大豆蛋白快速沉淀方法

㈠ 如何提取大豆中的蛋白质（至少两种方法）、a、b两种大豆蛋白如何区别其纯度高低

可以用等电点法、盐析法、有机溶剂的分级沉淀法来提取

用考马斯亮蓝结合法测定它们的纯度高低

㈡ 蛋白质沉淀的方法有那些，各有什么特点

沉淀蛋白质的方法主要有：盐析、有机溶剂、生物碱试剂、重金属盐、加热凝固。
分析如下：
（1）盐析破坏蛋白质的水化膜和电荷，采用不同浓度盐可将不同的蛋白质分段析出，盐析的蛋白质不变性，盐析作用是可逆的。（2）有机溶剂可破坏蛋白质的水化膜，若调节pH=pI，则更易沉淀。低温操作，快速分离溶剂不会使蛋白质变性，而常温操作，蛋白质易变性。（3）沉淀生物碱试剂：钨酸、三氯乙酸等的酸根与带正电荷的蛋白质结合沉淀，会使蛋白质变性。（4）重金属离子可与带负电荷的蛋白质结合沉淀，会使蛋白质变性。（5）在等电点加热蛋白质可形成凝块沉淀，会使蛋白质变性。

㈢ 大豆蛋白有几种提取方法

大豆分离蛋白的提取方法有碱溶酸沉法、膜分离法、吸附法和醇溶法；大豆浓缩蛋白的提取方法有稀酸沉淀法和醇洗法；大豆组织蛋白的提取方法有挤压膨化法、纺丝法。

㈣ 蛋白质分离提纯方法

1、盐析法：

盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中，溶解度会随盐浓度的增高而上升，但当盐浓度增高到一定数值时，使水活度降低，进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。

2、有机溶剂沉淀法：

有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二：其一、与盐溶液一样具有脱水作用；其二、有机溶剂的介电常数比水小，导致溶剂的极性减小。

3、蛋白质沉淀剂：

蛋白质沉淀剂仅对一类或一种蛋白质沉淀起作用，常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。

4、聚乙二醇沉淀作用：

聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。

(4)大豆蛋白快速沉淀方法扩展阅读：

吸附层析

1、吸附柱层析

吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。

2、薄层层析

薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种层析方法。这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层，然后按纸层析操作进行展层。

3、聚酰胺薄膜层析

聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。

层析时，展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离在聚酰胺膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程，就能导致分离物质达到分离目的。