋白”作抗原研制出一种孵育在1M生理盐水中的染色质中的预备品，但未得到明确鉴定。后期报道已有更好的方法来鉴定该预备品，并能分析凝胶电泳后的蛋白质和DNA的组成。染色质的类型分析以及阴、阳性判断对于辅助诊断SLE患者而获取高敏感性和特异性是非常重要的。第一种研究用于以变性的H2A和H2B作为抗原进行DNA再造，由血清结合上组织蛋白的变性区域，即天然染色质非暴露部分；第二种研究用于整条染色质作为抗原，剩余的Scl70蛋白引起抗Scl70，血清在此情况下产生弱阳性；第三种研究用于一个阴、阳性的弱的（低的）判断（硬皮患者血清呈现弱阳性）。第一代与第二代核小体检测技术的比较通过对SLE组（96例）、患者对照组（73例）、正常对照组（47例）进行AnuA和抗dsDNA抗体的检测，采用由德国EUROIMMUN公司生产的试剂盒和美国Coda公司生产的全自动酶标分析仪检测。结果表明，EUROIMMUN推出的第二代抗核小体抗体ELISA检测试剂与第一代比较敏感度差异不大，但特异性却有了明显提高。早期因核小体抗原纯化制备方法存在技术上的问题，纯化的核小体抗原常含有H1、Scl70(DNA拓扑异构酶I，一种DNA结合蛋白）、残留的染色质DNA和其他非组蛋白等蛋白成分，导致多种结缔组织病患者血清与核小体抗原交叉反应，尤其是在10%～68%的硬皮病患者中也可检测出AnuA，使得该抗体作为SLE特异性抗体的临床应用价值得到了很大的限制；而第二代AnuAELISA试剂在抗原的制备上有了很大的改进，抗原分离纯化技术提高，纯化的核小体抗原制品只含核小体单体，不含以上提到的DNA和组蛋白等杂质成分，可排除硬皮病患者血清假阳性反应，这样就使得AnuA对SLE的诊断价值得到了充分的发挥，极大提高了AnuA对SLE的特异性，已开始应用于临床常规检测。

F. 抗dsDNA抗体是什么

抗U1RNP或者抗SS-A抗体等多种抗体。

抗dsDNA抗体这是一种自身抗体，通常见于系统性红斑狼疮患者病情活动期。这个抗体对于红斑狼疮诊断的敏感性和特异性都是非常高的，通常不会见于其他结缔组织病。因此是可以预示系统性红斑狼疮用户病情活动的，而且随着狼疮患者病情的控制，抗双链DNA抗体是完全可以转为阴性的。

系统性红斑狼疮患者在体内会存在大量的自身抗体，以抗核抗体为代表，还会包括其他抗体，抗双链DNA抗体只是其中的一种而已，另外也会出现抗U1RNP或者抗SS-A抗体等多种抗体。

(6)抗dsdna常用的检测方法扩展阅读：

注意事项：

1、抗dsDNA抗体是一种诊断系统性红斑狼疮的实验室指标，一般需要抽血才能测定含量，对于他的印象因素，不必过分担心，只要仪器没问题，一般的检查结果没多大问题。

2、对抗dsDNA的检测结果应结合临床分析，必要时应动态观察。

3、鉴于检测试剂中DNA抗原的来源不同，碱基组成和顺序可能有一定差异，使抗体结合的表位发生变化。

G. 抗双链dna(抗dsDNA)<100是什么意思高还是低

近年来低分子肝素(LMWH)在妇产科及生殖领域的应用越来越广泛，尤其在某些反复自然流产(RSA)患者的治疗方面疗效肯定，在生殖医学领域如反复种植失败(RPF)、反复生化妊娠(RBP)治疗方面也取得了一定的进展。但由于缺乏相应的规范，LMWH的临床应用存在不恰当、过度使用现象。
低分子肝素(LMWH)是一类高效、相对安全的糖类抗凝剂。为了进一步指导和规范LMWH在自然流产防治中的应用，妇产科学、生殖医学、风湿免疫病学以及药理学等领域的相关专家根据国内外的研究进展，结合我国的实际情况，针对LMWH防治自然流产的适应证、剂量、疗程、监测等方面进行了充分讨论，并制定了该共识。
共识指出LMWH用于防治自然流产的适应证主要是抗磷脂综合征(APS)、易栓症(PTS)、自身免疫性疾病(AID) 等。依据病情，LMWH使用剂量有预防剂量和治疗剂量。

对于不明原因的反复自然流产(URSA)、反复生化妊娠(RBP)和反复种植失败(RPF)患者使用LMWH能否改善妊娠结局尚缺乏依据，尚无足够的临床证据显示增加LMWH剂量能增加血β-人绒毛膜促性腺激素(hCG)水平。

对于合并高血压、糖尿病、慢性肾脏疾病等病程较长、有可能存在血管内皮损伤的反复自然流产(RSA)患者，可以适当应用LMWH，但疗效有待进一步临床验证。临床上应避免超适应证和超大剂量使用。
‘简介’
●近年来低分子肝素(LMWH)在妇产科及生殖领域的应用越来越广泛，尤其在某些反复自然流产(RSA)患者的治疗方面疗效肯定，在生殖医学领域如反复种植失败(RPF)、反复生化妊娠(RBP)治疗方面也取得了一定的进展。但由于缺乏相应的规范，LMWH的临床应用存在不恰当、过度使用现象。
鉴于此，本刊成立了由妇产科学、生殖医学、风湿免疫病学以及药理学等领域的相关专家组成的专家组，就国内外的研究进展，结合我国的实际情况，共同讨论制定“低分子肝素防治自然流产中国专家共识”，旨在对于LMWH用于防治自然流产方面给出指导意见，进一步规范LMWH在自然流产防治中的应用。

1.LMWH概述
●LMWH是普通肝素(UFH)通过酶或化学方法解聚而产生的由12~18个糖单位组成的葡糖胺聚糖，相对分子质量<8000，平均相对分子质量为4000~5000。LMWH的药理学作用是通过与抗凝血酶Ⅲ (AT-Ⅲ)结合，抑制凝血因子Xa活性，从而快速抑制血栓形成，但不影响血小板聚集和纤维蛋白原与血小板的结合。
LMWH与UFH的作用机制相似，但LMWH比UFH具有更多的优点。由于相对分子质量不同，LMWH和UFH具有不同的抗凝血因子Xa/抗Ⅱa比值活性。研究表明，UFH的抗凝血因子Xa/抗Ⅱa比值为1︰1；依据相对分子质量大小，LMWH的抗凝血因子Xa/抗Ⅱa比值为2︰1~4︰1(美国药典推荐比值2.5)。

由于减少了对凝血因子Ⅱa的抑制作用，LMWH在达到有效抗凝作用的同时，降低了出血风险。LMWH较少与血小板及血小板因子4(PF4)结合，不易引起肝素诱导的血小板减少症(HIT)。LMWH不与血浆非特异性蛋白结合，具有更稳定的量效关系。LMWH的生物利用度达90% 以上。

LMWH在体内主要通过肾脏代谢，但其相对分子质量较大，可携带较多的负电荷，因此也可通过网状内皮系统清除，降低对肾脏的负担。皮下注射LMWH后，峰值浓度时间为3~5h，半衰期为3~7h；LMWH不通过胎盘，亦不分泌于乳汁中。美国食品与药品管理局(FDA)将其定为妊娠期B类药物。

●LMWH主要用于静脉血栓栓塞症(VTE)的预防和治疗，LMWH适应证：
◆预防和治疗深静脉血栓及肺栓塞；
◆预防血液透析时血凝块的形成；
◆治疗不稳定型冠状动脉疾病；
◆预防与治疗手术有关的血栓形成；
◆治疗弥散性血管内凝血；
◆预防和治疗各种原因引起的血栓前状态(PTS)等。
●LMWH禁忌证：
◆LMWH或UFH过敏；
◆不能控制的活动性出血；
◆有出血性疾病及凝血机制障碍；
◆外伤及术后活动性出血；
◆急性感染性心内膜炎；
◆消化道溃疡；
◆严重肝肾功能不全。
●常用的LMWH有那屈肝素钙、达肝素钠和依诺肝素钠等。LMWH使用剂量有预防剂量和治疗剂量2种。预防剂量如那屈肝素钙注射液 2850IU (0.3mL)皮下注射，qd，或达肝素钠注射液5000IU (0.5mL)皮下注射，qd，或依诺肝素钠注射液4000IU (0.4mL)皮下注射，qd；治疗剂量如那屈肝素钙注射液0.01mL/kg (95IU/kg)皮下注射，q12h，或达肝素钠注射液100IU/kg皮下注射，q12h，或依诺肝素钠注射液100IU/kg皮下注射，q12h。
如果无近期血管栓塞表现或相关病史，推荐使用预防剂量；对有近期血管栓塞表现或相关病史的患者则推荐使用治疗剂量，超剂量使用LMWH会增加出血的风险。
2.LMWH在生殖医学领域的应用
●由于LMWH具有高效的抗凝作用，且不良反应小、安全性高。近年来，LMWH在生殖医学领域的应用日益增多，尤其是用于RSA的治疗。
目前LMWH被公认为是治疗由抗磷脂综合征(APS)、PTS、自身免疫病等引起RSA的有效药物。近年来有研究表明，LMWH除具有抗凝作用外，还具有免疫调节及其他非抗凝益处，如抑制抗磷脂抗体(APL)产生的免疫反应，促进滋养细胞的增殖、侵袭及分化，抑制滋养细胞凋亡，保护血管内皮，促进胎盘形成等，因此也有将LMWH用于不明原因RSA、RPF和RBP治疗的报道，从而使LMWH在生殖领域的应用日趋广泛。
但由于缺乏相应的规范，我国LMWH在防治自然流产中的应用存在一些不恰当治疗现象。一方面是过度保守，即使患者有明确的使用指征，由于担心出血或对胚胎的影响不敢使用；另一方面是无明确指征用药，把LMWH当作常规的保胎药物，甚至通过监测血β-人绒毛膜促性腺激素(hCG)水平来调整LMWH的使用剂量。

尽管体外研究表明，在一定的浓度范围内，随LMWH浓度的增加，滋养细胞的增殖和迁移能力也逐渐增加。但也观察到再继续增加LMWH浓度，滋养细胞的增殖和迁移能力反而有下降趋势，β-hCG的分泌水平并没有随着LMWH浓度增加而进一步增加。
通过监测血β-hCG的分泌水平来调整LMWH的剂量缺乏依据，盲目增加LMWH剂量将增加出血的风险。因此，有必要就LMWH防治自然流产的适应证、剂量、疗程、监测等方面进行规范。

3.LMWH防治RSA适应症
RSA是指连续发生≥2次自然流产者，发生率为5%左右，且随着流产次数的增加再发流产的风险也明显增加。RSA病因复杂，已知的病因主要包括自身免疫异常、PTS、内分泌因素、解剖因素、母体和胚胎染色体( 基因) 异常等，临床上仍有30%~40%的患者流产原因不明，称为不明原因复发性流产(URSA)。
目前研究表明，URSA可能与母-胎免疫耐受失衡有关，因此也称URSA为同种免疫型RSA。RSA的治疗主要是根据病因进行针对性开展。APS、PTS及自身免疫疾病所致的RSA使用LMWH治疗能明显提高再次妊娠的活产率，改善妊娠结局。合并APS、PTS以及自身免疫疾病的RSA治疗方法首选LMWH抗凝治疗(或联合使用阿司匹林治疗)。最近有研究报道，使用LMWH 能改善URSA、RBP、RPF患者的妊娠结局，因此有人建议对于URSA、RBP、RPF也可以考虑使用LMWH。
但由于缺乏大样本的研究证据，使用LMWH治疗URSA、RBP、RPF的疗效尚存在争议；对于合并高血压、糖尿病、慢性肾脏疾病等病程较长、有可能存在血管内皮损伤的RSA患者，可以适当应用LMWH，但疗效有待进一步临床验证。

●3.1 LMWH在合并PTS的RSA中的应用
PTS是指血液成分发生某些病理变化，使得血液呈高凝状态，从而易于形成血栓的一种病理状态。根据发病原因，PTS可分为获得性和遗传性两大类。PTS严重者可发生全身血管血栓形成，导致器官功能障碍，如发生在妊娠期则可导致子宫螺旋动脉或绒毛血管微血栓形成，甚至形成多发性胎盘梗死灶，导致子宫- 胎盘循环血流灌注不良，增加RSA和胎死宫内的危险。PTS导致RSA的证据等级为I级。在由PTS引起的RSA中，抗凝治疗被公认为是首选的治疗方法，而LMWH在合并PTS的RSA治疗中占有重要地位。
◆3.1.1 获得性PTS最常见的病因是由APL引起的APS
APS最早发现于1952年，约70%的APS患者是女性，好发于育龄期。目前已公认APS是一种以循环中APL中-高滴度升高，伴有静脉或动脉血栓形成和/或早期RSA、胎儿宫内生长受限(FGR)、死胎、先兆子痫和胎盘功能不全等不良妊娠结局以及不孕等临床表现的综合征。
因此，APS对妊娠的危害极大(证据等级I级)。目前APS诊断标准中的APL为狼疮抗凝物(LA)、抗心磷脂抗体(ACA)和抗β2GP-1抗体，其与妊娠丢失相关的阳性预测值可达75%。其中，LA的阳性预测值更高。临床上根据有无合并其他自身免疫性疾病或者病情的轻重，将APS分为原发性抗磷脂综合征(PAPS)和继发性抗磷脂综合征(SAPS) 以及恶性抗磷脂综合征(CAPS)。
目前研究证实，APS引起不良妊娠结局的最明确机制是母-胎界面的血栓形成。
因此伴有APS的RSA患者的核心治疗措施是抗凝和抗血小板治疗，这也是目前被公认的最有效的治疗手段。然而各研究机构在LMWH给药时机、剂量、疗程尚不一致。
【专家观点及建议】
对于合并APL阳性(包括APS)的流产或RSA患者的给药方案如下：
★APL阳性患者
☆对单纯APL阳性而非典型APS患者，既往无自然流产史或仅有1次<孕10周的自然流产者，可单独使用低剂量阿司匹林(low-doseaspirin，LDA)(50~75mg/d)治疗，不建议使用LMWH；
☆对合并典型APS 的RSA 或既往有≥孕10周自然流产、胎死宫内、子痫前期(preeclampsiaeclampsia，PE)、FGR等胎盘功能不全病史者，应联合使用LDA和LMWH。建议计划受孕当月月经干净开始给予预防剂量LMWH，并持续整个孕期(分娩前24~48h停药)，分娩后12~24h继续给药至少至产后2周，期间可根据D-二聚体水平调节LMWH用量。
★既往有动静脉血栓史的APS患者
☆建议计划受孕当月月经干净后使用治疗剂量的LMWH并联合LDA，检测到成功妊娠后，持续用药至分娩前24~48h停药，分娩后12~24h继续给药至少至产后6周。
★PAPS患者
☆此类患者通常可不使用糖皮质激素或免疫抑制剂。只有在发生血小板减少时使用。建议在无临床禁忌的情况下使用羟基氯喹治疗，并监测眼底状况。
★SAPS患者
☆对于SAPS患者，其LMWH的使用方案与PAPS相同，但同时要根据原发病情联合使用糖皮质激素、免疫抑制剂和免疫调节剂，并建议与风湿免疫科共同管理。
★妊娠期间发生VTE合并APS的RSA患者
☆建议使用治疗剂量LMWH，并根据血栓形成部位与血管外科、心胸外科等相关学科共同管理，给药至少至产后6~12周或更长时间( 依据血栓情况决定)。
◆3.1.2遗传性PTS
指所有先天性抗凝血因子或纤溶活性缺陷而导致易于血栓形成的一类疾病。遗传性PTS包括抗凝蛋白( 蛋白C、蛋白S、抗ATIII)缺陷症、凝血因子FⅤLeiden突变、遗传性高同型半胱氨酸血症(HHCY)、凝血酶原基因突变等。遗传性PTS与RSA关系密切(证据等级I级)。遗传性PTS血栓特点除了遗传性HHCY外多数以静脉血栓为主。研究表明，HHCY与早期流产密切相关，而中期妊娠流产则以FVLeiden突变最为常见。多数文献报道，对于存在PTS的RSA首选LMWH抗凝治疗且疗效确切。但目前对遗传性PTS的RSA患者给药及停药时机存在较大差异。
【专家观点及建议】
对合并PTS的RSA患者首选LMWH治疗，给药方案如下：
★对于无VTE史或近期无VTE表现的合并PTS的RSA患者
☆建议给予预防剂量LMWH，从确诊妊娠开始，持续整个孕期(分娩前24~48h停药)，分娩后12~24h继续给药至少至产后2周。
★对于有VTE史或有VTE家族史的合并PTS的RSA患者
☆建议给予治疗剂量LMWH，从确诊妊娠开始，持续整个孕期(分娩前24~48h停药)，分娩后12~24h继续给药至少至产后6周。
★对于近期有VTE表现但未妊娠、合并PTS的RSA患者
☆建议血管外科、心胸外科等相关学科治疗，治愈后6个月方可再次妊娠。
★对妊娠期间发生VTE、合并PTS的RSA患者
☆建议使用治疗剂量的LMWH，并根据血栓形成部位与血管外科、心胸外科等相关学科共同管理，给药至少至产后6~12周或更长时间(根据血栓情况决定)。
★对于无VTE史或近期无VTE表现但妊娠期间血浆D-二聚体水平明显增加、合并PTS的RSA患者
☆可根据D-二聚体水平适当调整LMWH的使用剂量。
●3.2LMWH在合并自身免疫疾病(AID)RSA患者中的应用
AID是指机体产生高滴度自身抗体和/或自身反应性淋巴细胞攻击相应的自身正常细胞和组织，导致组织器官损伤和功能障碍的一组疾病。常见的妊娠合并AID有：APS、系统性红斑狼疮(SLE)、未分化结缔组织病(UCTD)，干燥综合征(SS)、弥漫性毒性甲状腺肿(Graves病)、类风湿性关节炎(RA)等。
妊娠合并AID患者由于免疫复合物广泛沉积于血管内皮，导致内皮损伤，血小板活化聚集及白细胞、红细胞黏附于受损的血管内皮，可诱发动、静脉血栓形成，从而增加流产、早产、FGR、羊水过少、死胎、子痫前期/子痫(PE-E)、溶血-肝酶升高-血小板减少(HELLP) 综合征等不良妊娠结局的发病风险。严重者可危及母、胎生命。因此，妊娠合并AID的抗凝治疗，在预防血栓形成、降低妊娠不良结局发生率中发挥着重要作用。
◆3.2.1合并SLE的RSA患者LMWH的应用
SLE多见于育龄期女性，是一种自身免疫介导的、以免疫性炎症为突出表现的弥漫性结缔组织病。血管病变是SLE的基本病理变化之一。病变除累及重要脏器外，妊娠期常累及胎盘。
研究显示，SLE患者妊娠率不受影响，但SLE 患者流产、死胎、死产、早产以及FGR的发生率明显高于正常人群，且SLE孕妇和胎儿发生严重并发症的风险也明显高于正常人群，异常妊娠可以发生在妊娠的各个阶段和产后3个月。30%~80%的SLE患者血清中存在APL，这些患者发生严重产科并发症和不良妊娠结局的风险更大。既往有流产或死产病史者、受孕时伴有活动性肾炎、高血压和APL阳性者的不良妊娠结局风险性将会增加。
因此，对SLE患者妊娠期的管理除了对病情的严格管控外，进行抗凝治疗和管理是必须的。但纵观国内外学者及我国SLE研究协作组对SLE妊娠患者抗凝治疗的推荐方案则不尽相同。
【专家观点及建议】
所有合并SLE的RSA患者均推荐使用LDA或联合使用LMWH，并进行妊娠风险评估。具体给药方案如下：
★对所有合并SLE 患者
☆推荐于计划妊娠当月即开始使用LDA，持续用药直至孕36周或计划分娩前1周。
★对APL阴性且无高危因素的SLE患者
☆可单独使用LDA， 在妊娠晚期给予预防剂量的LMWH，分娩前24~48h停药。如单用LDA仍发生妊娠不良事件，建议下次一旦确诊妊娠即开始联合使用LDA和预防剂量LMWH，持续整个孕期，分娩前24~48h停药。
★对APL阴性但合并肾病综合征的SLE患者
☆此类患者形成血栓风险升高，应当计划妊娠，并从备孕当月月经干净开始，给予预防剂量LMWH，直至整个孕期(分娩前24~48h停药)，分娩后12~24h继续给药至少至产后2周。
★对于APL持续中、高滴度阳性但无VTE病史、家族史和近期无VTE临床表现的SLE患者
☆应联合应用LDA和预防剂量LMWH，应当计划妊娠，并从备孕当月月经干净开始给药，直至整个孕期(分娩前24~48h停药)，分娩后12~24h继续给药至少至产后2周。
★APL持续中、高滴度阳性且有VTE病史、家族史的SLE患者
☆应联合应用LDA和治疗剂量LMWH，应当计划妊娠，并从备孕当月月经干净开始给药，直至整个孕期(分娩前24~48h停药)，分娩后12~24h继续给药至少至产后6周。
★对于高危的SLE患者如处于SLE活动期、SLE肾炎活动期、高血压或服用≥10~20mg/d泼尼松等的SLE患者
☆首先应联合风湿免疫科进行妊娠风险评估，如不适合继续妊娠则建议终止妊娠；如果能够继续妊娠，推荐联合使用LDA和预防剂量LMWH，持续整个孕期( 分娩前24~48h停药)，分娩后12~24h继续给药至少至产后6周。
★对既往联合使用LDA和预防剂量LMWH仍然发生不良妊娠事件且无高危因素的SLE患者
☆推荐联合使用LDA和治疗剂量LMWH，从确诊妊娠开始，用药持续整个孕期(分娩前24~48h停药)，分娩后12~24h继续给药至少至产后2周。
★对具有高危因素且合并非APS诊断标准临床症状(浅静脉血栓形成、血小板减少症、肾微血管病、心脏瓣膜病、网状青斑、偏头痛、舞蹈症、癫痫发作和脊髓炎)的SLE患者
☆推荐联合使用LDA和治疗剂量LMWH，从计划妊娠当月月经干净开始给药，持续整个孕期(分娩前24~48h停药)，分娩后12~24h继续给药至少至产后6周。
★妊娠期发生VTE的SLE患者
☆建议联合使用LDA和治疗剂量LMWH，并根据血栓形成部位与血管外科、心胸外科等相关学科共同管理，给药至少至产后6~12周或更长时间( 依据血栓情况)。
◆3.2.2合并SS的RSA患者LMWH的应用
SS是一种主要累及全身外分泌腺体的慢性炎症性自身免疫病。SS可根据表现不同分为原发性和继发性两类，约各占50%。SSA和SSB抗体是诊断SS 较为特异的抗体。SS患者中80%抗SSA抗体阳性，50%抗SSB抗体阳性。SS患者妊娠时，胎盘可作为靶器官受到免疫损害，造成胎盘功能障碍。SS合并妊娠会增加妊娠并发症和胎儿丢失的风险，SS患者和正常人群相比自然流产率和早产率均明显增加，如SS同时合并SLE时，自然流产率和早产率都显着增加。抗SSA和/或抗SSB抗体阳性患者妊娠易导致胎儿和新生儿先天性心脏传导阻滞，甚至引发胎儿心脏骤停，发病率为2%，且再次妊娠胎儿心脏骤停的风险明显增加。如SS同时合并APS，则流产、早产、溶血、肝酶升高、血小板减少、子痫和胎盘血肿的发病风险增加。
【专家观点及建议】
★对合并原发性SS的RSA患者
☆不建议常规使用LMWH，但要定期检测凝血功能，严密观察胎儿、胎盘受累的临床表现，给予针对性和选择性的抗凝治疗。
★对合并继发性SS的RSA患者
☆若SS继发于SLE、APS等AID， 则按照SLE、APS选择LMWH给药方案。
◆3.2.3合并UCTD的RSA患者LMWH的应用
UCTD指具有1种以上结缔组织病的症状或体征，伴1种以上自身抗体[如抗核抗体、抗双链脱氧核糖核酸(double stranded DNA，dsDNA)抗体等]阳性，但不符合任何其他结缔组织病的诊断标准，病程≥1年的AID(需排除肿瘤和感染)。UCTD发病率与性别有关，男女比例为1：6 ~1：4，育龄期女性多见。Mosca等估计UCTD占风湿免疫病的20%~52%。UCTD患者体内的自身抗体可通过影响血小板活性、凝血或抗凝机制和损伤血管内皮功能而诱发血栓形成，妊娠期则会影响胎盘功能，增加不良妊娠结局的发生率。
【专家观点及建议】
★对于合并UCTD的RSA患者
☆妊娠期应密切关注凝血指标的变化，一旦出现易栓倾向，应及时给予LMWH进行干预，同时根据凝血指标适时调整LMWH剂量。
★对APL阳性尚未达到APS诊断标准且既往单用LDA发生妊娠不良事件的UCTD患者
☆推荐联合使用LDA和预防剂量LMWH，从确诊妊娠开始用药，持续整个孕期(分娩前24~48h停药)，分娩后12~24h继续给药至少至产后2周。
●3.3LMWH在URSA患者中的应用
◆目前的研究表明，URSA可能与母-胎免疫耐受失衡有关。针对URSA，既往主要采用主动免疫、被动免疫等方法治疗，但疗效存在很大的争议。有研究表明，LMWH可以通过免疫调节作用，促进滋养细胞的增殖、侵袭及分化和胎盘形成，从而促进胚胎生长发育，这为使用LMWH治疗URSA提供了重要的实验依据。然而，目前尚无足够的临床研究证据表明LMWH治疗URSA是有效的。
【专家观点及建议】
★针对URSA患者应用LMWH治疗，目前尚无足够的临床研究证据证明其有效，不建议使用或在取得患者知情同意后开展临床试验。
●3.4 LMWH在RBP中的应用
◆生化妊娠是指血b-hCG一过性升高后很快下降至正常水平，超声检查无妊娠的形态学证据，提示受精卵着床失败，常发生在妊娠5 周以内，也被称为“亚临床流产、隐匿性流产”，是早期妊娠丢失的一种特殊类型。RBP 是指连续发生≥2次的生化妊娠，RBP由于妊娠丢失发生得很早，其发病率难以统计。但随着辅助生殖技术的发展，RBP的发生率大幅度升高。生化妊娠的发生率在15%~20%。RBP的病因尚不明确，有学者分析病因显示RBP和RSA在病因学方面有高度的相似性。目前鲜有LMWH在RBP中应用的报道。
【专家观点及建议】
★鉴于RBP和RSA在病因学方面有高度的相似性，专家建议对RBP患者可按照RSA诊治规范进行管理。先进行严格病因筛查，根据病因决定是否进行抗凝治疗。
4.应用LMWH的安全性
●目前一致观点认为妊娠期暴露预防或治疗剂量的LMWH对于母、胎是安全的，母体的不良反应少见，常见的不良反应包括：出血、过敏、转氨酶升高、注射部位皮下淤血、瘀斑、瘙痒、荨麻疹等，但多数症状较轻，不影响治疗，罕见有超敏反应和HIT的报道。对于有少量阴道出血的孕妇，应用LMWH并不增加阴道出血量。HIT、产前出血、死胎、FGR、重度PE、剖宫产、产后出血的发生率与对照组相比差异均无统计学意义，未见有骨质疏松性骨折发生和致畸的报道。LMWH不能通过胎盘屏障，故不会增加胎儿出血事件的发生，LMWH不分泌于乳汁中，因此，哺乳期使用LMWH也是安全的。
【专家观点及建议】
★尽管LMWH属于B类药物，安全性高。但也有很多不良反应，其本质是动物源性的糖类抗凝剂，并非常规的保胎药物，临床上应严格规范使用，避免超适应证、超大剂量使用。
5.LMWH监测
●妊娠期使用LMWH监测主要集中在LMWH可能引起的出血事件、凝血功能以及肝肾功能是否受损等方面，尤其是对于体质量过高或过低、肾功能不全、有出血倾向等患者，应用常规剂量LMWH有可能因剂量不足影响疗效，或剂量相对过大增加出血风险。因此对于这些特殊人群使用LMWH需要加强安全性监测，如需严密观察用药过程中患者是否有鼻衄、牙龈出血、皮肤黏膜出血等情况；定期检查凝血功能，至少每2~4周1次，凝血功能检测指标包括部分凝血活酶时间(partial thromboplastin time，APTT)、凝血酶原时间(prothrombin time，PT)、血小板计数、血小板聚集率、D-二聚体、血栓弹力图等。要定期检查肝、肾功能，至少每1~2个月1次。对于肥胖或体质量低于正常的患者，建议监测抗凝血因子Xa活性，依据抗凝血因子Xa活性调整LMWH剂量，避免剂量不足或过量。对于严重肾功能不全的患者，药代动力学研究证实，LMWH抗凝血因子Xa的作用与肌酐清除率显着相关。多次给药后，抗凝血因子Xa活性的积聚值得关注。在治疗剂量下，当肌酐清除率<30mL/min，LMWH清除将受到影响，容易造成LMWH累积效应，增加出血风险。因此当肌酐清除率<30mL/min， 建议选择相对分子质量较大的LMWH，同时定期监测抗凝血因子Xa活性。 因为相对分子质量较大的LMWH可部分通过机体网状内皮系统清除，减轻了肾脏负担。LMWH对血小板聚集影响小，罕见引起HIT，HIT一般出现在给药后5~21d，如检测到血小板数量较给药前下降>1/3，要警惕HIT的可能。
★低分子肝素防治自然流产中国专家共识专家组成员(按单位名称汉语拼音字母顺序排列)：

北京大学第三人民医院(乔杰、王海燕)
重庆医科大学附属第一医院(漆洪波)
东南大学附属中大医院(任慕兰)
复旦大学附属妇产科医院(杜美蓉、李大金)
广东省妇幼保健院(韦相才)
广东省计划生育研究所(欧汝强、钟兴明)
海军军医大学附属长海医院(古航)
海军军医大学附属长征医院 (李文)
四川大学华西第二医院(刘兴会)
华中科技大学同济医学院附属同济医院(靳镭)
江苏省人民医院(刘嘉茵)
南京中医药大学附属江苏省中医院(谈勇)
山东省立医院(陈子江、颜军昊)
上海交通大学医学院附属仁济医院(狄文、林厚文、林建华、林其德、吕良敬、孙赟、赵爱民)
上海交通大学医学院附属瑞金医院(杨程德)
上海市第一妇婴保健院(鲍时华、金莉萍)
首都医科大学附属北京妇产医院(王树玉)
苏州大学附属第二医院(张弘)
云南省第一人民医院(康晓敏)
浙江大学医学院附属妇产科医院(朱依敏)
浙江大学附属邵逸夫医院(张松英)
中国福利会国际和平妇幼保健院(李蓉)
中国医科大学附属盛京医院(乔宠)
中山大学附属第一医院(王琼)
中山大学附属孙逸仙纪念医院(张建平)

H. 自身免疫性疾病，常和其他系统性

一、自身免疫性溶血性贫血（AIHA）：机体免疫功能异常，或服用某些药物后，红细胞表面抗原性发生变化，产生抗红细胞膜表面抗原的自身抗体。自身抗体与自身抗原结合，激活补体，破坏红细胞，导致贫血。特点：
（1）体内出现抗红细胞自身抗体。
（2）抗人球蛋白试验（Coombstest）阳性。
（3）红细胞寿命缩短。
（4）AIHA多见于中年女性。
（5）继发性者多继发于淋巴系统恶性病、结缔组织病、感染和药物应用后。
（6）引起AIHA的药物有青霉素、奎尼丁、异烟肼、对氨基水杨酸、磺胺类、甲基多巴等。抗红细胞抗体可分为三类：①温抗体，为IgG型，37°C可与RBC结合，不聚集RBC.②冷凝集素，为IgG型，低温时与RBC结合使其凝集，引起冷凝集素综合征。③DonathLaidsteiner抗体，为IgG型，低温时与两种补体成分结合，温度升高至37°C时，激活补体链，导致溶血，引起陈发性冷性血红蛋白尿症（PCH）。PCH继发于梅毒或病毒感染后。病毒感染后引起的多见于儿童或年轻患者。
二、免疫性血小板减少性紫癜（ITP）：主要表现为皮肤黏膜紫癜，血小板↓，骨髓中巨核细胞可增多，女性多发，发病率1／lOO00，患者有抗血小板抗体，其使血小板寿命缩短。
三、重症肌无力（MG）：患者体内存在神经肌肉接头乙酰胆碱受体的自身抗体，该抗体结合到横纹肌细胞的乙酰胆碱受体上，使之内化并降解，使肌细胞对运动神经元释放的乙酰胆碱的反应性降低。引起骨骼肌运动无力。
四、肺出血肾炎综合征（Goodpasture综合征）：患者体内可检到抗肾小球基底膜Ⅳ型胶原抗体，由于肺泡基底膜与肾小球基底膜有共同抗原，故肺、肾同时发病。青年男性多见，反复咯血、血尿、蛋白尿，最后发展为肾衰。
五、系统性红斑狼疮（SLE）：是一种累及多器官、多系统的炎症性结缔组织病，多发于青年女性。其临床症状比较复杂，可出现发热、皮疹、关节痛、肾损害、心血管病变（包括心包炎、心肌炎和脉管炎）、胸膜炎、精神症状、胃肠症状、贫血等；疾病常呈渐进性，较难缓解。免疫学检查可见IgG、IgA和IgM增高，尤以IgG显着；血清中出现多种自身抗体（主要是抗核抗体系列）和免疫复合物，活动期补体水平下降。抗dsDNA和抗Sm抗体是本病的特征性标志。
SLE的实验诊断：
（1）抗核抗体
1）免疫荧光法检测抗核抗体：该法以小鼠肝细胞、Hep-2细胞（人喉癌上皮细胞株）、Hela细胞（官颈癌细胞株）或小鼠腹水癌细胞等作为抗原片，以Hep-2细胞抗原片敏感性较高。
2）抗DNA抗体：分为天然（双链）DNA（ds-DNA）和变性（单链）DNA（ss-DNA）抗体。Ds-DNA抗体的测定方法有间接免疫荧光法（以短膜虫或马疫锥虫为抗原）、间接酶标抗体法（以短膜虫为抗原）、补体结合抗体法（以短膜虫为抗原，以抗人C3荧光抗体为第二抗体）、酶联免疫吸附试验（ELISA，以DNA为抗原）和放射免疫分析法（即Farr法）等多种方法。
前四种方法检测到的都是低亲和力的抗dsDNA抗体，或敏感性低，或检测结果不稳定、重复性差。Farr法检测dsDNA抗体的特异性最高，结果可靠，重复性好，因此是目前国际上公认的检测抗ds-DNA抗体的标准方法。当抗ds-DNA抗体结合率>20％时对诊断SLE有意义。
3）抗可提取性核抗原（ENA）抗体：目前抗ENA抗体的检测方法有双向免疫扩散或对流免疫电泳和免疫印迹法医|学教|育网搜集整理。近年来随着分子生物学技术的发展，可以以重组抗原为底物，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测特异性抗体。
4）抗增殖细胞核抗原抗体。
（2）抗组蛋白抗体。
（3）抗核糖体抗体。
（4）抗Ku抗体。
（5）皮肤狼疮带试验。
与SLE病情判断有关的免疫学检测包括：
1）血沉和C反应蛋白（CRP），SLE活动时血沉增快，CRP改变不明显。
2）血清蛋白，包括白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原、冷球蛋白冷凝集素等。
3）血清补体，包括总补体（CH50）和Cl、C3、C4、C2及C9.
4）循环免疫复合物（CIC）聚乙二醇（PEG）沉淀法。
5）类风湿因子。
6）细胞免疫功能。
六、类风湿性关节炎（RA）：一种以关节病变为主的全身性结缔组织炎症，多发于青壮年，女性多于男性。本病的特征是关节及周围组织呈对称性、多发性损害，部分病例可有心、肺及血管受累。免疫学检查可见血清及滑膜液中出现类风湿因子，血清IgG、IgA和IgM水平升高。其他自身抗体也可出现：例如，抗角蛋白抗体；抗RA33抗体；抗环瓜氨酸抗体（抗CCP抗体）；抗核周因子等，对类风湿的早期诊断很有帮助。
七、干燥综合征（SS）：干燥综合征是一种侵犯外分泌腺，尤以唾液腺和泪腺为主的慢性自身免疫病，它可同时累及多种脏器。干燥症和干燥性角膜炎是SS的主要临床表现。干燥综合征的实验诊断包括：
（1）抗SS-A和抗SS-B抗体：检测方法有：①双向扩散（DID）法；②对流免疫电泳（CIE）法；③免疫印迹（IBT）法。
（2）其他免疫学异常：①高丙球蛋白血症，呈多克隆性，因此可引起血沉增快、血清絮状和浊度试验异常。②类风湿因子（RF）和循环免疫复合物（CIC），RF多为IgM型，IgG型和IgA型少；CIC可呈阳性。③其他自身抗体，抗核抗体（ANA）在SS患者中可呈阳性。
（3）与SS诊断有关的其他实验：①泪液分泌试验；②唾液分泌试验。

I. 您好医生我的抗双链DNA（抗dsDNA）（免疫印迹

dsDNA——双链DNA，double-stranded DNA。单链DNA——ssDNA，single-stranded DNA。 抗dsDNA（dsDNA抗体）：对诊断SLE有较高的特异性，且与SLE的活动相平行，并可作为治疗的估价。随着疾病活动的控制，抗dsDNA抗体滴度可以下降或消失。抗dsDNA抗体与DNA结合成为免疫复合物在肾小球基底膜沉积，或抗dsDNA抗体直接作用于肾小球抗原造成SLE患者的肾损害。抗dsDNA抗体阳性的患者较阴性患者发生肾炎的危险性高12倍。测定抗dsDNA抗体的方法很多，其中放射免疫法（Farr）敏感，用此法检测其结合率320%为 阳性，短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法（IF－CT或IF－TE）更特异，此法31：5可判阳性。低滴度的抗DNA抗体也可在多种疾病甚至正常人中出现。临床一般认为：1、抗双链DNA（dsDNA抗体）：对诊断SLE有较高的特异性，且与SLE的活动相平行，并可作为治疗的估价。随着疾病活动的控制，抗dsDNA抗体滴度可以下降或消失。2、考虑狼疮肾炎的诊断，以及对疗效、预后判断的标准之一。
回复专家:甘肃省人民医院-中西医结合风湿免疫科-王晋平主任医师

J. 什么是dsDNA

抗dsDNA抗体是什么?抗dsDNA抗体常和自身免疫病红斑狼疮联系在一起。红斑狼疮（sle）是一个累及身体多系统多器官，临床表现复杂，病程迁延反复的自身免疫性疾病。红斑狼疮可分为系统性红斑狼疮（SLE）和盘状红斑狼疮（DLE）两大类。红斑狼疮常表现出免疫检察异常，可以出现很多自身抗体的阳性，其中抗核抗体阳性率最高，其次就是抗dsDNA抗体。
抗dsDNA抗体的靶抗原是成双碱基对的DNA双螺旋结构,主要见于系统性红斑狼疮,是目前公认的高度特异性抗体,也被列为狼疮的诊断标准之一。
抗dsDNA抗体在狼疮中,阳性率为60-90%,活动期的狼疮阳性率一般更高,而非活动期的则相应较低.所以抗dsDNA抗体与狼疮疾病活动性紧密相关,其抗体滴度随疾病的活动与缓解而升降。血清中抗dsDNA抗体水平升高时,提示疾病复发；血清中抗dsDNA抗体呈升高水平,同时伴有补体降低,则提示狼疮肾炎的危急性大；狼疮的缓解期血清中抗dsDNA抗体水平降低甚至可以转阴。
综上所述,抗dsDNA抗体常作为狼疮的活动指标,可以用于监测病情变化,药物治疗效果观测。
系统性红斑狼疮患者也可以表现出抗dsDNA抗体阴性，但是阴性者的比例并不大。