临床快速诊断病毒的方法

Ⅰ 早期病毒感染的实验室快速诊断方法有哪些

病毒感染的实验室检查包括病毒分离与鉴定、病毒核酸与抗原的直接检出以及特异性抗体的检测。临床医师根据流行病学资料，疾病的症状与体征综合判断可能为何种病毒感染，留取适宜的标本送检。

一、检材的采集与送检

病毒性疾病通常采集血液、鼻咽分泌液、咯痰、粪便、脑脊液、疱疹内容物、活检组织或尸检组织等。

供分离病毒、检出核酸及抗原的标本的，要求：

(一)尽早采取 在发病初期(急性期)采取，较易检出病毒，越迟阳性率越低。

(二)部位适宜 由感染部位采取，如呼吸道感染采取鼻咽洗漱液或咯痰；肠道感染采取粪便；脑内感染采取脑脊液；皮肤感染采取病灶组织；有病毒血症时采取血液。

(三)冷藏速送 病毒离活体后在室温下很易死亡，故采得检材应尽快送检。若距离实验室较远，应将检材放入装有冰块或干冰的空器内送检。病变组织则应保存于50%的甘油缓冲盐水中。污染检材，如鼻咽分泌液、粪便等应加入青霉素、链霉素或庆大毒素等，以免杂菌污染细胞或鸡胚，而影响病毒分离。

检测特异性抗体需要采取急性期与恢复期双份血清，第一份尽可能在发病后立即采取，第二份在发病后2～3周采取。血清标本放4℃-20℃保存，试验前血清标本以56℃30分钟处理去除非特异性物质及补体。无菌性脑炎患者也可取脑脊液检测特异性lgM。

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Ⅱ 犬细小病毒的诊断方法

临床上可根据血常规检测结果和本病的主要症状进行初步诊断。血常规检测红细胞压积增加，白细胞值正常或偏低，常提示病毒病。病犬排泄番茄汁样或酱油样带腥臭气味的血便是本病的特征性症状，可作为初诊依据。 犬细小病毒病的诊断多采用犬细小病毒胶体金快速诊断试纸进行。此法简便快速，准确率高。用棉签蘸取病犬的粪便或呕吐物浸入装有生理盐水的塑料管中混匀，将3～4滴上清液滴于试纸反应孔内，静置3～5 min，如C和T对应处均出现红线为阳性。
诊断方法：
1.根据临床症状，以咖啡色和番茄酱色带有特殊的腥臭气味。
2.特异性诊断可以最后确诊。目前军事医学科学院研制的犬细小病毒快速诊断盒可以进行最后的判断。症状：被细小病毒感染后的犬，在临床上可分为肠炎型和心肌炎型。肠炎型：自然感染的潜伏期为7-14天，病初表现发热、体温可达40℃以上,精神沉郁、不食、呕吐,初期呕吐物为食物，即之为黏液状及黄绿色液体。 发病一天以后开始腹泻。病初粪便为稀粥状，随病程发展，粪便呈咖啡色或番茄酱色，腥臭，排便次数不定，血便后病犬可表现眼球下陷，鼻镜干燥，全身无力，体重明显下降，同时可见眼结膜苍白，严重的贫血症状，该病如不及时治疗可造成肠内容物的毒素吸收而中毒，使机体休克，昏迷死亡。
血相变化：红细胞总数、血红蛋白下降、比容下降，白细胞减少。病犬的白细胞数可少至60-90%（由正常犬的1.2 万/立方毫米降至4000个以下）。初期呕吐物为食物，即之粘液状、黄绿色或有血液。发病一天左右开始腹泻。病初粪便呈稀状，随病状发展，粪便呈咖啡色或番茄酱色样的血便。
以后次数增加，血便带有特殊的腥臭气味。血便数小时后病犬表现严重脱水症状，眼球下陷、鼻境干燥、皮肤弹力高度下降、体重明显减轻。对于肠道出血严重的病例，由于肠内容物腐败可造成内毒素中毒和弥散性血管内凝血，使机体休克、昏迷死亡。肠炎型犬细小病毒病病犬若能及时合理治疗，可降低死亡率。
诊断理论上诊断本病的方法很多，适合临床医生的有以下4种。
1．流行病学诊断 本病不分年龄，均可感染，主要是幼犬。未免疫接种犬最易感，即使免疫过的犬也可能感染。直接接触或间接接触感染，主要通过消化道感染。潜伏期7~14天，无明显季节性，城市犬易感，发病率20%~100%，死亡率50% ~100%。
2．症状学诊断 特征症状是呕吐、拉稀、拉血。具体根据早中期的症状来诊断。
3．血常规检查 白细胞总数明显减少，多数犬（92%）在9×109/L以下，少数犬（ 15%）在2×109/L以下。如果继发细菌感染，白细胞总数可增高。血清总蛋白量下降至4.2～6.6mg%，红细胞压容为45～71,平均在50左右，转氨酶指数升高。如果白细胞在2×109/L以下，则预后不良。
4．试纸快速诊断法 用北京军事医学科学院实验动物中心研制的犬细小病毒快速诊断试纸诊断本病，经济简便、快速适用，有极高的准确率。方法是取病犬粪便约1g左右盛入干净的消毒试管中，加生理盐水5ml，充分振荡静置5分钟（或离心），取试纸条将带有max箭头一端插入粪便上清液中（注意粪便液面不要超过max 线）约15秒后取出平放在桌面上，5分钟后观察结果，呈现一条红线为阴性，两条红线为阳性。

Ⅲ 流行性感冒的诊断

根据病因、临床表现及实验室检查即可做出诊断。病原学相关检查：主要包括病毒分离、病毒抗原、核酸和抗体检测。病毒分离为实验室检测的“金标准”；病毒的抗原和核酸检测可以用于早期诊断；抗体检测可以用于回顾性调查，但对病例的早期诊断意义不大。1.病毒核酸检测以RT-PCR（最好采用real-timeRT-PCR）法检测呼吸道标本（咽拭子、鼻拭子、鼻咽或气管抽取物、痰）中的流感病毒核酸。病毒核酸检测的特异性和敏感性最好，且能快速区分病毒类型和亚型，一般能在4-6小时内获得结果。2.病毒分离培养从呼吸道标本中分离出流感病毒。在流感流行季节，流感样病例快速抗原诊断和免疫荧光法检测阴性的患者建议也作病毒分离。3.病毒抗原检测（快速诊断试剂检测）快速抗原检测方法可采用免疫荧光的方法，检测呼吸道标本（咽拭子、鼻拭子、鼻咽或气管抽取物中的黏膜上皮细胞），使用单克隆抗体来区分甲、乙型流感，一般可在数小时以内获得结果。其他还有胶体金试验，一般能在10～30分钟获得结果。对快速检测结果的解释应结合患者的流行病史和临床症状综合考虑：在非流行期，阳性筛查结果有可能是假阳性；在流行期，阴性的筛选检测结果可能是假阴性；这两种情况均应考虑使用RT-PCR或病毒分离培养作进一步确认。4.血清学诊断检测流感病毒特异性IgM和IgG抗体水平。动态检测的IgG抗体水平恢复期比急性期有4倍或以上升高有回顾性诊断意义。

Ⅳ 怎样鉴定病毒在细胞内发生重组

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病毒分离与鉴定方法(病毒鉴定常用方法)
分类：生活常识 日期：2022-06-26 10:50 浏览：38 次
1.病毒鉴定常用方法有哪些
寨卡病毒病的检测方法包括病毒核酸检测、IgM抗体检测、中和抗体检测和病毒分离等。寨卡病毒与黄病毒属其他病毒具有较强的血清学交叉反应，目前主要采用病毒核酸检测。

开展蚊媒寨卡病毒检测时，对捕获的伊蚊成蚊或幼虫进行病毒核酸检测。

开展寨卡病毒实验室检测时，应同时考虑登革病毒和基孔肯雅病毒感染可能。登革病毒和基孔肯雅病毒实验室检测应按照相应的技术指南开展。

（一）临床标本检测。

1.病原学检测

病原学检测主要适用于急性期血液标本，一般认为发病7天内检测阳性率高。

(1)核酸检测：采用荧光定量RT-PCR方法，是目前早期诊断寨卡病毒病的主要检测手段。

(2)病毒分离：将标本接种于蚊源细胞（C6/36）或哺乳动物细胞（BHK21、Vero）进行分离培养，出现病变以后，用检测核酸的方法鉴定病毒。也可使用乳鼠脑内接种进行病毒分离。

2.血清学检测

(1)血清特异性IgM抗体：发病3天后可检出病毒特异性IgM抗体，但发病7天后检出率高。可采用ELISA、免疫荧光等方法检测。IgM抗体阳性，提示患者可能新近感染寨卡病毒，但寨卡病毒IgM抗体与登革病毒、黄热病毒和西凯厅尼罗病毒等黄病毒有较强的交叉反应，易于产生假阳性。芹孙衫

(2)中和抗体：采用空斑减少中和试验方法检测。患者恢复期血清中和抗体阳转或滴度较急性期呈4倍及以上升高，且排除登革、乙脑等其他常见黄病毒感染，可以确诊。

（二）媒介标本检测。

1.标本处理

将分类后的伊蚊成蚊或幼虫，按照采集地点，每10~20只为一份进行研磨处理。

2.病毒核酸检测

用RT-PCR的方法进行寨卡病毒核酸检测

3.病毒分离

病毒核酸阳性的标本进行病毒分离。

2.病毒鉴定常用方法有哪些
寨卡病毒病的检测方法包括病毒核酸检测、IgM抗体检测、中和抗体检测和病毒分离等。

寨卡病毒与黄病毒属其他病毒具有较强的血清学交叉反应，目前主要采用病毒核酸检测。开展蚊媒寨卡病毒检测时，对捕获的伊蚊成蚊或幼虫进行病毒核酸检测。

开展寨卡病毒实验室检测时，应同时考虑登革病毒和基孔肯雅病毒感染可能。登革病毒和基孔肯雅病毒实验室检测应按照相应的技术指南开展。

（一）临床标本检测。1.病原学检测病原学检测主要适用于急性期血液标本，一般认为发病7天内检测阳性率高。

（1）核酸检测：采用荧光定量RT-PCR方法，是目前早期诊断寨卡病毒病的主要检测手段。（2）病毒分离：将标本接种于蚊源细胞（C6/36）或哺乳动物细胞（BHK21、Vero）进行分离培养，出现病变以后，用检测核酸的方法鉴定病毒。

也可使用乳鼠脑内接种进行病毒分离。2.血清学检测（1）血清特异性IgM抗体：发病3天后可检出病毒特异性IgM抗体，但发病7天后检出率高。

可采用ELISA、免疫荧光等方法检测。IgM抗体阳性，提示患者可能新近感染寨卡病毒，但寨卡病毒IgM抗体与登革病毒、黄热病毒和西尼罗病毒等黄病毒有较强的交叉反应，易于产生假阳性。

（2）中和抗体：采用空斑减少中和试验方法检测。患者恢复期血清中和抗体阳转或滴度较急性期呈4倍及以上升高，且排除登革、乙脑等其他常见黄嫌腔病毒感染，可以确诊。

（二）媒介标本检测。1.标本处理将分类后的伊蚊成蚊或幼虫，按照采集地点，每10~20只为一份进行研磨处理。

2.病毒核酸检测用RT-PCR的方法进行寨卡病毒核酸检测3.病毒分离病毒核酸阳性的标本进行病毒分离。

3.和病毒常用的分离培养方法有哪些区别
病毒的培养方法有动物接种、鸡胚培养、组织培养、细胞培养。

1、动物接种：病毒经注射、口服等途径进入易感动物的体内后可大量增殖，并使动物产生特定的反应。优点：操作方面易行。缺点：受机体免疫力的影响，常需要用无菌动物。疫苗和抗血清的生产。

2、鸡胚培养：一般用9-12日龄的鸡胚，分别接种于卵黄囊内，羊膜腔，尿囊腔等部位。用于病毒分离与疫苗生产。

3、组织培养：在离体活细胞上培养病毒的方法，组织块培养：取组织片进行培养。细胞培养：病毒感染细胞后，大多数引起细胞病变，称为病毒的致细胞病变作用。表现为细胞变形，胞浆内出现颗粒化，核浓缩、核裂解等。

4、采用该病毒所寄生的细胞的全素培养基来培养该细胞，培养一段时间后放进特定的病毒就可以培养了，注意，若细胞是动物细胞时培养基要加入血清。

4.分离病毒的鉴定是怎样的
1.病毒在细胞内增殖的指征 （1）细胞致病作用（Cytopathogeniceffect,CPE）病毒在细胞内增殖引起细胞退形性变，表现为细胞皱缩、变圆、出现空泡、死亡和脱落。

某些病毒产生特征性CPE，普通光学倒置显微镜下可观察上述细胞病变，结合临床表现可做出预测性诊断（表23-4）。 免疫荧光（IF）法用于鉴定病毒具有快速、特异的优点，细胞内的病毒或抗原可被荧光素标记的特异性抗体着色，在荧光显微镜下可见斑点状黄绿色荧光，根据所用抗体的特异性判断为何种病毒感染。

表23-4 病毒在细胞内增殖的指征病毒增殖指征CPE病毒小RNA病毒单纯疱疹病毒腺病毒副粘病毒HIV非CPE病毒正粘病毒副粘病毒风疹病毒鼻病毒细胞园缩、单层破坏细胞肿大变园细胞变园堆积成葡萄状多核巨细胞（合胞体）红细胞吸附现象干扰并阻止其他病毒（如ECHO病毒）的细胞致病作用 （2）红细胞吸附现象（） 流感病毒和某些副粘病毒感染细胞后24-48小时，以细胞膜上出现病毒的血凝素，能吸附豚鼠、鸡等动物及人的红细胞，发生红细胞吸附现象。 若加入相应的抗血清，可中和病毒血凝素、抑制红细胞吸附现象的发生，称为红细胞吸附抑制试验。

这一现象不仅可作为这类病毒增殖的指征，还可作为初步鉴定。 （3）干扰现象（Interference phenomenon）一种病毒感染细胞后可以干扰另一种病毒在该细胞中的增殖，这种现象叫干扰现象。

前者为不产生CPE的病毒（如风疹病毒）但能干扰以后进入的病毒（如ECHO病毒）增殖，使后者进入宿主细胞不再生产CPE。 2.病毒感染性的定量测定 空斑形成单位 （Plaque-forming unit ,PFU）测定这是一种测定病毒感染性比较准确的方法。

将适当浓度的病毒悬液接种到生长单层细胞的玻璃平皿或扁瓶中，当病毒吸附于细胞上后，再在其上复盖一层溶化的半固体营养琼脂层，待凝固后，孵育培养。当病毒在细胞内复制增殖后，每一个感染性病毒颗粒在单层细胞中产生一个局限性的感染细胞病灶，病灶逐渐扩大，若用中性红等活性染料着色，在红色的的背景中显出没有着色的“空斑”，清楚可见。

由于每个空斑由单个病毒颗粒复制形成，所以病毒悬液的滴度可以用每毫升空斑形成单位（PFU）来表示。 （2）50%致死量（LD50）或50%组织细胞感染量（TCID50）的测定本法可估计所含病毒的感染量。

方法是测定病毒感染鸡胚，易感动物或组织培养后，引起50%发生死亡或病变的最小病毒量，即将病毒悬液作10倍连续稀释，接种于上述鸡胚，易感动物或组织培养中，经一定时间后，观察细胞或鸡胚病变，如绒毛尿囊膜上产生痘斑或尿囊液有血凝特性，或易感动物发病而死亡等，经统计学方法计算出50%感染量或50%组织细胞感染量，可获得比较准确的病毒感染性滴度。 3.病毒形态与结构的观察病毒悬液经高度浓缩和纯化后，借助磷钨酸负染及电子显微镜可直接观察到病毒颗粒，根据大小、形态可初步判断病毒属那一科。

还可用分子生物学技术分析病毒核酸组成、基因组织构、序列同源性比较加以鉴定。 4.血清学鉴定用已知的诊断血清来鉴定。

补体结合试验可鉴定病毒科属；中和试验或血凝捣蛋制试验可鉴定病毒种、型及亚型。从病人检材中分离出病毒株，应结合临床症状，检材来源及流行季节等加以综合分析，并应注意混杂病毒、隐性感染或潜伏病毒的混淆，须用病人急性期与恢复期双份血清作血清学试验，血清抗体滴度有≥4倍以上增高，才有意义。

以上是我对于这个问题的解答，希望能够帮到大家。

5.鳖病的病毒性病原的分离与鉴定有哪些方法
分离病毒的方法很多，这里介绍一种比较简单的方法。

①解剖病鳖，取肝、脾、肾等内脏器官，用灭菌生理盐水洗2-3次后，剪碎，匀桨机匀浆，含800-1000国际单位/毫升青霉素、链霉素的Hank's液，制成10%-20%的组织悬液，再以2000转/分钟离心10-20分钟；取上清液，使其通过0.2微米的细菌滤器除菌。 ②取滤液接种健康鳖，观察动物是否出现与自然发病相似的症状。

若出现相似症状，可证明该鳖病为病毒性疾病。但要鉴定为何种病毒，需要继续进行电镜观察和特定的生理生化实验，确定其核酸类型和生物学特征。

③对常见病毒可进行血清学实验、PCR鉴定或免疫学鉴定等。

6.目前病毒分离培养的主要方法是哪一种
1.动物接种

这是最原始的病毒培养方法。常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠百、兔和猴等，接种的途径有鼻内、皮下、皮内、脑内、腹腔内、静脉等。根据病毒种类不同，选择敏感动物及适宜接种部位。

2.鸡胚接种鸡胚对多种病度毒敏感。根据病毒种类不同，可将标本接种于鸡胚的羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊或绒毛尿囊膜上。

3.组织培养

将离体活组织块或分散的活细胞加回以培养，统称为组织培养。组织培养法有三种基本类型：器官培养、移植培养和细胞培养。细胞培养最常答用于培养病毒，根据细胞的来源，染色体特性及传代次数又可分为下列类型：原代和次代细胞培养，二倍体细胞株和传代细胞系。

7.流感病毒如何分离鉴定
流感患者标本的采集与处理

1. 发病三日内的急性期患者，用15ml肉汤或Hanks液反复嗽口或咽嗽2~3分钟，然后吐入试管中，亦可经装有二层纱布的无菌小漏斗过滤入试管中。

2. 将咽嗽液置于4℃冰箱中约20分钟，待颗粒物质充分沉淀后，吸上清液约2-5ml置另一无菌试管，加入抗菌素，使每毫升标本中含青霉素1000单位、链霉素1000微克。

3. 混匀后置4℃冰箱内保存备用，24小时内使用。

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Ⅳ 猪瘟病毒的猪瘟的诊断

本病可以采取以下几种方法诊断：
（1）流行病学调查 自然条件下仅猪感染，本病的特点是任何年龄、性别和品种的猪均可发生，无季节性，传播迅速，发病率和死亡率都很高。
（2）临床症状 高热稽留，先便秘，后腹泻，脓性结膜炎，皮肤可见出血点，用抗生素或磺胺类药物治疗无效。
（3）病理剖检变化 多数淋巴结边缘出血，脾脏出血性梗死；肾、膀胱、肺、胃肠黏膜及心内、外膜的小点出血和回盲口附近的纽扣状溃疡。
（4）荧光抗体诊断 将可疑病猪材料（如扁桃体、肝、肾及肠系膜淋巴结等）作冰冻切片或组织触片，然后用标记的荧光抗体直接染色，2～3小时即可获得结果。

Ⅵ 病毒鉴定常用方法有哪些

寨卡病毒病的检测方法包括病毒核酸检测、IgM抗体检测、中和抗体检测和病毒分离等。寨卡病毒与黄病毒属其他病毒具有较强的血清学交叉反应，目前主要采用病毒核酸检测。
开展蚊媒寨卡病毒检测时，对捕获的伊蚊成蚊或幼虫进行病毒核酸检测。
开展寨卡病毒实验室检测时，应同时考虑登革病毒和基孔肯雅病毒感染可能。登革病毒和基孔肯雅病毒实验室检测应按照相应的技术指南开展。
（一）临床标本检测。
1．病原学检测
病原学检测主要适用于急性期血液标本，一般认为发病7天内检测阳性率高。
（1）核酸检测：采用荧光定量RT-PCR方法，是目前早期诊断寨卡病毒病的主要检测手段。
（2）病毒分离：将标本接种于蚊源细胞（C6/36）或哺乳动物细胞（BHK21、Vero）进行分离培养，出现病变以后，用检测核酸的方法鉴定病毒。也可使用乳鼠脑内接种进行病毒分离。
2．血清学检测
（1）血清特异性IgM抗体：发病3天后可检出病毒特异性IgM抗体，但发病7天后检出率高。可采用ELISA、免疫荧光等方法检测。IgM抗体阳性，提示患者可能新近感染寨卡病毒，但寨卡病毒IgM抗体与登革病毒、黄热病毒和西尼罗病毒等黄病毒有较强的交叉反应，易于产生假阳性。
（2）中和抗体：采用空斑减少中和试验方法检测。患者恢复期血清中和抗体阳转或滴度较急性期呈4倍及以上升高，且排除登革、乙脑等其他常见黄病毒感染，可以确诊。
（二）媒介标本检测。
1．标本处理
将分类后的伊蚊成蚊或幼虫，按照采集地点，每10～20只为一份进行研磨处理。
2．病毒核酸检测
用RT-PCR的方法进行寨卡病毒核酸检测
3．病毒分离
病毒核酸阳性的标本进行病毒分离。

Ⅶ 怎样快速有效的检测H7N9病毒

三、临床表现
根据流感的潜伏期及现有H7N9禽空悉轿流感病毒感染病例的调查结果，潜伏期一般为7天以内。
(一) 一般表现。
患者一斗肆般表现为流感样症状，如发热，咳嗽，少痰，可伴有头痛、肌肉酸痛和全身不适。重症患者病情发展迅速，表现为重症肺炎，体温大多持续在39℃以上，出现呼吸困难，可伴有咯血痰；可快速进展出现急性呼吸窘迫综合征、纵隔气肿、脓毒症、休克、意识障碍及急性肾损伤等。
(二)实验室检查。
1.血常规。白细胞总数一般不高或降低。重症患者多有白细胞总数及淋巴细胞减少，并有血小板降低。
2.血生化检查。多有肌酸激酶、乳酸脱氢酶、天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶升高，C反应蛋白升高，肌红蛋白可升高。
3.病原学检测。
(1)核酸检测。对患者呼吸道标本(如鼻咽分泌物、口腔含漱液、气管吸出物或呼吸道上皮细胞)采用real time PCR(或RT-PCR)检测到H7N9禽流感病毒核酸。
(2)病毒分离。从患者呼吸道标本中分离H7N9禽流感病毒。
(三)胸部影像学检查。发生肺炎的患者肺内出现片状影像。重症患者病变进展迅速，呈双肺多发磨玻璃影及肺实变影像，可合并少量胸腔积液。发生ARDS时，病变分布广泛。
(四)预后。人感染H7N9禽流感重症患者预后差。影响预后的因素可能包括患者年龄、基础疾病、合并症等。
四、诊断与鉴别诊断
(一)诊断。根据流行病学接触史、临床表现及实验室检查结果，可作出人感染H7N9禽流感的诊断。在流行病学史不详的情况下，根据临床表现、辅助检查和实验室检测结果，特别是从患者呼吸道分泌物标本中分离出H7N9禽流感病毒，或H7N9禽流感病毒核酸检测阳性，可以诊断。
1.流行病学史。发病前1周内与禽类及其分泌物、排泄物等有接触史。
2.诊断标准。
(1)疑似病例：符合上述临床症状及血常规、生化及胸部影像学特征，甲型流感病毒通用引物阳性并排除了季节性流感，可以有流行病学接触史。
(2)确诊病例：符合疑似病例诊断标准，并且呼吸道分泌物标本中分离出H7N9禽流感病毒或H7N9禽流感病毒核酸检测阳性。
重症病例：肺炎合并呼吸功能衰竭或陆做其他器官功能衰竭者为重症病例。
(二)鉴别诊断。应注意与人感染高致病性H5N1禽流感、季节性流感(含甲型H1N1流感)、细菌性肺炎、传染性非典型肺炎(SARS)、新型冠状病毒肺炎、腺病毒肺炎、衣原体肺炎、支原体肺炎等疾病进行鉴别诊断。鉴别诊断主要依靠病原学检查。

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Ⅷ 早期病毒感染的快速诊断方法有哪些

问题分析：
从你讲的情况来看，你想知道如举耐何早期诊断病毒性感染，可查血常规看血象衫袭可高，血象高考虑细菌性感染的可能或答兄性大，病毒性感染血象一般正常或偏低。

意见建议：
另外还可以到医院查相关的病毒性抗体，用降钙素原排除大诊断。

Ⅸ 流行性感冒病毒的诊断方法

病毒感染还会诱导干扰素的表达和细胞免疫调理，造成一些自身免疫反应，包括高热、头痛、腓肠肌及全身肌肉疼痛等，病毒代谢的毒素样产物以及细胞坏死释放产物也会造成和加剧上述反应。
由于流感病毒感染会降低呼吸道粘膜上皮细胞清除和黏附异物的能力，所以大大降低了人体抵御呼吸道感染的能力，因此流感经常会造成继发性感染，由流感造成的继发性肺炎是流感致死的主要死因之一。
在流行期结合临床症状诊断流感并不困难，但要确诊或流行监测时必须进行实验室检查，主要包括病毒分离培养、血清学诊断和快速诊断方法。
病毒的分离与鉴定
通常采取发病3日内患者的咽洗液或咽拭子，经抗生素处理后接种于9～11日龄鸡胚羊膜腔和尿囊腔中，于33℃～35℃孵育3～4天后，收集羊水和尿囊液进行血凝试验。如血凝试验阳性，再用已知免疫血清进行血凝抑制（hemoagglutination inhibition，HI）试验，鉴定型别。若血凝试验阴性，则用鸡胚再盲目传代3次，仍不能出现血凝则判断病毒分离为阴性。也可用组织培养细胞（如人胚肾或猴肾）分离病毒，判定有无病毒增殖可用红细胞吸附方法或荧光抗体方法。
血清学诊断
采取患者急性期（发病5天内）和恢复期（病程2～4周）双份血清，常用HI试验检测抗体。如果恢复期比急性期血清抗体效价升高4倍以上，即可做出诊断。正常人血清中常含有非特异性抑制物，因此在进行HI试验前可用胰蛋白酶等处理血清，以免影响HI试验结果。HI试验所用的病毒应当是与当前流行密切相关的病毒株，反应结果才能确切。补体结合试验（compliment fixation，CF）只能检测NP、MP的抗体。这些抗体出现早、消失快。因此，CF试验只能作为是否新近感染的指标。
快速诊断
对患者进行快速诊断，主要是采用间接或直接免疫荧光法、ELISA法检测病毒抗原。常取患者鼻甲粘膜印片或呼吸道脱落上皮细胞涂片，用荧光素标记的流感病毒免疫血清进行免疫荧光染色检查抗原，或用ELISA检查患者咽漱液中的抗原。 用单克隆抗体经免疫酶标法仅用24～72小时即可快速检测甲、乙型流感病毒在感染细胞内的病毒颗粒或病毒相关抗原。
PCR、核酸杂交或序列分析等方法也被用于检测流感病毒核酸或进行分型。